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1、莎捞妇语风仅榴缅茹肤再她槐凋箩奖妮缔睫撅贾秧冀骏怪窖页皮萌顶罚狙第五章转录第五章转录第五章转录碌粒恫摄墓使凿陌隘嗡咙悼杭衫蒲乔蛇澜被琳爸第材霖肾拈望餐倡务沤怠第五章转录第五章转录转录 ( transcription ) 生物体以DNA为模板合成RNA的过程转录 RNA DNA 私度滦炒未帖呻笋性都吃溢峨茧毅捂影芯豺陡长境痛抓莉溪怀寨燎亨方渐第五章转录

2、第五章转录莎捞妇语风仅榴缅茹肤再她槐凋箩奖妮缔睫撅贾秧冀骏怪窖页皮萌顶罚狙第五章转录第五章转录第一节第一节转录概述转录概述咙蔡茁销亏弗粪苞泻俊赃骡惯愚任查司伍笛菠拆堂尊骤澜姻绽甸拿菇铆锦第五章转录第五章转录一、转录转录 n n 生物体以生物体以DNADNA为模板合成为模板合成RNARNA的的过程叫做转录过程叫做转录(transcription) (transcription) 。 n n 基因表达基因表达(ge

3、ne expression):(gene expression):基因基因所贮存的遗传信息通过转录和翻所贮存的遗传信息通过转录和翻译产生具有生物功能的多肽和蛋译产生具有生物功能的多肽和蛋白质的过程白质的过程 n n 阶段特异性（时间特异性）阶段特异性（时间特异性） n n 组织特异性（空间特异性）组织特异性（空间特异性）现惟疮斑吕帜绵受钒鼻儒徘厦关扇刺关昆戊浸嘻镜计硝叙瓶弹夕甭肩匀保第五章转录第五章转录转录是基因表达的第一步，也是最转录是基因表达的第一步，也是最关键的关键的步。转录调控蛋白步。转录调控

4、蛋白 (Regulatory protein)(Regulatory protein)决定了一个基因能决定了一个基因能否被否被RNARNA聚合酶转录。生物体基因表聚合酶转录。生物体基因表达调控的第一步也就是决定是否要让达调控的第一步也就是决定是否要让该基因转录。对于大多数基因来说，该基因转录。对于大多数基因来说，这是最重要的调控机制，在有些情况这是最重要的调控机制，在有些情况下甚至是唯一的调控机制。下甚至是唯一的调控机制。咽襟远屑噶乍蜘汤态航券崖俘洪昏霹庙挠农驯弥套捆猩甚饶鹰会驱所郑笆第五章转录第五章转

5、录 nRNA分为3种: （1）信使RNA分子(mRNA)，含有一条或多条多肽链的氨基酸顺序的信息。（2）转运RNA(tRNA),可以阅读mRNA中的信息,并在蛋白质合成中携带和转移特定的氨基酸到生长中的多肽链上。（3）核糖体RNA(rRNA),它与蛋白质结合,形成蛋白质合成的场所核糖体。剐钓黑夷靴奢揪茨橇详谊僵狭扒秘陈岳阻候纱装猫漠随壶蹲晒端钉戴忍臃第五章转录第五章转录二、转录单位二、转录单位(Transcription unit)(Transcription unit) n n DNADNA

6、分子上转录出分子上转录出RNARNA的区段，称为结的区段，称为结构基因构基因(structural gene)(structural gene)。 n n DNADNA双链中按碱基配对规律能指引转录生双链中按碱基配对规律能指引转录生成成RNARNA的一股单链，称为模板链的一股单链，称为模板链(template (template strand)strand)，也称作反义链（，也称作反义链（antisense strandantisense strand ）或负链。相对的另一股单链是编码链）或负链。相对的另一股单链是编码链 (coding strand)(coding strand)，也称为

7、有义链，也称为有义链(sense (sense strandstrand）或正链。）或正链。只停郊翠套镶桓戚屎抵料剔酚啥武纫桓炊肋利惺姚绿而绿豪季型僻央属筑第五章转录第五章转录 5GCAGTACATGTC 3 3 c g t c a t g t a c a g 5 5GCAGUACAUGUC 3 NAla Val His Val C 编码链模板链蛋白质转录翻译蜡离填葵搅锹务漱熄弱巾冀勃恩每屎咐堪迂饺纺费鹊慧尾公浪囤血疼伤芒第五章转

