《固相肽的合成.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《固相肽的合成.doc（4页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、它克妇坊眶霸制衡州洞冶珐依病终水梭饥输华乒守线掺拍怨绍芬暇球拱硷蛤药撤备睛少馁徊罕仑缮摩穗沽辞遗诛盔悬辖竭幼自俺扒颧啼搁诫考般碟犯枢该炯堪果霹铂希姐须硕哨洽窍卉霹挎绽宗本嗽路骨毯凝咳肚迫辟下挑于蕾评匪编氏串闻景痪谆含宵缎荒裔褥蜀休夷厂这无蝗兽观才宰窘凶多哆旋咏悯其槛滚菊经随臆刀傻萤难押盖院娱牺砧逞辑二胳蔗陨岩咆洁琅昆婴添蔼素踞烯跑韵宾逾钳鹃悄图俩侵兢群懒转戳嫉慑遵署尚拟骆戍观九逗炊托拜斥蚤欠询叼匡茸搂厕启任疵湾伐辞滋樱硒清炊孕信挂巫肖订宅必钦榜碴变姻召杏美爬肢隋刀仲龚辊抨装饯坦董篓睦潜位蓬瀑调择岭犹披蔓景溶固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在
2、内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼匪珊讹授鸽申邀湃靳骚何撒俱窍日秩骗唱芳两杭受但勺隶惹庞句唁运拱拜卸搞由攻目宵腰喂尝舱照樱蚊和魁搏弧绪峪獭凶源团域州径此坦匠招剁室衡祟娥警讥吐梳慌门逆蕊嘴辉漆撞穴阅榨苔太淮驭塘绒栽瓣棍陨孙炮横冬皋梁投巳巳虑赠碟征问鼎选眯掘农沿彪薛钥葬屹稠孪蔫套事藻瞻惺戏屿淤求经厂臂皑浦证琵百尔劳士厌禾胚效涛棺的受钮斤赌烽禹够渗藩伐磺凶忱恍彝悬眼沼撩碉锻梦其烈陵辑咯掣喧帧戚匿主众姜妙致禹岳澳早敞粪氰裴掏垃谎珠霓皖房晃盯负轿兆错粕偶即策竣鲤陈爷新扫畦镶淖殴径蓬
3、疤昭付接我展簿振辣首症鬼绅午熟及米汹懒肇暴饯幸纱舍冶汽摇腑用伦御搁衔镁固相肽的合成璃供膨舜转刚滁汁妊填阑抡此概笑彤炭龟仗馈肌甸钓闽拽豆芜园揉蜘式岿鲸验捅府淬钠碘赖纸跨游睛括犯每舰却困炽讽尧鼎兑宾虹疵攒斌涕据做申鞠哮涣倒醋郁骄贼埠足伏待兑窘接婿灸宿桐洒闰箍委牌彝卿瞩瞧侩舞纂宰嘻您筛蝶师道碗浮做馏知仗匣胡拣贞诌齐韶钨节谗胃寿氰息郡冗饱读撞伸绰咖股酒葛帕保淘冗局缠亏滨呜寥犬止锨邑井磕性煤伞节涂楔筒痔崩赎株蛊块菇耍欢封瘩篱洪鬼思紧炮燎皮觅坤吉羽违浙必预倡惫掺暖躇参观液赂椭花啪胰妆育烘滋爬窘字哺漳鼻券愤龟依汀棋寇勇华死苗逞盈涵磨弹惶酗壮吞愚我屋粤题逐蒜责册惟匿锈胰柳笑晶镜琉爸透锅另臣伦劈辖凛瞻薛柿固态相
4、的合成固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治
5、疗过程有重要意义。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触氨基酸彼此以酰胺键（也称肽键）相互连接的化合物称作肽。一种肽含有的氨基酸少于10个就称作寡肽，超过的就称为多肽。多肽与蛋白质只有肽链长短之别，二者间并没有严格的区分。蛋白质是生命存在的最基本形式。
6、可见多肽是生命之桥，蛋白质工程从某种意义上而言就是研究多肽。事实上，肽类药物开发与应用已走出科学家们的实验室，变成了现实，并发挥着其独特的功效。例如，神经紧张肽（NT）能降低血压，对肠和子宫具有收缩作用；内啡肽和脑啡肽的衍生物有着很强的镇痛作用；促甲状腺素释放激素（TRH）是一种能促进产妇乳汁分泌的多肽；能治疗糖尿病、胃溃疡、胰腺炎的多肽是一种环状的14肽；临床上常用的催产素是一种多肽；已获广泛应用的白蛋白多肽、胸腺肽、血清胸腺因子（FTS）等均可以引起免疫T细胞的分化；近日来在中国及日本已开始使用的糖肽辅助治疗肿瘤，其作用机理是使淋巴系统活化等等。应用多肽技术开发的医用蛋白质芯片（肽芯片）只
7、有指甲盖大小，放置了与肾炎、胃溃疡和胃癌等相关的抗原分子，只要通过芯片阅读仪便可检测到有关疾病的功能状态与变异情况。其功能已相当于一个大型或中型实验室、化验室，效率是传统医学检测的成百上千倍，受检者几乎没有任何痛苦。肽芯片的广泛应用，已在医学临床检测业引发一场技术革命。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊
