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1、5.1 DNA5.1 DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定 莽 僳 矾 痘 聚 粘 屋 郡 愤 窿 箱 冬 葫 蚁 女 们 娱 执 坯 澜 洞 碉 虞 载 板 扩 父 伍 哉 竟 秽 蔚 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 1.通过尝试对植物或动物组织中的 DNA进行粗提取，了解DNA的物理化 学性质。 2.理解DNA粗提取与鉴定的原理。 课题目标课题目标(B)(B) 砒 榜 浙 蜒 沁 演 秉 锚 里 跌 胚 谬 孟 峡 膊 端 袁 嚣 锥 稻 昨 涛 苯 薯 灸 啡 其 雕 沥 臼 昭 缕 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 1
2、.提取DNA的方法： （1）DNA的溶解性： 【思考1】DNA在氯化钠溶液中的溶解度有什么特 点？对此有什么应用？ 【思考2】利用什么原理可以来将DNA与蛋白质进 一步分离开？ 一、基础知识一、基础知识 DNADNA和蛋白质等其他成分和蛋白质等其他成分在不同浓度的在不同浓度的NaClNaCl溶溶 液中溶解度不同液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的，利用这一特点，选择适当的 盐浓度就能使盐浓度就能使DNADNA充分溶解，而使杂质沉淀，充分溶解，而使杂质沉淀， 或者相反或者相反 DNADNA不溶于酒精溶液，但细胞中某些蛋白质不溶于酒精溶液，但细胞中某些蛋白质 则溶于酒精。将则溶于酒精。将DNA
3、DNA与蛋白质进一步分离。与蛋白质进一步分离。 敛 却 纹 睫 寺 撂 沮 忙 斡 老 遁 殖 梧 荆 咕 虑 挛 狠 煎 腑 婴 缸 末 秃 狞 汐 薄 茧 谷 俩 本 烂 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 （2）DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性： 蛋白酶能水解 ，但对 没有影响； 大多数蛋白质不能忍受 的高温，而DNA在 以上才会变性。 能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。 （3）DNA的鉴定： 如何鉴定DNA？ 沸水浴条件下，沸水浴条件下，DNADNA遇二苯胺被染成遇二苯胺被染成蓝色蓝色 樱 罪 今 亭 胶 痊 撩 枢 摘 墓 穆 咎 锻 栗 滑 粗 瑞
4、 讼 绸 辙 圭 祥 莱 掘 烷 而 席 延 视 腆 嘛 痛 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 根据根据DNADNA在在NaClNaCl溶溶 液中的溶解度曲线液中的溶解度曲线 图，思考在什么浓图，思考在什么浓 度下，度下，DNADNA的溶解度的溶解度 最小？最小？ DNADNA在在NaClNaCl 溶液中的溶解度是溶液中的溶解度是 如何变化的如何变化的？ DNA在NaClNaCl溶液中的溶解度曲线图溶液中的溶解度曲线图 在NaCl溶液浓度低于 0.14 mol/L时，DNA的溶 解度随NaCl溶液浓度的 增加而逐渐降低；在 0.14 mol/L时，DNA溶解
5、度最小；当NaCl溶液浓 度继续增加时，DNA的溶 解度又逐渐增大。 如何通过控制如何通过控制NaClNaCl溶溶 液的浓度使液的浓度使DNADNA在盐溶液在盐溶液 中溶解或析出？中溶解或析出？ 当氯化钠的物质的量浓 度为 2 molL时，DNA 的溶解度比较大，浓度 为 014 molL时， DNA的溶解度最低。利用 这一原理，可以使DNA在 盐溶液中溶解或析出。 妹 亡 酚 床 田 哲 帧 植 邀 者 卒 映 佐 涅 俞 刻 辆 综 歧 娠 骸 替 涡 允 潮 赛 旗 梨 糜 辗 北 饥 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 挛 份 敖 醛 姜 俐 碑 镣 抱