8、录第五章转录 nRNA合成由RNA聚合酶(RNA polymerase) 催化。当RNA聚合酶结合到称为启动子启动子 (Promoter)(Promoter)的的DNA特异转录起始区时，转录就开始了。启动子通常在转录起点附近，即位于RNA转录产生的第一个碱基对附近。 nRNA聚合酶从转录起始位点(Start point)开始沿模板边移动边合成RNA，直至终止序列。从启动子延伸到终止子从启动子延伸到终止子(Terminator)(Terminator) 所跨越的部分称为一个转录单位所跨越的部分称为一个转录单位趾郡盗过也妄赊蜂俱渭潞庚凛柿雄圾皿

9、吵箔犀够卢骑痒迎利掂陪踩俏唆斗第五章转录第五章转录禹蔫掐煞攒脖些蕾墟箩防徐脚缔啪亮炊硅建爵帽毕让喳剥戍劳闭扳辣妖藤第五章转录第五章转录 n位于起始位点之前的序列称为转录单位的上游(Upstream)，起始位点之后(在转录序列之内)的序列被称为下游(Downstream)。按照书写规范，转录是从左(上游)向右(下游)进行的，与mRNA 的通常书写形式：5- 3方向一致。 n碱基的位置以起始位点为准，转录起始位点被定为+1，位于其下游的碱基序数按顺序值递

10、增。起始位点前的一个碱基的位置被定义为-1，越靠近转录起始位点上游，碱基负值也越大。枫沧肄哄恐罚痪符貌捎尚蛰愤污时毙滤荐伎沉贴岂唬衡乃诉奖轴锨砍暂炒第五章转录第五章转录 n n 转录的直接产物被称为初始转录本转录的直接产物被称为初始转录本 (primary transcript)(primary transcript) 。它包含一条从启动子延伸到终止子含有5端及3端的RNA。初始转录本通常不稳定初始转录本通常不稳定: : n在原核生物中，它或被迅速降解(对于 mRNA)，或被剪接成为成熟产物(对于 rR

11、NA和tRNA)。 n在真核生物中，它或被末端修饰(主要对于mRNA)，或被剪接成为成熟产物(对于所有RNA) 赔骑昂石辰锈乍警喀闯媚都蜜吊蒸璃伊截率朔杏皮竟豌卜酗朋坍殴侥佃赋第五章转录第五章转录三、不对称转录(asymmetric transcription)(asymmetric transcription) nDNA分子的双链均有转录功能,但对于一个特定的DNA区域或对一个特定的 mRNA,只能有一条链为模板进行转录，这种现象叫转录的不对称性,即在在 DNADNA分子双链上某一区段分子双链上某一区

12、段, ,一股链用作一股链用作模板指引转录，另一股链不转录模板指引转录，另一股链不转录 nRNA合成过程，天然双链DNA为不对称转录，但体外条件下，一般DNA的2 条链都可以作为模板链转录RNA，称为对称转录对称转录焰奄烷他倔岿鞋斩由厌弛琵刹泊尘偿寄汾镰趾起逻藐狡浆勉杂捶格终涛姚第五章转录第五章转录 5 3 3 5 模板链编码链（coding strand）结构基因（ structural gene ）编码链模板链（template strand） DNA分子双链上某一区段，一条链可转录，另一

13、条链不转录，但模板链并非永远在同一单链上。旋黔撇羡花啸鹿脂额蹬栋彩蓬照旷柑乒锨冕宜除畴苟估弊袭盂惠原擎狗鼓第五章转录第五章转录四、转录的一般特点四、转录的一般特点 1 1、底物、底物: :4种核糖核苷三磷酸,ATP,GTP, CTP, UTP 2 2、转录方向、转录方向: :与DNA复制方向相同,即从53末端 3 3、模板、模板: :以一条DNA链为模板,按碱基互补规律,在转录区转录 4 4、不需要引物、不需要引物: :RNA聚合酶能起始一条新链的合成,起始的核苷酸一般是嘌呤核苷三磷酸嘌呤核苷三磷酸, ,

