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1、毕业论文诚信声明 本人郑重声明：所呈交的毕业论文二甲酸钾对断奶仔猪肠道菌群的影响是本人在指导老师的指导下，独立研究、写作的成果。论文中所引用是他人的无论以何种方式发布的文字、研究成果，均在论文中以明确方式标明。 本声明的法律结果由本人独自承担。 毕业论文作者签名： 年 月 日成绩：江西科技师范大学 毕业设计（论文）题目（中文）：二甲酸钾对断奶仔猪肠道菌群的影响 题目（外文）：The effect of dimethyl potassium on the intestinal flora of the piglets 院 （系）：生命科学学院 专 业：食品科学与工程 学 生 姓 名：樊友金 学
2、号：20081172 指 导 教 师：黄建华 2012年5月10 日 目 录1. 引言12. 材料与方法22.1 试验材料22.1.1 二甲酸钾和培养基22.1.2 试验动物及分组32.1.3 仪器与试剂32.1.4 试验日粮42.2 试验方法52.2.1 乳酸杆菌的测定52.2.2 大肠杆菌的测定62.2.4 计算结果93. 讨论94. 结论10参考文献10 二甲酸钾对断奶仔猪肠道菌群的影响摘要：大量研究表明， 二甲酸钾对动物体内肠道有益菌(乳酸杆菌)的繁殖抑制不明显，又能够有效减少肠道病原菌（大肠杆菌）数量，提高肠道黏膜的完整性，调节动物免疫反应， 从而提高动物的生产性能。本试验旨在研究二
3、甲酸钾对断奶仔猪肠道菌群的影响，选择21日龄体况良好 (杜洛克长白大约)三元杂交断奶仔猪36 头,按窝别相同原则分为 4 个处理，每个处理3个重复，每个重复3头,分别饲喂 A (不添加二甲酸钾)、B (添加 0.7% 二甲酸钾)、C (添 1.1% 二甲酸钾)和 D (添加 1.5 % 二甲酸钾) 4 种日粮,考察二甲酸钾对断奶仔猪肠道菌群的影响。试验结果表明:（1）断奶仔猪日粮中二甲酸钾添加量为0.7%、1.1%、1.5%时，试验猪肠道乳酸杆菌与日粮中没有添加二甲酸钾相比分别提高了40.0%（P0.1）、26.7%（P0.1）和33.3%（P0.1）；（2）日粮中添加1.1%的二甲酸钾试验猪
4、肠道中大肠杆菌数低于没有添加组，低于35.0%（P0.1）；（3）日粮中添加1.1%的二甲酸钾试验猪肠道中乳酸杆菌与大肠杆菌数比值将近高出没有添加二甲酸钾试验组一倍（P0.1）。关键字：二甲酸钾；断奶仔猪；大肠杆菌；乳酸杆菌1. 引言饲料用二甲酸钾的研究和开发起源自欧洲上世纪90年代中期。而二甲酸钾的化学结构早在上世纪初就被确定了，但是从此就停留在新奇学术发现而已。据报道，二甲酸钾具有抗细菌感染和提高饲料消化率的作用。对生长、肥育猪和哺乳母猪的促生长效果明显，能显著提高生产性能。猪生长性能试验和在欧洲的大规模应用显示，与抗生素促生长剂相比，不仅安全、无副作用，而且猪的日增重和饲料报酬获得可观、
5、稳定的改善。其次，简单的化学结构决定的安全性和纯结晶盐的物理性状决定的易用性成为受欢迎的另一个原因。 Hebeler等（2000）报道，日粮中添加1.8%二甲酸钾能降低断奶仔猪肠道中总厌氧菌、总需氧菌和大肠杆菌等的数量，乳酸杆菌与大肠杆菌的比例相对提高1。Papenbrock等（2005）发现在断奶仔猪日粮中添加二甲酸钾可以减少消化道大肠杆菌的数量，并可减少排泄物中沙门氏菌的数量，说明二甲酸钾的可能的作用机理是抑制有害微生物的繁衍，类似抗生素的作用2。Canibe，Steien等（2001）研究发现，在断奶仔猪日粮中添加二甲酸钾同时降低食糜和粪便中的大肠杆菌、乳酸菌和酵母菌数量，说明二甲酸钾对
6、各种微生物都有抑制或者杀灭作用，这与抗生素的作用机理类似3。王冉等（2001）的研究也得到类似的结果4。从2006年1月1日起，欧盟在动物饲料中全面禁止抗生素生长促进剂的使用。因此，寻找安全的非抗生素类动物促生长剂成为当今饲料添加剂研究的热点之一。作为抗生素促生长剂主要消费市场的养猪业和世界第一养猪大国，我国也投入了大量资源开展了包括有机酸、酶制剂、微生物添加剂、寡糖、植物提取物，甚至类激素物质在内的研究，试图解决该问题。而二甲酸钾作为类抗生素能解决上述问题。 猪的胃和小肠中最主要的细菌是大肠杆菌和乳酸杆菌，而在肠道的后段则存在着多种细菌。通过液态饲喂、日粮酸化、添加益生菌、益生素、酶制剂等营
