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1、研考点重点难点探究 悟高考真题演练 固考基双基体系优化 目 录 ONTENTS 课时作业 第十一单元 现代生物科技专题 第1讲 基因工程 固考基固考基双基体系优化双基体系优化 基因治疗基因治疗基因诊断基因诊断 原理原理_及基因表达及基因表达DNA分子分子_ 方法方法 将正常基因导入有基因缺陷将正常基因导入有基因缺陷 的细胞中，使该基因的的细胞中，使该基因的_ _发挥功能，以达到治发挥功能，以达到治 疗的目的疗的目的 制作特定制作特定DNA探针与探针与 病人样品病人样品DNA混合，混合， 分析分析_情况情况 进展进展临床实验临床实验临床应用临床应用 基因重组基因重组杂交杂交 表达表达 产物产物
2、杂交带杂交带 研考点研考点重点难点探究重点难点探究 考点研析考点研析 基因工程的别名基因工程的别名基因拼接技术或基因拼接技术或DNA重组技术重组技术 操作环境操作环境生物体外生物体外 操作对象操作对象基因基因 操作水平操作水平DNA分子水平分子水平 基本过程基本过程剪切剪切拼接拼接导入导入表达表达 结果结果(优点优点) _生物性状，创造出人生物性状，创造出人 类需要的基因产物或生物类型类需要的基因产物或生物类型 定向改造定向改造 条件条件目的目的 稳定并能稳定并能_目的基因稳定存在且数量可扩大目的基因稳定存在且数量可扩大 有一个至多个有一个至多个_切割位点切割位点可携带多个或多种外源基因可携带
3、多个或多种外源基因 具有特殊的具有特殊的_基因基因便于重组便于重组DNA的鉴定和选择的鉴定和选择 复制复制 限制酶限制酶 标记标记 种类种类 项目项目 限制酶限制酶 DNA连接连接 酶酶 DNA聚合酶聚合酶解旋酶解旋酶 作用底物作用底物DNA分子分子 DNA分子分子 片段片段 脱氧核苷酸脱氧核苷酸 DNA分子分子 作用部位作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键 磷酸二酯磷酸二酯 键键 磷酸二酯键磷酸二酯键 碱基对间碱基对间 的氢键的氢键 作用结果作用结果 形成黏性末形成黏性末 端或平末端端或平末端 形成重组形成重组 DNA分子分子 形成新的形成新的 DNA分子分子 形成单链形成单链 DNA分子分子 DN
4、A复制复制PCR技术技术 区区 别别 解旋方式解旋方式解旋酶催化解旋酶催化 DNA在高温作用下变在高温作用下变 性解旋性解旋 场所场所 细胞内细胞内(主要在细胞主要在细胞 核内核内) 细胞外细胞外(主要在主要在PCR扩扩 增仪内增仪内) 酶酶 DNA解旋酶、普通解旋酶、普通 的的DNA聚合酶等聚合酶等 耐热的耐热的DNA聚合酶聚合酶 (Taq酶酶) 温度条件温度条件细胞内温和条件细胞内温和条件 需控制温度，在较高需控制温度，在较高 温度下进行温度下进行 合成的对象合成的对象DNA分子分子DNA片段或基因片段或基因 DNA复制复制PCR技术技术 联联 系系 模板：均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物
5、质合成模板：均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成 原料：均为四种脱氧核苷酸原料：均为四种脱氧核苷酸 酶：均需要酶：均需要DNA聚合酶进行催化聚合酶进行催化 引物：均需要引物，使引物：均需要引物，使DNA聚合酶从引物的聚合酶从引物的3端开端开 始连接脱氧核苷酸始连接脱氧核苷酸 针对训练针对训练 考点研析考点研析 生物种类生物种类植物细胞植物细胞动物细胞动物细胞微生物细胞微生物细胞 常用方法常用方法_转化法转化法_法法_法法 受体细胞受体细胞_细胞细胞_原核细胞原核细胞 转化过程转化过程 将目的基因插将目的基因插 入到入到Ti质粒的质粒的 TDNA上上导导 入农杆菌入农杆菌侵侵 染植物细胞染植物
