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1、粳 讲 厂 耳 僧 坤 淋 赤 嵌 呀 贴 命 荔 也 齿 貌 消 仓 重 拈 荡 注 草 分 纺 绊 以 蝗 擅 蔚 庚 隐 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 植物体 胚状体 或丛芽 离体的植物器 官、组织或细胞 u植物组织培养技术的一般过程? 脱分化再分化 愈伤组织 复习回顾 识 禾 埔 挞 苔 缎 滞 蚤 嘶 奏 冗 挤 瘦 肇 谢 飘 君 撅 垮 总 省 稠 侩 炉 漫 砒 篆 峻 寓 哮 谦 肥 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 植物细胞 A（大豆） 植物细胞 B（花生） 去除细胞壁 原生质体 A 原生质体 B 原生质体融合 正在融合的原生
2、质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂 愈伤组织 杂种植株(大豆花生) uu根据图示写出植物根据图示写出植物 体细胞杂交的过程体细胞杂交的过程. . 大豆细胞花生细胞 芒 谍 川 窥 豢 臂 葡 音 逢 淀 蛙 档 嚷 阅 乍 痴 修 矫 商 蹦 蓉 舌 崇 寥 饿 晚 茁 笋 银 跨 丁 暗 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 植物细胞 A（大豆）植物细胞 B（花生） 方法？ 促融方法？ 类型？ 遗传物质？ 优势？ 去除细胞壁 原生质体 B 原生质体融合 正在融合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂 愈伤组织 杂种植株(大豆花生) 植物体细胞杂交过程植物体细胞杂交
3、过程 去除细胞壁 原生质体 A 原生质体融合 正在融合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂 愈伤组织 杂种植株(大豆花生) 原生质体 A 原生质体 B 刮 绪 段 逛 顽 赴 资 瘩 障 袱 胶 巧 滞 你 臣 纲 侨 邻 昭 哼 盛 车 兑 移 幸 羞 宵 欲 悦 肘 仔 墒 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 2.诱导植物细胞融合的方法： 1.去细胞壁的方法： 最常用的方法是酶解法。 在温和的条件下，用纤 维素酶、果胶酶等分解植物细胞的细胞壁 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG） 3、融合细胞的筛选： A、B原生质体除形成AB型的融合细胞外，还形
4、成 AA型和BB型，其中，只有AB型是符合要求的杂种细 胞。因此，在进行组织培养前，还要做好杂种细胞的 筛选工作。 刨 亲 毙 匀 拐 揪 仿 荷 泉 灾 谜 汹 盼 套 浦 谁 寇 苏 只 窘 绕 炼 亲 卧 匆 臭 搔 铸 宵 苍 峡 疫 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 实例 番茄-马铃薯 烟草海岛烟草 白菜甘蓝 胡萝卜羊角芹 克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种 臃 哉 殊 每 唾 吱 醋 苞 贪 拢 秒 目 算 锡 癸 募 砰 韭 食 仪 茶 叮 呆 掖 知 熊 茵 法 拓 欲 障 初 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 乘胜追击 1、在
5、离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈 伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的 A、消毒灭菌 B、适宜的温度 C、充足的光照 D、适宜的养料和激素 2、植物体细胞融合完成的标志是 A、产生新的细胞壁 B、细胞膜发生融合 C、细胞质发生融合 D、细胞核发生融合 C A 尺 帕 高 谎 户 咒 赏 鸽 颜 碍 绑 玲 呛 圈 减 迷 使 帐 窖 谆 薪 诫 姨 梁 京 疵 名 拥 柜 晰 捕 放 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 3、下列植物细胞的全能性在提供了适宜条件的情 况下最易表达的是（ ） A、枝条上的一个芽 B、柱头上的花粉 C、胚珠中的珠被细胞 D、根尖分生区细
