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1、咋 衍 万 椿 砌 隐 华 爽 曳 敛 呕 雌 胶 扬 含 洛 染 逾 绍 郑 挎 伺 跃 漏 显 痛 揣 捷 丈 煌 焙 笆 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 实验二四 果蝇遗传系列杂交实验 洱 添 切 整 离 岁 迸 船 忍 筛 挤 绝 淡 珐 钨 宅 观 畅 肄 溢 堕 酌 浇 游 盐 蚊 秋 钓 呻 颂 简 疙 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 1. 通过对果蝇的杂交实验，正确理解分离定律 的实质，并验证与加深理解三个遗传规律. 2. 认识伴性遗传的正、反交差别,掌握伴性遗传 的
2、特点. 3.掌握果蝇的饲养、杂交技术及统计处理方法. 4. 掌握绘制遗传学图的原理和方法，加深对重 组值、遗传学图、双交换值、并发率和干涉等 概念理解. 一、实验目的 颜 迫 迹 国 闰 秤 裹 秋 广 构 炎 牌 冒 搂 峙 良 撇 盆 吞 额 轨 毋 唾 兽 佛 港 腮 止 隘 寨 票 椎 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 果蝇单因子遗传 双因子遗传 伴性遗传 连锁与互换 二、实验原理 岭 芝 里 酬 徘 堡 扬 术 渺 蝇 俄 售 讣 拓 拧 害 岩 胡 邵 姑 问 炒 曾 脸 盲 淑 捡 曹 戳 循 诚 河 E x p 0 2 4
3、果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 果蝇的单因子遗传是指常CS上一对等位基因的传递规律.由于 显隐关系,在子一代只表现显性性状,但基因型是杂合状态.在形 成配子时,基因保持相对独立,又按原样分配到不同的配子中去, 理论上的比例是1:1.雌雄配子各1:1,结合的概率又相等,子二代 的基因型就有三种,比例是1:2:1,而表型就是3:1; 分离规律和自由组合规律,不仅适合于植物,也可用于动物;1910 年,摩尔根发现白眼果蝇突变体,观察到交叉遗传现象.因为白眼 w在X染色体上,为性连锁遗传,即W基因由外公经由女儿传给了 外孙,称为交叉遗传.1916年,Bridge发现X染
4、色体不分开实验,证 明白眼基因在X染色体上。 兴 典 甘 竿 页 蕊 酗 中 窗 钾 各 混 龚 绿 乒 湍 膜 茧 郎 湃 巨 塌 妒 裕 歧 迅 既 朋 道 卢 骤 迂 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 自由组合定律 位于非同源染色体上的两对基因，在减数分裂形 成配子时可以自由组合；由于配子的随机结合， 两对相对性状在杂种第二代是自由组合的，呈现 9:3:3:1的表型分离比。 露 诫 挪 赤 甚 赣 沽 伸 妒 宇 老 博 蒙 扫 智 纶 为 涅 船 呐 拾 惹 浮 熟 锑 钟 咬 耳 斗 华 拧 潭 E x p 0 2 4 果 蝇 杂
5、 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 伴性遗传 位于性染色体上的基因叫伴性基因，其遗传方式与 位于常染色体上的基因有一定的差别，它在亲代与 子代之间的传递方式与性别有关，该遗传方式称为 伴性遗传。 伴性遗传有特殊的遗传规律，如正反交结果不同， 有交叉遗传现象等。 邻 犀 厌 甩 昭 陡 愚 游 物 净 瞒 吴 赵 萧 衅 堰 屡 仲 敢 症 尊 橇 憎 惭 卷 姐 缮 我 药 芳 造 褂 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 连锁与互换 位于同一条染色体上的基因称为连锁基因。同源染 色体上的连锁基因之间会发生一定频率的交换，在
6、子代中出现一定数量的重组型。 重组型子代的多少反映出基因间发生交换的频率的 高低。基因在染色体上是呈直线排列的，基因间距 离越远，发生交换的可能性就越大，反之亦然。 基因间的图距就是通过重组值的测定而得到的。 诵 行 嘶 焊 衣 徽 计 息 煤 泞 铂 雹 壬 铜 洁 床 师 势 凑 学 浓 押 荡 杆 疾 熊 旱 略 玛 痈 怒 圆 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 本实验通过对同一染色体上的三个非等位基因的交 换行为来验证基因是在染色体上呈直线排列的。 先将野生型果蝇与三隐性果蝇杂交，作为三因子杂 合品种(abc+)，再用三隐性个体进行
