2019高考生物二轮复习课件：第16讲　基因工程与细胞工程 .pdf

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1、考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 专题九专题九 现代生物科技专题现代生物科技专题 第第1616讲讲 基因工程与细胞工程基因工程与细胞工程 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 考纲再现 1.基因工程的诞生(); 2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(); 3.基因工程的应用(); 4.蛋白质工程(); 5.植物的组织培养(); 6.动物细胞培养与体细胞克隆(); 7.细胞融合与单克隆抗体(); 8.DNA的粗提取与鉴定。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 知识联网 考纲再现 知识联网 诊

2、断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 知识联网 参考答案 DNA连接酶 基因表达载体的构建 将目的 基因导入受体细胞 药物 基因 自然界中没有 全 能性 体细胞杂交 细胞增殖 动物细胞核 化学法 抗原 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 总纲目录 总纲目录总纲目录 高频命题点1 基因工程 高频命题点2 细胞工程 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 高频命题点1 基因工程 1.基因工程常考的3种基本工具(填空) (1)限制性核酸内切酶:识别特定 ,并在特定位 点上切割DNA分子。 (2)DNA连接酶:a.Ec

3、oliDNA连接酶只能连接 ; b.T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。 (3)载体:a.能在宿主细胞内稳定存在并大量复制; b.有一个至多个限制酶切割位点,便于外源DNA片段(基因)插入 其中; c.具有特殊的标记基因以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 2.理清基因工程的操作流程(填空) (1)获取目的基因的三种方法: a.从 中获取; b. c.化学法人工合成:通过DNA合成仪利用mRNA反转录法合成。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 (2)基因表达载体的构

4、建重组质粒的构建 a.基因表达载体的组成 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 (3)将目的基因导入受体细胞的“三种类型” a.导入植物细胞农杆菌转化法、花粉管通道法、 (本法针对单子叶植物) b.导入动物细胞 法 b.构建过程 c.导入微生物(细菌)转化法 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 (4)目的基因的检测与鉴定的方法 a.检测目的基因是否导入受体细胞:DNA分子杂交技术。 b.检测目的基因是否转录出mRNA:分子杂交技术。 c.检测目的基因是否翻译成蛋白质: 。 d.个体生物学水平鉴定:根据表达性状

5、判断。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 3.理清蛋白质工程(填空) 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 整合突破 核苷酸序列 黏性末端 基因文库 引物 复性 RNA聚合酶 复制原点 同种限制酶处理 DNA连接 酶 基因枪法 显微注射 抗原抗体杂交技术 新 的蛋白质 蛋白质结构 脱氧核苷酸序列 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 蛋白质工程中为什么通过对基因操作来实现对天然蛋白质的改 造? 思维延展 蛋白质具有十分复杂的空间结构,基因的结构相对简单、容易改 造;

6、改造后的基因可以遗传给下一代,被改造的蛋白质无法遗传。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 考向突破考向突破1 基因工程的工具及操作程序 基因工程的工具及操作程序 1.(2017课标,38)真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基 因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的 RNA序列的机制。已知在人体中,基因A(有内含子)可以表达出 某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题: (1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A,以大肠杆菌作为受 体细胞却未得到蛋白A,其原因是 。 (2)若用家蚕作为表达基因A的受体,在噬菌体和昆虫病毒两种载 体

7、中,不选用 作为载体,其原因是 。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 (3)若要高效地获得蛋白A,可选用大肠杆菌作为受体。因为与家 蚕相比,大肠杆菌具有 (答出两点 即可)等优点。 (4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可用的检测物质是 (填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。 (5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做 出了重要贡献,也可以说是基因工程的先导,如果说他们的工作为 基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是 。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 答案答案 (1)基

