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1、 学 士 学 位 论 文 BACHELOR S THESIS 编号 学士学位论文玫瑰花及其口服液中总黄酮含量 的测定 学生姓名： 学 号： 系 部: 化学与环境科学系 专 业：化 学 年 级：2008级 指导教师： 完成日期： 2013 年 5 月 8 日中文摘要目的：本文用紫外可见分光光度法分别对玫瑰花和玫瑰花口服液中总黄酮含量进行了测定。方法：对玫瑰花干花蕾中总黄酮类化合物采用乙醇超声波提取和索氏提取，以芦丁为对照品，硝酸铝亚硝酸钠溶液为显色剂，用紫外可见分光光度法，在510nm处测定吸光度。结果：测定芦丁标准溶液所得到的标准曲线的回归方程为Y=1.6625x-0.0059(r2=0.99
2、52)。通过实验测定出的玫瑰花和口服液中总黄酮的含量分别为0.1644mg/mL，0.1944mg/mL。结论：紫外-可见分光光度法具有操作简单、准确度高,分析速度快、精密度高、适用范围广等特点，可用于测定玫瑰花和玫瑰花口服液中总黄酮含量。关键词:玫瑰花，玫瑰花口服液，总黄酮，紫外可见分光光度法。目录中文摘要1引言31实验部分41.1 材料与仪器41.1.1 实验材料41.1.2实验试剂41.1.3 实验仪器41.2实验方法41.2.1 玫瑰花中黄酮的提取41.2.2 对照品的制备51.2.3样品溶液的制备52. 结果与讨论52.1测定波长的选择52.2标准曲线的绘制62.3 样品中黄酮含量的
3、测定73.结论8参考文献9致谢10引言玫瑰(rosa rugosa thunb)，是蔷薇科蔷薇属多年生常绿或落叶性灌木1。玫瑰为国际香型，以花瓣，花蕾为原料可开发的产品很多，主要有玫瑰精油，玫瑰浸膏，净油，玫瑰糖，玫瑰干花等都是极名贵的天然产品，用作高级香水，医药，食品，化妆品，香精，香料，及工艺品。从玫瑰花中提取的香料则是天然香料，有益于人民的身体健康。因此，货源在国际市场走俏2。玫瑰花性温，味甘，微苦，能理气散淤，和血养血和镇静安神，具有治疗心悸气短和阴虚体弱嘲的功效。作为一种具有良好的食用价值与保健功能的花卉，玫瑰花中含有丰富的黄酮类化合物3。玫瑰花含有丰富的天然有机营养素，可被人体细胞
4、快速吸收利用，是一种具有很好疗效和美容价值的药物。经现代药理证明玫瑰花具有解毒排毒, 养颜, 抗衰老, 增加人体香源,收敛消炎，调经止带, 治疗急性乳腺炎，改善循环，增强机体免疫力等作用4。 玫瑰花具有较高的实用和药用价值，其主要化学成分为黄酮,且为重要的活性成分之一。天然植物黄酮类物质在食品和医药工业上具有广泛的应用, 抗氧化活性是其最显著的性质。玫瑰花中的黄酮类化合物以槲皮素，芦丁及山奈酚为主,均具有较高的抗氧化活性，且玫瑰花来源丰富,价格低廉5-6。玫瑰花口服液源于维吾尔医典名著卡热巴丁卡德尔成药总库,其以补益心脑，镇静安神，消肿止痛,经过长期的临床应用治疗心血管疾病方面取得了可喜的疗效
5、7。目前关于总黄酮含量的测定方法较多,如高效液相色谱法，毛细管电泳法，荧光分光光度法法，紫外分光光度法,其中紫外可见分光光度法使用方便，快捷，灵敏度高，操作简单易懂容易掌握等特点。紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性，定量和结构分析方法，其目的在于通过简便易行的方法而不是复杂而昂贵的程序，在短时间内达到对于产品质量分析和控制的目的。目前紫外-可见分光光度法已广泛应用于有机化学、生物化学，食品检验，环境监测，医疗卫生，肿瘤诊断及生命科学等领域8-9。当前有效成分的提取方法有浸渍法，煎煮法，回流提取法，索氏提取法和超声波提取法，
6、其中索氏提取法和超声振荡提取法由简单，方便，易懂，因此本文适用索氏提取和超声振荡提取，用紫外可见分光光度法测定玫瑰花和玫瑰花口服液中总黄酮含量。1实验部分1.1 材料与仪器1.1.1 实验材料玫瑰花干花蕾，（喀什中亚市场维吾尔药铺店）；玫瑰花口服液(6种批号：20100526,20090508,20100531,20100525，20080103,20080109，喀什昆伦药业股份有限责任公司)；芦丁标准品（批号：2002807，北京寰宇科创生物科技发展有限公司)；1.1.2实验试剂 (1)无水乙醇（分析纯），（天津市富宁精细化工有限公司） （2）5%亚硝酸钠溶液：准确称5gNaNO2固体置于