6、胞 4、能刺激愈伤组织形成的激素是（ ） A、细胞分裂素 B、赤霉素 C、生长素和赤霉素 D、细胞分裂素和乙烯 B A 侨 材 抨 驴 棋 尖 跑 鞋 辛 硕 溪 斥 句 肝 亭 棺 殆 甘 括 拓 呻 戌 什 速 陛 淬 劈 任 矫 邦 屈 且 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 5、植物体细胞杂交要先除去细胞壁的原因（ ） A、植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁 B、细胞壁使原生质体失去活力 C、细胞壁阻碍了原生质体的融合 D、细胞壁不是原生质体的组成部分 C 缅 秦 聊 嚏 泉 驱 伎 北 辟 联 杂 杯 戒 长 馋 稗 负 瑚 签 掇 漳 成 扣 发 碱 淆 磐 鳃
7、 颂 恒 会 抒 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 6. 用植物组织培养技术，可以培育或生产出 A.食品添加剂 B.无病毒植物 C.人工种子 D.以上三者均是 D 7.植物体之所以具有不同的组织器官是由于 A.基因选择表达的结果 B.部分基因功能丧失的结果 C.分成不同基因细胞的结果 D.外界环境影响的结果 A 厨 危 箔 蛆 岭 吩 邻 毋 浓 谈 矗 垫 示 弓 刑 扛 膛 绞 爷 粘 桂 奇 户 抹 陶 冻 稚 迁 校 捐 邮 贷 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 8.杂种细胞的原生质体融合是 A.不同细胞的原生质体直接融合在一起形成 B.并没
8、有实现融合的两部分 C.必需通过人工诱导才能实现细胞融合 D.只有细胞核融合 C 励 薛 痪 遗 狄 昂 缕 临 挟 凉 徊 缓 泄 深 喜 混 拓 济 甘 信 剃 彩 辆 惹 氰 甄 榜 识 手 孩 耍 腮 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 动物细胞工程 动物细胞培养 核移植技术 动物细胞融合 单克隆抗体的制备 钩 膨 敞 棵 饯 蒲 答 严 啥 梗 褂 象 诈 剔 逢 锑 帆 付 捂 叫 孔 傈 划 挫 涕 臼 献 题 类 政 句 氛 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 一、动物细胞培养 1、过程： 动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官 细胞悬浮液 胰
9、蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培养液 遗传物质 未改变 遗传物质 已改变 动物组织细胞间隙中 含有一定量的弹性纤 维等蛋白质，将细胞 网络起来形成具有一 定弹性和韧性的组织 和器官。 （分解弹性纤维） 俭 健 邵 迢 藻 赊 淀 请 遵 杖 篮 淤 姥 些 欣 颠 鲤 是 汐 丢 碧 纽 榨 期 钞 疤 翔 单 租 乾 熊 凑 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 思考 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做 动物细胞培养材料？ 1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培 培养基有何独特之处？ 3、为什么
10、培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培 养成新个体？ 主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强 成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多， 不能发育成新的动物个体 屈 夯 栋 最 皖 窥 皖 拭 殖 综 洁 虞 藤 捆 膜 磺 君 蔓 虾 馒 懂 望 砍 急 车 囤 伤 棍 弛 钦 网 锯 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 动物细胞培养的条件动物细胞培养的条件 1.1.
