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1、重点增分练重点增分练 一、选择题 1(2018徐州检测)下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是( ) A天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基 B接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理 C大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段 D分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源 解析：选 C 天然培养基的成分不明确，其原料来自天然物质，其配制较为简单；接种 前需要对培养基、培养皿、接种环进行灭菌，实验操作者的双手等进行消毒处理 ； 大肠杆菌 的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段 ； 分离分解尿素的细菌时，尿素 是
2、培养基中唯一的氮源，尿素和葡萄糖是碳源。 2下列有关用鸡血进行 DNA 粗提取和鉴定实验的操作，错误的是( ) A鸡血细胞中加入蒸馏水后，用玻璃棒搅拌 B用蛋白酶纯化溶解于 2 mol/L NaCl 溶液中的 DNA C在溶有 DNA 的滤液中加入体积分数为 95%的冷酒精后，用玻璃棒轻缓搅拌 D将卷在玻璃棒上的丝状物加入 4 mL 二苯胺试剂中，沸水浴加热，冷却后观察 解析：选 D 卷在玻璃棒上的丝状物(DNA)首先溶于 NaCl 溶液，然后再加二苯胺试剂沸 水浴加热，冷却后观察颜色变化。 3某校高三学生对某种加酶洗衣粉做了研究实验，在不同温度下除去不同污渍所需的 时间，结果如表所示。下列叙
3、述正确的是( ) 不同温度下除去不同污渍所需时间(min) 水温()1020304050607080 奶渍48432812641217 蓝墨水93868072686781105 注：牛奶(主要含蛋白质、脂肪)、蓝墨水主要成分：阿拉伯树胶(植物纤维)、鞣酸与 硫酸亚铁 A此加酶洗衣粉适宜洗涤棉织品、毛织品、蚕丝制品等衣料 B此实验证明了酶具有高效性 C此实验证明了加酶洗衣粉的洗涤效果比普通洗衣粉好 D同一水温下除去两种污渍时间不同的可能原因是加酶洗衣粉含有多种酶，酶具有专 一性，且不同酶的活性受温度影响不同 解析：选 D 根据题中表格数据可知，此加酶洗衣粉对奶渍的洗涤效果较好，因此含有 蛋白酶，
4、而毛织品、蚕丝织品等衣料的主要成分就是蛋白质，不能用该洗衣粉洗涤 ； 该实验 证明了酶需要温和的条件，即适宜的温度 ； 此实验探究了加酶洗衣粉最适温度范围以及对不 同污渍的洗涤效果， 由于缺少加普通洗衣粉的对照组， 不能证明加酶洗衣粉比普通洗衣粉的 洗涤效果好。 4下表是利用固定化 淀粉酶进行酶解淀粉的实验，下列叙述错误的是( ) 组别固定化酶柱长度(cm) 淀粉溶液的流速 (mL/min) 甲100.3 乙100.5 丙150.3 丁150.5 A预期丙组流出液中产物的纯度可能最高 B固定后的 淀粉酶装入柱中后可以重复利用 C各组实验中淀粉溶液的浓度、pH、温度等都应该相同且适宜 D流出液产
5、物的纯度只与固定化酶柱长度和淀粉溶液的流速有关 解析：选 D 反应柱长，淀粉流速慢，则反应时间充足，产物纯度较高；流出液产物的 纯度除与固定化酶柱长度和淀粉溶液的流速有关外， 还与反应柱中固定的酶的数量及下端筛 板上孔径大小等有关。 5(2019 届高三南通调研)下面是利用苹果块固定乳酸菌进行的有关实验流程图，相 关叙述错误的是( ) A将苹果切成小块可以增大相对表面积，有利于固定化乳酸菌与外界进行物质交换 B步骤中用无菌水清洗的目的是洗去苹果块表面乳酸菌，使步骤的结果更准确 C步骤中设置的对照实验应是用等质量的苹果小块在相同条件下进行实验 D与传统使用海藻酸钠固定细胞相比，用苹果固定乳酸菌可
6、以保证发酵食品的安全性 解析：选 C 将苹果切成小块可以增大相对表面积，有利于固定化乳酸菌与外界进行物 质交换；步骤中用无菌水清洗的目的是洗去苹果块表面乳酸菌，使步骤的结果更准确； 步骤中设置的对照实验应是用等量的(未固定)乳酸菌在相同条件下进行实验 ； 与传统使用 海藻酸钠固定细胞相比，用苹果固定乳酸菌可以保证发酵食品的安全性。 6苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂 产生的废水中含有苯酚， 为了降解废水中的苯酚， 研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利 用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，为土壤样品。下列相关叙述错误的是 ( ) A使用平板划线法可