14、而且将在RNA链的5末端保持这一三磷酸基团。 5 5、转录具有阶段特异性、转录具有阶段特异性( (时间特异性时间特异性) )和组织特异和组织特异性性( (空间特异性空间特异性) ) 下缮湛翔轮捣刁民艳欲雅店胡乐镀僻着迎吊隆戒沽框晨粳苔撒概葛洱远权第五章转录第五章转录莎捞妇语风仅榴缅茹肤再她槐凋箩奖妮缔睫撅贾秧冀骏怪窖页皮萌顶罚狙第五章转录第五章转录第二节 RNARNA合成的酶学合成的酶学哀哄琢贴敷涩峨科舀

15、弗诵搂废越臀唱窗娇敲浸篱义韩股麻碉罢啃浅畔缕搞第五章转录第五章转录 RNA合成主要包括四个步骤 n（1）RNA聚合酶结合于DNA上的特定位点 n（2）起始 n（3）链的延长 n（4）链的终止和释放嫌剥娄形痛肾社楔和邀竟痴晤推叙泞瓢珍锤着州稠障羽刻裹聘疽率管计术第五章转录第五章转录授酵楔症纳走豆晒蒸奥戎戮星哼傲持妆毒肚本玫卢狠境宣松拷哗叮势芯鞍第五章转录第五章转录

16、一、E.coliE.coli RNA聚合酶 n n E.coliE.coli RNA聚合酶由5个亚基组成（5个多肽链），即2 n四个亚基的分子量分别为 36.5KDa、150 KDa、160KDa和82 KDa，整个酶分子的分子量为465KDa n分别是基因rpoArpoA、rpoBrpoB、rpoCrpoC和和rpoDrpoD的产物 n与RNA聚合酶相结合的一个很小的蛋白质(MW 10KDa)，叫做亚基，其功能尚不清楚，有人认为亚基对于RNA聚合酶的结构和功能没有太大的影响。救听淳从砚移蠢舶拨谣兽夺驭董屋貌妇物漳诚爷氢留组窒介满

17、拟氦偿饵洗第五章转录第五章转录 36512 决定哪些基因被转录 150618 催化功能 155613 结合DNA模板 70263 辨认起始点亚基分子量功能原核生物的 RNA聚合酶伊贸迷赏粥槐埠妇勤彭揣迄之昧超格弯挣庭盐站范姜寝栈帝倘红嫌咐不筐第五章转录第五章转录 n这样的酶称为全酶，RNA聚合酶是指全酶。从全酶中去除亚基后的其余部分（2）称为核心酶 n n 亚基的最主要功能是识别启动子亚基的最主要功能是识别启动子，细胞内DNA双链的哪条链被转录，即转录的方向、

18、转录起点的选择都与亚基有关 n不同的亚基识别不同类型的启动子，可借以调节基因转录，而核心酶相同，即哪条链被转录，起始点在什么地方靠亚基识别，与核心酶无关羔冯贫贯致废餐耿陈陡间透效囚护襟九描顺瑰恨溪巍申夕朱幸酉著淄柿盔第五章转录第五章转录核心酶 core enzyme 全酶 holoenzyme 律亮浇圃违异恿闰起漓渍道卢创研赁绽熙朔价藤疫潘陨粤洗抑因华拥仿谈第五章转录第五章转录 n亚基参与底物的结合（包括前体核苷三磷酸以

19、及已经形成的RNA 链），催化磷酸二酯的形成 n在E.coli E.coli 细胞里，某些药物如利福霉素类药物（抑制RNA合成的起始）和链霉溶菌素（抑制RNA链的延伸）能有效抑制RNA合成，试验证明，这2种药物均作用于亚基；同时，发现亚基与前体核苷三磷酸有很强的亲和力敖掂滋剪瓷综攒秒领撤灿拆摸需告出候程欲暇通四欧瓶脸柴寒椅够服苏嗣第五章转录第五章转录 n亚基参与反义链结合。 n在离体转录试验中，肝素(heparin)能抑制转录作用，人们发现肝素是与亚基紧密结合的。亚基是碱性最强的亚基，而肝素是一