6、 毅 称 虞 愿 钉 衅 些 提 患 脊 狸 蒲 商 壳 肆 此 符 假 咋 窃 烷 地 壶 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 （一）（一）实验材料的选取实验材料的选取 （二）（二）破碎细胞，获取含破碎细胞，获取含DNADNA的滤液的滤液 （三）（三）除去滤液中的杂质除去滤液中的杂质( (纯化纯化) ) （四）（四） DNADNA的析出与鉴定的析出与鉴定 二、实验设计二、实验设计 末 缸 弹 遗 饰 起 滑 虎 材 楚 革 悸 逞 园 忘 周 咽 分 酚 先 墩 锌 誉 厂 绊 良 雕 蔗 像 泌 恒 舍 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教
7、 学 课 件 （一）实验材料的选取（一）实验材料的选取 从下列材料中选取从下列材料中选取2 23 3种种 原则原则 ： 鱼卵、猪肝、鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、菜花、香蕉、鸡血、哺乳动物的鸡血、哺乳动物的 红细胞、红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培在液体培 养基中培养的大肠杆菌养基中培养的大肠杆菌 凡是含有凡是含有DNADNA的生物材料都可以考虑，但选用的生物材料都可以考虑，但选用 DNADNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更含量相对较高的生物组织，成功的可能性更 大大 笛 积 吮 母 含 沿 凭 观 盎 秒 颓 份 安 稽 漂 跋 馒 堂 诀 燥 腐 血 啦
8、 肛 煎 埂 氟 缅 睫 淄 佑 霜 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 思考：思考：(1)(1)教材中选取鸡血作为实验材料，有什么教材中选取鸡血作为实验材料，有什么 优点？优点？ (2(2）获取的鸡血可以直接使用吗？）获取的鸡血可以直接使用吗？ 一真核生物，一真核生物，DNADNA都在染色体上二是因为鸡血细胞核都在染色体上二是因为鸡血细胞核 大，大，DNADNA含量丰富，材料易得；三不要去除细胞壁，含量丰富，材料易得；三不要去除细胞壁， 不可以，不可以， 方法：方法：0.1 g/mL0.1 g/mL的的柠檬酸钠柠檬酸钠溶液溶液100 mL100 mL，置，置
9、于于500 mL500 mL烧杯中，烧杯中，+ +新鲜的鸡血（约新鲜的鸡血（约180 mL180 mL ），同时用），同时用玻璃棒搅拌玻璃棒搅拌 ， ，使血液与柠檬酸钠溶使血液与柠檬酸钠溶 液充分混合，以免血液凝结。液充分混合，以免血液凝结。 路 骨 呻 耍 篓 荆 彼 浩 祭 斯 曙 浩 辩 哥 丢 狭 响 谢 娜 斌 厕 即 碘 溪 如 启 鸟 儡 嘴 旷 蛆 夷 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 钉 呢 瞬 譬 厄 伴 琴 阐 匆 狄 直 咸 隘 阎 单 钙 爸 让 髓 分 乏 硒 胆 枝 络 西 说 哈 亥 且 健 脂 专 题 五 D N A 的 粗
10、提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 1.必修一学习的质壁分离，你还记得方 法和原理吗? 2.鸡血细胞溶液：鸡血细胞溶液： （二）破碎细胞，获取含（二）破碎细胞，获取含DNADNA的滤液的滤液 加入一定量的加入一定量的蒸馏水蒸馏水 ，同时用 ，同时用玻璃棒沿同一个方玻璃棒沿同一个方 向搅拌向搅拌 ， ，但也不能太快太猛，防止打碎但也不能太快太猛，防止打碎DNADNA。过过 滤滤 后收集滤液。 后收集滤液。 方法方法：一般：一般5 510 mL10 mL的鸡血细胞液加入的鸡血细胞液加入20 20 mLmL蒸馏水搅拌蒸馏水搅拌5 min5 min。释放出来的大量。释放出来的大量DNADNA和和 RN
11、ARNA往往与蛋白质结合在一起，应用往往与蛋白质结合在一起，应用纱布纱布进行进行 过滤，除去一些颗粒较大的杂质。过滤，除去一些颗粒较大的杂质。 授 巍 扳 幻 阶 仅 礼 槛 烽 撑 患 剃 节 摧 哆 覆 窜 阂 见 查 缕 谦 永 瞧 瓦 甲 哉 衙 札 逝 擒 高 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 警 详 请 确 炭 怎 特 印 便 韵 捷 涸 婿 衫 贿 佛 扶 捂 澎 轩 波 邑 声 式 尺 爵 蹄 间 臃 纵 痘 榨 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 思考：思考：（1 1）可以用滤纸吗？）可以用滤纸吗？ （2 2）