7、以在上获得单个菌落 B如果要测定中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法 C图中培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源 D微生物培养前，需对培养基和培养器皿进行消毒处理 解析：选 D 微生物培养前，需对培养基和培养皿进行灭菌处理。 7下列有关生物技术应用的叙述，正确的是( ) A固定化酶技术在多步连续催化反应方面优势明显 B牛肉膏蛋白胨培养基是常用的细菌基础培养基，可用高压蒸汽灭菌法灭菌 C相同 pH 时，加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉 D向鸡血细胞中加入冷却的体积分数为 95%的酒精，可以获得无杂质的 DNA 解析：选 B 在多步连续催化反应方面优势明显的是固定化细胞；pH 不适宜时，加酶
8、 洗衣粉洗涤效果不一定比普通洗衣粉好；向鸡血细胞中加入冷却的体积分数为 95%的酒精， 得不到 DNA。 8下列有关生物技术实践的叙述，错误的是( ) A制作腐乳时，料酒的量超过 50%时，腐乳成熟的时间将会缩短 B发酵装置设置出料口便于取料及对发酵的情况进行及时的监测 C采用不同浓度的 NaCl 溶液反复溶解与析出 DNA 的方法可去除部分杂质 D用移液管稀释菌液时，要轻压橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀 解析：选 A 制作腐乳时，料酒的量超过 50%时，腐乳成熟的时间将会延长。 9(2018南通二模)下列是“肝脏细胞 DNA 粗提取”实验的两个关键操作步骤，相关 叙述错误的是( ) A
9、.步骤 1 中，加入柠檬酸钠缓冲液的目的是维持 pH 的稳定 B步骤 1 中，冰浴处理的主要原理是低温下 DNA 水解酶容易变性 C步骤 2 中，异戊醇的作用可能是使与 DNA 结合的蛋白质因变性而沉淀 D步骤 2 中，离心后应取上清液，因为 DNA 在 2 mol/L NaCl 溶液中溶解度比较大 解析：选 B 步骤 1 中，加入柠檬酸钠缓冲液的目的是维持 pH 的稳定；步骤 1 中，冰 浴处理主要原理是低温下 DNA 酶的活性低，防止 DNA 分解 ； 步骤 2 中，异戊醇的作用可能是 使与 DNA 结合的蛋白质因变性而沉淀；DNA 在 2 mol/L NaCl 溶液中的溶解度最大，因此加
10、固 体 NaCl 使溶液浓度达到 2 mol/L 后再离心过滤取上清液。 10(2018盐城三模，多选)下列有关利用新鲜的菜花进行“DNA 粗提取与鉴定”实验 的叙述，正确的是( ) A向菜花组织中加入蒸馏水并搅拌可释放核 DNA B加入洗涤剂和食盐的作用分别是瓦解细胞膜和溶解 DNA C利用 DNA 不溶于冷酒精的原理可进一步提纯 DNA D含 DNA 的 NaCl 溶液与二苯胺在常温下混合呈蓝色 解析：选 BC 菜花细胞为植物细胞，有细胞壁保护，因此加蒸馏水不会吸水胀破。加 入洗涤剂的作用是瓦解细胞膜， 加入食盐的作用是溶解 DNA。 DNA 在冷酒精中的溶解度很低， 蛋白质在冷酒精中的溶
11、解度较高， 因此可以利用DNA不溶于冷酒精的原理可进一步提纯DNA。 含 DNA 的 NaCl 溶液与二苯胺在沸水浴下混合呈蓝色。 11(多选)下图为制备人工种子部分流程示意图，有关叙述正确的是( ) A外植体需要经过脱分化、再分化等才能形成胚状体 B在海藻酸钠溶液中可加入适量的无机盐、有机碳源以及农药、抗生素等 C人工种皮应选择不透水、不透气的材料，以防加入的养分流失 D配制海藻酸钠溶液时，可用水浴法加热促进其溶解 解析：选 ABD 为了促进胚状体的生长发育，在人工种子的包裹剂中需要加入适量的无 机盐、有机碳源及农药抗生素等；人工种皮应选有韧性、透气、对胚状体无害的材料。 12.(多选)在涂
12、布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在 a、b、c 处 分别贴浸有不同抗生素(浓度相同)的无菌滤纸片，d 处滤纸片浸有无菌水。 培养后的结果如图。以下判断正确的是( ) Aa 处抑菌效果大于 b 处Bb 处的滤纸片没有沥干 Cc 处抗生素无效 Dd 为对照 解析：选 BCD 根据图示，b 的透明圈大于 a，则 b 处抑菌效果大于 a 处；b 的透明圈不 规则，b 处的滤纸片没有沥干，有浸润现象 ； d 处滤纸片浸有无菌水，无抗生素，作为对照 ； c 处的结果和 d 处相同，说明 c 处抗生素无效。 二、非选择题 13图 1 表示实验室微生物培养中的部分操作。请分析回答： (1)步骤的后一步的正