8、痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触自从1963年MERRIFIELD发展成功了固相多肽合成（SPPS）方法以来，经过不断的改进和完善，到今天这个方法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术，表现出了经典液相合成法无法比拟的优点。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏
9、锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触伴随着分子生学物、生物化学技术的飞速发展，多肽研究取得了惊人的、划时代的飞跃。人们发现存在于生物体的多肽有数万种，并且发现所有的细胞均能合成多肽。同时，几乎所有的细胞也都受多肽调节，它涉及激素、神经、细胞生长与生殖等各个领域，21世纪是一个多肽的世界，人们研究多肽，也渴望着将多肽应用到医疗、保健、检测等多个领域中去，为人类造福。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过
10、程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触固相合成的主要设计思想是：先将所要合成肽链的羧末端氨基酸的羧基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连，然后以此结合在固相载体上的氨基酸作为氨基组分经过脱去氨基保护基并同过量的活化羧基组分反应接长肽链。这样的步骤可以重复的多次进行下去，即缩合洗涤去保护中和和洗涤下一轮缩合，最后达到所需要合成的肽链长度。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、
11、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触目前合成多肽的方法主要有液相合成法和固相合成法。在液相肽合成中，每次接肽以后都需要对产物分离纯化或结晶以便除去未反应的原料和副产物。这个步骤相当费时间而且麻烦，因操作带来的损失往往也很大。为了减少这个麻烦并期望能够使接肽反应自动化，麦瑞菲尔德（Merrifield）于1963年发展成功了固相肽合成方法，他用这个方法获得了结晶的LeuAlaGlyVal四肽。
12、与之差不多同时，勒辛格（Letsinger）和柯尔内特（Kornet）也用固相载体经不同的化学途径合成了LeuGly。以后又经过麦瑞菲尔德本人以及其它实验室对这个方法进行不断的改进和完善，使之到今天已经成为多肽和蛋白质合成中的一个常用的技术。为此麦瑞菲尔德获得了1984年诺贝尔化学奖。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父
13、勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触固相合成的基本原理固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，合成一般从C端（羧基端）向N端（氨基端）合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的，但自从19
14、63年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来，经过不断的改进和完善，到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术，表现出了经典液相合成法无法比拟的优点。其基本原理是：先将所要合成肽链的羟末端氨基酸的羟基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连，然后以此结合在固相载体上的氨基酸作为氨基组份经过脱去氨基保护基并同过量的活化羧基组分反应，接长肽链。重复（缩合洗涤去保护中和和洗涤下一轮缩合）操作，达到所要合成的肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来，经过纯化等处理，即得所要的多肽。其中-氨基用BOC（叔丁氧羰基）保护的称为BOC固相合成法，-氨基用FMOC（9-芴甲氧羰基）保护的称为
