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1、课下能力提升（二）课下能力提升（二） 基础题组基础题组 1下列获取目的基因的方法中需要模板链的是下列获取目的基因的方法中需要模板链的是( ) 从基因文库中获取目的基因从基因文库中获取目的基因 利用利用 PCR 技术扩增目的基因技术扩增目的基因 反转录法获得反转录法获得 cDNA 通过通过 DNA 合成仪利用化学方法人工合成目的基因合成仪利用化学方法人工合成目的基因 A B C D 解析：选解析：选 D 可依据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因的转录产物 可依据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因的转录产物 mRNA 以及基 因的表达产物蛋白质等从基因文库中获取目的基因，故不需要模板；利用 以及基
2、 因的表达产物蛋白质等从基因文库中获取目的基因，故不需要模板；利用 PCR 技术扩增 目的基因需要 技术扩增 目的基因需要 DNA 的两条链作为模板；反转录法获得的两条链作为模板；反转录法获得 cDNA 需要需要 mRNA 作为模板；通过作为模板；通过 DNA 合成仪利用化学方法人工合成目的基因时，不需要模板。合成仪利用化学方法人工合成目的基因时，不需要模板。 2在基因表达载体的构建中，下列叙述错误的是在基因表达载体的构建中，下列叙述错误的是( ) A基因表达载体的构建方法不完全相同基因表达载体的构建方法不完全相同 B有了启动子才能驱动基因转录出有了启动子才能驱动基因转录出 mRNA C终止子
3、的作用是终止翻译过程终止子的作用是终止翻译过程 D基因表达载体的结构包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等基因表达载体的结构包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等 解析：选解析：选 C 因为受体细胞有植物、动物、微生物细胞之分，且目的基因导入受体细 胞的方法不同，因此，基因表达载体的构建方法是不完全相同的；启动子是一段有特殊结 构的 因为受体细胞有植物、动物、微生物细胞之分，且目的基因导入受体细 胞的方法不同，因此，基因表达载体的构建方法是不完全相同的；启动子是一段有特殊结 构的 DNA 片段，位于基因的首端，是片段，位于基因的首端，是 RNA 聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出聚合
4、酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出 mRNA，最终获得所需要的蛋白质；终止子的作用是使转录在所需要的地方停止，终止密 码子的作用是使翻译在所需要的地方停止；基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因、 标记基因等。 ，最终获得所需要的蛋白质；终止子的作用是使转录在所需要的地方停止，终止密 码子的作用是使翻译在所需要的地方停止；基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因、 标记基因等。 3在将目的基因导入受体细胞的相关操作中，正确的是在将目的基因导入受体细胞的相关操作中，正确的是( ) A导入植物细胞时均采用农杆菌转化法导入植物细胞时均采用农杆菌转化法 B转基因动物的获得多数运用基因枪法转基因动物
5、的获得多数运用基因枪法 C大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钙离子处理大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钙离子处理 D导入目的基因的动物受精卵在培养液中发育成转基因动物导入目的基因的动物受精卵在培养液中发育成转基因动物 解析：选解析：选 C 将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法；显微注射法 是将目的基因导入动物细胞中最为有效的方法；大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钙 离子处理，使其成为感受态细胞；导入目的基因的动物受精卵在培养液中发育成早期胚胎， 再经胚胎移植进入母体子宫内，其在母体子宫内发育成转基因动物。 将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法；显微注射法 是将目