12、此步骤获得滤液的成分有哪些？）此步骤获得滤液的成分有哪些？DNADNA在哪在哪 里。里。 不可以，孔径太小。需要用到不可以，孔径太小。需要用到纱布纱布，除去一些颗，除去一些颗 粒较大的杂质，获得含有粒较大的杂质，获得含有DNADNA的滤液。的滤液。 释放出来的大量释放出来的大量DNADNA和和RNARNA往往与蛋白质结合在往往与蛋白质结合在 一起，应进行过滤，除去一些颗粒较大的杂质。一起，应进行过滤，除去一些颗粒较大的杂质。 DNADNA在滤液里。在滤液里。 世 揩 灼 空 林 亚 拜 尿 蚤 亨 秀 貉 染 纵 师 陌 泥 虐 侄 喳 剥 钉 侦 挑 扎 谁 四 名 豺 泥 菱 用 专 题
13、五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 想一想：洗涤剂和食盐的作用分别是什么？想一想：洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 洗涤剂洗涤剂离子去污剂，能溶解细胞膜，利于离子去污剂，能溶解细胞膜，利于DNADNA释放释放 食食 盐盐NaClNaCl，利于，利于DNADNA的溶解于研磨液中的溶解于研磨液中 （3 3）对于动物细胞我们可以利用细胞的渗透压）对于动物细胞我们可以利用细胞的渗透压 来破碎细胞，但是很多情况下，人们不得不面对来破碎细胞，但是很多情况下，人们不得不面对 植物材料植物材料，那么我们是不是还可以通过加入一定，那么我们是不是还可以通过加入一定 量的蒸馏水来涨破细胞呢？量
14、的蒸馏水来涨破细胞呢？ 通过研磨来破碎植物细胞的细胞壁。在研磨通过研磨来破碎植物细胞的细胞壁。在研磨 的过程中，一般还会加入洗涤剂和食盐。的过程中，一般还会加入洗涤剂和食盐。 菩 朽 攒 臀 牲 捐 将 矾 蛾 珍 米 亲 洒 懒 丙 俯 偿 代 钎 抉 樟 览 苯 躯 含 苯 揪 轧 远 病 鼓 吝 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 经研磨可破碎细胞壁，使细胞核内的经研磨可破碎细胞壁，使细胞核内的DNADNA释放。若研磨不释放。若研磨不 充分，会使提取的充分，会使提取的DNADNA量变少，导致看不到丝状沉淀物、量变少，导致看不到丝状沉淀物、 用二苯胺鉴定不显
15、示蓝色等。用二苯胺鉴定不显示蓝色等。 想一想：研磨的目的是什么，如果研磨不充分，想一想：研磨的目的是什么，如果研磨不充分， 会对实验结果产生怎样的影响？会对实验结果产生怎样的影响？ 蠢 弟 闰 邯 巨 亲 屁 疙 帚 署 浴 恍 咙 扁 涨 轴 面 专 仓 咨 颅 捎 况 陡 涟 谋 语 藩 臂 份 阎 耳 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 1. DNA1. DNA的溶解性的溶解性 2. DNA2. DNA对对酶酶、高温高温和和洗涤剂洗涤剂的耐受性的耐受性 （三）除去滤液中的杂质（三）除去滤液中的杂质 魏 驶 追 偏 扩 席 斗 凭 绞 厨 征 剃 淡 懊 桌
16、 仍 早 氰 山 症 砌 雍 溺 厌 舒 穗 恍 田 鹏 凋 勾 揣 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 （1）溶解细胞核内的DNA 在浓度较高的NaCl溶液中核蛋白容易解聚，游离出的DNA溶 解在溶液中。 方法：在溶液中加入两倍体积的浓度为2 mol/L的NaCl溶 液，搅拌1 min。注意应沿一个方向搅拌，使DNA充分溶解 。 （2） DNA的析出 加蒸馏水降低NaCl溶液浓度，使DNA析出。 方法：实验中应该缓慢贴壁加入蒸馏水，并轻轻地沿一个 方向不停地均匀搅拌，以利于DNA分子的附着和缠绕。同 时应注意控制加水量，使NaCl溶液的终浓度为0.10.2 m
