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1、研考点重点难点探究 悟高考真题演练 固考基双基体系优化 目 录 ONTENTS 课时作业 第十二单元 生物技术实践 第1讲 微生物的培养与应用 固考基固考基双基体系优化双基体系优化 研考点研考点重点难点探究重点难点探究 考点研析考点研析 营养要素营养要素来源来源功能功能 碳碳 源源 无机无机 碳源碳源 CO2、NaHCO3、CaCO3 等含碳无机物等含碳无机物 构成细胞物质和一构成细胞物质和一 些代谢产物些代谢产物 既是碳源又是能源既是碳源又是能源( 有机碳源有机碳源) 有机有机 碳源碳源 糖类、脂质、蛋白质、有糖类、脂质、蛋白质、有 机酸、石油、花生粉饼等机酸、石油、花生粉饼等 营养要素营养
2、要素来源来源功能功能 氮氮 源源 无机无机 氮源氮源 无机氮：无机氮：NH3、铵盐、铵盐、 硝酸盐、硝酸盐、N2等等 合成含氮的代谢产物合成含氮的代谢产物 有机有机 氮源氮源 牛肉膏、蛋白胨、核酸、牛肉膏、蛋白胨、核酸、 尿素、氨基酸尿素、氨基酸 合成蛋白质、核酸及含合成蛋白质、核酸及含 氮的代谢产物氮的代谢产物 生长因子生长因子维生素、氨基酸、碱基维生素、氨基酸、碱基 酶和核酸的组成成分酶和核酸的组成成分 参与代谢过程中的酶参与代谢过程中的酶 促反应促反应 培养基种类培养基种类特点特点用途用途 液体培养基液体培养基不加凝固剂不加凝固剂工业生产工业生产 固体培养基固体培养基 加凝固剂加凝固剂(
3、如如 琼脂琼脂) 微生物分离、鉴定，微生物分离、鉴定， _，菌种保藏，菌种保藏 半固体培养基半固体培养基 观察微生物的运动、观察微生物的运动、 _、鉴定、鉴定 活菌计数活菌计数 分类分类 种类种类制备方法制备方法原理原理用途用途举例举例 选择选择 培养培养 基基 培养基中加入培养基中加入 某些某些_ 依据某些微生依据某些微生 物对某些物质物对某些物质 的的_ 或抗性而设计或抗性而设计 从众多微从众多微 生物中生物中 _所需所需 的微生物的微生物 加入青霉加入青霉 素分离得素分离得 到酵母菌到酵母菌 和霉菌和霉菌 鉴别鉴别 培养培养 基基 培养基中加入培养基中加入 某种某种_或或 化学药品化学药
4、品 产生特定的产生特定的 _或其他或其他 变化变化 _不同不同 种类的微种类的微 生物生物 用伊红用伊红美美 蓝培养基蓝培养基 鉴别大肠鉴别大肠 杆菌杆菌 化学物质化学物质特殊需求特殊需求分离分离 指示剂指示剂颜色颜色 鉴别鉴别 条件条件结果结果常用方法常用方法应用范围应用范围 消消 毒毒 较为较为 _ 的物理的物理 或化学或化学 方法方法 仅杀死物体仅杀死物体 表面或内部表面或内部 的部分对人的部分对人 体体 的的 微生物微生物 煮沸消毒法煮沸消毒法日常用品日常用品 巴氏消毒法巴氏消毒法不耐高温的液体不耐高温的液体 化学药剂消毒法化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手，用酒精擦拭双手， 用氯气消毒水
5、源用氯气消毒水源 灭灭 菌菌 强烈的强烈的 理化因理化因 素素 杀死物体内杀死物体内 外所有的外所有的_ _，包括，包括 芽孢和孢子芽孢和孢子 灼烧灭菌法灼烧灭菌法接种工具接种工具 干热灭菌法干热灭菌法 玻璃器皿、金属玻璃器皿、金属 工具工具 高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法培养基及容器培养基及容器 温和温和 有害有害 微微 生物生物 比较项目比较项目 平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法 关键操作关键操作 接种环在固体平板培接种环在固体平板培 养基表面养基表面 划线划线 一系列的一系列的_； 涂布平板法操作涂布平板法操作 注意事项注意事项 每次划线前后均需每次划线前后均需 _接种环接
6、种环 _要足够高，为确保要足够高，为确保 实验成功可以增加稀释度实验成功可以增加稀释度 菌体获取菌体获取 在具有显著的在具有显著的_ _的菌落中挑取菌体的菌落中挑取菌体 从适宜稀释度的从适宜稀释度的_上的上的 菌落中挑取菌体菌落中挑取菌体 优点优点 可以根据菌落的特点可以根据菌落的特点 获得某种微生物的单获得某种微生物的单 细胞菌落细胞菌落 既可以获得单细胞菌落，既可以获得单细胞菌落， 又能对微生物计数又能对微生物计数 缺点缺点不能对微生物计数不能对微生物计数 操作复杂，需要涂布多个操作复杂，需要涂布多个 平板平板 连续连续 梯度稀释梯度稀释 灼烧灼烧 稀释度稀释度 菌落特菌落特 征征 平板平
