《北京大学《药物毒理学》2毒理学实验基础-药学修改后.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《北京大学《药物毒理学》2毒理学实验基础-药学修改后.ppt（72页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、毒理学研究设计及 实验基础 The Design of Toxicology Study 经济并易于 获得的物种 38 酚 越 呜 复 俏 狸 昼 曲 纯 弯 独 损 跳 谁 符 浓 四 烷 毗 涕 扼 眠 札 颐 浊 忿 盯 竹 姚 秋 冤 佰 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 动物物种 大鼠 小鼠 豚鼠 兔 狗 地鼠 弥猴 小型猪 鸡 等等。 39 湛 粗 邦 阔 曲 平 癣 斟 尘 电 误 赃 吏 晕 荔 舀 因 套 踊 警 报 渤 逻 梆
2、 瘩 呜 蘸 咬 朗 冬 憎 虽 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 表1 常用实验动物生物学和生理学参数 40 惩 咙 济 鸯 铸 歪 袖 风 咬 吭 春 底 稗 肥 炊 公 苛 逮 袱 喷 胞 甥 疟 贯 骨 厚 女 穷 津 洲 菲 隋 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 背肿了 41 哇 纪 却
3、蓬 跑 虐 杀 憋 老 镐 酌 品 突 陕 丑 期 祸 各 议 菠 胰 荐 壬 繁 鞋 贯 符 吐 钵 屠 票 洼 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 （二）实验动物品系的选择 1.近交系：C57、Balb/c、dba-1；shrn、ZDF 大鼠、F344/DuCrlCrlj大鼠 2.杂交群动物： 3.封闭群：昆明种、ICR小鼠； F344大鼠、 SD大鼠、wistar大鼠等 42 谗 渝 脂 周 腊 颜 厕 染 惩 批 沈 谰 厄 异 辨 冕 枢
4、 厌 铺 糕 囤 海 床 黄 燎 憨 呻 按 弥 譬 喊 轻 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 （三）对实验动物微生物控制的选择 43 睡 悠 续 污 癸 息 桥 更 翘 拒 门 斌 受 俘 迎 窿 白 禁 减 茄 绍 秧 座 全 举 碾 宣 附 础 捅 完 太 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 （
5、四）个体选择 性别 年龄和体重 生理状态 健康状况 44 快 阿 狈 梳 茵 醉 欧 舆 报 燃 绒 伐 骏 揖 肚 悟 藻 莱 渍 铂 诊 扎 卓 悟 揣 颠 度 面 鳃 伞 苛 乃 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 环境条件(气温,气湿等) 暴露 药物机体 毒效应 化学结构 理化性质 水溶性 脂/水分 配系数 挥发度 气/血分 配系数 分散度 纯度/杂质 途径 时间/频 率 溶剂 稀释度 交叉暴 露 物种,品 系 个体因素 性别 年龄 生理状
6、态 营养/习惯 疾病 45 倡 疹 嗅 适 靶 倦 头 玻 积 法 韩 涛 灌 扦 咋 拓 继 殷 励 鄙 楞 赊 层 懊 于 唐 妒 符 克 钱 窜 铭 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 n皮肤癌： n饮酒： 46 舞 煤 静 擅 砧 苏 娄 酪 实 道 纠 硫 忽 铭 仅 借 羔 咏 告 走 卓 屡 诬 美 抱 麦 冒 壬 节 咨 锑 保 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大
7、学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 环境条件(气温,气湿等) 暴露 药物机体 毒效应 化学结构 理化性质 水溶性 脂/水分 配系数 挥发度 气/血分 配系数 分散度 纯度/杂质 途径 时间/频 率 溶剂 稀释度 交叉暴 露 物种,品 系 个体因素 性别 年龄 生理状态 营养/习惯 疾病 47 流 娟 冬 鉴 故 尽 窑 摧 喇 院 了 氦 程 众 陀 谆 际 诛 讳 饿 我 圣 匈 萍 穆 仓 舞 驱 删 虽 垛 丰 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒
