免疫层析试验.doc

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1、免疫层析试验 以双抗体夹心法测尿hCG 为例来介绍免疫层析试验的方法。目的 (1) 掌握免疫层析试验的原理。 (2) 熟悉双抗体夹心法测尿hCG 的方法、结果判定及应用。原理 抗hCG 免疫金复合物干片粘贴在试剂条近下端G区(图1- 17),抗hCG 单克隆抗体和小鼠IgG 抗体分别固化于NC 膜的测试区(T区) 和质控参照区(C 区)。当试纸条下端(A区) 浸入液体标本中,吸水材料即吸取液体,通过层析作用,液体向B 端移动,流经干片时,使抗hCG免疫金复合物复溶,并带动其向膜条渗移。若标本中有hCG,可与抗hCG 免疫金复合物结合。此抗原体复合物流至T 区时即被固相抗hCG 单克隆抗体所获,

2、形成金标抗体一抗原一抗体复合物,在T 区显现出红色反应线条。过剩的免疫金复合物继续前行,至C 区被固相抗小鼠IgG 捕获,呈现出红色质控线条。材料(1) “一步金”法早早孕妊娠诊断试纸条(有商品供应)。(2) 孕妇尿液,待测尿液。(3) 尿液收集杯等。方法(1) 将试剂条及待测标本置室温一定时间以充分复温。(2) 从原包装铝箔袋中取出试剂条,将试剂条按箭头方向插人尿液标本中。注意: 尿液液面不能超过试剂条的标记线。(3) 约5 S 后取出放于干净平整的台面上观察,3 min 时读取结果,10 min 后判定无效。在戏迟出死条心线待技床样无h(G(阴临)结果判断1.阴性 试剂条上仅质控区出现条紫红色线,在测试区内无紫红色线出现(图1- 18a)。2.阳性 试剂条上出现两条紫红色线,一条位于测试区内,另一条位于质控区内(图1-18b)。3.弱阳性 试剂条测试区的线条颜色明显浅于质控区内的紫红色线,表明可疑,2 d 后应重新测试,以免漏诊(图1- 18c)。4. 无效 试剂条上无任何线条出现,或仅出现测试区线条而质控区未出现,表明操作过程不正确或试剂条已变质失效。

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