7、板 第一次操作第一次操作每次划线之间每次划线之间划线结束划线结束 目目 的的 杀死接种环杀死接种环 上原有的微上原有的微 生物生物 杀死上次划线后接种环上杀死上次划线后接种环上 残留的菌种，使下次划线残留的菌种，使下次划线 的菌种直接来源于上次划的菌种直接来源于上次划 线的末端，使每次划线菌线的末端，使每次划线菌 种数目减少种数目减少 杀死接种环上杀死接种环上 残存的菌种，残存的菌种， 避免细菌污染避免细菌污染 环境和感染操环境和感染操 作者作者 针对训练针对训练 考点研析考点研析 比较比较 项目项目 土壤中分解尿素的细菌的分土壤中分解尿素的细菌的分 离离 分解纤维素的微生物的分分解纤维素的微
8、生物的分 离离 方法方法 利用以利用以 为唯一氮源的为唯一氮源的 选择培养基进行选择培养选择培养基进行选择培养 利用富含利用富含 的选择的选择 培养基进行选择培养培养基进行选择培养 原理原理 只有分解尿素的细菌能够合只有分解尿素的细菌能够合 成成 ，才能在以尿素为，才能在以尿素为 唯一氮源的培养基上生长唯一氮源的培养基上生长 因为培养基中含有丰富的因为培养基中含有丰富的 纤维素，因此能够分解纤纤维素，因此能够分解纤 维素的微生物具有更多的维素的微生物具有更多的 生存机会而大量繁殖生存机会而大量繁殖 鉴别鉴别 在培养基中加入在培养基中加入 指示指示 剂，指示剂变红说明菌落中剂，指示剂变红说明菌落
9、中 的菌体为分解尿素的细菌的菌体为分解尿素的细菌 _染色法，周围出染色法，周围出 现现_的菌落为分解的菌落为分解 纤维素的微生物的菌落纤维素的微生物的菌落 尿素尿素纤维素纤维素 脲酶脲酶 酚红酚红刚果红刚果红 透明圈透明圈 比较比较 项目项目 间接计数法间接计数法(稀释涂布平板法稀释涂布平板法) 直接计数法直接计数法(显微计显微计 数法数法) 原理原理 当样品的稀释度足够高时，培养当样品的稀释度足够高时，培养 基表面生长的一个菌落，来源于基表面生长的一个菌落，来源于 样品稀释液中的样品稀释液中的 活菌，通活菌，通 过统计平板上的过统计平板上的 ，就能，就能 推测出样品中大约含有多少活菌推测出样
10、品中大约含有多少活菌 利用特定细菌计数板利用特定细菌计数板 或血细胞计数板，在或血细胞计数板，在 显微镜下计算一定容显微镜下计算一定容 积的样品中微生物的积的样品中微生物的 数量数量 一个一个 菌落数菌落数 比较比较 项目项目 间接计数法间接计数法(稀释涂布平板法稀释涂布平板法) 直接计数法直接计数法(显微计显微计 数法数法) 公式公式 每克样品中的菌落数每克样品中的菌落数 (CV)M C：某稀释度下平板上生长的平：某稀释度下平板上生长的平 均菌落数；均菌落数； V：涂布平板时所用的稀释液的：涂布平板时所用的稀释液的 体积体积(mL)； M：稀释倍数：稀释倍数 每毫升原液所含细菌每毫升原液所含
11、细菌 数：每小格平均细菌数：每小格平均细菌 数数400104稀释稀释 倍数倍数 缺点缺点 当两个或多个菌体连在一起时，当两个或多个菌体连在一起时， 平板上观察到的只是一个菌落平板上观察到的只是一个菌落 不能区分细胞死活不能区分细胞死活 结果结果比实际值偏小比实际值偏小比实际值偏大比实际值偏大 比较项目比较项目对照对照重复重复 目的目的 排除非测试因素对实排除非测试因素对实 验结果的影响验结果的影响 排除偶然因素对实验排除偶然因素对实验 结果的影响结果的影响 实例实例 空白对照：确定培养空白对照：确定培养 基制作是否合格基制作是否合格 同一稀释度涂布至少同一稀释度涂布至少 3个平板个平板 针对训练针对训练 组别组别平板数平板数统计的菌落数统计的菌落数取平均值取平均值 甲组甲组两个两个250和和220235 乙组乙组三个三个160、240和和110170 丙组丙组四个四个280、200、340和和160245 丁组丁组五个五个120、60、270、220和和130160 悟高考悟高考真题演练真题演练 酵母膏酵母膏 无机盐无机盐 淀粉淀粉 纤维素粉纤维素粉 琼脂琼脂 CR溶液溶液水水 培养基甲培养基甲 培养基乙培养基乙 课时作业课时作业 点击进入word