6、的基因导入动物细胞中最为有效的方法；大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钙 离子处理，使其成为感受态细胞；导入目的基因的动物受精卵在培养液中发育成早期胚胎， 再经胚胎移植进入母体子宫内，其在母体子宫内发育成转基因动物。 4下列关于目的基因表达情况检测与鉴定方法中错误的是下列关于目的基因表达情况检测与鉴定方法中错误的是( ) A用显微镜观察染色体的形态和结构，从而检测受体细胞是否导入了目的基因用显微镜观察染色体的形态和结构，从而检测受体细胞是否导入了目的基因 B采用分子杂交技术检测目的基因是否转录出了采用分子杂交技术检测目的基因是否转录出了 mRNA C用相应的抗体进行抗原用相应的抗体进行抗原抗体
7、杂交检测目的基因是否翻译成蛋白质抗体杂交检测目的基因是否翻译成蛋白质 D做抗虫或抗病的接种实验检测转基因生物是否具有抗性以及抗性的程度做抗虫或抗病的接种实验检测转基因生物是否具有抗性以及抗性的程度 解析 ： 选解析 ： 选 A 检测受体细胞是否导入了目的基因， 用显微镜观察不到， 但可以利用 检测受体细胞是否导入了目的基因， 用显微镜观察不到， 但可以利用 DNA 分子杂交技术检测；采用分子杂交技术检测目的基因是否转录出分子杂交技术检测；采用分子杂交技术检测目的基因是否转录出 mRNA；通过抗原；通过抗原抗体 杂交检测目的基因是否翻译成了蛋白质；做抗虫或抗病的接种实验检测转基因生物是否具 有抗
8、性以及抗性的程度。 抗体 杂交检测目的基因是否翻译成了蛋白质；做抗虫或抗病的接种实验检测转基因生物是否具 有抗性以及抗性的程度。 5应用转基因技术可生产人类所需要的转基因产品，如利用大肠杆菌生产人胰岛素。 下列能说明人胰岛素基因在受体细胞中得以表达的是 应用转基因技术可生产人类所需要的转基因产品，如利用大肠杆菌生产人胰岛素。 下列能说明人胰岛素基因在受体细胞中得以表达的是( ) A在大肠杆菌细胞中检测到人的胰岛素基因在大肠杆菌细胞中检测到人的胰岛素基因 B在大肠杆菌细胞中检测到人胰岛素基因转录出的在大肠杆菌细胞中检测到人胰岛素基因转录出的 mRNA C在大肠杆菌的代谢产物中检测到人胰岛素在大肠
9、杆菌的代谢产物中检测到人胰岛素 D在含有四环素的培养基中培养出大肠杆菌在含有四环素的培养基中培养出大肠杆菌 解析 ： 选解析 ： 选C 在大肠杆菌细胞中检测到人的胰岛素基因， 只能说明胰岛素基因导入成功， 但不一定能合成胰岛素；在大肠杆菌细胞中检测到人胰岛素基因转录出的 在大肠杆菌细胞中检测到人的胰岛素基因， 只能说明胰岛素基因导入成功， 但不一定能合成胰岛素；在大肠杆菌细胞中检测到人胰岛素基因转录出的 mRNA，只能说 明胰岛素基因转录成功，但不一定能合成胰岛素；人胰岛素基因在大肠杆菌中得以表达的 标志是通过转录和翻译合成人的胰岛素，所以在大肠杆菌的代谢产物中检测到人胰岛素， 说明人胰岛素基
10、因在受体细胞中得以表达；若基因表达载体上有四环素抗性基因，则在含 有四环素的培养基中大肠杆菌能生存，说明目的基因可能导入到受体细胞中，但不一定能 合成胰岛素。 ，只能说 明胰岛素基因转录成功，但不一定能合成胰岛素；人胰岛素基因在大肠杆菌中得以表达的 标志是通过转录和翻译合成人的胰岛素，所以在大肠杆菌的代谢产物中检测到人胰岛素， 说明人胰岛素基因在受体细胞中得以表达；若基因表达载体上有四环素抗性基因，则在含 有四环素的培养基中大肠杆菌能生存，说明目的基因可能导入到受体细胞中，但不一定能 合成胰岛素。 6下列对基因工程的叙述，正确的是下列对基因工程的叙述，正确的是( ) A基因工程必须使用的工具酶
11、是限制酶、基因工程必须使用的工具酶是限制酶、DNA 连接酶和连接酶和 RNA 聚合酶聚合酶 B基因工程的核心步骤是将目的基因导入受体细胞基因工程的核心步骤是将目的基因导入受体细胞 C载体上的标记基因可用于检测目的基因是否导入受体细胞载体上的标记基因可用于检测目的基因是否导入受体细胞 D目的基因是否表达可通过目的基因是否表达可通过 DNA 分子杂交技术来检测分子杂交技术来检测 解析：选解析：选 C 基因工程使用的工具酶是限制酶和 基因工程使用的工具酶是限制酶和 DNA 连接酶；基因工程的核心步骤是 基因表达载体的构建；标记基因的作用是鉴别和筛选含目的基因的细胞；目的基因是否表 达可通过分子杂交技
12、术和抗原 连接酶；基因工程的核心步骤是 基因表达载体的构建；标记基因的作用是鉴别和筛选含目的基因的细胞；目的基因是否表 达可通过分子杂交技术和抗原抗体杂交来检测，因为基因表达包括转录和翻译两个过程。抗体杂交来检测，因为基因表达包括转录和翻译两个过程。 7下列关于下列关于 cDNA 文库和基因组文库的说法，错误的是文库和基因组文库的说法，错误的是( ) AcDNA 文库中的文库中的 DNA 来源于来源于 mRNA 的反转录的反转录 B 如果某种生物的 如果某种生物的 cDNA 文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制 的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同 文库中的某个基因与该生物