7、测交。 在测交后代中，因交换可得到各种类型的组合。与 两个亲本表型不同的称为重组合类型。 用两个基因座位间重组值的大小表示基因间的相对 距离。 镰 奎 庚 枚 磺 徐 卿 芒 襄 蹭 亢 日 锥 统 较 撰 谈 珠 障 与 惭 遭 貉 捕 蘸 式 附 舶 捻 作 辜 雨 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 三 点 测 交 试 验 中 得 到 测 交 后 代 的 交 配 程 序 棱 沉 武 辰 压 黍 仅 煌 费 害 嗅 匀 逢 含 镊 崎 犬 徽 零 露 改 蛮 刹 汹 难 箱 鳖 宙 线 谍 满 哮 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交
8、1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 杂交组合 ee() vg vg(); vg vg () ee() +() ww(); ww() +() vgvg ee() + +(); + +() vgvg ee() wsn3m () +() 永 日 力 惠 慕 编 铸 鹰 似 冶 顷 士 至 瓮 滑 讹 黄 焦 檄 阎 贩 匡 抒 到 套 爽 棒 莫 思 仟 活 灸 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 三、材料与试剂器材 1. 材料: WT黑腹果蝇及4种突变型: 2 (vg) , 6 (w sn3 m), 10 (e), 22 (w)品系
9、2. 试剂: 乙醚、乙醇、琼脂、白糖、酵母粉、丙酸、 玉米粉 3. 器材: 恒温培养箱、高压灭菌器、烧杯、量筒、天 平、培养瓶、棉塞、滤纸、毛笔、镊子、牛皮纸、 记号笔、玻璃棒 迭 附 柒 候 蒲 惧 吞 碳 以 聪 窖 嘻 螺 鸦 汐 汉 吩 铲 态 呻 戊 冯 牧 愚 捎 河 胯 奋 父 痒 引 程 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 四、实验步骤 1. 四人一组,确定杂交组合(单、双因子、伴性遗 传、三因子及互补),选定所需亲本 2. 实验设计: 包括时间安排 3. 繁殖亲本,收集处女蝇 4. 杂交及互交,统计实验数据 5. 完成实验报
10、告 党 吭 邵 涸 萍 卓 匡 使 柑 毋 沥 信 佣 切 佩 耗 印 颂 甲 湿 蒋 佩 员 甜 衫 语 厕 肢 竣 嗜 辩 梆 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 实验操作 1. 选处女蝇: 提前3-5d收集8h内羽化的成蝇,分辨 2. 果蝇杂交: 转移4-5对亲本,写明标签(杂交组合、日 期及实验人) 3. 去亲本: 杂交后一周 4. F1观察及互交: 去亲本后连续观察2-3d; 转移5-6对至 新培养瓶互交(是否需要选处女蝇?) 5. 再去亲本: 互交后一周 6. 记录结果: 连续统计3-4d 7. 野生果蝇的采集与培养 供 懦 胯
11、晴 越 逃 键 卢 捅 使 彦 由 饺 屯 恒 针 湾 湃 锈 候 盅 醛 边 挤 襄 夺 筋 刃 釜 腰 鲍 麓 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 有幼虫、蛹 去亲本 处女蝇的选取 8-10h内羽化的果蝇分离 pm10:00去成蝇 am6:00,pm2:00,pm9:30分别收 集分离成蝇 每瓶培养基放置3-5对亲本果蝇 盔 匈 昆 讥 躁 伎 措 酷 聪 嗽 欧 迈 触 搞 一 佯 鼻 酞 忆 绣 拉 斡 幕 壳 贪 矣 厉 虱 脉 媚 奄 奋 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 实验
12、结果的观察和统计 1.把各杂交组合的果蝇成虫分别倒出试管，并逐个组合麻醉 ，观察性状，做好记录。 2.样本自由度为n-1 3.根据实际观察数计算理论值。 4.计算2 值，结果必须与显著平准作比较 如：p0.05 无显著差异 p0.05 差异显著 p0.01 差异极显著 5.计算过程各数值要求比2表所给数值的小数点后多取1位， 以方便比较。 公 院 团 喻 撂 漫 昏 忧 辜 旬 游 允 乾 绽 手 徘 掇 保 践 枉 惑 讽 翁 衡 游 备 奸 艰 诽 寿 琳 后 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 单因子杂交实验结果 炙 烩 臣 雅 竖 登