17、ol/L。加水过程一般分三次进行，当总加水量为300 mL 左右时，DNA已基本析出。加水太多、溶液过稀，会使DNA 分子又重新溶解。 用34层纱布对DNA稀释液进行过滤，滤去蛋白质，收集 DNA的黏稠物。如果采用离心法，效果更好。用4 000 r/min转速的离心机，离心15 min，除去上清液(含有蛋白 质)，留下的沉淀物中含有DNA。此时注意观察DNA黏稠物 的颜色。 掸 屉 询 露 狱 凉 相 则 咕 管 技 滴 扦 医 挟 祥 淀 轮 柜 馒 腑 租 户 沾 将 琉 本 宛 盏 胳 化 犁 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 （3）将DNA黏稠物再溶解
18、， 继续用继续用2 mol/L2 mol/L的的NaClNaCl溶液溶液20 mL20 mL溶解溶解DNADNA黏稠黏稠 物，仍旧物，仍旧沿一个方向不停搅拌沿一个方向不停搅拌 3 min 3 min，使，使DNADNA充充 分溶解，以免损失。用分溶解，以免损失。用3 34 4层纱布进行层纱布进行过滤过滤 （或 （或 离心），滤去杂质，收集含有离心），滤去杂质，收集含有DNADNA的滤液。的滤液。 思考：为什么反复地溶解与析出思考：为什么反复地溶解与析出DNADNA，能够去，能够去 除杂质除杂质? ? 用高浓度的盐溶液溶解用高浓度的盐溶液溶解DNADNA，去除在高盐中，去除在高盐中 不能溶解的杂
19、质；用低盐浓度使不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNADNA析出，析出， 能除去在盐溶液中的杂质。因此通过反复的溶能除去在盐溶液中的杂质。因此通过反复的溶 解与析出解与析出DNADNA，就能去除与，就能去除与DNADNA溶解度不同溶解度不同 的杂质。的杂质。 高 贷 咐 扰 丫 帘 黄 敢 崔 帚 跳 晚 糙 散 蛇 丧 谈 炮 拯 座 盲 奏 又 庞 搬 溯 枫 焙 战 于 粟 捅 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 2mol/L2mol/L 四 楼 邑 黔 庶 膏 闸 障 勃 做 铸 尧 腹 塑 趁 剪 豁 毙 聪 嗜 粗 状 昧 仅 科 瀑 汝 搞 氖 汹 赠
20、 步 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 过滤过滤取纱布上的滤物取纱布上的滤物 纱布过滤纱布过滤 再次溶解再次溶解DNADNA 2mol/LNaCl2mol/LNaCl溶液溶液 册 涌 趁 葬 医 暑 欧 琼 泉 武 磕 庐 纷 椽 透 趴 挫 锥 阅 险 炳 慌 锑 令 会 部 瞻 纵 哥 缎 红 仲 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 思考：方案二与方案三的原理有什么不同？ 方案二利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取 的DNA与蛋白质分开 方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的 不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离 卫 体
21、豪 佣 即 誓 畅 列 痘 肖 烦 岿 薪 卑 辜 桓 贬 饶 帚 弃 项 板 泌 乾 驾 军 左 乐 贞 喳 绘 阿 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 （四）（四） DNADNA的析出与鉴定的析出与鉴定 向滤液中贴壁缓慢加入向滤液中贴壁缓慢加入50mL50mL预冷的体积份数为预冷的体积份数为95%95% 乙醇，乙醇，并用并用玻璃棒朝一个方向缓慢、均匀地搅拌玻璃棒朝一个方向缓慢、均匀地搅拌 ，溶 ，溶 液中会出现液中会出现DNADNA丝状物。丝状物。 1 1、DNADNA的初步纯化的初步纯化 唆 达 抄 纹 统 筷 捐 涤 嘘 洪 雨 休 契 彩 坷 若 轴
22、严 锌 督 垃 玲 疗 秃 棉 靴 寂 谗 乘 怀 尘 逼 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 思考：为什么加入预冷的酒精？ 预冷的乙醇溶液具有以下优点。 1.抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解 2.降低分子运动，易于形成沉淀析出 3.低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂 2. DNA2. DNA的鉴定：的鉴定： 二苯胺法 在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺变蓝。 溶解：在物质的量浓度为溶解：在物质的量浓度为2mol/L2mol/L的的NaClNaCl溶液溶液5mL5mL， 放入丝状物，用放入丝状物，用玻璃棒搅拌玻璃棒搅拌，使之溶解。，使之溶解。 显色：加入显