8、因A有内含子,在大肠杆菌中,其初始转录产物中与 内含子对应的RNA序列不能被切除,无法表达出蛋白A (2)噬菌 体 噬菌体的宿主是细菌,而不是家蚕 (3)繁殖快、容易培养 (4)蛋白A的抗体 (5)DNA可以从一种生物个体转移到另一种生 物个体 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 解析解析 本题主要考查基因工程的相关知识。(1)从人的基因组文 库中获得的基因A中含有内含子,而大肠杆菌属于原核生物,故大 肠杆菌不能切除基因A初始转录产物中与内含子对应的RNA序 列,故基因A在大肠杆菌中无法表达出蛋白A。(2)由于病毒对宿 主细胞的感染具有特异性,噬菌体

9、只能寄生在细菌细胞中,不能感 染家蚕细胞,故应选用可感染家蚕的昆虫病毒作为载体。(3)与真 核生物相比,大肠杆菌等原核生物具有繁殖快、容易培养、遗传 物质相对较少等优点。(4)检测基因A是否翻译出蛋白A,一般用 抗原抗体杂交的方法,即用蛋白A的抗体与从细胞中提取的蛋 白质进行杂交,观察是否出现杂交带。(5)肺炎双球菌转化实验的 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 实质是S型菌的DNA进入R型菌体内,并可在R型菌体内完成表达, 这证明了DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体,为基 因工程奠定了基础。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详

10、情 栏目索引 高考导航 命题点1 2.(2016课标,40)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoR 、BamH和Sau3A三种限制性内切酶的识别序列与切割位 点,图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoR、Sau3A 的切点是唯一的)。 图(a) 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 图(b) 根据基因工程的有关知识,回答下列问题: (1)经BamH酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被 酶切后的产物连接,理由是 。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 (2)若某人利用图(b)所示的表达载体

11、获得了甲、乙、丙三种含有 目的基因的重组子,如图(c)所示。这三种重组子中,不能在宿主 细胞中表达目的基因产物的有 ,不能表达的原因是 。 图(c) 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有 和 ,其中既能连接黏性末端又能连接平 末端的是 。 答案答案 (1)Sau3A 两种酶切割后产生的片段具有相同的黏 性末端 (2)甲和丙 甲中目的基因插入在启动子的上游,丙中目 的基因插入在终止子的下游,二者的目的基因均不能被转录(其 他合理答案均可) (3)Ecoli DNA连接酶 T4DNA连接酶 T4

12、DNA连接酶(其他合理答案均可) 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 解析解析 (1)分析图(a)可知,限制酶Sau3A与BamH切割DNA后 形成的黏性末端相同,故经这两种酶切割得到的产物可以用DNA 连接酶进行连接。(2)构建基因表达载体时,为保证目的基因能在 宿主细胞中成功表达,目的基因应插入在启动子和终止子之间,据 此可判断甲、丙均不符合要求,目的基因均不能被转录。(3)常见 的DNA连接酶有Ecoli DNA连接酶和T4DNA连接酶,其中T4DNA 连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏

13、目索引 高考导航 命题点1 考向突破考向突破2 基因工程的应用及蛋白质工程 基因工程的应用及蛋白质工程 3.(2015课标,40)已知生物体内有一种蛋白质(P),该蛋白质是一 种转运蛋白,由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨 酸变成亮氨酸,240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸,改变后的蛋白质 (P1)不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性。回答下列问题: (1)从上述资料可知,若要改变蛋白质的功能,可以考虑对蛋白质 的 进行改造。 (2)以P基因序列为基础,获得P1基因的途径有修饰 基因或合成 基因。所获得的基因表达时是遵循中心法 则的,中心法则的全部内容包括 的复制;以及遗传信息在

14、不同分子之间的流动,即: 。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 (3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋 白质功能出发,通过 和 ,进而确定相对应的脱氧核苷酸序列,据此获得基因,再经表 达、纯化获得蛋白质,之后还需要对蛋白质的生物 进行 鉴定。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 答案答案 (1)氨基酸序列(或结构) (2)P P1 DNA和RNA(或遗 传物质) DNARNA、RNADNA、RNA蛋白质(或转录、 逆转录、翻译) (3)设计蛋白质的结构 推测氨基酸序列 功能 考纲再现