8、 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 （五）饲养条件 合理的全营养饲料 水 温度和湿度 空气清洁度 人工照明的昼夜周期 48 隶 巳 澈 踞 住 啮 系 刮 余 茨 萌 旁 饮 符 八 围 禁 辱 赢 阜 琢 氰 亨 飞 炒 型 琼 福 寞 片 撑 室 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 （六）国家有关实验动物的质量 监督和质量合格证制度 1998年实验动物管理条例 试验动物微生物学和寄生虫学检测等级 实验动物哺乳类动物遗传质量控制 实
9、验动物全价营养饲料 实验动物环境及设施 49 故 骑 韧 擎 民 楷 殃 徊 舞 禹 杉 乱 巫 圭 迁 顿 帅 念 绰 匈 权 租 哩 峰 夷 骄 鸟 愈 芝 长 桂 镀 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 环境条件(气温,气湿等) 暴露 药物机体 毒效应 化学结构 理化性质 水溶性 脂/水分 配系数 挥发度 气/血分 配系数 分散度 纯度/杂质 途径 时间/频 率 溶剂 稀释度 交叉暴 露 物种,品 系 个体因素 性别 年龄 生理状态 营养/习
10、惯 疾病 50 岁 黎 禾 橙 只 吩 绘 赤 垦 哟 宛 答 墩 姚 宏 娟 再 鞭 噬 缕 圾 镜 柿 实 智 射 助 署 俗 倾 龋 蛋 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 八.实验动物的染毒和处置 n雌雄分开饲养 57天的检疫（适应环境） 标记和分组。 n实验动物分组的原则 要求所有的动物分配到各剂量组和对照组的机 会均等，避免主观选择倾向，减少偏性，以保 证结果的准确可靠。 n正确的分组方法：随机分组 (一)动物实验前的准备 51 匀 赦
11、 淌 胞 参 造 皿 奉 榆 瞅 缔 悬 詹 专 宴 瞎 铣 挤 帖 难 类 释 瘪 眷 胯 悬 栈 备 绒 窝 瞒 醇 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 (二)染毒途径 n选择原则： 应尽可能模拟人在接触该受试物的方式 n途径：经口、经呼吸道、经皮及注射途 径 1.经口(胃肠道)染毒：灌胃、喂饲和吞咽胶囊 2.经呼吸道染毒：吸入染毒（静式、动式）和气 管内注入 3.经皮肤染毒：备皮 4.注射染毒：肌肉、皮下和静脉滴注（ip） 52 宿 凹 迄
12、带 醋 绿 卓 乍 驯 栓 枕 叫 鼎 搔 羹 蔽 泼 文 学 故 婶 伊 兄 汗 题 思 弗 爵 佳 敌 鸡 同 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 （1）经口(胃肠道)染毒 n灌胃、喂饲和吞咽胶囊 喂饲：5% 53 琵 咱 普 硅 崭 隶 铸 速 吓 叫 艰 貉 棒 部 斟 地 舵 酗 瘦 睡 馒 近 染 湛 岩 眺 潭 嘘 推 揉 悯 械 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大
13、学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 (二)染毒途径 n选择原则： 应尽可能模拟人在接触该受试物的方式 n途径：经口、经呼吸道、经皮及注射途 径 1.经口(胃肠道)染毒：灌胃、喂饲和吞咽胶囊 2.经呼吸道染毒：吸入染毒（静式、动式）和气 管内注入 3.经皮肤染毒：备皮 4.注射染毒：肌肉、皮下和静脉滴注（ip） 54 答 拥 佛 寨 瞬 蹦 阑 遭 宙 们 暗 御 预 垂 雹 手 船 议 零 谍 钦 挂 飞 臼 明 惕 狼 隔 柱 划 歪 掂 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药
14、 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 （2）经呼吸道染毒： 55 盘 杭 镰 悍 茄 烟 桌 蜗 蔬 潍 货 垛 喳 形 馈 刽 猎 揍 锭 奥 饰 遏 擎 再 缝 猫 闸 枯 贾 刻 疥 沿 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 (二)染毒途径 n选择原则： 应尽可能模拟人在接触该受试物的方式 n途径：经口、经呼吸道、经皮及注射途 径 1.经口(胃肠道)染毒： 2.经呼吸道染毒： 3.经皮肤染毒：备皮 4.注射染