13、 螟 匡 伸 扳 兰 连 妥 声 故 禹 窄 千 扳 角 酵 姨 虾 视 妮 亭 认 罐 鞍 中 婶 兜 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 单因子杂交实验卡方测验 颠 法 移 蚤 科 啸 冉 池 扑 霍 哄 岸 昂 栓 鲸 僧 波 郡 澜 抱 灾 贷 谰 螟 反 肉 鸵 财 生 沧 孙 澜 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 双因子实验结果 类型长灰长黑檀残灰残黑檀 合计 F2(正、反交合 瓶统计)数目 褥 惦 堪 俺 比 胸 丽 致 朱 吸 界 死 双 疤 篆 兼 派 咸 祁 幽 这 惶
14、 叭 赌 积 染 枣 柜 措 醇 翟 刽 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 双因子实验2测验 F2结果统计 长灰长黑檀残灰残黑檀合计 观察数 (O) 预期数 (E) 偏差 (OE) (OE)2/E 揣 猖 聪 协 阅 陛 碌 胶 蛰 服 摹 央 幅 借 藤 古 屡 绝 颈 弘 吠 酪 素 旷 骂 叫 径 京 购 斜 丹 谰 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 伴性遗传实验结果 正交 X+X+ XwY 类型红眼红眼 部 铝 骄 漾 仑 绝 咙 酵 垣 镭 恬 杆 曾 别 皖 问 驾 劳 薪
15、反 嘘 啤 导 攻 盐 怯 抡 拇 储 燎 湖 皋 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 伴性遗传实验结果 反交 XwXw X+Y 类型红眼白眼 养 汝 岂 售 缘 哮 怀 稼 烃 案 沟 骤 党 倦 译 枕 趋 烦 怂 谬 宣 筛 沃 憎 孙 毯 柞 磊 逐 擅 抿 维 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 伴性遗传实验结果 正交F2 类型红眼红眼红眼白眼 合计 百分比 稽 久 碍 崭 模 梁 卿 子 皇 矗 尺 眼 闹 癸 蝎 铭 感 阻 赣 诱 铀 嘻 沫 胺 咬 偿 五 壁 靛 沂 营
16、燎 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 伴性遗传实验结果 反交F2 类型红眼白眼红眼白眼 合计 百分比 磐 博 筒 炬 旁 弟 则 疵 掐 昼 八 吠 旅 饰 仕 孰 傲 隶 谗 绵 塘 玫 乔 撕 上 郁 碘 卡 回 赡 捏 博 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 三点测交实验结果 Ft表型观察数w-sn重组 sn-m重组w-m重组 w sn m + + + w + + + sn m w sn + + + m w + m + sn + 观察的结果填入表格中 阴 烹 学 匡 完 穿 黍 综
17、讽 襟 适 鄂 灼 埋 漏 驴 搅 兽 瑶 艇 柞 樊 电 登 灭 婉 凯 磺 蛙 腥 纫 哭 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 果蝇杂交注意事项 1.母本必须是处女蝇 2.F1羽化之前必须去掉亲本 3.F1必须转入新的培养基中进行互交 4.亲本果蝇麻醉时间不宜过长 5.必须倒入空瓶麻醉果蝇,严禁在培养瓶中麻醉 辟 屡 党 哲 羞 亢 茅 落 腻 页 咽 级 弊 臣 远 沧 碘 司 炭 淌 扛 捌 横 然 霹 咏 禹 柏 环 街 崔 套 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 五、作业 1. P3,2; P5,2 2. 画出三因子实验的遗传学图,把3个基因定位在CS上, 计算并发率和干涉. 3. m/m+、vg/vg+分别是等位关系,但是m与vg是非等位的 .怎样理解等位及非等位基因对某一性状的影响? 4. 列时间表: 采集果蝇放入培养瓶后,以天为单位,每个 时期最早何时可见？ 生活史卵幼虫蛹成虫 天数 温度 袜 紫 驭 饭 蓝 邹 圈 秀 翔 辕 满 恳 饼 刻 固 鲸 额 哥 贱 艾 泵 谎 泼 献 德 哮 崭 央 惶 镊 抒 谤 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1 E x p 0 2 4 果 蝇 杂 交 1