13、的基因组文库中的某个基因控制 的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同 CcDNA 文库中的基因都没有启动子文库中的基因都没有启动子 D一种生物的一种生物的 cDNA 文库可以有许多种，但基因组文库只有一种文库可以有许多种，但基因组文库只有一种 解析：选解析：选 B 由于基因转录时只有编码区段才能转录，所以以 由于基因转录时只有编码区段才能转录，所以以 mRNA 反转录成的反转录成的 DNA 就只有外显子区段，而缺少内含子和启动子等非编码区段，和原来的基因结构不相同。就只有外显子区段，而缺少内含子和启动子等非编码区段，和原来的基因结构不相同。 8下列关于基因表达载体导入微生物细胞的叙述，错误的
14、是下列关于基因表达载体导入微生物细胞的叙述，错误的是( ) A常用原核生物作为受体细胞，是因为原核生物繁殖快，且多为单细胞，遗传物质相 对较少 常用原核生物作为受体细胞，是因为原核生物繁殖快，且多为单细胞，遗传物质相 对较少 B受体细胞所处的一种能吸收周围环境中受体细胞所处的一种能吸收周围环境中 DNA 分子的生理状态称为感受态分子的生理状态称为感受态 C感受态细胞吸收感受态细胞吸收 DNA 分子需要适宜的温度和酸碱度分子需要适宜的温度和酸碱度 D感受态细胞吸收重组表达载体感受态细胞吸收重组表达载体 DNA 分子的液体只要调节为适宜的分子的液体只要调节为适宜的 pH 即可，没必 要用缓冲液 即
15、可，没必 要用缓冲液 解析 ： 选解析 ： 选 D 将基因表达载体导入微生物细胞时，需在一定条件 将基因表达载体导入微生物细胞时，需在一定条件(如适宜的温度、如适宜的温度、pH 等等) 下，将基因表达载体和感受态的微生物细胞混合培养，在培养过程中，可能会影响下，将基因表达载体和感受态的微生物细胞混合培养，在培养过程中，可能会影响 pH 的变 化，因此要加入缓冲液，以保持适宜的 的变 化，因此要加入缓冲液，以保持适宜的 pH。 能力题组能力题组 9下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是( ) A表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞表达载体中的胰岛
16、素基因可通过人肝细胞 mRNA 反转录获得反转录获得 B表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原点表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原点 C借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来 D启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用 解析：选解析：选 C 由于人肝细胞中胰岛素基因不表达，所以无法利用肝细胞 由于人肝细胞中胰岛素基因不表达，所以无法利用肝细胞 mRNA 反转录 获得胰岛素基因；表达载体的复制启动于复制原点，胰岛素基因的转录启动于启动子；抗 生素抗性基因是标记
17、基因，作用是检测受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有胰岛素 基因的受体细胞筛选出来；启动子是 反转录 获得胰岛素基因；表达载体的复制启动于复制原点，胰岛素基因的转录启动于启动子；抗 生素抗性基因是标记基因，作用是检测受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有胰岛素 基因的受体细胞筛选出来；启动子是 RNA 聚合酶识别和结合的部位，是转录的起点，而终 止密码子位于 聚合酶识别和结合的部位，是转录的起点，而终 止密码子位于 mRNA 上，在翻译中起作用。上，在翻译中起作用。 10如图为形成如图为形成 cDNA 和和 PCR 扩增的过程。据图分析，下列说法正确的是扩增的过程。据图分析，下列说法正确的是