7、烧杯中加蒸馏水溶解后,转移100ml容量瓶中加蒸馏水到刻度，就得到5%的 NaNO2溶液。 (3)10%硝酸铝溶液:准确称10gAl(NO3)3固体置于烧杯中加蒸馏水溶解后，转移100ml容量瓶中加蒸馏水到刻度，就得到10%Al(NO3)3溶液。 (4)1mol/L氢氧化钠溶液:准确称4gNaOH固体置于烧杯中加蒸馏水溶解后，转移100ml容量瓶中加 馏水到刻度，就得到浓度为1mol/l NaOH 溶液。 1.1.3 实验仪器 T6新世纪紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；VS-02ST 索氏提取装置（无锡沃信仪器有限公司）;HH-S6旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司），ZN-04
8、B型粉碎机（北京兴时利和科技发展有限公司）;FA2104N电子天平（上海民桥精密科学仪器有限公司）;超声波(上海予皓科学仪器有限公司);容量瓶(25mL50mL)；锥形瓶（25ml,50mL）；漏斗；烧杯；移液管；玻璃棒。1.2实验方法1.2.1 玫瑰花中黄酮的提取（1）索氏提取 将粉碎后的玫瑰花样品用电子天平称取2.016g用滤纸将其包好放入索氏提取仪中，在圆底烧瓶中加入200ml无水乙醇（95%）对其进行回流提取3小时，然后将其滤液倾入锥形瓶中得到浅棕色滤液。再将其放入旋转蒸发仪的圆底烧瓶中进行蒸馏，要注意温度控制在75-88.6内，至溶液到10ml左右为止。（2）超声波提取 称取粉碎后的
9、玫瑰花样品2.014g放入锥形瓶中,并加入50ml无水乙醇将其盖好放入超声振动提取仪中进行超声提取40min,然后取出将其溶液进行过滤得到浅绿色滤液，之后处理方法同（1）。1.2.2 对照品的制备精密称取干燥至恒重的芦丁对照品106.7 mg,置100 ml 容量瓶中,用少量甲醇加热溶解,冷却后甲醇定容至刻度,摇匀,即得浓度为1.067 mg/mL 的芦丁标准品溶液。1.2.3样品溶液的制备将玫瑰花提取液和玫瑰花口服液各精密吸取0.1mL和1mL加入两个25 mL的锥形瓶中，再分别加入11.9m,30%乙醇加入0.7mL，5%的亚硝酸钠溶液，摇匀，静置6 min，加10%硝酸铝溶液0.7 mL
10、，摇匀，放置6 min，加入10 molL氢氧化钠溶液10 mL，用30%乙醇来定容至25 mL，放置10 min，以1 cm比色皿,以相应试剂为空白，在最大吸收波长处测定吸光度。2. 结果与讨论2.1测定波长的选择 已制备的芦丁标准溶液按1.2.3来配制溶液，以相应试剂为空白，在波长200600nm范围内测定吸光度，选择最大吸收波长。结果为从图1可示： 图1芦丁标准溶液（A）玫瑰花样品溶液（B）从图1可以看出，510nm处得到最大的吸收峰，因此将510nm作为测定时的最大吸收波长。2.2标准曲线的绘制 精密量取0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL对照品溶液,分别置于25 mL的容
11、量瓶中，按照本文1.2.3样品制备的方法操作，以1 cm比色皿,以相应试剂为空白，在波长510nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。结果见表1和图2 。 表1 芦丁标准溶液在不同浓度的吸光度编号123456浓度（mg/ml）00.04080.08160.12240.16320.2040吸光度A0.0000.0640.1230.1880.2580.346 由表1可知，芦丁标准溶液的浓度越大，其吸光度就越大。 图2浓度和吸光度的关系曲线 由图2可知，得到标准溶液的工作曲线，用最小二乘法进行线性回归，得到芦丁标准溶液的浓度C（mg/ml）与吸光度值A关系曲线的回归方程为：Y