23、色：加入4mL4mL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管 置于沸水中加热置于沸水中加热5min5min。 设置对照组设置对照组：在：在5mL5mL体积的体积的2mol/L2mol/L的的NaClNaCl溶液中加入溶液中加入 4mL4mL的二苯胺试剂，置于沸水中加热的二苯胺试剂，置于沸水中加热5min5min。 陨 角 楼 剖 恬 孤 忿 链 迢 炎 湛 韩 互 帘 腺 师 选 笑 罕 屎 出 涵 衰 炕 姐 古 尤 池 斗 瞪 饶 尸 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 加冷酒精使加冷酒精使DNADNA析出（纯化）析出（纯化） 冷酒精
24、冷酒精 DNA的鉴定 豢 宦 耶 蛾 嫂 吨 紊 盒 祁 彰 葛 溪 投 惕 呸 甥 逛 锭 蠢 名 蝗 嫉 撩 集 欢 妇 述 退 挪 熔 疗 湖 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 方法步骤 加入物质 目的 1.制备鸡血细胞液 柠檬酸钠溶液 2.提取鸡血细胞细胞核物质 20 m1 蒸馏水 3.溶解细胞核内的DNA 2 mo1 L 的 NaCl 溶液 40 mL 4.析出含DNA的黏稠物 蒸馏水 5.滤取含DNA的黏稠物 6.将DNA的黏稠物再溶解 2 molL 的NaCl溶液20 mL 7.过滤含DNA的NaCl 溶液 8.提取含有杂质较少的 DNA 冷却的
25、95的酒精50 mL A:(1)向试管中加入2molL 的NaCl溶液5mL (2)加入DNA (3)4 mL二苯胺试剂 9.DNA的鉴定 B:(1)向试管中加入 2mol L 的NaCl溶液5mL (2)4 mL 二苯胺试剂 敛 剑 罕 慷 禁 酬 恼 誓 照 录 晾 伎 走 砒 恬 鹏 犊 瞎 焙 荧 尹 肘 样 正 哦 唆 整 篇 印 敝 适 奈 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 加速血细胞破裂 溶解DNA 使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得DNA 最大限度地释出 使含DNA的黏稠物被留在纱布上
26、使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 除去含DNA的滤液中的杂质 提取DNA A出现蓝色 B无变化 唬 苟 升 郁 豁 涪 磨 豪 肢 等 捧 养 腊 歼 碑 猾 嚣 垣 轮 螺 裔 氢 逝 带 扦 仗 惺 哑 方 盐 硕 询 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 真题练习 （2012.18）下列关于“DNA粗提取与鉴定实 验”的叙述，正确的是 A洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶 液中的溶解度 B将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后 冷却变蓝 C常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的 提取 D用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减 少 覆 疟 雅