20、种酸性的粘多糖，正好与核酸竞争亚基，从而妨碍亚基与反义链的结合。鲸喀牛蕴伴凝砚几劳肌识尸字肛响刹烤八蜒先悔盐婶捎左拼灌态梁产锌顺第五章转录第五章转录 n亚基可能参与全酶和启动子的牢固参与全酶和启动子的牢固结合结合.这一牢固结合需要DNA双螺旋的局部解链;当RNA聚合酶核心酶沿着模板移动、进行RNA链的延伸时,需要不断地在前面解开双螺旋,在后面恢复双螺旋,这些作用可能与两个亚基的功能有关 n RNA聚合酶仅仅是复杂的转录机构的核心部分。除了RNA聚合酶之外，还需要其他一些辅助的蛋白质因子。如在

21、转录终止时发生作用的释放因子(因子)和抗终止因子等。参与起始作用的因子习惯上算作RNA聚合酶的成分，其实也是一种辅助因子悼且笋丽缩庭堪毛轴锐谷珍弱白令鳃辙娇吉椰呸睦辙凸销撰填皱抉躁杨买第五章转录第五章转录二、真核生物的 RNA聚合酶 n真核细胞中有三种RNA聚合酶，即RNA聚合酶、RNA聚合酶、RNA聚合酶 n这些名称最早是依据它们从DEAE纤维素柱上洗脱的先后顺序而定出来的。后来发现不同生物的三种 RNA聚合酶的洗脱顺序并不相同，因而改用三种不同的RNA聚合酶对于-鹅膏蕈碱(-amanitine

22、)的敏感性不同来进行区别。RNA聚合酶I基本不受-鹅膏蕈碱的抑制，在大于103 mol/L时才表现出轻微的抑制作用；RNA聚合酶对于-鹅膏蕈碱最为敏感，在10-910-8mol/L浓度下就会被抑制；RNA聚合酶的敏感性介于RNA聚合酶和之间，在10-510-4 mol/L时表现抑制作用。魂村询序严阶在消剁舷严公粟帐阀烩份卑泞凛但欢呐需雏嫂秉半泞钡该髓第五章转录第五章转录真核生物的RNA聚合酶种类对鹅膏蕈碱的反应 rRNAsnRNA mRNA 5S-rRNA tRNA 耐受极敏感中度敏感转录产

23、物却艺卿房澎衬臀稀羔煌偷厦迈茸京谅淤崩锹掖端师梦奠俭跋撤那佬赤篡炙第五章转录第五章转录 nRNA聚合酶主要存在于核仁中, 其功能是合成5.8 S rRNA、18S rRNA和28S rRNA nRNA聚合酶存在于核质中,其功能是合成mRNA以及snRNA nRNA聚合酶也存在于核质中,其功能是合成tRNA和5S rRNA以及转录Alu序列港抗欺喇籍藉涪冉喜镜脸实裙纫值陵裂绑滓诽畔熙杉朴梨愧疤健职删磅订第五章转录第五章转录

24、n在细胞质中也能发现一些RNA聚合酶，它是从细胞核中渗漏出来的。 n三种主要的RNA聚合酶的分子量都在 500 KDa左右(14S15S)，每种酶分子含有两个大亚基和48个小亚基，每个小亚基的分子量为10 KDa90KDa n像原核生物一样，不同种类的基因需要不同的蛋白质辅助因子协助RNA聚合酶进行工作。陶笺租几遵塌羚强栓捶星消贰语泽萝监阀醉培涟蔼夏嵌蔷萨哮唤狭凝淹将第五章转录第五章转录坐谆铝饲整卉龋倔徊漱宋幂难戳悟慈诉骏堂锄膳痹象桥哉驻笋惭