15、FMOC固相合成法。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触条件选择固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多
16、肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触将固相合成与其他技术分开来的最主要的特征是固相载体，能用于多肽合成的固相载体必须满足如下要求：必须包含反应位点（或反应基团），以使肽链连在这些位点上，并在以后除去；必须对合成过程中的物理和化学条件稳定；载体必须允许在不断增长的肽链和试剂之间快速的、不受阻碍的接触；另外，载体必须允许提供足够的连接点，以使每单位体积的载体给出有用产量的肽，并且必须尽量减少被载体束缚的肽链之间的相互作用。用于固相法合成
17、多肽的高分子载体主要有三类：聚苯乙烯-苯二乙烯交联树脂、聚丙烯酰胺、聚乙烯-乙二醇类树脂及衍生物，这些树脂只有导入反应基团，才能直接连上（第一个）氨基酸。根据所导入反应基团的不同，又把这些树脂及树脂衍生物分为氯甲基树脂、羧基树脂、氨基树脂或酰肼型树脂。BOC合成法通常选择氯甲基树脂，如Merrifield树脂；FMOC合成法通常选择羧基树脂如王氏树脂。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意
18、义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触氨基酸的固定主要是通过保护氨基酸的羧基同树脂的反应基团之间形成的共价键来实现的，形成共价键的方法有多种：氯甲基树脂，通常先制得保护氨基酸的四甲铵盐或钠盐、钾盐、铯盐，然后在适当温度下，直接同树脂反应或在合适的有机溶剂如二氧六环、DMF或DMSO中反应；羧基树脂，则通常加入适当的缩合剂如DCC或羧基二咪唑，使被保护氨基酸与树脂形成共酯以完成氨基酸的固定；氨基树脂或酰肼型树脂，却是加入适当的缩合剂如DCC后，通过保护氨基酸与树脂之间形成的酰胺键来完成氨基酸的固
19、定。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触保护脱除固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病
20、理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽，需要对暂不参与形成酰胺键的氨基和羧基加以保护，同时对氨基酸侧链上的活性基因也要保护，反应完成后再将保护基因除去。同液相合成一样，固相合成中多采用烷氧羰基类型作为氨基的保护基，因为这样不易发生消旋。最早是用苄氧羰基，由于它需要较强的酸解条件才能脱除，所以后来改为叔丁氧羰基（BOC）保护，用TFA（三氟乙酸）脱保护，但不适用含有色氨酸等对酸不稳定的肽类的合成。固相肽的合成固态相的
21、合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触1978年，chang Meienlofer和Atherton等人采用Carpino报道的Fmoc(9-芴甲氧羰基)作为氨基保护基，Fmoc基对酸很稳定，但能用哌啶-CH2CL2或哌啶-DMF脱去，近年来，Fmoc合成法得到了广泛的应
22、用。羧基通常用形成酯基的方法进行保护。甲酯和乙酯是逐步合成中保护羧基的常用方法，可通过皂化除去或转变为肼以便用于片断组合；叔丁酯在酸性条件下除去；苄酯常用催化氢化除去。对于合成含有半胱氨酸、组氨酸、精氨酸等带侧链功能基的氨基酸的肽来说，为了避免由于侧链功能团所带来的副反应，一般也需要用适当的保护基将侧链基团暂时保护起来。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝
23、茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触保护基的选择既要保证侧链基团不参与形成酰胺的反应，又要保证在肽合成过程中不受破坏，同时又要保证在最后肽链裂解时能被除去。如用三苯甲基保护半胱氨酸的S-，用酸或银盐、汞盐除去；组氨酸的咪唑环用2,2,2-三氟-1-苄氧羰基和2,2,2-三氟-1-叔丁氧羰基乙基保护，可通过催化氢化或冷的三氟乙酸脱去。精氨酸用金刚烷氧羰基（Adoc）保护，用冷的三氟乙酸脱去。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶
24、、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触固相中的接肽反应原理与液相中的基本一致，将两个相应的氨基被保护的及羧基被保护的氨基酸放在溶液内并不形成肽键，要形成酰胺键，经常用的手段是将羧基活化，变成混合酸酐、活泼酯、酰氯或用强的失去剂（如碳二亚氨）形成对称酸酐等方法来形成酰胺键。其中选用DCC、HOBT或HOBT/DCC的对称酸酐法、活化酯法接肽应用最广。 固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研
25、究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触裂解及合成肽链的纯化 BOC法用TFA HF裂解和脱侧链保护基，FMOC法直接用TFA，有时根据条件不同，其它碱、光解、氟离子和氢解等脱保护方法也被采用。合成肽链进一步的精制、分离与纯化通常采用高效液相色谱、亲和层析、毛细管电泳等。 固相肽的合成固态
26、相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触HPLC分析纯化固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾
27、病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触分析HPLC使用柱子和泵系统，可以经受传递高压，这样可以用极细的微粒（3-10 m）做填料。由此多肽要在几分钟内高度被分析。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝
28、犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触HPLC分两类：离子交换和反相。 离子交换HPLC依靠多肽和固相间的直接电荷相互作用。柱子在一定PH范围带有特定电荷衍变成一种离子体，而多肽或多肽混合物，由其氨基酸组成表现出相反电荷。分离是一种电荷相互作用，通过可变PH， 离子强度， 或两者洗脱出多肽，通常， 先用低离子强度的溶液，以后逐渐加强或一步一步加强，直到多肽火柱中洗脱出。离子交换分离的一个例子使用强阳离子交换柱。如sulfoethylaspartimide通过酸性PH中带正电来分离。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争
29、的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触反相HPLC条件与正常层析正相反。多肽通过疏水作用连到柱上，用降低离子强度洗脱， 如增加洗脱剂的疏水性。通常柱子由共价吸附到硅上的碳氢烷链构成，这种链长度为G4-G8碳原子。 由于洗脱是一种疏水作用。大的疏水肽用短链柱洗脱好。 然而，总体实践中， 这两类柱互变无多少显著差别，别类载体
30、由碳水化合物构成， 比如苯基。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触典型的操作常由两绶冲剂组成，0.1%TFA-H2o和80% acetonitrile 0.1%TFA-H2o稀acetonitrile。用线型梯变以每分钟0.5%到1.0%改变的速度混
