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1、目录一查阅资料二准备实验方案三准备实验用品四测柚子茶中PH值五测柚子茶中茶多酚含量六测柚子茶中草酸，苹果酸含量七实验结论八实训总结一查阅资料1.PH氢离子浓度指数是指溶液中氢离子的总数和总物质的量的比。它的数值俗称“pH值”。表示溶液酸性或碱性程度的数值，即所含氢离子浓度常用对数的负值的pH是溶液中氢离子活度的一种标度，也就是通常意义上溶液酸碱程度的衡量标准。pH值越趋向于0表示溶液酸性越强，反之，越趋向于14表示溶液碱性越强，在常温下，pH=7的溶液为中性溶液。2.茶多酚茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。主题为黄烷醇（儿茶素）类，儿茶素占60
2、80%。 类物质茶多酚又称茶鞣或茶单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，是茶叶中儿茶素类、丙酮类、酚酸类和花色素类化合物的总称。成分：是一种稠环芳香烃，可分为黄烷醇类、羟基-4-黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。其中以儿茶素最为重要，约占多酚类总量 的60%-80%；儿茶素类主要由EGC、DLC、EC、EGCG、GCG、ECG等几 种单体组成。茶多酚在茶叶 中的含量一般在2035%。 在茶多酚中各组成份中以黄烷醇类为主，黄烷醇类又以儿茶素类物质为主。儿茶素类物质的含量约占茶多酚总量的70%左右。3草酸草酸，即乙二酸，最简单的有机二元酸之一。结构简式HOOCCOOH。它一般是无色透
3、明结晶，对人体有害，会使人体内的酸碱度失去平衡，影响儿童的发育，草酸在工业中有重要作用，草酸可以除锈。草酸遍布于自然界，常以草酸盐形式存在于植物如伏牛花、羊蹄草、酢浆草和酸模草的细胞膜，几乎所有的植物都含有草酸盐。4.苹果酸苹果酸即2-羟基丁二酸，是一个二羧酸，化学式为O2CCH2CHOHCO2H。分子中含有一个不对称碳原子，因此有两种旋光异构体和一种外消旋体。与发烟硫酸作用，苹果酸发生自缩合反应得到吡喃酮的衍生物香豆酸。它是三羧酸循环的中间物之一，由反丁烯二酸水合生成，继续氧化得到草酰乙酸。存在于苹果、葡萄、山楂等果实中，苹果酸首先从苹果汁中分离出来，是苹果汁酸味的来源，并因此得名。它也用作
4、食品添加剂。自然界存在的苹果酸是L-苹果酸，存在于不成熟的的山楂、苹果和葡萄果实的浆汁中。也可由延胡索酸经生物发酵制得。未成熟苹果中含0.5左右的有机酸，其中L一苹果酸占97.2以上，苹果酸因此而得名。二准备实验方案1.pH测定有很多方法来测定溶液的pH值：1.使用pH指示剂。在待测溶液中加入pH指示剂，不同的指示剂根据不同的pH值会变化颜色，根据指示剂的研究就可以确定pH的范围。滴定时，可以作精确的pH标准。2.使用pH试纸。pH试纸有广泛试纸和精密试纸，用玻璃棒蘸一点待测溶液到试纸上，然后根据试纸的颜色变化对照标准比色卡可以得到溶液的pH。pH试纸不能够显示出油份的pH，原因是pH试纸以氢
5、铁制成并以氢铁来测定待测溶液的pH值，而油中不含氢铁。3.使用pH计。pH计是一种测定溶液pH值的仪器，它通过pH选择电极（如玻璃电极）来测定出溶液的pH。pH计可以精确到小数点后两位。我们选用的是酸度计测定PH值。2.茶多酚测定1、酒石酸铁比色法准确称取茶叶磨碎试样3g，加入450ml沸蒸馏水，在沸水浴中浸提45min，每隔10min摇瓶1次，过滤，用少量沸蒸馏水洗涤残渣，滤液合并于500ml容量瓶中，冷却后用蒸馏水定容到刻度，摇匀，准确吸取1ml后加入25ml容量瓶中，加水4ml，酒石酸铁溶液5ml，用pH7.5的缓冲液定容至刻度，混匀。用10cm比色皿，以试剂空白为参比，于波长540nm
6、处测定吸光度值。酒石酸铁比色法，是利用茶多酚在一定的pH条件下，酒石酸铁与茶多酚类物质形成蓝紫色或红紫色的络合物，在540nm处有最大吸收值，在一定的浓度范围内，茶多酚含量与吸光值呈线性关系，当吸光度是0.5时，茶多酚浓度为1.957mg/ml，可用分光光度法比色测得茶多酚浓度结果。2、硫酸铈滴定法准确称取茶叶磨碎试样5g，加入450ml沸蒸馏水，在沸水浴中浸提45 min，每隔10min摇瓶1次，过滤，用少量沸蒸馏水洗涤残渣，滤液合并于500ml容量瓶中，冷却后用蒸馏水定容到刻度，摇匀。准确吸取10ml茶汤，加入500ml烧杯中，加300ml水稀释，然后加入5N H2SO4 10ml和0.1