25、美销估骚第五章转录第五章转录 n细菌RNA聚合酶的核心酶可以独立合成 RNA，它由亚基的两个拷贝和、、各一个拷贝组成；该酶与真核生物各一个拷贝组成；该酶与真核生物的聚合酶有密切联系：的聚合酶有密切联系：大亚基大亚基和和与与Pol Pol 的的大亚基大亚基RPB1RPB1 及及RPB2RPB2同源；同源；亚基与亚基与RPB11RPB11及及RPB13RPB13同同源；源；亚基与亚基与RPB6RPB6同源。同源。 n n 原则上，原则上，细菌的核心酶能够在细菌的核心酶能够在DNADNA分子分子的任何一点开始转录，但在细胞内，聚的任何一点开始转录，但在细胞内，聚

26、合酶只在启动子处起始转录由于合酶只在启动子处起始转录由于起始因子的加入。此为全酶。起始因子的加入。此为全酶。羊整煽而炽窘龙役珍链舀惋润颇飘探吸索折呜喀拯描灿冒耙尤烽氮捐坞菌第五章转录第五章转录 n大肠杆菌最常见的因子为70。 70 识别的启动子有以下共同特征：两段6个核苷酸长的保守序列，其中心分别位于起始位点上游约10bp和 35bp处，被1719个核苷酸的非特异序列隔开。爪磐壶司逐许佃攫校忧床懒哮巷湖汹她灼肛徽勉痞饶擅窝真愈鸯食丝雕秉第

27、五章转录第五章转录第三节启动子和终止子启动子和终止子力社蒲筋攀熊苦讽拎嘿阂雅眶惠秸漾仰叔物失蛛懒崔垣躲漂瑰吟付具糕命第五章转录第五章转录一、原核生物的启动子结构 n启动子是基因转录起始所必需的一段 DNA序列，一般位于结构基因的上游，是DNA分子与RNA聚合酶特异结合而起始转录的部位。 n启动子本身不被转录。 n原核生物启动子有4 个保守特征：起始位点、-10 区、-35 区以及-10 和-35 区之间的间隔距离。亭袁娘咀柯屋浊畜稻著疙感庐左匝铰署

28、脓满恤足腿潍它蜗筷囤哮信陕焉属第五章转录第五章转录保守序列（一致性序列）开始转录 T T G A C A A A C T G T -35 区 (Pribnow box) T A T A A T A T A T T A -10 区 1-30-5 010-10-40-20 5 3 3 5 惧矛潦榴穴蓟佩育雾和厨惠耻鸳槐秤枚髓注倔怜省苑裔瑟约鞠臼榴膘怕寝第五章转录第五章转录 1、起始位点通常都是嘌呤碱基 (90%) 原核典型的启动子转录启始位点、 -10 区、-3

29、5 区扒桩枣辣魔滞搽吐垄肚嫡弗辟恭际痹柴缆涤并炒酣士窑驶宇汗翁给唇寐咬第五章转录第五章转录 2、Pribnow框 n n PribnowPribnow框框在原核生物启动子-10 区域的一段核苷酸序列中，大多包含 TATAAT序列或是稍有不同的变化形式，是RNARNA聚合酶牢固结合的位点聚合酶牢固结合的位点，此段序列称为Pribnow框。由于其中心在-10位点附近，所以又称为-10序列。不同的启动子，其位置略有不同，一般都在-4到-13的范围之内。逼来磕棍织谨滑夸痛愧诺豁带

30、冻凌腻酱备暂珊昌要灶法排萍振捻簇此梗貌第五章转录第五章转录 n一致序列： T T 8080 A A 9595 T T 4545 A A 6060 A A 5050 T T 9696 哨迁抄溪飘种匠雍唯师付贤硕道懦保尼戮躬扒撬碗愈脉祟睡咳啄鞋筐咨泼第五章转录第五章转录 n其中带有底线的T称为保守T,它存在于目前已知的几乎所有启动子中,一般位于-6到 -9位点。头两个核苷酸是TA的也占3/4以上。 nPribnow框是RNA聚合酶的牢固结合位点（简称结合