18、( ) A催化过程的酶是催化过程的酶是 DNA 聚合酶聚合酶 B过程发生的变化是引物与单链过程发生的变化是引物与单链 DNA 结合结合 C催化过程的酶都必须能耐高温催化过程的酶都必须能耐高温 D过程需要解旋酶过程需要解旋酶 解析：选解析：选 B 为逆转录过程，该过程需要逆转录酶的催化；为复性过程，发生的 变化是引物与互补 为逆转录过程，该过程需要逆转录酶的催化；为复性过程，发生的 变化是引物与互补 DNA 链结合；图中过程为链结合；图中过程为 DNA 复制，这两个过程都需要复制，这两个过程都需要 DNA 聚 合酶的催化， 其中过程进行的温度是 聚 合酶的催化， 其中过程进行的温度是 7075
19、， 因此催化该过程的， 因此催化该过程的 DNA聚合酶能耐高温， 但催化过程的酶不须耐高温；过程为高温解链，该过程不需要解旋酶。 聚合酶能耐高温， 但催化过程的酶不须耐高温；过程为高温解链，该过程不需要解旋酶。 11.质粒是基因工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体 内，某细菌质粒上的标记基因如图所示， 通过标记基因可以推知外 源基因 质粒是基因工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体 内，某细菌质粒上的标记基因如图所示， 通过标记基因可以推知外 源基因(目的基因目的基因)是否转移成功。外源基因插入的位置不同， 细菌在 培养基上的生长情况也不同， 如图所示外源基因在质粒中可插入的 位置有 是否转
20、移成功。外源基因插入的位置不同， 细菌在 培养基上的生长情况也不同， 如图所示外源基因在质粒中可插入的 位置有 a、b、 c 点。某同学根据实验现象对其插入的位点进行分析， 其中分析正确的是 点。某同学根据实验现象对其插入的位点进行分析， 其中分析正确的是( ) 实验现象实验现象实验推论实验推论 选选 项项 在含青霉素培养基上的 生长情况 在含青霉素培养基上的 生长情况 在含四环素培养基上 的生长情况 在含四环素培养基上 的生长情况 目的基因插入 的位置 目的基因插入 的位置 A能生长能生长能生长能生长a B不能生长不能生长能生长能生长b C能生长能生长不能生长不能生长c D不能生长不能生长不
21、能生长不能生长c 解析：选解析：选 B 若质粒上插入的位置在 若质粒上插入的位置在 b 点，那么抗四环素基因没有被破坏，抗青霉素 基因被破坏，导入该重组质粒的细菌在含青霉素的培养基上不能生长，在含四环素的培养 基上能生长。 点，那么抗四环素基因没有被破坏，抗青霉素 基因被破坏，导入该重组质粒的细菌在含青霉素的培养基上不能生长，在含四环素的培养 基上能生长。 12利用基因工程技术生产羧酸酯酶利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是 ( ) A过程所需的逆转录酶可取自抗农药马拉硫磷小菜蛾的任一细胞过程所需的逆转录酶可取自抗农药
22、马拉硫磷小菜蛾的任一细胞 B过程利用过程利用 PCR 技术扩增目的基因需使用耐高温的解旋酶和引物技术扩增目的基因需使用耐高温的解旋酶和引物 C过程常用过程常用 Ca2 处理大肠杆菌使其成为易于吸收 处理大肠杆菌使其成为易于吸收 DNA 分子的感受态细胞分子的感受态细胞 D过程可利用抗原过程可利用抗原抗体杂交技术鉴定目的基因是否已导入受体细胞抗体杂交技术鉴定目的基因是否已导入受体细胞 解析：选解析：选 C 过程表示通过反转录法合成目的基因，该过程需要逆转录酶，逆转录 酶一般取自 过程表示通过反转录法合成目的基因，该过程需要逆转录酶，逆转录 酶一般取自 RNA 病毒，抗农药马拉硫磷小菜蛾体内没有逆
23、转录酶；过程利用病毒，抗农药马拉硫磷小菜蛾体内没有逆转录酶；过程利用 PCR 技术 扩增目的基因需使用耐高温的 技术 扩增目的基因需使用耐高温的 DNA 聚合酶和引物；过程常用聚合酶和引物；过程常用 Ca2 处理大肠杆菌，使其 成为易于吸收 处理大肠杆菌，使其 成为易于吸收 DNA 分子的感受态细胞；抗原分子的感受态细胞；抗原抗体杂交技术用于鉴定目的基因是否成功 表达，鉴定目的基因是否已导入受体细胞常用 抗体杂交技术用于鉴定目的基因是否成功 表达，鉴定目的基因是否已导入受体细胞常用 DNA 分子杂交技术。分子杂交技术。 13如图是利用基因工程方法培育抗虫棉的过程。请回答相关问题：如图是利用基因
24、工程方法培育抗虫棉的过程。请回答相关问题： (1)从苏云金芽孢杆菌的从苏云金芽孢杆菌的 DNA 中获取抗虫基因，需要用到的工具是中获取抗虫基因，需要用到的工具是_，此工具主 要是从 ，此工具主 要是从_生物中分离纯化出来的， 它能够识别双链生物中分离纯化出来的， 它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列， 并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的 分子的某种特定核苷酸序列， 并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的_键断开。键断开。 (2)构建重组质粒时，常用构建重组质粒时，常用 Ti 质粒作为载体，是因为质粒作为载体，是因为 Ti 质粒上具有质粒上具有_，它能把 目的基因整合
