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1、 课下能力提升（四）【基础题组】1下列关于微生物的营养，说法正确的是()A同一种物质不可能既作碳源又作氮源B凡是碳源都能提供能量C除水以外的无机物仅提供无机盐D无机氮源也可能提供能量解析：选D对一些微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源。CO2是光能自养细菌的碳源，但不能提供能量。CO2和N2是无机物，也是微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨，同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源。2下列叙述错误的是()A右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞，为避免污染需放在酒精灯火焰附近B倒平板整个过程应在火焰旁进行C打开培养皿的皿盖，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿
2、，左手立即盖上培养皿的皿盖D为避免水滴滴入培养基，平板应倒过来放置解析：选CC项应是用左手的拇指和食指将培养皿打开稍大于瓶口的缝隙，而不是完全打开，以防杂菌污染。3下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是()A操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C将培养基冷却至50 左右时进行倒平板D将平板冷却凝固约510 min后将平板倒过来放置解析：选A制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，顺序不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏融化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。将培养基冷却至50 ，用手触摸锥形瓶感觉刚刚不烫手时倒
3、平板，平板冷却后还需倒置。4某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是()A培养基分装到培养皿后进行灭菌B转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D培养过程中每隔一周观察一次解析：选B在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板，A错误；转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，B正确；接种后放置在恒温培养箱中进行培养，C错误；培养过程中一般隔12 h或24 h观察一次，D错误。5在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中加入琼脂这一理想的凝固剂，下列关于琼脂的说法不正确的是()A不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用B在微生物生长
4、温度范围内保持固体状态C琼脂凝固点低，利于微生物的生长D琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强解析：选C琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用，在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强，A、D正确。琼脂在98 以上可溶解于水，在45 以下凝固，所以在微生物生长温度范围内保持固体状态，B正确。琼脂的凝固点相对于微生物生长的温度较高，凝固剂的凝固点不能太低，否则不利于微生物的生长。6在微生物的实验室培养中，下列各项操作不需要在无菌条件下进行的是()A配制培养基B倒平板C接种 D培养解析：选A配制培养基时不需要无菌操作，因为配制后的培养基需要进行高压蒸汽灭菌。7关于灭菌和消毒的理解不正确
5、是()A灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B消毒和灭菌的实质是相同的C接种环用灼烧法灭菌D常用的灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法解析：选B灭菌与消毒是两个概念。灭菌的原理是蛋白质凝固变性，含水分较多者，其凝固所需温度较低。灭菌时要根据不同的材料选用不同的灭菌方法，如接种环用灼烧法，培养基用高压蒸汽灭菌法，还有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法等。消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。8有关平板划线操作的叙述，不正确的是()A第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物B每次划线前，灼烧接种环是为了
6、杀死上次划线结束后，接种环上的菌种C在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液D划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者解析：选C在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于第一次划线的末端。【能力题组】9平板划线法和稀释涂布平板法是常用的两种接种方法。下列相关叙述中错误的是()A平板划线法要求连续多划几次，且除了第一次划线外，每一次划线的起点都是上一次划线的末端B除了第一次划线需要将接种环灼烧灭菌外，以后的划线可以不用灭菌即可划线C如果菌液本来浓度不高，则可以适当降低稀释倍数D充分稀释和连续划线的目的都是为了使形成的菌落是由单一的细菌繁殖而成解析：
7、选B平板划线法连续划线的目的是使细菌的浓度降低，所以除了第一次划线外，以后每次划线的起点都是上一次划线的末端，A正确；每一次划线前都要将接种环进行灼烧灭菌，B错误；稀释倍数要随菌液的浓度而定，如果菌液的浓度太大，则需要更高的稀释倍数，反之，则需要适当降低稀释的倍数，C正确；稀释涂布平板法中的充分稀释及平板划线法中的连续划线，都是为了保证菌落是由单一的细菌繁殖而成，D正确。10在培养基的配制过程中，具有如下步骤，其正确顺序为()溶化调pH加棉塞包扎分装 称量A BC D解析：选B上述步骤中，培养基的配制顺序为称量溶化调pH分装加棉塞包扎。11科学家通过实验发现了细菌的快速进化过程。人们发现，用肉
8、汤培养假单胞杆菌，如果肉汤保持不动，不久后，在肉汤的不同部位，如表面、底部或其他部位，细菌的形态发生了如图所示的变化，出现一定数量的变异株。下列有关说法错误的是()A这个实验说明了细菌在不同的小环境中发生了进化B细菌的生命周期短，繁殖速度快，容易受到外界环境影响而发生变化C用静止的肉汤培养FS细菌，其菌落形状将趋于一致D用不断摇动的肉汤培养SM细菌，不会出现FS细菌和WS细菌解析：选C分析题干信息可知，起初的SM细菌在静止的肉汤表面繁殖，一段时间后，有一部分在肉汤底部繁殖，这部分可能向厌氧方向进化，故细菌在不同的小环境下可发生进化，A项正确。细菌繁殖周期短，繁殖速度快，容易受外界环境因素(如温