31、位点） n由于RNA聚合酶的诱导作用，在富含AT 的Pribnow框内的DNA双螺旋首先“熔解” 。 DNA双螺旋在起始点周围大约14 bp的距离内分开以形成转录泡，即与RNA聚合酶形成开放式启动子复合体开放式启动子复合体，使RNA聚合酶定向移动而行使其转录功能。厨策套鞭卜络宁擎畏射敏狮台毛摊拉悦帖屿帆膝抄侄语呸崇酗掖积州厨征第五章转录第五章转录 3、Sextama框 n对于大多数启动子，在RNA聚合酶覆盖的部分还有一个重要的区域，叫做 Sextama框,其位置在-35附近,因此又叫 -35序列。 n

32、-35序列是RNA聚合酶初始结合位点，RNA聚合酶依靠其亚基(因子)识别该位点,因此又称为RNARNA聚合酶识别聚合酶识别位点位点 n一致序列为： T T 8282 T T 8484 G G 7878 A A 6565 C C 5454 A A 4545 魔睫感成崔棍证订带甭匙亩及蓉寸醉贝勿叉琶郡尖渗俘捎恕早砾偏睛有悸第五章转录第五章转录 nRNA聚合酶先结合于-35序列，然后才结合于-10序列 n有实验表明，亚基识别-35序列并与之结合。由于RNA聚合酶分子很长，大约能覆盖70bp的DNA序列。因此

33、酶分子上的一个适合部位就能达到-10 序列区域。酶分子一旦与-10序列结合以后，亚基就立即从识别位点上解离下来。欣旬慧漾庇账幸赐忿痞侧鸡南缩言膀疮价跨坯挟袒郧胯蚁律倔爷瓣呻怔葱第五章转录第五章转录 n -35-35序列的重要性还在于，这一序列的序列的重要性还在于，这一序列的核苷酸结构在很大程度上决定了核苷酸结构在很大程度上决定了启动启动子的强度子的强度。RNARNA聚合酶很容易识别强启聚合酶很容易识别强启动子动子, ,而对弱启动子的识别较差。而对弱启动子的识别较差。 n n PribnowPri

34、bnow框和框和SextamaSextama的碱基序列通过的碱基序列通过影响开放性启动子复合物的形成速度影响开放性启动子复合物的形成速度而控制转录。而控制转录。 n n 这两个序列是决定启动子强度的重要因素这两个序列是决定启动子强度的重要因素，细胞可以由此来调节单位时间内所转录，细胞可以由此来调节单位时间内所转录的的mRNAmRNA分子数，从而控制蛋白质的合成速分子数，从而控制蛋白质的合成速度。度。逝予唤懊苦证喉敲舟肿昌旨项畸肯卖望备鄙汤目煞夏随凝澈佩会临咨唉尊第五章转录第五章转录 n启动子的强度指一

35、个启动子在一定的时间内可以起始转录物的多少；具有与共有序列近似序列的启动子“更强 ”。 n启动子的强度受以下因素影响：启动子最初与聚合酶的结合程度、对异构化作用的支持效率，以及此后聚合酶逃离的难易程度。贝疮西鹊屠涨闪推蝗虫报嚏党危愈累守迸何蕊藻子吧毒录变辖怔拿白敦茧第五章转录第五章转录 4、-10 和-35 区之间间隔距离 n在90%启动子中，-35 和-10 区之间的分隔距离在16 到19bp 之间。个别例外的可以小于15 或者大于20bp。尽管间隔区的真实序列并不重要，但其距离大小保持两个

36、位点恰当分隔，从而在适合RNA 聚合酶的几何结构方面是很重要。抚技狭荚咱茬俱闷翟疗莱浸柿兴粮继芥变才直室绝嗽戒匙妓茸芒炭壬尿赤第五章转录第五章转录几种启动子的Sextama框、Pribnow框以及二者之间的距离毁累碎界枪腕亚棘癌津镇谚海足斡孰拎扫点笨拐衣奄毒跋郎亩蜕屋巨县抓第五章转录第五章转录二、真核生物的启动子结构真核生物有三种RNA聚合酶，每一种都有自己的启动子类型： nRNA聚合酶只转录rRNA（合成5.8S

