脑脊液检查结果分析.ppt

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1、脑脊液检查结果分析,CSF 检测 为什么?,提供 诊断、鉴别诊断 的重要信息 监控 疾病进程 和 治疗效果 是否存在脑内炎症/感染及其严重性 是否存在血脑屏障障碍及其严重性 鉴别和描述脑内Ig合成的程度 感染情况下的病原菌特性 是否存在脑内肿瘤转移,基础知识： 存在于：脑室、蛛网膜下腔 流动于：脑和脊髓表面，通过脑穹隆面的蛛 网粒膜绒毛吸收入上矢状窦而返 回静脉 产生于：70%脑室系统脉络 30%室管膜和蛛网膜下腔,作用： 保护脑和脊髓免受外界震荡损伤 调节颅内压力变化 供给脑、脊髓的营养物质, 运走代谢产物 调节神经系统碱储量、维持正常pH值 参与神经内分泌调节 积液性状： 量：成人1201

2、80ml 新生儿1060ml 色：无色透明,血脑屏障：,（blood-brain barrier）,物质通过血脑屏障的难易程度： 最易：氯化物、钠、镁、乙醇 其次：清蛋白、葡萄糖、钙、乳酸、 氨基酸、尿素、肌酐 极难：纤维蛋白原、补体、抗体、 胆红素、胆固醇,问题1：要不要做脑脊液检查？ 适应症 有脑膜刺激症状 疑有颅内出血 中枢神经系统恶性肿瘤 脱髓鞘疾病 有剧烈头痛,昏迷,抽搐或瘫痪疑为中枢神经疾病 中枢神经疾病需作椎内给药,禁忌证 疑有颅内压升高，有明显视乳头水肿 休克、衰竭或濒危状态 局部皮肤有炎症 颅后窝占位、脑干症状,标本采集 1）穿刺部位： 腰椎穿刺 小脑延髓池穿刺 侧脑室穿刺

3、2）压力测定： 成人：0.781.76kPa（80180mmH2O） 儿童：0.41.0kPa（40100mmH2O）,过度紧张 充血性心衰 上腔静脉综合征 静脉窦血栓形成 脑膜炎 脑水肿 脑脊液吸收受抑 颅内占位病变,压力过高,压力,压力过低,蛛网膜下腔阻塞 脱水 循环衰竭 脊液漏,3）收集标本：分别收集于3个无菌试管 第一管：1-2ml细菌学检查 第二管：1-2ml生化和免疫学检查 第三管：1-2ml细胞计数、分类 标本采集后必须立即送检，一般不能超过1h。,CSF外观 CSF各种颜色的临床意义,1.血色: 提示CSF混有红C,见颅内或椎管内病理性出血以及腰穿时外伤导致的出血. 据红C的多

4、少和时间的不同,而呈现红、红褐、淡红、柠檬黄或淡黄.是由于CSF中氧合HB(红色)和胆红质(黄色)比例的不同所致.,CSF穿刺损伤与病理性出血的鉴别, 鉴别要点 损伤性出血 病理性出血 三管试验 逐渐变淡 均匀一致 放置试验 可凝成血块 不凝 离心试验 上层液无色 上层液红色或黄色 潜血试验 阴性 阳性 细胞形态 正常、完整 皱缩有含红C的吞噬C CSF压力 正常 常升高 ,三管试验 第一管红色、第二管、第三管变淡； 离心后上清无色透明； 上清液隐血试验阴性： 穿刺所致 三管均红色；离心后变淡红、黄色； 上清液隐血试验阳性： 蛛网下腔出血、脑室出血,目测CSF红C数目的判断标准, 外观变化 红

5、C数量 无外观改变 10000/mm3 _,2.黄色,CSF呈现黄色或淡黄色-棕黄色,也称 为黄变症.有很重要的临床意义. (1)出血性黄变症: 脑或脊髓出血(特别是蛛网膜下腔出血)以后,进入CSF的红C遭到破坏.溶解.使HB分解,胆红质增加,深的黄变症常为蛛网膜下腔出血的结果.,蛛网膜下腔出血 红细胞溶解氧合血红蛋白 血 清 中胆红素 256mol/L 脑脊液中胆红素 8.6mol/L,通常蛛网膜下腔出血4-8小时后即呈色,48小时最深,至3周左右消失.出血性黄变的持续时间取决于以下几种因素: 1.蛛网膜下腔出血的严重程度; 2.红C溶解的速度; 3.溶血的分解产物的多少; 4.组织C反应的