25、到受体细胞的 ，它能把 目的基因整合到受体细胞的_上。上。 (3)E 过程是利用植物组织培养技术完成的，要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋 予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做 过程是利用植物组织培养技术完成的，要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋 予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做_实验。实验。 (4)将目的基因导入植物细胞，除采用图示中的方法外，还可以采用将目的基因导入植物细胞，除采用图示中的方法外，还可以采用_法和花粉 管通道法。 法和花粉 管通道法。 解析 ：解析 ： (1)限制酶用于切割限制酶用于切割 DNA 分子，获取目的基因。限制酶主要从原核生物细胞中获 取。 限制酶可使
26、磷酸二酯键断裂， 将 分子，获取目的基因。限制酶主要从原核生物细胞中获 取。 限制酶可使磷酸二酯键断裂， 将DNA分子切开。分子切开。 (2)Ti质粒是可转移质粒是可转移DNA， 其上的， 其上的TDNA 可以整合到植物细胞的染色体可以整合到植物细胞的染色体 DNA 上，故将目的基因借助上，故将目的基因借助 Ti 质粒导入植物细胞中。质粒导入植物细胞中。(3)把 害虫接种到转基因植株上，以检测转基因植株的抗虫基因是否正常表达。 把 害虫接种到转基因植株上，以检测转基因植株的抗虫基因是否正常表达。 答案：答案：(1)限制酶 原核 磷酸二酯 限制酶 原核 磷酸二酯 (2)TDNA 染色体 染色体
27、DNA (3)抗虫的接种 抗虫的接种 (4)基 因枪 基 因枪 14(全国卷全国卷)几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通 过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题： 几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通 过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题： (1)在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的 mRNA，常选用嫩叶而不 选用老叶作为实验材料，原因是 ，常选用嫩叶而不 选用老叶作为实验材料，原因是_。提取。提取 RNA
28、 时，提取液中需添加时，提取液中需添加 RNA 酶抑制剂，其目的是酶抑制剂，其目的是_。 (2)以以 mRNA 为材料可以获得为材料可以获得 cDNA，其原理是，其原理是_。 (3)若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入 受体细胞，原因是 若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入 受体细胞，原因是_(答出两点即可答出两点即可)。 (4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时，当几丁质酶基因和质粒载体连接时， DNA连接酶催化形成的化学键是连接酶催化形成的化学键是_。 (5)若获得的转基因植株若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物
29、的基因组中几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没 有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是 抗真菌病的能力没 有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是_。 解析 ：解析 ： (1)与老叶相比， 嫩叶组织细胞易破碎， 容易提取到几丁质酶的与老叶相比， 嫩叶组织细胞易破碎， 容易提取到几丁质酶的 mRNA。 提取。 提取 RNA 时，提取液中需添加时，提取液中需添加 RNA 酶抑制剂，其目的是防止酶抑制剂，其目的是防止 RNA 降解。降解。(2)以以 mRNA 为材料获得为材料获得 cDNA 的原理是在逆转录酶的作用下，以的原理是在逆转录酶的作用下，以 mRNA 为模板按照碱基互补