12、=1.6646X-00066,其中芦丁标准溶液的浓度(C mg/ml)和吸光度(A)的相关系数r2=0.9952。2.3 样品中黄酮含量的测定按实验步骤1.2.3来操作，然后根据标准曲线（或直线回归方程）求出样品中总黄酮含量浓度C（mg/ml），结果如表2和表3. 表2 玫瑰花提取液中总黄酮含量的测定提取法吸光度平均值总黄酮含量(mgml)索氏提取液0.2670.1644超声波提取液0.1660.1037 由表2可知，用两种提取法来提取的玫瑰花中总黄酮含量分别为0.1644mgml和0.1037mgml。 表3 不同批号的口服液中总黄酮含量批号2008010320080109200905082
13、01005252010052620100531吸光度A 0.252 0.228 0.190 0.2550.285 0.317黄酮含mg/ml 0.1554 0.1409 0.1181 0.1572 0.1752 0.1944 由表3看出，不同批号的玫瑰花口服液中所含的总黄酮含量不同，其时间不同，黄酮含量也不同。3.结论 本文用索氏提取法和超声振荡提取法从玫瑰花干花蕾中提取黄酮进行处理，采用了紫外可见分光度法测定了玫瑰花和玫瑰花口服液中总黄酮的含量。实验表明，该法具有线性关系良好、分析准确、快捷等优点。结果显示： （1）本实验中采用索氏提取法样品中总黄酮含量比超声波提取法样品中总黄酮含量的较高，
14、这两种方法所用的回归方程为y=1.6646x-0.0066，相关系r2=0.9952，索氏提取法样品总黄酮含量为0.1644mg/mL,而超声波提取法样品中总黄酮含量为0.1037mg/mL,导致这两种提取方法提取的黄酮含量不同的原因是所需时间比索氏提取的短，尤其是所用的无水乙醇也很少，采取的样品没有代表性，因此超声波提取法的样品中总黄酮含量低一些。 （2）玫瑰花与玫瑰花口服液比较，玫瑰花口服液中总黄酮的含量0.1181mg/mL0.1752mg/mL内,大于玫瑰花中总黄酮等的含量（0.1037mg/mL0.1644mg/mL），这说明玫瑰花口服液的药理作用比玫瑰花还好，因此，在医疗行业中玫瑰
15、花口服液具有更好的使用价值。 参考文献1 牛淑敏,李巍.玫瑰花中两种抗氧化成分的分离鉴定与活性测定J.南开大学学报,2006,26(1)：90942 赵晓峰.吴荣书玫瑰花综合利用与其开发前景J保鲜与加工，2004,38(3)：3031.3 热比亚阿布力米提维吾尔药玫瑰花口服液结合西药治疗44例心血管疾病的疗效观察J.中国民族医药杂志,2006,24(2):14-16.4任雪峰,林敏,周梅,等.迎春花中总黄酮含量的测定研究J.农林科技，2009，20(6):124125.5 严建刚,张名位,杨公明,等.芹菜黄酮的提取条件及其抗氧化活性研究J.西北农林科技大学学报(自然科学版),2005,33 (
16、1)：1311346 浅田浩二.生物体内的活性氧清除系统抗氧化酶J.日本医学介绍,1994，15(7):37397伊德力斯巴克.中华人民共和国卫生部药品标准:维吾尔药分册M.乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社,1998,42(1):152-154.8 叶文峰,陈新,刘秀娟,等.杜仲叶中黄酮类化合物的提取工艺J.江西师范大学学报,2001,34(1)：70-719 丁利君,吴振辉,蔡创海,等槐花中黄酮类物质提取工艺的研究J.农业工程学报,2002,29(1)：142-143致谢 毕业在即，首先我要感谢母校对我四年的培养和教育，我将继续努力，为母校增光添彩。论文利完成的前提下由学校高水平的老师给我提供了合适的学习环境及相关的参考材料，并给了我想当大的关怀和指导。 在论文过程中，我得到了阿吉古丽老师的亲切关怀和耐心的指导。作为一个本科生的毕业论文，由于经验的缺乏，难免许多考虑不周全的地方，如果没有指师的督促指导，以及一起学习的同学们的支持，想要完成这个设计是难以想像的。阿吉古丽老师严肃的态度，严谨的治学精神，精益求精的工作作风，以及她耐心 细致的指导，深深地感染和激励着我，在此谨向阿吉古丽老师致意诚挚的谢意和崇高的敬意。10