6、活性 ; 5.对CSF循环的影响 ; 6.个体的特异性.,(2) 梗阻性黄变症 : 见于椎管梗阻(如髓外肿瘤),同时CSF蛋白显著升高,当蛋白升高超过1.5g/L时,CSF可呈黄变症.黄变程度与CSF蛋白含量成正比,且梗阻部位越低,黄变越明显.,CSF黄变症的鉴别,_ 黄变程度 腰穿动力学 CSF红C 蛋白 _ 梗阻性黄变症 最显著 椎管有梗阻(完 无 最显著 全.或部分) 出血性黄变症 中度 无梗阻 大量 轻.中度 _,(3).其它颜色 棕色或黑色: 见于CNS(尤其是脑膜)黑色素肉瘤或黑色素瘤. 绿色混浊: 见于绿脓杆菌性脑膜炎或急性肺炎双球菌性脑膜炎. 米汤样混浊: 见于脑膜炎双球菌性脑

7、膜炎.,乳白色：白细胞增多 （化脓性脑膜炎）,透明度： 正常清晰透明 白细胞 200106/L 红细胞 400106/L 细菌、真菌等较多 病 毒 性 脑 炎 中枢神经梅毒 结核性脑膜炎细胞数中度毛玻璃样混浊 化脑性脑膜炎细胞数大量乳白色混浊 腰椎穿刺损伤出血时红色混浊,混浊,细胞数轻度微混,CSF检测的几个问题,.CSF标本应立即化验,不要超过1小时,放置时间过久,C可破坏或沉淀后与f.pr凝集成块,导致C分布不均而使计数不准确. .CSF中的C离体后迅速变形,而且逐渐消失,影响分类计数. .细菌溶解,影响细菌检出率(尤其是脑膜炎双球菌最明显.),CSF细胞学的检测与诊断,(一)正常CSF

8、C成分: 正常成人CSF C (0-5个/mm3). 儿童CSF C(0-10个/mm3). 其C学分类为小L.C,M.C(二者之比为7:3).比例相当恒定.仅占1-3%激活性单核样C. 正常人CSF中不含红 C.,(二).CSF的正常C及其演变C,正常CSF中只有小L.C和M.C. 但在病理情况下,小L.C可演化成转化型L.C.L样C和浆C; M.C可演变成激活M.C和巨噬C. 这些演变后的C均视为异常C.,(三)异常CSF C成分,1. 转化型L.C, L样C 2. 浆 C 3. 各种激活性单核吞噬 C 4. 多形核白C 5. 红C 肿瘤、各种细菌,（四） CSF C学的分类,.免疫活性:

9、均由L.C衍生而来,包括 A.小L.C:为正常人CSF中的主要细胞.无特殊的病理意义.占C总数75% B.转化型L.C和L样C:提示局部的体液或C介导的免疫反应. 临床意义:病脑、TBM、脑脓肿、MS等.,C.浆C- 亦名Ab C.它来自外周血L.C, 受Ag刺激后转化而来. 临床意义:浆C与.转化型L.C出现提示局部Ag- Ab反应.一个浆C也有意义. MS.病脑.GBS.脑囊虫病. * 在MS患者CSF C计数正常情况下出现浆C则有助于MS的诊断.,2.单核吞噬 C,A.单核样 C-为正常人CSF中的细胞.占 30%,当比例倒错,伴有病理性C出现,则有意义. B.激活性单核样C-非特异性脑