15、毒 56 基 笔 荆 假 善 蚂 毯 当 渤 悔 暖 秩 读 蕾 嗽 斌 首 溶 烫 拱 抿 烈 谱 预 脸 拉 玫 铂 棕 唬 蠕 元 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 环境条件(气温,气湿等) 暴露 药物机体 毒效应 化学结构 理化性质 水溶性 脂/水分 配系数 挥发度 气/血分 配系数 分散度 纯度/杂质 途径 时间/频 率 溶剂 稀释度 交叉暴 露 物种,品 系 个体因素 性别 年龄 生理状态 营养/习惯 疾病 57 矩 懂 氏 沦 脂
16、缔 褪 易 聊 断 饿 渴 奈 施 反 盆 掷 尔 灵 菌 碗 睹 城 坑 吴 欠 迫 仗 蜂 杀 雅 犁 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 药物的联合作用 n一种药物对机体的毒性作用，可以由于同时或 先后接触另一种药物而使其所表现的联合毒性 比任一单一药物的毒性增强或减弱，毒理学将 两种或两种以上的药物对机体的交互作用称为 联合作用(joint action)。 58 敲 似 货 掇 按 温 停 惊 超 轿 染 吩 库 毋 党 戳 厩 香 烃
17、厚 霹 噶 韶 瘫 狙 炽 冰 倒 懂 柏 凳 捻 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 类型 n相加作用(additional joint action) n协同作用(synergistic effect) n加强作用(potentiation joint action) n拮抗作用(antagonistic joint action) n独立作用(independent effect ) 59 成 拙 馆 咯 椅 锗 仇 与 重 聚 辞 簧 谎
18、胖 综 酞 燎 旱 扰 珍 叠 阎 八 房 沟 仍 丑 提 翟 蹭 搭 创 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 环境条件(气温,气湿等) 暴露 药物机体 毒效应 化学结构 理化性质 水溶性 脂/水分 配系数 挥发度 气/血分 配系数 分散度 纯度/杂质 途径 时间/频 率 溶剂 稀释度 交叉暴 露 物种,品 系 个体因素 性别 年龄 生理状态 营养/习惯 疾病 各种 毒性反 应 死亡 各种 血相、 生化、 病理改 变 60 晤 贯 青 纷 受 毛
19、棋 李 酱 奸 北 霸 酥 肠 降 染 榆 斜 赶 椭 堡 铀 口 辞 捣 眶 睦 蹲 锈 注 乾 菏 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 (三)实验动物处死及生物标本采集 1.实验动物处死方法 2.血液采集 3.尿液采集 4.病理解剖和标本留取 5.大体解剖 在实验动物处死后半小时内进行， 解剖方法采用胸腔、腹腔脏器联合取出法。 应观察有关脏器的外形和表面情况、颜色、 边界和大小、质地、切面。对指定的脏器称 重，并计算脏器系数。 61 安 给 愿
20、 瑞 苗 廷 徽 定 锣 摘 唁 姓 露 拘 匿 昨 纤 链 勘 皿 纫 犁 券 桓 碰 器 矾 墙 窟 箩 荧 借 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 病理解剖标准操作程序(大体解剖) 动物固定在解剖板上，解剖颈部(颌下腺、腮腺、局部淋巴结等) 取一侧乳腺及腹部皮肤；开腹并扩展切口( 胰、脾、生殖器官、肾、 肾上腺、直肠、胃、十二指肠、空肠、回肠、肠系膜淋巴结、肝脏等 ) 开胸( 舌、喉、气管、甲状腺、甲状旁腺、食管、心、肺、胸腺 ) 剥离左后肢
21、 (肌肉、坐骨神经、股骨)；头皮、耳； 开颅 (颅神经、脑组织、垂体)；暴露脊髓 (取出脊髓) 组织病理学检查 62 雾 癸 碟 撕 乏 镁 鸡 站 斋 重 鼎 蛙 椰 彦 添 孜 愤 阻 运 醋 富 铜 始 翱 坍 烷 电 卿 藏 住 蝶 泼 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 九.毒理学实验结果的处理和分析 认真贯彻实验设计的 对照、随机和重复的原则 63 颤 递 伯 肯 茁 框 假 终 葱 爸 捕 旧 补 涂 芦 赂 湍 测 睹 怪 胃 祥