7、N硫酸铈25ml，混合均匀，反应1h后，另入邻菲罗啉-硫酸亚铁混合指示剂3滴，用0.1N硫酸亚铁溶液滴定至黄色退去、桔黄色出现为滴定终点。硫酸铈滴定法是利用过量的硫酸铈氧化茶多酚，然后用硫酸亚铁进行反滴定，测定过量的硫酸铈。消耗掉的硫酸铈与茶多酚含量成反比，根据生化研究，消耗0.1N的硫酸铈相当于氧化1.93mg的茶多酚。3、高锰酸钾滴定法准确称取茶叶磨碎试样3g，加入450ml沸蒸馏水，在沸水浴中浸提45min，每隔10min摇瓶1次，过滤，用少量沸蒸馏水洗涤残渣，滤液合并于500ml容量瓶中，冷却后用蒸馏水定容到刻度，摇匀。准确吸取10ml茶汤于大白瓷皿中，加入靛红溶液25ml、水750m
8、l，用0.02N高锰酸钾溶液滴定，终点掌握由蓝色变为绿色，最后转变为淡黄色为止，消耗的高锰酸钾溶液量为A ml。再另取100ml茶汤于500ml三角瓶中，加精胶液50ml、酸性饱和氯化钠溶液100ml和高岭土10.00g，塞紧瓶口，充分摇振2-3分钟后过滤，吸取25ml滤液于白大瓷皿中，加入靛红溶液25ml、水750ml，用0.02N高锰酸钾溶液滴定，终点掌握由蓝色变为绿色，最后转变为淡黄色为止，消耗的高锰酸钾溶液量为B ml。因1ml 1N高锰酸钾溶液能氧化58.2g茶多酚，再由A减去B值计算，因氧化茶酚而消耗的高锰酸钾量。 4、福林酚氧化法称量茶叶磨碎试样0.2g(精确到0.1mg)于10
9、ml离心管中，加入在70中预热过的70%的甲醇溶液5ml，用玻璃棒充分搅拌均匀湿润，立刻移入70水浴中，浸提10min（隔5min搅拌一次），浸提后冷却至室温，转入离心机在3500r/min转速下离心10min，将上清液转移至10ml的容量瓶，残渣再用5ml的70%甲醇溶液提取一次，重复以上操作。合并提取液定容至10ml，摇匀，过0.45l膜,待用(提取液在4下可至多保存24h)。同时制备浓度分别为10，20，30，40，50g/ml没食子酸工作液。然后分别用移液管移取水（空白对照用）、没食子酸工作液及测试液各1ml分别加入刻度试管中，在各个试管中加入5.0ml福林酚（Folin-Ciocal
10、teu）试剂，反应3-8min内，加入4.0ml 7.5%Na2CO3溶液，加水定容至刻度、摇匀。室温下放置60min。用10cm比色皿、在波长765nm处测定分光光度值。对应标准曲线上没食子酸浓度即为茶多酚浓度，依此计算出茶多酚含量。我们选用的是可见分光光度计。3.草酸，苹果酸的测定抗氧化剂，保护维生素C以酚酞为指示剂，用氢氧化钠标准溶液进行滴定，高效液相色谱法。我们选用液相色谱法。三准备实验用品我们检测的是柚子茶。1.pH测定烧杯 酸度计 缓冲液 磁力棒 PH试纸2.茶多酚测定仪器：分析天平、721可见分光光度计、 锥形瓶、烧杯试剂：酒石酸亚铁溶液、PH为7.5的磷酸缓冲液（磷酸氢二钠溶液
11、和磷酸氢二钾溶液）蒸馏水。3.草酸，苹果酸的测定注射器 针头滤器 液相小瓶 安捷伦1200液相色谱仪 VWD检测器0.5%磷酸二氢胺溶液 1ml柚子茶四测柚子茶中PH值.用值试纸确定饮料的值，选择与饮料PH值接近 的缓冲溶液.将清洗干净的玻璃-甘汞电极对进入选定的PH标准缓冲溶液中按下测定按钮，转动定位调节旋钮，使仪器显示的PH值稳定在该标准溶液的PH值3.松开按钮取出电极，用蒸馏水冲洗，用滤纸吸取电极上的水4.将电极进入待测水样中，按下测量按钮，读取PH值记录PH值 =3.85缓冲液值4.0通过PH值的测定柚子茶呈酸性五测柚子茶中茶多酚含量配制pH 值为7. 5 的磷酸盐缓冲液和酒石酸铁溶液
12、 将机器预热，然后取出四根比色管，第一根管先加入5ml柚子茶、4ml蒸馏水、5ml酒石酸铁溶液，并用PH值为7.5的磷酸盐缓冲液加至刻度线；第二根作为空白对照不加入饮料，第三根管与第一根重复不加酒石酸铁溶液，第四根管为空白对照不加入饮料和酒石酸铁溶液。 将机器的波长调为540，分别倒入比色皿中，分别测出A1和A2两个吸光度值，并记录 波长A1A2540nm0.8700.057六测柚子茶中草酸，苹果酸含量1.用针头过滤注射器吸取加多宝1ml，逐滴滴慢速加于液相小瓶中。2.将加好溶液的液相小瓶放入液相色谱仪中，标好名字，序号与样品名称。3.按下开始键，等待十分钟即可得出数据。峰面积/a含量/mg/ml草酸：210.60.2苹果酸：610.42.5七实验结论柚子茶中的PH值，茶多酚，草酸，苹果酸含量符合国家标准。八实训总结通过一周的实训学习，在实际操作中我逐步适应酸度计，721型分光光度计，安捷伦1200液相色谱仪的操作，基本掌握了测量饮料中PH值，茶多酚，草酸，苹果酸含量的方法。提高了标准溶液的配置，浓度标定及基本计算能力。培养了收集，整理分析相关信息和查阅资料的能力。进一步认识和理解了专业课所学的理论知识。为以后工作打下了坚实的基础。