7、养策略来建立猪正常的肠道菌群。苏勇等研究新生仔猪从7日龄至35日龄(断奶后2周)胃中细菌及乳酸杆菌的菌群变化，发现仔猪断奶后，引起断奶应激，仔猪断奶前、后胃中乳酸杆菌变化较小，胃pH值显著上升，并造成潜在病原菌在胃中大量增生5。吴忠良等研究表明，仔猪出生早期饲喂乳酸杆菌有明显的促生长效果，随着时间的推移这种效果逐渐降低，断奶后已无明显影响，可明显控制白痢的发生，断奶后饲喂低剂量乳酸杆菌，发病率和死亡率都明显降低，但高剂量使发病率和死亡率都明显增加6。乳酸杆菌是厌氧型细菌，乳酸杆菌能分解糖类产生乳酸，增加肠道的酸度，pH值降低，不耐酸的。吴向军等发现乳酸杆菌裂解物在体内外对金黄色葡萄球菌、大肠埃
8、希菌均有较强的抑制作用7。任庆娜等的试验研究结果说明将植物乳酸杆菌和保加利亚乳酸杆菌应用到饲料中，乳酸菌可以抑制饲料中寄生曲霉的生长，从而避免黄曲霉毒素的产生，以及减少黄曲霉毒素对人类的危害8。李晓卉选用的肠道乳酸杆菌均来自健康成年羊，所选菌株中3株乳酸杆菌对大肠杆菌有明显的生物颉颃作用，说明肠道乳酸杆菌可显著抑制病原性大肠杆菌的生长繁殖9。通过在饲料中添加乳酸杆菌，研究乳酸杆菌对饲料中寄生曲霉菌孢子活性的影响，得出乳酸杆菌能通过改善饲料的有益菌，从而增加动物体内的有益菌，增强动物机体的抵抗力；在高温、高湿地区的饲料中加入植物乳酸杆菌可以防止霉菌的生长和产毒10。2. 材料与方法2.1 试验材
9、料2.1.1 二甲酸钾和培养基 二甲酸钾商品名福尔，为白色晶体状，有效成分含量为97，流散性好，易溶于水。在配合饲料中应用时，先用适量粉碎好的豆粕预混合，而后加入猪配合饲料中与其它原料一起混合。在仔猪饲料里分别配成质量含量百分比0%、0.7%、1.1%、1.5%。二甲酸钾添加量的设计（见表1）。表1 二甲酸钾添加量项目 添加物 质量含量百分比空白对照A组 二甲酸钾 0%处理B组 二甲酸钾 0.7%处理C组 二甲酸钾 1.1%处理D组 二甲酸钾 1.5%表2 MRS琼脂培养基的配方和EMB培养基的配方MRS培养基的配方 EMB培养基的配方组成成份 重量 （g/L） 组成成份 重量 （g/L）牛肉
10、蛋白粉 10 蛋白胨 10.0鱼肉汁 10 乳糖 10.0酵母浸出汁粉 5 磷酸氢二钾 2.0葡萄糖 20 琼脂 15.0 醋酸钠 5 伊红 0.4柠檬酸二铵 2 美蓝 0.065吐温-80 1 pH 6.97.3硫酸镁 0.58硫酸锰 0.28pH 6.26.4 注：两培养基各加入蒸馏水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，充分溶解，121高压灭菌15min。为油酸酯。2.1.2 试验动物及分组 选用4窝21日龄体况良好的(杜洛克长白大白)三元杂交仔猪（每窝体重生长状况都差不多且不少于9头），每窝挑选9头大小差不多的，4窝共36头。36头仔猪从产后的22天开始断奶。按窝别相同原则分为
11、4 个处理，每个处理3个重复，每个重复3头，都放有保温箱培养（实验过程中猪圈温度10C 保温箱温度20C）。2.1.3 仪器与试剂恒温培养箱（PYX-300Q-A 科力仪器）；无菌超净工作台（ZHJH-1214B 洁净等级100级 上海智城分析仪器制造有限公司）；JJ500型精密电子天平（美国双杰兄弟公司）；电热恒温保温箱（上海精密实验设备有限公司）； 立式高压蒸汽灭菌锅（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；通风厨；Milli-Q超纯水系统（美国Milli Pore公司）；实验所用试剂均为分析纯。 2.1.4 试验日粮采用单因子试验设计，共设4个处理组（日粮），分别为A组不添加二甲酸钾、B组添加
12、0.7%的二甲酸钾、C组添加1.1%的二甲酸钾和D组添加1.5%的二甲酸钾，来考察不同比例的二甲酸钾对断奶仔猪肠道菌群的影响。选择36头21日龄体况良好的断奶仔猪，以窝别相同原则分为4个处理组。试验日粮标准参照美国NRC(1998)猪的营养需要，饲料类型为粉料，其组成及营养水平见表3和表4。表3 日粮组成日粮ABCD玉米%60606060去皮豆粕 %24.524.524.524.5豆油%2222肠膜蛋白%1.51.51.51.5鱼粉%2222葡萄糖%2222乳清粉%44444%预混料%4444合计100100100100表4 日粮营养指标日粮ABCD消化能3390339033903390粗蛋白