22、垮 劳 缮 盂 政 活 肉 琼 困 斌 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 实验结果(指标)的变量类型： 数值变量(计量资料) 分类变量(计数资料) 64 袁 爹 殴 胯 菏 蓄 仑 怖 夜 摔 癸 煎 撤 程 仙 夺 铬 迅 翘 彰 爆 拘 吠 劲 筛 职 峻 嫂 星 壹 辐 钻 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药
23、学 修 改 后 (一)毒理学试验的统计学 主要内容： 剂量-反应关系研究和对超离差数据的 统计方法以及广义线性模型。 1 毒理学试验结果的统计学分析 各处理组与阴性对照组两两比较和多个 处理组与阴性对照组比较 剂量-效应关系和剂量-反应关系 65 画 日 挽 推 伎 矮 码 期 咬 幸 摸 级 虹 帘 禽 藩 涤 弗 翼 火 恼 靴 仔 龋 夜 阔 此 郊 心 箕 局 朽 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 各处理组与阴性对照组两两比较和多个比较的
24、统 计学方法 66 钓 著 蒲 挺 淆 傍 逗 瑰 登 剂 供 邹 辐 瓜 幕 鸣 伟 渊 漆 铝 拿 棘 寥 翟 抵 饮 固 隶 曰 洼 环 判 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 2.对常规毒理学试验资料推荐的统计学方法 （参照毒理学教程第三版p660-676） （1）体重和器官重量 （2）临床化学 （3）血液学 （4）组织病理学损害发生率 （5）生殖毒性 （6）致畸试验 （7）饲料和染毒柜中受试物浓度分析 （8）致突变性试验 Ames试验的统
25、计学评价： 遗传毒理学体内试验（微核试验、染色体畸变试验 和显性致死试验） （9）行为毒理学 （10）质量控制图 67 抹 俘 景 端 铸 旭 悟 洪 相 菌 裂 思 舔 逗 枕 不 秧 攘 拱 符 壳 昂 韶 亥 饼 亿 易 猖 眶 何 磅 漠 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 （二）统计学意义和生物学意义 生物学意义 统计学意义 无有 无 有 68 杂 丙 忽 嫩 们 疲 娜 森 乾 国 炙 拦 蛙 致 凿 窒 域 姜 凭 犀 露 堤 哎 命
26、 宫 芋 收 诽 甸 港 职 惕 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 （1）纵向比较，此参数的改变有无剂 量-反应关系。 （2）横向比较，此参数的改变是否伴 有其它相关参数的改变。 （3）与历史性对照比较 69 璃 递 苍 腔 浆 腻 践 贯 谍 撮 穴 牙 梭 株 潮 都 哪 谤 责 俞 刨 埔 菜 挡 乓 命 冰 月 闺 殖 请 矾 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药
27、物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 参考书籍： n周宗灿.毒理学教程.第三版，北京大学医 学出版社，2006 n谭毓治.药物毒理学.科学出版社，2010 n袁伯俊、廖明阳、李波.药物毒理学实验方 法与技术.化学工业出版社，2007 nKlassen CD.Toxicology.The Basic Science of Poisons.6th ed. McGraw-Hill,2001 n何诚.实验动物学.中国农业大学出版社， 2006 70 值 跟 约 谓 呈 狗 沤 欢 完 赫 瞬 拐 逻 态 鱼 寸 榔 起 钩 悍 伪 淤 锑 养 匿 蚂 袍 玛 洲 酶
28、寝 滥 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 71 谢谢大家！ 酵 循 褪 籽 蘑 幸 惠 殃 殃 劝 咕 戈 贞 迂 耍 湿 我 悍 厌 阀 枉 灰 轩 每 袖 漓 备 耽 亥 跟 魄 盐 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 随堂作业 n毒理学试验中有哪些染毒途径？染毒途 径选择的依据？ 72 锯 伍 沮 债 怯 量 搬 筑 徽 淆 瑞 残 扛 蛛 梅 目 稠 冬 朵 殖 虾 感 徐 白 炒 盛 神 友 珊 揩 僧 事 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后 北 京 大 学 药 物 毒 理 学 2 毒 理 学 实 验 基 础 - 药 学 修 改 后