10、膜刺激. C.巨噬C-其特点为胞浆内含有各种噬物.如:红C吞噬C.脂肪吞噬C.含铁血黄素吞噬C.白C吞噬C.多核巨C.,3.多形核白 C:,A.嗜中性粒C-为病理性,与CSF渗透力关,趋化因子起重要作用. CNS各种感染. B.嗜酸性粒C-为病理性,多见于 CNS寄生虫感染. C.嗜碱性粒C-参与I型变态反应或C导的免疫反应.如EP大发作.,4. CSF腔壁 C：,CSF腔壁 C是由脑脊髓腔壁的C 脱落所致,正常和异常CSF均偶见此类C. A.脉络丛C B.室管膜C C.蛛网膜C 临床意义:见于气脑造影,小儿脑积水.,5.CSF肿瘤C,在CSF脱落C中,肿瘤C最具有诊断价值. CSF中肿瘤C多

11、为转移肿瘤C. CSF中肿瘤C一般分为四种类型: 原发性肿瘤C. 继发性肿瘤C. 白血病C- L瘤C.,5.CSF肿瘤C,肿瘤C的异常特征: (1).C本身的改变: A.核的改变: 核大,核浆比例失常核的染色质增多. 核的形态和结构异常. 核分裂的活跃.,B.胞浆的改变:可有胞浆色素颗粒 C.整个C的改变:C大.小不一,C形态不一等, (2).C与C间关系的改变: A.排列不整. B.C和C核大小不均一是肿瘤重要特征 C.C常成丛集状排列.是肿瘤的常见特征,6.污染C,1.软骨C 2.骨髓C 上述两类C是由于穿刺不当（损伤） 引起，一般无临床意义.,凝固性 正常静置24h不凝固、无薄膜形成 急

12、性化脓性脑膜炎静置1-2h凝块沉淀物 结核性脑膜炎静置12-24h表面有纤细薄膜 蛛网膜下腔阻塞时黄色胶胨状,化学检测 1 蛋白质测定 蛋白定性试验（Pandy试验）0.25g/L可呈弱阳性 原理：蛋白 + 碳酸蛋白盐混浊或沉淀 定量试验 原理：蛋白 + 生物碱 混浊 浊度与蛋白量成正比 参考值：200-00mg/L,CSF蛋白含量明显低于血浆蛋白含量, CSF蛋白含量仅相当于血浆蛋白的0.5%.不同部位CSF蛋白含量也略有不同,不同年龄CSF蛋白含量也有不同.,不同部位CSF蛋白含量,_ 部位 蛋白含量(g/L) _ 脑室 0. 05-0.15 脑池 0. 1-.25 腰部脊髓蛛网膜下腔 0

13、.15-0.45 _,不同年龄CSF蛋白含量,_ 年龄 蛋白含量(g/L) _ 儿 童 0.1-0.2 成 人 0.2-0.4 老年人 0.3-0.45 _,正常CSF蛋白成分绝大部分为白蛋白,而球蛋白仅微量(不超过0.05 g/L),没有优球蛋白和f.pr原. 混入血液时CSF蛋白含量的计算,有损伤或其它情况使血液CSF时. CSF蛋白含量随之升高,掩盖了真正的CSF蛋白含量,应减去血液混入的蛋白含量.,血液混入的蛋白含量的估计,_ 红C数量 增加蛋白量 750-1000/ul 0.01 g/L 5000/ul 0.04 g/L 10000/ul 0.15 g/L 100000/ul 1.4

14、0 g/L _,蛋白质测定的临床意义： 神经系统感染性疾病 颅内和蛛网膜下腔出血 蛛网膜下腔梗阻 颅内占位性病变 损伤性腰椎穿刺 脊液更新加快 损伤或腰穿引起的脊液漏 颅内压增加 甲亢,增加见于,减少见于,脑脊液几类蛋白质,白蛋白 指示性蛋白 2-Mg CNS感染（结脑、细菌） 肿瘤(复发)、 变性病（HIV-痴呆） 铁蛋白（Ft） CNS恶性肿瘤 CSF-tau蛋白 AD (早期) ApoE AD（早期） S-100蛋白 急性脑梗死、MS、脑外伤 MBP MS、脑外伤、脑肿瘤、 急性脑血管病,髓鞘碱性蛋白 （MBP）髓鞘脱失,中枢髓鞘的主要蛋白质 中枢型 CNS 少突胶质细胞 周围型 雪旺细