13、18.7518.7518.7518.75赖氨酸%1.401.401.41.4蛋氨酸%0.840.840.840.84胱氨酸%0.290.290.290.29精氨酸%1.171.171.171.17钙%0.600.600.600.60有效磷%0.390.390.390.39注：每千克日粮中含铜200，铁96，锌120，锰50，碘0.75，钴0.6，硒0.45；维生素A 11520IU，维生素D3 3600IU，维生素E 30，维生素K3 3.5，维生素B1 3.5，维生素B2 10，维生素B6 3.5，维生素B12 0.03，生物素0.2，泛酸20，烟酸35，叶酸2。2.2 试验方法2.2.1
14、乳酸杆菌的测定2.2.1.1 样品 收集断奶第11天和第21天早晨每组新鲜的仔猪粪。2.2.1.2 培养基 酸化MRS琼脂培养基。2.2.1.3 实验流程 猪粪稀释倾注法接种平板培养检查计数。2.2.1.3.1 样品稀释 在无菌超净工作台内，先将样品容器开口周围用75%酒精棉球擦拭消毒，打开容器，用灭菌金属勺搅拌均匀样品后，以无菌吸管吸25mL样品加入盛有225mL无菌生理盐水的三角瓶中，在漩涡混合器上充分振摇，务必使样品分散均匀，即为10-1 的样品稀释液，再根据对样品含菌量的估计，将样品按10度梯度稀释至适当稀释度。精确称取1mL10-1 的样品稀释液置99mL稀释液（含0.1琼脂生理盐水
15、）中，充分混匀，为原液（10-2），再进行10倍剃度稀释到第5管，稀释度分别为10-3、10-4、10-5、10-6。2.2.1.3.2 倾注法接种平板 选用最后三个稀释度，在培养皿上用标签或记号笔相应编号，分别吸取不同稀释度的稀释液20uL置于平皿内，每个稀释度做4个重复（四组）。然后倒入熔化并冷却至4650C的改良MRS琼脂培养基1215mL，迅速转动平皿使之混合粉均匀，冷凝成平板。每个稀释度平板的其中一个接种后覆盖一层冷却至46C1.5%水琼脂8mL。2.2.1.3.3 培养和计数 将平皿倒置于40C温箱中培养12d，观察长出的细小菌落，计菌落数，每个稀释度均有两个结果，取其平均值为该稀
16、释度结果；每个样品有三个稀释度，取2-20个菌落数为其结果。结果计算：计数结果=所得样品数 稀释度50（CFU/mL）。2.2.2 大肠杆菌的测定2.2.2.1 样品 收集断奶第11天和第21天早晨每组新鲜的仔猪粪。2.2.2.2 培养基 以EMB(伊红美兰琼脂)选择培养基检测大肠杆菌（出现黑色有光泽为大肠杆菌菌落）。2.2.2.3 实验流程检样稀释乳糖胆盐发酵管产气伊红美蓝琼脂平板大肠杆菌阳性计算大肠杆菌数量。2.2.2.3.1 样品稀释 同上2.2.1.3.1一样。2.2.2.3.2 乳糖发酵试验 选用最后三个稀释度，在培养皿上用标签或记号笔相应编号，分别吸取不同稀释度的稀释液20uL置于
17、平皿内，每个稀释度做4个重复（四组）。然后倒入熔化并冷却至5065C的改良EMB伊红美蓝琼脂培养基1215mL，迅速转动平皿使之混合粉均匀，冷凝成平板。将供试液划线接种于平板上。将平板翻转，放入恒温培养箱中，361培养1824h。2.2.3 乳酸杆菌和大肠杆菌实验图片图1 断奶第11天的乳酸杆菌图片图2 断奶第21天的乳酸杆菌图片2.2.3.1 用放大镜估算平板上乳酸杆菌的数量见表5表5 各组平板上乳酸杆菌的数量 平板的稀释度 10-4（菌落/个） 10-5（菌落/个）10-6（菌落/个） A组平均值 20 20 7.5(6、9) B组平均值 20 20 10.5（10、11） C组平均值 2
18、0 20 9.5(9、10) D组平均值 20 20 10（10、10）图3断奶第11天的大肠杆菌图片图4断奶第21天的大肠杆菌图片2.2.3.2 用放大镜估算平板上大肠杆菌的数量见表6表6各组平板上大肠杆菌的数量 平板的稀释度 10-4（菌落/个） 10-5（菌落/个） 10-6（菌落/个） A组平均值 10（10、10） 2 2 B组平均值 15.5（16、15） 2 2 C组平均值 6.5（7、6） 2 2 D组平均值 14.5（14、15） 2 22.2.4 计算结果结果计算：计数结果=所得样品数（取平均值）稀释度50（CFU/mL）。表7 计算结果检测序号送检编号检测项目 乳酸杆菌/