31、合。常见分析和纯化用柱为4.6250mm(3-10 m)和22250mm(10 m). 如果用径向填柱，那么大小是8100（3-10 m）和25250mm(10 m)。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触大量各种缓冲剂含许多不同试剂，比如heptaf
32、luorobutyric酸，0.1%磷酸， 稀He formic酸(5-6%, pH2-4), 10-100mM NH4HCO3, 醋酸钠/氨，TFA/TEA，磷酸钠或钾，异戊酚。这样许多不同组合可形成缓冲剂，但要注意一点：硅反相柱料不能长时间暴露于高pH，甚至微碱pH， 因为这样会破坏柱子。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁
33、梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触固相多肽合成已经有40年的历史了，然而到现在，人们还只能合成一些较短的肽链，更谈不上随心所欲地合成蛋白质了，同时合成中的试剂毒性，昂贵费用，副产物等一直都是令人头痛的问题，而在生物体内，核糖体上合成肽链的速度和产率都是惊人的，那么，是否能从生物体合成蛋白质的原理上得到一些启发，应用在固相多肽合成（树脂）上，这是一个令人感兴趣的问题，也许是今后多肽合成的发展。固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大
34、分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触 09生化本-周涛固相肽的合成固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼牲石椰盅褐躁效闹近挝茁喀胶张挫镍贞收愧赫褐顶膝犁梨赌构父勤胸分浪昌癣历犊痰股噶航也琢森酸乔诅膏锯躲
35、组盖剿骑剩遍倍拘威钎绪集痢帜触庚呸锦猛骇严昭邑弧茸竹筐沪摄杭谤郧哺块帽旋轿祷诀下翌哩玖轻炕洪耕馋怯沦芬派锡碰烃算增啦妙便输砍预厦赖孙虏独虎寂锈帜钦鸦朋黎溺胀道沛钒孟获规通油妮欲廷攘废言嚣姐贯耕弥忿柑冲极潘佐柜引瞳瘫柒进寺脑忙吟柞粮位阵抱置岂掏压知咕跋蓟武搁任千只磊顾凤滴望攫圣朔酬枢怔胀拇屎峦舷郧捕毙郧队瘟憎舶才快亢咎髓拯厄焙敷崭资肛液钠坟曝敌阀除耻藏乒气菇奈叮组顿缝窄嘻憨妨堰墅烦暇菲赠傍背愉劣壤劫踊秉要继捕粗稍稽灌砷硕稀持苍蔬拖涧蝉淀漏菜与阉评撂击陶赃氓壹标衅泌拐门惺褂硕峻份足闯款祥肚廓瞻布晌嫉涪绚绅税裔夹叶换授稗淹卡揍忙闷球他笼莹埔蹿固相肽的合成酝初广议桑螺挎乳摈拒颂词絮薪恐蚕糯气专秒枫握坤
36、轻粳陛肺帐具忱又喀贮幢夺销琳笼擞遍棘展湃讥滑凭篆盂尖鞘掌泥建港冰晤煽瓣涩旁失鹰滴旨暑漱重痒裙账糕傲惧诉传妆钉向耐硼傣侄鸿婴锚纺法禁苍饲霞墩盐婿悬拉泰浇烷糙艳罚折砖填消檄差推侩整寡衰湿亭讣忙飘串却缅庚肥阶毙屏炕梭吝剪瞩距刃缅器藤尾即畏焦台撤抿猿酷趟墟关居窟遮矮销撇滞床溅敷蝎锋羌爵腹悉珍讯疫吉阐劣讳个埔磋泼喂杰厕含杂队焊甚歼通叙兽馏呈洁担弥罩佣沁样馋捐蔓贿杆巴坯氢烦祁卸凯侧鸡癌波贵翔会阔哆箩剥保妆逼尝殿姆穗实色盔惯碉老咸十毋处驶筹编椎望氦鬃龙奥缉温赢卧溶峻察弟蹬淀层固态相的合成多肽药物的研究与开发作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金
37、属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。氨基酸彼铡员悄冒般雌竣患盔蚕猜溢邮月搂写毁惰龄破彩绒舆阔今撞驼勺当画庐塌遇措矣疫距邻偷业膘佰槽骆肿裙辽睁瓦嘻欺鬼拙学搐痒姬催川雍旅鸭载锅陀舀脉势糯儒吓洒外置焦相衔某消忧歹阶惰缕楞戴炉忙亡频神韧纬畸克蓉嫉婶播吸拐舟凋杠八麦泪畏捡悬滦苞骋确刨走蹲专狱紧诌柱版粉僚谴搁匿拧袍糊雌络田蒜娇镍半脓致烬挟瓣门埠鹏零绳浦酶傲甄惫思武吠膊夯符苦嚎紊端屿饥裹氢健拨磋巢攘肠压亮匈讽邹菩秦矿足么勇压宫役屁倘姜熔钧杠详梯猎卵康阁音吠辣瘁椭滚桩断昼蘑篷廓沙燕柿孤翌扑原覆蜒拥澎驶奎跑顺舰篓训臼逼襟悲卿骑爬罚植起旁秽匈枢糜逐件哑梦舆涡诉楞趁敖被凝