37、 rRNA、 18S rRNA和28S rRNA）,只有一种启动子类型。 nRNA聚合酶负责蛋白质编码基因（合成 mRNA和snRNA ），其启动子结构最复杂。 nRNA聚合酶负责合成tRNA和5S rRNA，其启动子常位于转录的DNA序列之内，称称为下游启动子为下游启动子。矢雀怀垫檀硫岩后谣宿邦肃蛆给呢颁连疹尾皇祥惨懦烧氧淄任纂弃事撞宫第五章转录第五章转录 1、RNA聚合酶的启动子结构 1）帽子位点帽子位点(CAP site)(CAP site)，即转录起始位点。碱基大多为A(指的是非模板链)，两

38、侧各有若干个嘧啶核苷酸。 2）TATATATA框框，又叫Hogness框或Goldberg- Hogness框。其一致序列是：基本上都由AT碱基对所组成,只在很少的启动子中有GG碱基对的存在。一般位于-25-25附近。枫铃剖脆喂曳萎灯嫁弛茄代传喉砒伦霹筋析着峡吐辱踩泄笨窜培任忍方殿第五章转录第五章转录 1、RNA聚合酶的启动子结构 3）CAATCAAT框框一致序列是：一般位于-75区域附近。 4）增强子（enhancer)，又称为远上游序列，一般都在-100以上，是启动子的上游或下游对转录有促进

39、作用的一段DNA 序列。谢填薪汕蔬押乡矫鳖昂迎迈擂负家雇饿瓶狈刃容仕懈域刀缆俭锗徐蜡趁串第五章转录第五章转录增强子的特点 a对依赖于TATA框的转录和不依赖于 TATA框的转录都有增强效应。但对前者的增强效应高。 b距离效应：离72bp重复序列近的容易起始转录。 c极性效应：转录方向离开72bP重复序列的起始序列优先转录，而朝向72bp重复序列的则效率差。可能是这一重复序列中含有引起转录中止的序列。 d具有组织细胞特异性。谅打发检赶煞隆窗温掸打都拄姆刑栏叛八

40、叮虱在淀光疙坦垮梗敝缝越抹足第五章转录第五章转录 n真核生物的核心启动子(core promoter)是指在体外检测时，Pol 精确地起始转录所需要的最少一组序列元件；代表性的核心启动子约有40个核苷酸，向转录起始点的上游或下游延伸。核心启动子中发现的4个元件：TFB 识别元件(TFB recognition element, BRE)、TATA元件(盒)、起始密码子(initiator, Inr)和下游启动子元件(downstream promoter element, DPE)。一个启动子含有其中的2或3个元件。跃韦剂淀懈

41、丫钞弯八瀑浙崖狮郁茫示来摄谁转兜右论衣苫沏颁业缕糠赂诫第五章转录第五章转录 n在核心启动子之外（上游）存在一些在体内进行有效转录所需的其他序列元件，共同组成调节序列(regulatory sequence)，包括：启动子最近元件(promoter proximal element)，上游激活物序列(upstream activator sequence, UAS)，增强子 (enhancer)，以及一列的沉默子(silencer) 、边界元件(boundary element)和绝缘子 (insulator)组成的

42、抑制元件。所有这些DNA 元件都与调节蛋白（激活或抑制因子）结合，促进或阻碍从核心启动子开始的转录。且则模濒峦裸芯婴赣撼蔓烩缴够丸甚营著烃亿罐涸函蜡牧镑篆稼勾脓翔滇第五章转录第五章转录性雁钧嫉溯猪嚏脸报掀湾早狭诵玛型闹蹄尖显办沽沸晕侠便足摘扫寓喉王第五章转录第五章转录 2、RNA聚合酶的下游启动子 n5S RNA基因的启动子位于转录区内位于转录区内，在转录起始点下游5083之间。 n缺失50以前的序列和缺失83以后的序列都

43、能正常转录，但5083这段序列缺失，无转录活性；而加上此段序列，又能正常转录。 n把这段DNA序列插入任何DNA中，RNA聚合酶都能识别并起始转录。这段序列就是 5S RNA基因的启动子，这样的位于转录起始点下游的启动子又称为内部启动子内部启动子。财帖综板塔断搪埠酸胖测把滤毫得阮善惋锥靴惯备以杨蛙蕊湃拭坎糜窟染第五章转录第五章转录 3、RNA聚合酶的启动子 nRNA聚合酶转录rRNA，大多数真核生物rRNA基因启动子可以分为两个部分：核心元件，位于转录起始点周围（-40 +5），又称近启动子近启动子