19、大肠杆菌乳酸杆菌计数（CFU/mL）大肠杆菌计数（CFU/mL）01A组 3.75108 5.0010675:102B组 5.25108 7.7510667.7:103C组 4.75108 3.25106146.2:104D组 5.0 108 7.2510669:13. 讨论本次试验通过检测粪中乳酸杆菌和大肠杆菌来间接推断仔猪肠道中这两种菌的数量关系，发现在断奶仔猪日粮中添加0.7%、1.1%和1.5%二甲酸钾，仔猪肠道中乳酸杆菌明显优于不添加二甲酸钾试验组；在断奶仔猪日粮中添加1.1%二甲酸钾，仔猪肠道中大肠杆菌显著低于在日粮中添加0%、0.7%、1.5%二甲酸钾试验组；这与Kirchges
20、sner等（1992）报道，日粮中添加二甲酸钾能明显降低仔猪肠道中大肠杆菌的数量，及Papenbrock等（2005）发现在断奶仔猪日粮中添加二甲酸钾可以减少消化道大肠杆菌的数量，并可减少排泄物中沙门氏菌的数量，说明二甲酸钾的可能的作用机理是抑制有害微生物的繁衍，类似抗生素的作用，基本一致的；添加1.1%二甲酸钾试验组乳酸杆菌与大肠杆菌比值显著高于没有添加二甲酸钾试验组。4. 结论1）断奶仔猪日粮中二甲酸钾添加量为0.7%、1.1%、1.5%时，试验猪肠道乳酸杆菌与日粮中没有添加二甲酸钾相比分别提高了40.0%（P0.1）、26.7%（P0.1）和33.3%（P0.1）。2）日粮中添加1.1%
21、的二甲酸钾试验猪肠道中大肠杆菌数低于没有添加组，低于低于35.0%（P0.1）。3）日粮中添加1.1%的二甲酸钾试验猪肠道中乳酸杆菌与大肠杆菌数比值将近高出没有添加二甲酸钾试验组一倍（P0.1）。参考文献1Hebeler D，Kulla S W inkenwerder F，K amphues J Zen tek J. Am tsberg H annover 54th Proc Soc N atr PhysioM. Gottingen，Geman，2000，7-9.2Papenbrock，Setal. Investigations on prophylactic effects of coars
22、e feed structure and/or potassiumdifomate on the microflora in the digestive tract of weaned piglets experimentally infected with Salmonella Der by J.Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition，2005，89(36):84-87.3Canibe，N，S H Steien，et al. Effect of K-diformate in starter diers on acidity，micr
23、obiota，and the amount of organic acids in the digestive tract of piglets， and on gastric alterationsJ. Journal of Animal Science，2001，79(8):2123-2133.4王冉，邵春荣，胡来根，等，酸化剂对肉鸡肠道微生物数量的影响研究J. 2001，22(7):31-33.5苏勇，朱伟云.仔猪哺乳期和断奶后胃中细菌和乳酸杆菌菌群的变化J.肠外与肠内营养，2006，13(1):1-4.6吴忠良，张瑞峰，王金义.乳酸菌对早期断乳仔猪生长性能的影响J.畜牧兽医杂志，200
24、5，24(1):27-28.7吴向军，袁杰利，梁红春.乳酸杆菌细胞裂解物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的抑制作用J.中国微生态学杂志，2007，19(5):422-423.8任庆娜，马凤龙，乔彦良，等.乳酸菌对寄生曲霉孢子活性的影响J.黑龙江畜牧兽医，2009(1):102-103.9李晓卉.绵羊肠道3株乳酸杆菌对大肠杆菌的体外生物颉颃试验J.青海畜牧兽医杂志，2009，39(1):21.10刘焕齐，马凤龙，任庆娜.两种乳酸菌对饲料中寄生曲霉生长和产毒影响的研究J.黑龙江畜牧兽医，2009(9):67-68.The effect of dimethyl potassium on the inte
