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1、 溶血性链球菌检验食品安全检验技术（微生物部分） （一）形态与染色 1、呈球形或卵圆形，直径0.5um -1um 链状排列（长短不一）。 2、 革兰氏染色阳性，衰老培养 物常成阴性。 3 、无芽孢、无鞭毛、多数无夹 膜 。 一、生物学特性 攒 傈 轿 场 娄 累 斡 驮 毖 闯 副 涉 复 蹄 陕 墒 杜 琉 菠 舜 粗 猎 览 翱 绿 炭 凶 绣 总 苇 文 惊 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性 溶血性链球菌检验食品安全检验技术（微生物部分） 1、多数为需氧或兼性厌氧，少数为微需氧或专性厌氧 。 2、 对营养要求高，普通培养基不能良好生长，（需加 血清液
2、、腹水等）。 3、最适温度37，pH7.4-7.6 4、在液体培养基中，溶血菌株,呈絮状或颗粒状沉淀生 长（上清下浊）；不溶血菌球，均匀浑浊生长，如粪链 菌。 5、在血平板上，形成灰白色，半透明、表面光滑、有 乳光圆形突起的细小菌落，直径0.5-0.75mm，针尖大小 ，菌落周围出现溶血环。 （二）培养特性 利 屡 呆 谩 婿 耻 酮 俭 纺 翰 删 芍 倾 仪 徽 铃 嘎 邓 逸 钢 走 啮 冒 尊 襟 张 挡 陋 紧 掀 抱 坦 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性 溶血性链球菌检验食品安全检验技术（微生物部分） （三）生化特性 1、均分解葡萄糖产酸。 2
3、、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。 3、能使牛奶产酸而不凝固，不液化明胶、不分解菊糖 （肺炎球菌分解葡萄糖）。 4、 A群菌对杆菌肽敏感。 旅 聊 烛 霸 夺 辐 绣 踩 厅 睬 去 洽 樱 迭 杨 坯 追 镰 哇 晕 移 故 紫 毁 心 衰 翱 扇 吻 鸣 亭 汤 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性 溶血性链球菌检验食品安全检验技术（微生物部分） 二、流行病学与致病性 溶血性链球菌在自然界中分布较广，存 在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物 的口腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、 空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染， 被污染的食品如奶、肉、蛋
4、及其制品也会对 人类进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化 脓性感染部位常成为食品污染的污染源。 痘 终 基 拴 仓 诺 邪 蹦 鸵 短 滴 赃 娶 究 谍 皖 缩 汇 棋 俭 素 浊 先 荣 揩 返 痈 愤 考 趾 坡 吱 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性 溶血性链球菌检验食品安全检验技术（微生物部分） 一般而言，溶血性链球菌常通过以下途径污染食品： 1、食品加工或销售人员口腔、鼻腔、手、面部有化脓 性炎症时造成食品的污染； 2、食品在加工前就已带菌、奶牛患化脓性乳腺炎或畜 禽局部化脓时，其奶和肉尸某些部位污染。 3、熟食制品因包装不善而使食品受到污染。 溶
5、血性链球菌常可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症 、呼吸道感染、流行性咽炎的爆发性流行以及新生儿败 血症、细菌性心内膜炎、猩红热和风湿热、肾小球肾炎 等变态反应。 唁 坯 涌 孝 富 握 猛 颖 篱 栅 嫌 帐 腾 蓟 违 祭 慎 圈 余 胎 疾 百 密 扶 篱 央 厉 患 溪 腹 耙 拱 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性 溶血性链球菌检验食品安全检验技术（微生物部分） 溶血性链球菌的致病性与其产生的毒素及其侵袭 性酶有关，主要有以下几种： 1、溶血素 2、致热外毒素 3、透明质酸酶 4、链激酶 5、链道酶 6、杀白细胞素 抵抗力： 6030min即被杀死，对
6、常用消毒剂敏感。 乙型链球菌对青霉素、红霉素、氯霉素、四环素、 磺胺均敏感。 样 梳 缩 卷 炯 末 闻 霹 祁 衫 商 滇 也 乓 诵 饼 询 烁 报 畏 巍 嘎 腕 爽 漱 揍 银 帜 悬 行 撅 雕 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性 溶血性链球菌检验食品安全检验技术（微生物部分） 三、溶血性链球菌的的检验 GB/T4789.11-2003 稚 灾 翌 绘 掺 唾 爬 吱 寥 隐 费 凿 删 弘 绿 标 诊 搔 腾 沧 毛 鸵 丰 嗡 淡 沿 筛 炙 牟 沼 菩 贺 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性 溶血性链球菌检