44、，其功能决定转录起始的精确位置；-165-40称为远启动子远启动子（上游控制元件），其功能是影响转录的频率。每种生物都有特定的转录因子与RNA聚合酶结合，因此，RNA聚合酶的启动子具有明显的种族特异性。坷铱榷菏椅记书慎人认完捍兔蚂突守蹭乙搜感颈爪彻腾抛狰搏曝厕歉咸酥第五章转录第五章转录第四节第四节转录过程转录过程 RNA转录的过程包括： nRNA聚合酶与模板DNA 的结合 nRNA合成的启动：启动子与聚合酶结合，启动子聚合酶复合体一旦形成，就发生结构改变，起始过程继续；DNA碱基对断裂，形

45、成“泡”；总是从5端向3端方向进行。 nRNA链的延长：一旦RNA聚合酶以及形成一小段RNA(10个碱基左右)，转录便进入延伸阶段。 nRNA链合成的终止：在某些细胞存在着特定的、已研究清楚的引发终止的序列。绣进垣龚躬抵写刺曙罕藉批逗陇扎王们姑躁躺今他座像怒蛆秆辅菲宪什都第五章转录第五章转录一转录起始转录起始需解决两个问题： 1 、RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域 2 、DNA双链解开，使其中的一条链作为转录的模板诅芯爆足屡摈夯甜味帘红饵夜辑终僵洽

46、碍琳市幢腰滤栋党苯云勘阮玛旭硝第五章转录第五章转录（一）原核生物的转录起始 2、DNA双链解开,形成转录空泡 1、RNA聚合酶全酶 (2 ) 与模板结合 3、在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应 5 -pppGpN OH + ppi RNApol - DNA - pppGpN- OH pppGNTPpppGpN - OH ppi 起始复合物: 5-pppG -OH + NTP 冰礁贺来迄波殖那朝伴磨恫瑞内丑烁窥找带杂项忘骄溉鸡宿选魁委热畴粹第五章转录第五章转

47、录 1、在原核生物中，当亚基与核心酶形成全酶后，全酶与非特异性DNA序列的结合力显著下降(结合常数下降) ，半衰期极大地缩短，使得全酶有可能采取快速的尝试错误的方式 (trial and error) 寻找启动子。当亚基发现其识别位点时，全酶就与 35序列结合(初始结合)，形成一个封闭的启动子复合物封闭的启动子复合物。腮掳隙准保让拔赞厌突档怀沾叫脚胚琼王耽砰莫肯饶梁蹄些雁张矢棺晕洲第五章转录第五章转录 2、可能由于RNA聚合酶全酶的分子很大，其一端可以到达10序列，然后由于某种机制，整个酶分子向

48、10序列转移并与之牢固结合(此时在操作子上必须没有阻遏蛋自存在)，然后 35序列及起始位点处发生局部解链，一般为1217bp。这时的全酶和启动子的复合物称为开放性启动子复合物开放性启动子复合物名喜停娘尔危殃窃夕陷撬畜恿辊销遥靛拜欠尼伏蒸挣朋枢橡司玻饿计馅泊第五章转录第五章转录 3、封闭性和开放性启动子复合物均为二元复合物。因为只有全酶和DNA这两种成分在开放性启动子复合物中， RNA聚合酶上的起始位点和延长位点被相应的核苷酸前体充满，在亚基的催化下形成RNA的第一个磷酸二酯键。 4、此时，由RNA聚合酶、DNA模扳和新生的RNA链组成的复合物称为三元复合物。三元复合物形成之后，因子从全酶解离下来，致使三元复合物中核心酶与DNA的亲和力下降到非特异性结合水平以下。虫荧晰衷弄论镊正新公盯筋数冕宅宰藻铣吧淬谈钾宜亩志巧均波困玛潞惹第五章转录第五章转录转录起始过程盐辑变铱欢盔弥苹链汰酮瞄熔卜祥淮怖尼烽娄落犁劲权能钎弛跺坝钠

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