15、 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 解析解析 (1)蛋白质的功能与结构相关,若要改变蛋白质的功能,需 要对其结构进行改造。(2)确定目的基因的碱基序列后,可通过对 现有基因进行改造或者重新合成来获得目的基因。中心法则的 内容包括遗传信息的复制、转录、逆转录和翻译。(3)蛋白质工 程的基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过设计蛋白质的结构 和推测氨基酸序列,进而确定相对应的脱氧核苷酸序列。获得蛋 白质之后要对蛋白质的生物功能进行鉴定。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 4.(2019广东深圳实验等六校第一次联考,38

16、)MAP30蛋白是一种 能使型核酸核糖体失活的蛋白质,存在于苦瓜果实和种子中。 MAP30蛋白具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗艾滋病的功能,近年 来引起人们的广泛关注。 (1)人们已经清楚MAP30蛋白的氨基酸序列,可以用 方法获得MAP30蛋白的基因。再利用PCR技术扩增该基因,PCR 反应体系的主要成分应该包含: 、 、 、 、扩增缓冲液(含Mg2+)和水等。 (2)科学家将MAP30蛋白的基因与某种病毒的DNA构建基因表达 载体,导入南瓜细胞中,在这个过程中,需要使用到的酶是 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 。为了避免出现“目的基因自我环化”、

17、“目的基 因在运载体上反向连接”的问题,请提出一种解决该问题的思路: 。 (3)可用 技术得到愈伤组织大规模生产MAP30蛋 白,用 技术检测MAP30的基因是否在南瓜 果实中成功表达。 (4)弧菌是克氏原鳌虾养殖中重要的致病菌,大规模暴发会给水产 养殖带来巨大的经济损失。科研人员为了研究MAP30蛋白抗弧 菌的效果,用含不同浓度MAP30蛋白培养液培养弧菌,绘制弧菌 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 生长曲线如下图: 由图可以得出的结论是 。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 答案答案 (1)化学合成

18、 4种脱氧(核糖)核苷酸 模板DNA 引 物 (对)热稳定DNA聚合酶(Taq酶) (2)限制酶和DNA连接酶 分别使用两种限制酶去剪切目的基因和运载体 (3)植物组织 培养 抗原抗体杂交随着MAP30蛋白浓度的升高,MAP30蛋 白对弧菌生长的抑制作用增强;当MAP30蛋白浓度达到或高于 500 g/mL时,弧菌生长完全被抑制 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 解析解析 (1)已知MAP30蛋白的氨基酸序列,可以用化学合成方法 获得MAP30蛋白的基因。利用PCR技术扩增该基因,PCR反应体 系的主要成分应该包含4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、引

19、 物、热稳定DNA聚合酶、扩增缓冲液(含Mg2+)和水等。(2)构建 基因表达载体需要使用到的酶是限制酶和DNA连接酶;为了避免 出现“目的基因自我环化”、“目的基因在运载体上反向连 接”的问题,可分别使用两种限制酶去剪切目的基因和运载体。 (3)可用植物组织培养技术得到愈伤组织大规模生产MAP30蛋 白,可通过抗原-抗体杂交技术检测MAP30的基因是否在南瓜果 实中成功表达。(4)用含不同浓度MAP30蛋白培养液培养弧菌, 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点1 根据图中曲线显示,随着MAP30蛋白浓度的升高,MAP30蛋白对 弧菌生长的抑制作用增强;

20、当MAP30蛋白浓度达到或高于500 g/ mL时,弧菌生长完全被抑制。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 1.植物细胞工程必记关键点(填空) (1)植物组织培养 a.植物组织培养的两个关键 b.植物激素的使用 比例较高时,促进芽分化,抑制根形成; 高频命题点2 细胞工程 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 生长素比例较高时,促进根分化,抑制芽形成。 c.光照的使用 阶段不需要给予光照,再分化阶段需给予光照,以利 于叶绿素的合成。 (2)植物体细胞杂交 a.酶解法用 酶 和果胶酶去除细胞壁。 b.促融剂