6、细胞 整合到受体细整合到受体细 胞的染色体胞的染色体 DNA上上表达表达 将含有目的基将含有目的基 因的表达载体因的表达载体 提纯提纯取卵取卵(受受 精卵精卵)显微注显微注 射射受精卵发受精卵发 育育获得具有获得具有 新性状的动物新性状的动物 Ca2 处理细胞 处理细胞 感受态细胞感受态细胞 重组表达载重组表达载 体与感受态细体与感受态细 胞混合胞混合感受感受 态细胞吸收态细胞吸收 DNA分子分子 农杆菌农杆菌显微注射显微注射转化转化 体体受精卵受精卵 针对训练针对训练 考点研析考点研析 项目项目蛋白质工程蛋白质工程基因工程基因工程 区区 别别 原理原理中心法则的逆推中心法则的逆推基因重组基因
7、重组 过程过程 预期蛋白质功能预期蛋白质功能设计预设计预 期的蛋白质结构期的蛋白质结构推测应推测应 有的氨基酸序列有的氨基酸序列找到相找到相 对应的脱氧核苷酸序列对应的脱氧核苷酸序列 合成合成DNA表达出蛋白质表达出蛋白质 获取目的基因获取目的基因构建基因构建基因 表达载体表达载体将目的基因导将目的基因导 入受体细胞入受体细胞目的基因的目的基因的 检测与鉴定检测与鉴定 实质实质 定向改造或生产人类所需定向改造或生产人类所需 的蛋白质的蛋白质 定向改造生物的遗传特性，定向改造生物的遗传特性， 以获得人类所需的生物类以获得人类所需的生物类 型或生物产品型或生物产品(基因的异基因的异 体表达体表达)
8、 结果结果生产自然界没有的蛋白质生产自然界没有的蛋白质生产自然界已有的蛋白质生产自然界已有的蛋白质 项目项目蛋白质工程蛋白质工程基因工程基因工程 联系联系 蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代 基因工程基因工程 基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进 行修饰、改造行修饰、改造 针对训练针对训练 考点研析考点研析 加蒸馏加蒸馏 水水2次次 加到鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破；加到含加到鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破；加到含 DNA的的2 mol/L的的NaCl溶液中，使溶液中，使NaCl溶液的物
9、质的量溶液的物质的量 浓度稀释到浓度稀释到0.14 mol/L，使，使DNA析出析出 用纱布用纱布 过滤过滤4 次次 过滤血细胞破裂液，得到含细胞核物质的滤液；过滤血细胞破裂液，得到含细胞核物质的滤液； 过滤用过滤用2 mol/L的的NaCl充分溶解的充分溶解的DNA，滤去溶液中的，滤去溶液中的 杂质；滤取杂质；滤取0.14 mol/L的的NaCl溶液中析出的溶液中析出的DNA(黏黏 稠物稠物)；过滤溶有；过滤溶有DNA的的2 mol/L的的NaCl溶液溶液 用用NaCl 溶液溶液4 次次 加加2 mol/L的的NaCl溶液，溶解提取的细胞核物质；溶液，溶解提取的细胞核物质； 用用0.14 m
10、ol/L的的NaCl溶液使溶液使DNA析出；用析出；用2 mol/L的的 NaCl溶液，溶解滤取的溶液，溶解滤取的DNA黏稠物；黏稠物；用用2 mol/L的的 NaCl溶液，溶解丝状物用于鉴定溶液，溶解丝状物用于鉴定DNA 针对训练针对训练 试管试管 序号序号 AB 1 加加2 mol/L的的NaCl溶液溶液 5 mL 加加2 mol/L的的NaCl溶液溶液5 mL 2不加不加 加入提取的加入提取的DNA丝状物丝状物 并搅拌并搅拌 3加加4 mL二苯胺，混匀二苯胺，混匀加加4 mL二苯胺，混匀二苯胺，混匀 4沸水浴沸水浴5分钟分钟沸水浴沸水浴5分钟分钟 实现现象实现现象 实验结论实验结论 悟高考悟高考真题演练真题演练 课时作业课时作业 点击进入word