13、确操作应是将平板_，这样可以防止 _。 (2)步骤之间需要进行的正确操作应是_ _。 (3)甲同学按步骤进行操作，据图分析，采用的接种方法称为_，其操作 的两处不当之处分别是_、_。在老师的指导下， 该同学按正确的方法重新操作，则经培养后菌落的分布情况最可能是图 2 中的_。 (4)乙同学尝试采用不同于甲同学的接种方法进行实验，其中一个平板经培养后的菌落 分布如图 3 所示，推测该同学接种时可能的操作失误是_。 解析：(1)步骤是倒平板，下一步应是将平板冷凝后并倒置，目的是防止皿盖上的冷 凝水落入培养基。 (2)步骤需要在火焰旁冷却接种环并打开棉塞、 将试管口通过火焰。 (3)据图 1 分析，
14、 甲同学采用的接种方法为平板划线法。 划线操作应在酒精灯火焰附近进行， 划线的首尾区域不应相连。(4)乙同学采用的接种方法是稀释涂布平板法，根据菌落分布情 况推测，该同学接种时可能涂布不均匀。 答案 ： (1)冷凝后并倒置(缺一不可) 皿盖上的冷凝水落入培养基 (2)在火焰旁冷却接 种环(并打开棉塞)、将试管口通过火焰 (3)平板划线法 划线的首尾区域不应相连 划线 应在酒精灯火焰附近进行 A (4)涂布不均匀 14(2018南通考前预测)“CTAB 法”和“SDS 法”是提取 DNA 的常用方法，CTAB 提 取液含有 CTAB、EDTA 等成分，SDS 提取液含 SDS、EDTA 等成分。
15、CTAB 破坏膜结构，使蛋白 质变性， 提高 DNA 在提取液中的溶解度 ； SDS 能破坏膜结构， 使蛋白质变性， EDTA 能螯合 Mg2、 Mn2， 抑制DNA酶的活性。 某科研小组为了寻找提取蜡梅DNA的优良方法， 比较了两种提取DNA 的方法，主要操作如下： 实验测定结果如下(表中 OD260 反映溶液中核酸的浓度，OD280 反映溶液中蛋白质的浓 度。理论上，纯 DNA 溶液的 OD260/OD280 为 1.8，纯 RNA 溶液的 OD260/OD280 为 2.0)。 CTABSDS OD260OD280OD260/OD280OD260OD280OD260/OD280 0.03
16、30.0181.8330.0060.0051.200 请回答下列问题： (1)CTAB 法和 SDS 法提取液中都加入 EDTA 的目的是_ _。 (2)氯仿异戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA 不溶于氯仿异戊醇，蛋白质等杂质 可溶于氯仿异戊醇，实验过程中加入氯仿异戊醇离心后，应取_加异丙醇(异 丙醇与水互溶)并离心进行纯化，利用异丙醇溶液纯化 DNA 的原理是_ _。 (3)两种方法中， _法提取的 DNA 较多， 其可能原因是_ _。 (4)两种方法中，_法提取的 DNA 纯度较低，其含有的主要杂质是_。 解析 ： (1)EDTA 能螯合 Mg2、Mn2，抑制 DNA 酶的活性，减少 DN
17、A 水解，提高 DNA 的完 整性和总量。 (2)氯仿异戊醇密度均大于水且不溶于水， DNA 不溶于氯仿异戊醇， 离心后， 氯仿异戊醇位于试管的底部，DNA 位于上清液中，所以离心后应该取上清液；含 DNA 的上 清液中加异丙醇离心后取的是沉淀物，说明 DNA 不溶于异丙醇，而杂质能溶于异丙醇。(3) 从表中数据可知，CTAB 法提取的 DNA 的 OD260 是 0.033，而 SDS 法提取的 DNA 的 OD260 是 0.006,0.0330.006， 所以 CTAB 法提取的 DNA 较多， 根据 CTAB 和 SDS 两种试剂作用的区别 可知， CTAB 提高了 DNA 在提取液中
18、的溶解度,从而可提取出更多的 DNA。 (4)从表中数据可知， CTAB 法提取的 DNA 的 OD260/OD280 是 1.833， 而 SDS 法提取的 DNA 的 OD260/OD280 是 1.200， 与 1.833 相比，1.200 偏离 1.800 更多，所以 SDS 法提取的 DNA 纯度较低，纯 RNA 溶液的 OD260/OD280 为 2.0，比纯 DNA 溶液的 OD260/OD280 大，而 1.2 比 1.8 小，所以主要杂质不 是 RNA，而是蛋白质。 答案：(1)减少 DNA 水解，提高 DNA 的完整性和总量 (2)上清液 DNA 不溶于异丙醇， 而杂质能溶于异丙醇 (3)CTAB CTAB 提高了 DNA 在提取液中的溶解度，从而能提取出更多 的 DNA (4)SDS 蛋白质