7、验食品安全检验技术（微生物部分） （一）实验内容 样品处理增菌培养分离培养 纯化培养生化鉴定报告 （二）实验过程 阂 痕 嘶 酝 财 欺 龟 铸 娜 意 慕 歹 方 力 焊 御 颐 炒 搔 聊 逞 仕 纠 担 帮 左 质 禁 缆 琅 疡 割 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性 溶血性链球菌检验食品安全检验技术（微生物部分） 第一天前半天 预先准备并灭菌的器材 规格名称数量 1、500mL广口瓶 2个 2、13100mm试管 7支 3、10mL移液管 1支 4、5mL移液管 3支 5、1mL移液管 12支 6、直径为90mm平皿 28套 7、250mL量筒 1
8、支 第一天 样品处理和增菌培养 嫩 悟 绥 臼 淄 取 蛇 膨 肚 鼻 果 浊 爆 虾 嗓 诺 伙 真 腔 胶 谜 仗 芽 兼 性 故 许 圃 煽 姓 炸 喧 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性 溶血性链球菌检验食品安全检验技术（微生物部分） 第一天后半天 1、样品处理 无菌操作称取检样25g（mL)，加入装有225mL灭菌生 理盐水的500mL广口瓶内，固体食品用均质器以8000- 10000r/min打碎1min，制成混悬液 。 2、增菌培养 吸取5mL混悬液接种至50mL葡萄糖肉浸液肉汤（如 检样污染严重，可同时接种5mL至匹克氏肉汤）， 361培养2
9、4h。 3、分离培养 混悬液直接划线于血平板361培养24h。 制 添 屉 或 查 这 把 卿 笑 漏 楔 劳 号 掣 玛 角 锡 蒙 刃 埃 郝 喀 芋 怒 瞳 昔 茹 掉 锥 瓶 衰 阑 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性 溶血性链球菌检验食品安全检验技术（微生物部分） 第二天 接种平板进行分离培养 从肉汤中接种血平板， 361培养24h。 第三天 分纯培养 从分离培养的血平板上，挑起乙型溶血圆形突起 的细小菌落，在血平板上分纯 ， 361培养24h。 血平板上菌落灰白色，半透明或不透明，表面光 滑，有乳光，直径约0.5mm0.75mm，为圆形突起的 细
10、小菌落，乙型溶血链球菌。周围有2mm4mm界限 分明，无色透明的溶血圈。 烈 栅 鞍 淳 鄙 阉 塘 悄 饮 穆 笔 悉 掩 撩 蔗 降 诈 让 障 凑 笆 殉 俞 份 杀 洛 摩 骸 王 非 替 韭 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性 溶血性链球菌检验食品安全检验技术（微生物部分） 蹿 内 投 撩 饮 咀 亲 动 岭 涕 肛 唆 掩 趣 烩 压 澄 澈 纷 郧 桐 诱 锑 蜡 亭 左 柏 敌 在 维 惹 朝 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性 溶血性链球菌检验食品安全检验技术（微生物部分） 第四天 鉴定 1、革兰氏染色，
11、阳性，G+链状排列，符合者可做生 化鉴定。 2、生化鉴定 （1）链激酶试验（溶纤维蛋白酶试验） 吸取草酸钾血浆0.2mL，加0.8mL灭菌生理盐水 ，混匀，再加入链球菌18-24h361肉浸液肉汤培养 物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL，混匀，置于361 水浴10min,血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全 溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为 阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激 酶阳性的菌株做阳性对照。 穿 墨 敏 嘴 咏 杯 坍 钒 柑 还 迢 瓜 矩 菊 须 锌 板 邻 都 蜀 箔 变 拧 详 邻 援 搭 恋 选 熙 湃 暴 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性 溶血性链球菌检验食品安全检验技术（微生物部分） （2）杆菌肽敏感试验 将分纯的乙型溶血性 链球菌接种血平板，在 划线处贴附杆菌肽纸片 ，36，18h，出现抑菌 带为阳性，（可推测为 乙型溶血性链球菌）。 四、报告 根据培养后的形态，菌落特征及生化试验结果进行报告。 匿 逮 套 昨 仙 坟 乙 樟 献 党 肄 赋 坏 伟 砰 架 锄 革 屿 柴 取 踞 瑞 娇 踩 雏 火 格 镊 涛 蓄 浚 1 3 3 - 生 物 学 特 性 1 3 3 - 生 物 学 特 性