15、胞 临床意义 MS 急性脑血管病 脑肿瘤 病脑 癫痫 其他,脑脊液蛋白电泳 前白蛋白增高退行性变：舞蹈病，帕金森病 前白蛋白减少 脑膜炎，脑肿瘤，脑萎缩 白 蛋 白 增 高 脑血管病：脑溢血，脑梗塞 a1球蛋白增高 中枢神经系统感染 a2球蛋白增高 脑肿瘤，转移癌，胶质瘤 B 球蛋白增高 退行性变，动脉硬化 r 球蛋白 增高占位性病变,免疫球蛋白测定 IgG增加多发性硬化，亚急性硬化性全脑炎 结核性脑膜炎，梅毒性脑膜炎 IgA增加各种脑膜炎、脑血管疾病 IgM出现近期中枢神经系统有感染， 脑肿瘤，多发性硬化,P2蛋白及抗体,周围神经的髓鞘中含有P0、P1、P2 、X、Y等蛋白成分。 P1为中枢

16、和周围神经系统所共有。 P2分子量较小为周围神经所特有。 在AIDP和CIDP患者的脑脊液中检测到P2蛋白抗体，并发现其水平与其病情相关，可用于临床诊断、病情和疗效观察。,OB,克隆(clone)指一个无性细胞株。 寡克隆(oligoclone):两个或多个细胞克隆活化造成不连续IgG带群。 寡克隆区带(al bands, OB)是一电泳用语，是检测鞘内Ig合成的又一重要方法。 测定方法及要点：IEF银染；CSF与血同时电泳，蛋白量标化。 意义：OB是MS诊断的重要参考指标，但是OB的存在并非MS病人所特有，在其它神经系统疾病中也可出现。,抗水通道蛋白4抗体,AQP4是脑中重要的水通道蛋白，参

17、与脑组织与血液、脑组织与CSF间的水转运和渗透压调节。在CNS，AQP4主要存在于构成血一脑脊液屏障(BCB)的星形胶质细胞终足上，是星形胶质细胞质膜内在蛋白质。AQP4大量存在于视神经和脊髓，同时也遍及脑的各个部分。,血管周围的胶质细胞突起是水分子流动的主要部位。AQP4通道可使水分子跨细胞膜移动，生理条件下AQP4参与CSF的形成和吸收，参与BCB对水分子的转运调节，并调节细胞外间隙钾离子浓度；病理条件下，AQP4的表达发生变化，参与各种原因引起的脑水肿。,NMO没有鞘内合成AQP4抗体。这与MS明显不同，MS有免疫球蛋白鞘内合成，例如可出现寡克隆带阳性和IgG指数增高。抗AQP4抗体产生

18、在外周淋巴组织。由于BCB的作用，抗体进入脑内血管外间隙是有限的。,在患NMO时BCB经常被破坏，抗AQP4抗体可通过BCB进入CNS，结合在星形胶质细胞足突上的AQP4胞外域。抗原抗体与补体、免疫细胞结合导致AQP4丧失。,研究显示NMO和NMO高危综合征本质上是抗AQP4抗体相关疾病。 AQP4抗体滴度在分析疗效方面也很有益。应用大剂量甲基氢化泼尼松治疗能使抗体滴度降低，患者出现复发时抗体滴度可再度升高。,免疫抑制剂使抗体滴度保持在低水平有助于减轻疾病损害。 也有统计数字显示抗AQP4抗体阳性提示更高的复发率，这与患者的视神经、脊髓症状无关。,14-3-3蛋白,14- 3- 3是一类序列高

19、度保守的蛋白家族, 为典型的浆酸性蛋白。14- 3 - 3蛋白主要分布在神经细胞内, 约占可溶性蛋白的1%14- 3- 3蛋白是一组多功能蛋白, 参与了多种生物学过程的调控, 包括神经元的改变, 控制细胞的生长和循环, 参与细胞信号传递或作为第2信使其发挥生物功能, 并参与磷酸化, 细胞转运和有丝分裂。,有文献报道, 在sCJD中, 由于脑细胞急性损伤而释放出大量14 - 3 - 3蛋白, 因而CSF中14 - 3 - 3 蛋白对sC JD的检测具有重要意义。在急性神经元缺失或损害如脑卒中、病毒性脑炎、缺氧性脑损伤、硬膜下血肿、急性脑梗死及多发性梗死引起痴呆、颅内转移瘤, 常出现阳性结果, 但

