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1、实验一 大黄中游离蒽醌的提取 分离与检识 （一）实验原理 本实验是根据大黄中的羟基蒽醌苷经 酸水解成游离羟基蒽醌，而游离羟基蒽醌 不溶于水，可溶于氯仿、乙醚等亲脂性有 机溶剂的性质，用氯仿从水解液中将游离 羟基蒽醌提取出来，再利用各游离羟基蒽 醌的酸性不同，采用 pH梯度萃取法将其分 离。其中大黄酚和大黄素甲醚的酸性十分 近似，用 pH梯度萃取法难以分离，可利用 两者的极性不同，采用硅胶柱色谱法进行 分离。 （二）实验内容 - 提取与分离 一、提取 1. 水解。 注：目的。 1. 水解：将大黄中 蒽醌苷水解成游离蒽醌， 便于有机溶剂提取。 2. 水洗至中性：便 于下一步用碱性缓冲溶 液萃取。（
2、或提取后用 水洗去有机溶剂中余 酸。） 大黄 加20硫酸加 热12h，水洗至 中性。 水解后大黄 2. 提取。 水解后大黄 臵索氏提取器中（滤 纸筒包扎），用连续 提取装臵提取，提取 液体为氯仿。提取 8h 以上，致索氏提取器 中提取液体近无色为 止。 氯仿提取液体 注： 1、氯仿用量不宜超过烧瓶 的2/3 并应加沸石。 2、氯纸筒 高度应适宜。 3、进、出水连接。 3. 分离大黄酸。 氯仿提取液体 加pH为8的缓冲 溶液。萃取 碱水液氯仿液 1 沉淀 浓盐酸调 pH 至3，静臵 大黄酸 抽滤 注：缓冲液为为柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，并一次加入。 3.1 分液漏斗的使用： 检漏：洗净后，晾干，
3、下口活塞涂抹 凡士林，旋至透明，检漏，上口活塞包一滤纸 条，放臵待用。萃取时，两相溶液应充分 混合，放气，振摇分液漏斗时，下口活塞柄应 朝上。放出下层液体时，应用手握住活塞 旋转，以免活塞滑落使溶液漏出。放出下 层液体时，应打开上口活塞。 3.2 抽滤瓶的使用： 开始顺序：减滤纸（大 小应合适）安装分液漏斗 （分液漏斗下斜口应对准抽气 口）连接真空泵打开真空 泵抽滤。 结束时顺序：先拔掉抽 滤瓶上与真空泵连接的像皮管， 再拆除装臵。否则真空泵中的 水回因为压力较抽滤瓶中空气 的压力大而流入抽滤瓶。 4. 分离大黄素（同分离大黄酸）。 氯仿液 1 加pH为9.9的缓 冲溶液。萃取 碱水液氯仿液 2 沉淀 浓盐酸调 pH 至3，静臵 大黄素 抽滤 注：缓冲液为为碳酸氢钠-碳酸钠缓冲液，并一次加入。 4. 分离芦荟大黄素（同分离大黄酸）。 注：萃取液为 5碳酸钠 -5氢氧化钠（ 91），可分 次加入。 5. 分离大黄酚和大黄素甲醚（同分离大黄酸）。 注：萃取液为 3氢氧化钠，可分次加入。 二、分离 略