25、stinal flora of the piglets Abstract: Numerous studies show that dimethyl potassium has not an obvious inhibition on the intestinal bacteria (lactobacilli) in vivo while they reproduce. But it can effectively reduce the number of intestinal pathogens (E. coli), improves the integrity of the intestin
26、al mucosa, and regulates animals immune responsibility. Thereby it can enhance the production performance of the animals. It is designed to study the influence of dimethyl potassium on the intestinal flora of weanling piglets. It chooses a good body condition at 21 days (Duroc Landrace approximately
27、) 36 crossbred weaned piglets, then divided them into four litter on the same basis treatment, each treatment would recieve three replicates, each repetition 3, respectively, fed A, (do not add potassium diformate), B (add 0.7% dimethyl potassium), C (add 1.1% dimethyl potassium) and D (add 1.5% dim
28、ethyl potassium) four kinds of diets, investigated the influence of dimethyl potassium on the intestinal flora of weanling piglets. The results showed that: (1) weaning piglets dimethyl potassium dosage 0.7%, 1.1%, 1.5%, intestinal lactobacilli of pigs diets did not add dimethyl potassium were incre
29、ased compared to the 41.89 % (P 0.1), 28.38% (P 0.1) and 32.43% (P 0.1); (2) the number of E. coli in the pig intestinal diets supplemented with 1.1% dimethyl potassium test below does not add a group, low 33.2% (P 0.1); (3) diet supplemented with 1.1% dimethyl potassium test pig intestinal Lactobac
30、illus and E. coli ratio higher than the nearly did not add dimethyl potassium test group doubled (P 0.1). Keywords: dimethyl potassium; weaned piglets; Escherichia coli; Lactobacillus毕业设计（论文）任务书（由指导教师填写）学生姓名樊友金专业食品科学与工程班级08级（1）班题目二甲酸钾对断奶仔猪肠道菌群的影响一、毕业设计（论文）的内容和要求 1 完成文献调研、文献综述及开题报告 2 取断奶第11天和断奶第21天仔猪