20、根据临床表现可做鉴别诊断。,总tau蛋白( T- tau),Tau蛋白是一种微管相关蛋白, 具有促进微管蛋白聚集成微管和维持微管结构的功能, 并与细胞有丝分裂、细胞内物质转运等多种功能有关。正常情况下tau蛋白广泛存在于神经元内。Tau蛋白可以分泌到CSF中, 因此, CSF中tau蛋白浓度的变化可能会反映神经元的退化和损害。,两类疾病能使tau蛋白含量增加 神经系统的急性炎症, 神经元或轴索的变性疾病。 sCJD 引起神经元损害, 使tau蛋白释放入CSF中的量增多; 也可能与CJD引起脑组织的空泡状态有关。单纯依据临床症状来鉴别AD与CJD很困难, 但CJD病程的显著缩短及严重的神经元变性

21、都可以通过CSF中tau蛋白显著增加反映出来。,S- 100蛋白,S- 100蛋白是一种酸性钙结合蛋白, 可溶解在pH 7.0的饱和硫酸铵溶液中, 故命名为S-100 蛋白。 76例确诊或疑似CJD患者脑脊液中S- 100蛋白的含量, 中位数为25 ng /mL, 明显高于对照组(中位数为4 ng /mL), 当临界值为8 ng /mL时, 其敏感性为84.2%, 特异性为90. 6% ,抗Yo:抗Purkinje 细胞抗体 (APCA) 抗Hu：抗神经元核抗体 (ANNA) 正常情况下血和脑脊液中一般无抗神经元抗体，在无神经系统表现的肿瘤患者抗体滴度较低，而在伴有副肿瘤综合征的肿瘤患者抗体滴

22、度较高。 80%以上的抗Hu抗体阳性患者有小细胞肺癌。 90%的抗Yo抗体阳性患者有妇科肿瘤，通常为卵巢癌或乳腺癌。 P/Q-型VGCC抗体阳性率在重症肌无力病人5，而Lambert-Eaton肌无力样综合征则高达95%，这有助于二者的鉴别。,自身抗体,自身抗体与疾病,检查方法：免疫组化、免疫印迹、ELISA,酶学检查 1、乳酸脱氢酶(LDH) 340/L (具有鉴别意义) 细菌性脑膜炎： LDH 病毒性脑膜炎：多正常或轻度升高 颅 脑 外 伤：LDH正常 脑 血 管 疾 病：LDH 脑肿瘤、脱髓鞘病：LDH进展 LDH缓解,2、肌酸激酶(creatine kinase,CK) CK-BB 0

23、.940.25/L,化脓性脑膜炎 结核性脑膜炎 脑血管疾病 脑肿瘤,增高见于,病毒性脑膜炎正常或轻度增高,3、天门冬氨酸氨基转移酶(AST) 520/L,脑血管病变 中枢神经系统感染 脑肿瘤 脱髓鞘病 颅脑外伤,活性升高见于,葡萄糖测定： 血糖浓度 血脑屏障通透性 糖酵解速度,影响脊液中糖含量因素,参考值,成人2.54.4mmol/L 儿童.84.5mmol/L 脑脊液/血浆比0.30.9,葡萄糖分解酶酵解,感染性疾病（化脓性、结核性、真菌性脑膜炎） 颅内肿瘤 低血糖,临床意义：,中枢神经系统代谢紊乱 血 糖 脊 液,糖,破坏的细胞,细 菌,糖降低,（三）氯化物测定,结核性脑膜炎 102 化脓性脑膜炎 102116 血氯,意 义：,减少见于,参考值：120130mmol/L,细菌学检查 直 接 涂 片 法 离心沉淀制涂片 疑为化脓性脑膜炎革兰氏染色后镜检 疑为结核性脑膜炎静置24h取形成的薄膜， 抗酸染色镜检 疑为隐球菌脑膜炎墨汁染色，荚膜未被染色,TORCH,TORCH是指一组病原体： T即弓形虫， R即风疹病毒, C即巨细胞病毒， H即单纯疱疹病毒。,