21、。 c.杂种细胞的形成标志新细胞壁的形成。 d.培养杂种植株的技术植物组织培养。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 2.动物细胞培养的特殊条件(填空) a.营养条件:加入动物血清、血浆等;通入氧气以满足代谢的需要; 通入二氧化碳以 。 b.胰蛋白酶的两次使用:首先用胰蛋白酶处理动物的器官或组织, 以制备单细胞悬液;培养过程中发生 时,同样要用 胰蛋白酶使细胞分散开。 c.避免杂菌污染的措施:培养液及培养用具灭菌处理,加入一定量 的 ,定期更换培养液。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 3.理清克隆动物的

22、培育流程(填空) (1)流程图 (2)用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因是营养丰富、体积 大、易操作,含有刺激细胞核恢复分裂能力的物质。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 4.明确单克隆抗体的一过程两特点(填空) (1)制备过程 (2)单克隆抗体的特点:特异性强、 。 (3)2次筛选的目的:第1次筛选获得杂交瘤细胞,第2次筛选获得能 分泌所需特异性抗体的杂交瘤细胞。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 整合突破 固体 细胞分裂素 脱分化 纤维素酶 聚乙二醇 维持培养液的 接触抑制 抗生素 去核 融合 杂交

23、瘤细胞 灵敏度高 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 1.诱导融合的方法分别有哪些?融合的细胞类型有哪几种(仅考虑 两两融合的细胞)? 2.植物组织培养与植物体细胞杂交各自的原理分别是什么? 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 思维延展 1.诱导植物体细胞的原生质体融合的方法主要有离心、振 动、电激或用聚乙二醇作为诱导剂。动物细胞融合常用的诱 导因素有聚乙二醇、灭活的病毒(诱导动物细胞融合的特有因 素)、电激等。融合的细胞类型:前者AA、BB、AB。后者 瘤瘤、B瘤、BB。 2.前者是植物细胞的全能性,后者

24、是细胞膜的流动性和植物细胞 的全能性。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 考向突破考向突破1 植物细胞工程 植物细胞工程 1.(2018广东茂名省际名校联考,38)利用现代生物技术,科研人员 对马铃薯的培育进行了研究,请回答相关问题: (1)培育马铃薯脱毒苗所依据的原理是 ,该培 育过程涉及 和 两个阶段。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 (2)研究马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响, 结果如图。据图可知:茎尖越小,脱毒率 ,成苗率 ,培养脱毒苗茎尖的适宜大小为 。 (3)若想培育出“番

25、茄马铃薯”植株,运用传统有性杂交能否得 到可育的杂种植株?为什么? 。 (4)若马铃薯细胞中含m条染色体,番茄细胞内有n条染色体,则 “番茄马铃薯”细胞在有丝分裂后期含 条染色体。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 答案答案 (1)植物细胞的全能性 脱分化 再分化 (2)越高 越 低 0.27 mm (3)否(或不能),不同种的植物存在生殖隔离 (4)2 (m+n) 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 解析解析 (1)培育马铃薯脱毒苗是对植物组织培养技术的应用,所依 据的原理是植物细胞的全能性;该培育过程

26、涉及脱分化和再分化 两个阶段。(2)据图可知:茎尖越小,脱毒率越高,成苗率越低;培养 脱毒苗茎尖的适宜大小为0.27 mm。(3)由于番茄和马铃薯属于 两个不同物种,而不同种的植物存在生殖隔离,所以若想培育出 “番茄马铃薯”植株,运用传统有性杂交不能得到可育的杂种 植株。(4)若马铃薯细胞中含m条染色体,番茄细胞内有n条染色 体,则“番茄马铃薯”细胞中含有(m+n)条染色体,在有丝分裂 后期含2(m+n)条染色体。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 考向突破考向突破2 动物细胞工程及其 动物细胞工程及其1应用应用 2.(2016课标,40)如图表示