31、粪的检测。 3 主要是检测0%、0.7%、1.1%、1.5%二甲酸钾对断奶仔猪肠道中大肠杆菌和乳酸杆菌的影响。 4 了解大肠杆菌和乳酸杆菌计数的方法及最后的影响。5 完成毕业论文二、参考文献1Hebeler D，Kulla S W inkenwerder F，K amphues J Zen tek J. Am tsberg H annover 54th Proc Soc N atr PhysioM. Gottingen，Geman，2000，7-9.2Papenbrock，Setal. Investigations on prophylactic effects of coarse feed
32、structure and/or potassiumdifomate on the microflora in the digestive tract of weaned piglets experimentally infected with Salmonella Der by J.Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition，2005，89(36):84-87.3Canibe，N，S H Steien，et al. Effect of K-diformate in starter diers on acidity，microbiota，
33、and the amount of organic acids in the digestive tract of piglets， and on gastric alterationsJ. Journal of Animal Science，2001，79(8):2123-2133.4王冉，邵春荣，胡来根，等，酸化剂对肉鸡肠道微生物数量的影响研究J. 2001，22(7):31-33.5苏勇，朱伟云.仔猪哺乳期和断奶后胃中细菌和乳酸杆菌菌群的变化J.肠外与肠内营养，2006，13(1):1-4.6吴忠良，张瑞峰，王金义.乳酸菌对早期断乳仔猪生长性能的影响J.畜牧兽医杂志，2005，24(1)
34、:27-28.7吴向军，袁杰利，梁红春.乳酸杆菌细胞裂解物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的抑制作用J.中国微生态学杂志，2007，19(5):422-423.8任庆娜，马凤龙，乔彦良，等.乳酸菌对寄生曲霉孢子活性的影响J.黑龙江畜牧兽医，2009(1):102-103.9李晓卉.绵羊肠道3株乳酸杆菌对大肠杆菌的体外生物颉颃试验J.青海畜牧兽医杂志，2009，39(1):21.10刘焕齐，马凤龙，任庆娜.两种乳酸菌对饲料中寄生曲霉生长和产毒影响的研究J.黑龙江畜牧兽医，2009(9):67-68.三、毕业设计（论文）进度计划序号各阶段工作内容起讫日期备注1完成文献调研、文献综述及开题报告2011年
35、10月12日-11月6日2实验阶段2011年12月3论文初稿2012年1月2月4完成毕业论文2012年3月4月5论文答辩2012年5月四、其他（学生提交）1.文献综述1份（3000字以上）2.开题报告1份 3.论文1份（6000字以上）二甲酸钾对断奶仔猪肠道菌群的影响文献综述摘要:随着人类对抗生素作用认识的不断深入，对于抗生素可能导致的动物体耐药性的产生及药物残留越来越引起人们的关注。因此，许多国家相继颁布法令，限制抗生素在饲料中的使用。而绿色微生态添加剂逐渐成为热点。大量研究表明，二甲酸钾在动物体内促进肠道有益菌的增殖，减少肠道病原菌，提高肠道黏膜的完整性，调节动物免疫反应从而提高动物的生产
36、性能。本实验旨在研究二甲酸钾对断奶仔猪肠道菌群的影响，主要检测对断奶仔猪肠道中的乳酸杆菌和大肠杆菌的影响。关键词：抗生素、二甲酸钾、断奶仔猪、肠道菌群、乳酸杆菌、大肠杆菌 半个世纪以来，抗生素作为促生长剂曾给畜牧生产带来了很大的经济效益。但是时至今日，许多抗生素的促生长机理尚不明了。一般认为饲料中添加抗生素后生产性能的提高与亚临床感染被抑制有关。因此，二甲酸钾之所以具有抗生素类促生长作用，实际上是利用其在肠道内对致病菌有很强的杀灭作用。其独特的抗微生物功能基于甲酸和甲酸盐的综合作用，以完整的二甲酸钾的形式摄入并通过酸性的胃，到达中性和偏碱性的后段肠道，即自动分解为甲酸和甲酸盐，非解离的甲酸通过