30、配对的原则可以合成为模板按照碱基互补配对的原则可以合成 cDNA。(3)若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导 入受体细胞，原因是目的基因无复制原点且目的基因无表达所需的启动子。入受体细胞，原因是目的基因无复制原点且目的基因无表达所需的启动子。(4)DNA 连接酶 催化形成的化学键是磷酸二酯键。 连接酶 催化形成的化学键是磷酸二酯键。(5)若获得的转基因植株不具备所期望的性状表现，根据 中心法则分析，其可能的原因是目的基因的转录或翻译异常。 若获得的转基因植株不具备所期望的性状表现，根据 中心
31、法则分析，其可能的原因是目的基因的转录或翻译异常。 答案：答案：(1)嫩叶组织细胞易破碎 防止嫩叶组织细胞易破碎 防止 RNA 降解 降解 (2)在逆转录酶的作用下，以在逆转录酶的作用下，以 mRNA 为模板按照碱基互补配对的原则可以合成为模板按照碱基互补配对的原则可以合成 cDNA (3)目的基因无复制原点；目的基因无表达所需启动子 目的基因无复制原点；目的基因无表达所需启动子 (4)磷酸二酯键 磷酸二酯键 (5)目的基因的转录或翻译异常目的基因的转录或翻译异常 15为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶 D 基因与位于叶绿体膜上的转运肽 基因相连，
32、导入油菜叶片细胞并获得了转基因油菜品种。 基因与位于叶绿体膜上的转运肽 基因相连，导入油菜叶片细胞并获得了转基因油菜品种。 (1)选用图甲中的选用图甲中的_限制酶处理两个基因后，再用限制酶处理两个基因后，再用 DNA 连接酶处理，得到连接酶处理，得到 _(填图中字母填图中字母)端相连的融合基因。端相连的融合基因。 (2)将上述融合基因插入如图乙所示质粒的将上述融合基因插入如图乙所示质粒的 TDNA 中，构建中，构建_，并导 入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含 ，并导 入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含_的固体平板上培养得到含融合基因的单菌 落，再利用培养基振荡培养，可以得到用于转化的浸染液。
33、的固体平板上培养得到含融合基因的单菌 落，再利用培养基振荡培养，可以得到用于转化的浸染液。 (3)剪取油菜的叶片放入染液中一段时间后筛选获得转基因油菜细胞。该细胞通过剪取油菜的叶片放入染液中一段时间后筛选获得转基因油菜细胞。该细胞通过 _技术，可培育成转基因油菜植株。技术，可培育成转基因油菜植株。 (4)提取上述转基因油菜的提取上述转基因油菜的 mRNA，在逆转录酶的作用下获得，在逆转录酶的作用下获得 cDNA，再利用，再利用 _的的 DNA 片段设计引物进行扩增。对扩增结果进行检测，可判断融合基因 是否完成 片段设计引物进行扩增。对扩增结果进行检测，可判断融合基因 是否完成_。 解析：解析：
34、(1)可以用可以用 Cla 限制酶和限制酶和 DNA 连接酶处理图甲两个基因后，得到连接酶处理图甲两个基因后，得到 A、D 端相 连的融合基因。 端相 连的融合基因。(2)将上述融合基因插入图乙所示将上述融合基因插入图乙所示 Ti 质粒的质粒的 TDNA 中，构建基因表达载体中，构建基因表达载体 (重组质粒重组质粒)并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌 落，再利用液体培养基振荡培养，可以得到用于转化的浸染液。 并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌 落，再利用液体培养基振荡培养，可以得到用于转化的浸染液。(3)剪取油菜的叶片放入染
35、液中一段时间后筛选获得转基因油菜细胞。该细胞通过植物组织培养技术，可培育成转基 因油菜植株。 剪取油菜的叶片放入染 液中一段时间后筛选获得转基因油菜细胞。该细胞通过植物组织培养技术，可培育成转基 因油菜植株。(4)提取上述转基因油菜的提取上述转基因油菜的 mRNA，在逆转录酶的作用下获得，在逆转录酶的作用下获得 cDNA，再依据 融合基因的 ，再依据 融合基因的 DNA 片段设计引物进行扩增，对扩增结果进行检测，可判断融合基因是否完成 转录。 片段设计引物进行扩增，对扩增结果进行检测，可判断融合基因是否完成 转录。 答案：答案：(1)Cla A、D (2)基因表达载体基因表达载体(重组质粒重组质粒) 四环素 四环素 (3)植物组织培养 植物组织培养 (4)融合基因 转录融合基因 转录