高中生物实验12乳酸脱氢酶同工酶的分离学案浙科版选修12.doc

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1、乳酸脱氢酶同工酶的分离1除了LDH还有哪些酶具有同工酶?(1)哺乳动物的肝脏中,己糖激酶有、4种同工酶;(2)碱性磷酸酯酶(AKP)有4种同工酶;(3)微生物中也有同工酶,大肠杆菌中天冬氨酸磷酸液酶,共有3种同工酶。2LDH同工酶有什么用途?同工酶又有什么应用?LDH同工酶的分布有明显的组织特异性,所以可以根据其组织特异性来协助诊断疾病。正常人血清中LDH2LDH1。如有心肌酶释放入血清中,则LDH1LDH2,利用此指标可以观察诊断心肌疾病。临床意义:(1)急性心肌梗塞发作后,早期血清中LDH1和LDH2活性均升高,但LDH1增高更早,更明显,导致LDH1与LDH2的比值升高。(2)肝炎、急性

2、肝细胞损伤及骨骼肌损伤时LDH5都会升高。(3)患活动性风心肌湿性炎、急性病素性心肌炎、溶血性贫血、肾坏死等病LDH1也可升高。(4)恶性病变时LDH3常增高。同工酶是基因表达的产物,生物发育过程中基因的表达受时间和空间的控制,所以同工酶的研究在生理或病理变化、分子进化、育种等方面都有意义。近年来,同工酶检测在有些方面已被DNA标记所取代。但由于同工酶的检测在操作上比检测DNA简便,所以在一定程度上还可发挥作用。3LDH活性染色法能否用于定量测定,能否用于比色法测定其他生化反应?LDH活性染色法可用于溶液的比色定量测定。此法也可用于其他生化的氧化还原反应。但由于NBTH2不溶于水,在琥珀酸脱氢

3、酶测定中,可使PMSH2与溶于水的2,6二氯酚靛酚相偶联而进行比色测定。4同工酶能否用SDS聚丙烯酰胺电泳分离?为什么?SDS是解离剂,而许多同工酶是由2种亚基以不同比例组成的全酶,被解离后进行电泳,获得的是亚基的条带,无法显示同工酶的条带。所以同工酶不能用SDS聚丙烯酰胺电泳分离。题例领悟TILILINGWU【例题1】 乳酸脱氢酶能使乳酸发生下列的哪一变化 ()A乳酸脱氢产生丙酮酸B使氧化型辅酶NAD分解C使乳酸氧化生成CO2、H2OD使乳酸分解成乙醇解析:本题考查乳酸脱氢酶的作用。根据教材中对其的描述,乳酸脱氢酶(LDH)可以发生以下变化CH3CHOHCOOHNAD(乳酸)(氧化型辅酶NA

4、D)CH3COCOOHNADHH(丙酮酸)所以,正确的答案是A。答案:A将乳酸脱氢酶的反应式搞清楚,尤其是各物质的分子简式。【例题2】 下面对同工酶概念的说法,正确的是 ()A能将不同物质催化反应为同一物质的一组酶B能催化同一化学反应,但其酶蛋白分子的组成却不同的一组酶C所起的作用都是催化作用的一组酶D催化同一个物质生成的物质却不同的一组酶解析:根据同工酶的概念所述,同工酶是指催化同一化学反应,但其酶蛋白的分子组成却不同的一组酶,所以选项B是正确的。答案:B同工酶的概念要准确理解。随堂训练SUITANGXUNLIAN1下列属于乳酸脱氢酶(LDH)催化得到的物质是()乳酸NADHNADH丙酮酸A BC D答案:B解析:根据下图可知:CH3CHOHCOOH(乳酸)NADCH3COCOOH(丙酮酸)NADHH生成物为3个:丙酮酸、NADH、H。2关于同工酶的叙述,不正确的是()ALDH各种同工酶的化学本质都是蛋白质BLDH共有5种同工酶,分别为H4、H3M、H2M2、HM3、M4CLDH是由2种亚基L和M以不同比例组成的四聚体DLDH同工酶可用于研究酶的专一性答案:D解析:根据教材中对同工酶概念、特性的描述,D是不正确的。同工酶的用途之一是用以辅助诊断疾病等。第 3 页 共 3 页

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