37、细菌的细胞壁，在细胞内使pH下降。细胞内pH接近7，有机酸一旦进入细胞，破坏细胞内的酶作用和养分输送系统，使微生物不能繁殖，导致死亡，起到抑菌杀菌功能；甲酸盐阴离子在细胞壁外分解细菌细胞壁蛋白质，发挥杀菌和抑菌作用。1. 二甲酸钾对断奶仔猪肠道菌群的影响1.1二甲酸钾对乳酸杆菌和大肠杆菌的影响综述Kirchgessner等（1992）报道，日粮中添加二甲酸钾能明显降低仔猪肠道中大肠杆菌的数量。Hebeler等（2000）报道，日粮中添加1.8%二甲酸钾能降低断奶仔猪肠道中总厌氧菌、总需氧菌和大肠杆菌等的数量，乳酸杆菌与大肠杆菌的比例相对提高1。Canibe等的研究也表明，在仔猪开食料中添加二甲
38、酸钾能减少各肠段总的厌氧菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、酵母菌的数量。Overland等研究发现在生长育肥猪日粮中添加1.2%的二甲酸钾，降低了十二指肠，空肠和直肠中大肠杆菌的数量。Papenbrock等（2005）发现在断奶仔猪日粮中添加二甲酸钾可以减少消化道大肠杆菌的数量，并可减少排泄物中沙门氏菌的数量，说明二甲酸钾的可能的作用机理是抑制有害微生物的繁衍，类似抗生素的作用2。Canibe，Steien等（2001）研究发现，在断奶仔猪日粮中添加二甲酸钾同时降低食糜和粪便中的大肠杆菌、乳酸菌和酵母菌数量，说明二甲酸钾对各种微生物都有抑制或者杀灭作用，这与抗生素的作用机理类似3。王冉等（2001）的研
39、究也得到类似的结果4。1.2乳酸杆菌和大肠杆菌对仔猪肠道菌群的影响猪的胃和小肠中最主要的细菌是大肠杆菌和乳酸杆菌，而在肠道的后段则存在着多种细菌。通过液态饲喂、日粮酸化、添加益生菌、益生素、酶制剂等营养策略来建立猪正常的肠道菌群。乳酸杆菌属于乳杆菌科，乳杆菌属，是一种没有芽孢的革兰阳性杆菌，异养厌氧型。王志祥等在仔猪日粮中添喂乳酸杆菌，发现能显著提高猪的增重、饲料利用率，减少患白痢、腹泻的几率，降低断奶应激反应，具有改善养分表观消化率的趋势5。2003年黄沧海等研究发现，分离自胃黏膜上皮的乳酸杆菌在大肠杆菌培养初期起到抑制作用，后期随着乳酸杆菌的增殖、产物的积累等可直接灭杀大肠杆菌6。鲍连生等
40、用乳酸杆菌属的嗜酸乳杆菌和病原菌大肠杆菌共同培养发现，嗜酸乳杆菌能破坏白色念珠菌细胞内正常结构，抑制白色念珠菌的生长7。陈莹等证实了芽孢乳酸杆菌和产生的抑菌物质能抑制常见的肠道病原菌8。苏勇等研究新生仔猪从7日龄至35日龄(断奶后2周)胃中细菌及乳酸杆菌的菌群变化，发现仔猪断奶后，引起断奶应激，仔猪断奶前、后胃中乳酸杆菌变化较小，胃pH值显著上升，并造成潜在病原菌在胃中大量增生9。这可能是由于仔猪消化系统尚未发育完全，胃分泌的胃酸能力弱，pH值偏高，使得一些能耐低酸的病原细菌能通过胃部到胃肠道定植，使仔猪疾病发病率增加。吴忠良等研究表明，仔猪出生早期饲喂乳酸杆菌有明显的促生长效果，随着时间的推
41、移这种效果逐渐降低，断奶后已无明显影响，可明显控制白痢的发生，断奶后饲喂低剂量乳酸杆菌，发病率和死亡率都明显降低，但高剂量使发病率和死亡率都明显增加10。可能原因是由于剂量过大，导致菌群结构部分失调，对断奶应激更加敏感。张丽萍等在试验中发现，从猪的新鲜粪便中培养分离获得的乳酸杆菌有促进仔猪生长发育、提高生产性能、降低发病率和死亡率的作用11。1.2.1乳酸杆菌维持肠道菌群平衡的作用机制乳酸杆菌是厌氧型细菌，乳酸杆菌能分解糖类产生乳酸，增加肠道的酸度，pH值降低，不耐酸的。病原细菌不能生长;因此，动物肠道内寄居的微生物主要是耐酸厌氧菌。一般情况下，肠道内有益菌和致病菌维持一定的比例，当条件发生改变时这种平衡失调，致病菌大量繁殖，导致动物致病。乳酸杆菌对很多致病菌均有抑制作用。吴向军等发现乳酸杆菌裂解物在体内外对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌均有较强的抑制作用12。鸡源乳酸杆菌和牛源乳酸杆菌均能较明显的抑制黄