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专题专题5 DNA和蛋白质技术和蛋白质技术 课题课题2 多聚酶链式反应扩增多聚酶链式反应扩增 DNA片段片段 项目项目DNA复制复制PCR扩增扩增 不同点不同点 时期时期 细胞有丝分裂细胞有丝分裂 间期和减数第间期和减数第 一次分裂前的一次分裂前的 间期间期 体外随时进行体外随时进行 场所场所活细胞内活细胞内细胞外细胞外 酶酶 解旋酶、解旋酶、DNA 聚合酶聚合酶 耐高温的耐高温的DNA 聚合酶聚合酶(Taq DNA聚合酶聚合酶) 不同点不同点 是否是否 有有RNA 转录转录 伴有伴有RNA转录，转录， 产生引物产生引物 无无RNA转录，需转录，需 加入两种引物加入两种引物 特点特点 边解旋边复制，边解旋边复制， 半保留复制半保留复制 体外迅速扩增体外迅速扩增 是否需是否需 缓冲液缓冲液 不需缓冲液不需缓冲液 严格配制严格配制10倍浓倍浓 缩扩增缓冲液缩扩增缓冲液 设备设备无无 严格控制温度变严格控制温度变 化的温控设备化的温控设备 相同点相同点 原料原料4种脱氧核苷酸种脱氧核苷酸(A、G、C、T) 复制复制 原理原理 严格遵循碱基互补配对原则，严格遵循碱基互补配对原则， 半保留复制半保留复制 模板模板以以DNA母链为模板母链为模板 引物引物 都需要分别与两条模板链相结都需要分别与两条模板链相结 合的两种引物合的两种引物