27、通过核移植等技术获得某种克隆哺 乳动物(二倍体)的流程。 回答下列问题: (1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可 为 。过程表示去除细胞核,该过程一般要在卵 母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用 的方 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 法。代表的过程是 。 (2)经过多次传代后,供体细胞中 的稳定性会降低。因 此,选材时必须关注传代次数。 (3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的 角度分析其原因是 。 (4)与克隆羊“多莉(利)”培育成功一样,其他克隆动物的成功获 得也证明了 。 考纲再现 知识联网

28、 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 答案答案 (1)XX或XY 显微操作 胚胎移植 (2)遗传物质 (3) 卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响 (4)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 解析 解析 (1)因供体的性别不确定,故其细胞核内的性染色体组成为 XX或XY;一般将卵母细胞培养到M中期,用显微操作法将其细 胞核去除;代表的过程是胚胎移植。(2)传代培养10代以内的细 胞可以保持正常的二倍体核型,超过10代以后,供体细胞中遗传物 质的稳定性会降低。(3)克隆动物细胞

29、质中的遗传物质来自卵母 细胞的细胞质,卵母细胞细胞质中的遗传物质对克隆动物的性状 会产生影响。(4)克隆动物的成功可以证明动物已分化的体细胞 的细胞核具有全能性。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 3.(2018山东德州一模,38)双特异性单克隆抗体是指可同时与癌 细胞和药物结合的特异性抗体。如图是科研人员通过杂交杂 交瘤细胞技术(免疫的B细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产能同时 识别癌胚抗原和长春碱(一种抗癌药物)的双特异性单克隆抗体 的部分过程。分析回答: 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 (1)过程的

30、目的是 ,制备双 特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有 (至少答出两条)。 (2)过程诱导融合的方法是 ,过程 选用的骨髓瘤细胞 (填“能”或“不能”)在HAT培 养基上生长。 (3)经过程筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中进行过程 ,原因是 。 (4)请根据所学知识,用箭头和文字补全图中方框内获取单克隆杂 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 交杂交瘤细胞的生产过程。 (5)获得的单克隆杂交杂交瘤细胞在体外条件下培养或 ,均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 答案答案

31、(1)使小鼠产生能分泌识别癌胚抗原抗体的浆细胞(B淋 巴细胞) 动物细胞融合、动物细胞培养 (2)聚乙二醇(PEG)诱 导、电激等 不能 (3)从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种 类型(筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体不是单克隆抗体) (4) 将获得的B淋巴细胞与单克隆杂交瘤细胞融合在选择培养基 上筛选出杂交杂交瘤细胞克隆化培养、抗体检测筛选出单 克隆杂交杂交瘤细胞 (5)注射到小鼠腹腔内增殖 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 解析解析 (1)过程表示给小鼠注射抗原,目的是刺激小鼠产生能分 泌识别癌胚抗原抗体的浆细胞(B淋巴细胞);根据单克隆抗体制

32、备流程可知,该过程涉及的技术包括动物细胞融合技术、动物细 胞培养技术。(2)诱导动物细胞融合的方法有聚乙二醇、灭活病 毒、电激等;HAT培养基的作用是筛选出杂交瘤细胞,骨髓瘤细 胞不能在HAT培养基上生长。(3)从小鼠体内提取的B淋巴细胞 不止一种类型,故筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体不是单克隆 抗体,因此经过程筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板上运 用抗原抗体杂交法筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞。(4)双 特异性单克隆抗体制备过程为将获得的B淋巴细胞与单克隆杂 考纲再现 知识联网 诊断疏漏 总纲目录 考点详情 栏目索引 高考导航 命题点2 交瘤细胞融合在选择培养基上筛选出杂交杂交瘤细胞克 隆化培养、抗体检测筛选出单克隆杂交杂交瘤细胞。(5)获得 的单克隆杂交杂交瘤细胞在体外条件下培养或注射到小鼠腹 腔内增殖,均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。