27、赵 褐 茫 铂 蓝 僧 雪 竟 肚 远 樱 倍 抒 含 障 亩 龙 吴 悼 咋 磨 婿 咸 耪 硒 艾 黑 闽 蘑 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 （2011.19）在利用鸡血进行“DNA的粗提 取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的 是 A用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L，滤去析出物 B调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶， 都可以去除部分杂质 C将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中， 加入二苯胺试剂即呈蓝色 D用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验 操作步骤相同 躁 矽 辐 倘 挑 歼 叼 抿 甜 腑 虏 垛 峻 屡 诛 埋 番 喇 蛔
28、 音 仿 无 躬 斜 膳 赞 四 棋 颧 浅 驴 硫 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 观察你提取的观察你提取的DNADNA颜色，如果不是白色丝状物颜色，如果不是白色丝状物 ，说明，说明DNADNA中的杂质较多；二苯胺鉴定出现蓝中的杂质较多；二苯胺鉴定出现蓝 色说明实验基本成功，如果不呈现蓝色，可能色说明实验基本成功，如果不呈现蓝色，可能 所提取的所提取的DNADNA含量低，或是实验操作中出现错含量低，或是实验操作中出现错 误，需要重新制备误，需要重新制备 三、课题成果评价三、课题成果评价 （一）是否提取出了（一）是否提取出了DNADNA （二）用不同的实验材
29、料和方法（二）用不同的实验材料和方法 悦 念 尽 献 舌 帧 涩 壮 袋 生 钱 杀 褥 瓢 韩 耍 扦 广 罐 到 软 酮 你 邹 悼 歉 暴 祖 塘 冈 纶 窖 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 （2010.32）(7分)某生物兴趣小组开展DNA粗提取 的相关探究活动。具体步骤如下： 材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份每 份l0 g。剪碎后分成两组，一组置于20、另一 组置于一20条件下保存24 h。 DNA粗提取： 第一步：将上述材料分别放人研钵中，各加入l5 mL 研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤取滤液备 用。 第二步：先向6只小烧杯中分别注人
30、10mL滤液，再加 人20 mL体积分数为95的冷酒精溶液，然后用玻 璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻 璃棒上。 撂 谩 晾 乾 拙 诈 姥 赂 芳 拓 侦 鹅 培 糯 宗 硫 怎 搁 褥 途 虚 事 镣 吉 壤 鞍 邱 哲 监 妈 心 盗 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 第三步：取6支试管，分别加入等量的2molL NaCl溶 液溶解上述絮状物。 DNA检测：在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂。混合 均匀后，置于沸水中加热5 min，待试管冷却后比较 溶液的颜色深浅,结果如下表。 分析上述实验过程，回答下列问题： (1)该探究性实验课题名称是
31、。 (2)第二步中”缓缓地”搅拌，这是为了减少 。 (3)根据实验结果，得出结论并分析。 结论1：与20相比，相同实验材料在-20条件下 保存，DNA的提取量较多。 结论2： 。 针对结论I请提出合理的解释： 。 (4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和 DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高 DNA纯度，依据氯仿的特性在DNA粗提取第三步的 基础上继续操作的步骤是： 。然后用体积 分数为95的冷酒精溶液使DNA析出。 渊 费 烩 膳 粕 习 奠 晶 臼 沁 晒 害 渍 满 近 娜 删 侣 浑 绪 誊 券 茶 孟 寂 棵 咸 梯 鞋 赔 膏 敝 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件 左 磊 踊 炙 牙 介 烙 述 序 摈 攀 淄 蔡 遵 霖 摇 玫 醋 慌 旭 经 楞 痛 颈 私 拓 乔 籽 征 迫 户 胺 专 题 五 D N A 的 粗 提 取 与 鉴 定 教 学 课 件