9、度、氧气)的影响，B项正确。用静止的肉汤培养FS细菌，该细菌也有可能向不同方向进化，如进化成WS细菌，C项错误。不断摇动，肉汤中的溶氧会抑制厌氧型的FS细菌；不断摇动，容器与肉汤无固定接触面，WS细菌无法附着生长繁殖，D项正确。12现有菌液10 mL，按图示进行系列稀释，在最后一个试管中测得细菌数为20个，则未稀释前的试管中有细菌()A600个 B1 200个C2107个 D2106个解析：选C由图可知每次都是稀释10倍，共稀释6次，即稀释106倍，最后一个试管为20个，即原来菌液中有细菌2107个。13(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_、_和渗透压等条件。由于该细菌具有
10、体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行_(填“消毒”或“灭菌”)；操作者的双手需要进行清洗和_(填“消毒”或“灭菌”)；空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_。(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_。(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_
11、。(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。解析：(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。(2)对培养基和培养皿应进行灭菌，操作者的双手需要进行清洗和消毒。紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。(3)稀释涂布平板法要先将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，操作中应保证样品稀释的比例合适。(4)对获得的纯菌种可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。(5)检测培养基
12、是否被污染的方法是将未接种的培养基在适宜条件下进行培养，观察是否有菌落形成。(6)实验使用过的培养基及培养物，必须灭菌后才能丢弃。答案：(1)温度酸碱度易培养生活周期短(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3)比例合适(4)鉴定(或分类)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(6)灭菌14(2014全国卷节选)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_。(2)该小组采用平板
13、划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过_灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_。(3)示意图A和B中，_表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中_的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高_的利用率。解析：(1)为了检测培养基平板灭菌是否合格，可在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间。(2)接种环、接种针或其他金属用具直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧
14、，可以迅速彻底地灭菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)比较两图可以看出，A培养基中细菌的分布呈线形，是用平板划线法接种培养后得到的结果，B培养基中细菌均匀分布，是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)由于振荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量，还可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率，因此振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。答案：(1)检测培养基平板灭菌是否合格(2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 (3)B(4)溶解氧营养物质15富集培养是微生物学中最强有力的技术手段之一，主要是指利用不同
15、微生物间生命活动的特点不同，仅适应该条件的微生物生长旺盛，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离得到所需的特定微生物。富集条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物等综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。如图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。请分析回答下面的问题。(1)本实验所需要的培养基为选择培养基，碳源为_。(2)实验原理是_。(3)重复培养的目的是_。(4)的菌落中大部分是降解_的微生物。(5)为_组，为_组，设置的目的是_。(6)采用_法，接种到的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是_。解析：先用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的液体培养基，经过富集培养之后，将其涂布到固体平板培养基中分离培养，然后将单菌落接种到液体培养基中，才能得到纯度较高的微生物。答案：(1)对羟基苯甲酸(2)利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基，经富集培养，选出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物(3)增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例(4)对羟基苯甲酸(5)对照实验说明通过富集培养的确得到了欲分离的目标微生物(6)单菌落挑取接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红的接种环应在火焰旁冷却，同时，打开皿盖挑取菌落接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物