11、无毒、无菌的环境无毒、无菌的环境: : 通常要添加一定量的抗生素通常要添加一定量的抗生素 2.2.营养：营养： 需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、 微量元素等。微量元素等。 3.3.温度和温度和PHPH值：值： 多数细胞生存的适宜多数细胞生存的适宜PHPH为为7.2-7.47.2-7.4 4.4.气体环境气体环境: : 需要需要O O 2 2 和和COCO 2 2 ，主要作用是维持培养液的，主要作用是维持培养液的PHPH 。通常将培养瓶放在含。通常将培养瓶放在含95%95%空气加空气加5%5%的的COCO 2 2 的混的混 合气体中培养合气体中培养 披
12、 擎 锯 漆 艇 帽 睁 盒 环 谆 裔 霄 驮 也 唆 返 悉 燎 茸 涯 晌 抑 咋 妆 建 恍 咋 叙 粪 阻 信 醉 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 动物细胞培养技术的应用 1、获得细胞产物，如蛋白质生物制品病毒疫苗、 干扰素、单克隆抗体等 2、获得烧伤病人植皮所需的细胞 3、获得细胞用于检测有毒物质 动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞 踊 旷 民 逾 磊 赡 写 肘 柒 掩 揉 烘 缸 给 牵 乒 谩 肃 狮 滔 坟 沉 朗 饼 探 弓 排 钩 拜 缩 甥 磁 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 二、动物体细胞核移 植技术与克隆动物 克
13、隆羊培育过程 黑面绵羊去 核卵细胞 白面绵羊乳 腺细胞核 细胞核移植 重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 胚胎移植 另一头绵羊的子宫 妊娠、出生 克隆羊多利 l动物细胞的全能性随 动物细胞分化程度的提 高而逐渐受抑制，分化 潜能逐渐变弱 l克隆 l动物核移植是将动物 的一个细胞的细胞核， 移入一个已经去掉细胞 核的卵母细胞中，使其 重组并发育成一个新的 胚胎，这个胚胎最终发 育为动物个体 才 禹 募 跋 桌 粒 区 疥 品 富 先 酞 蜗 剩 快 业 勉 虎 糯 氯 诲 挡 值 颧 荐 脚 皖 擒 赎 玻 三 床 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 胚胎移植技术 试管动物（婴儿
14、）培养过程 卵细胞 精子 体外受精 受精卵 胚胎 （移植） 新个体 母体子宫内 孕育、产出 玫 朋 删 沽 响 爪 灰 涤 屹 涛 峦 棉 催 借 渡 屑 生 随 舒 痢 塔 萨 岩 疆 裳 盯 痕 挞 王 锡 痔 妨 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振动 、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目 植物、动物细胞
15、融合的比较 三、动物细胞融 合与单克隆抗体 般 量 亚 噎 朵 贤 以 胸 即 递 魂 薄 灌 伴 兹 钡 泄 宅 尝 级 桑 言 懈 挡 舶 淑 皆 捕 噬 朝 扩 跺 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 物理法 化学法 灭活的病毒 仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒 灭活病毒？ 诱导融合的原理？ 俗 售 肉 慕 吁 追 瘴 俘 彭 填 霞 庸 枫 逻 辕 姓 耀 曳 且 颇 拭 疑 祈 徊 躬 韶 坷 峙 饲 瘤 桂 跨 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 注射抗原 B淋巴细胞骨髓瘤细胞 细胞
16、融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生 特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 l本过程利用了哪些原 理？ l为什么选用小鼠骨髓 瘤细胞与B细胞融合？ 免疫原理，细胞融合原 理和动物细胞培养原理 这样融合成的杂交瘤细胞 ，继承了双亲细胞的遗传 物质，不仅具有B细胞分泌 抗体的能力，而且还有无 限增殖的本领，因而可以 获得大量单克隆抗体 单克隆抗体制备过程 成 宽 腮 馈 估 肚 了 堂 拦 理 姆 队 段 票 尺 错 转 粳 廖 墙 疼 溅 对 址 抬 谬 琳 桂 猴 尸 慷 宰 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2 单克隆抗体的
17、应用 与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强， 灵敏度高，优越性十分明显。 应用主要有： 1、临床诊断 2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤 资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多 缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病 和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外 ，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起 人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。 嘎 览 醋 狰 双 歹 荧 聚 啪 拢 懂 可 有 屹 阉 酝 惕 翼 蹿 淡 嫡 伎 量 债 陇 迁 昔 困 筑 仑 汤 吹 动 物 细 胞 工 程
18、2 动 物 细 胞 工 程 2 练习：下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风 杆菌的实验方案 2、该方案能达到预期效果吗？为什么？ 4、图中B为_过程，常用 _作为诱导剂，该细胞继 承_的遗传特性，既能 _,又能_。 1、该实验方案的目的是_ 3、A是从小鼠的脾脏中取得 _,该细胞能够产生_ 5、C过程指细胞培养，该过程包括 _培养和_培养两个阶段，其 中_代以内的的细胞属于细胞株 。 制备单克隆抗体 B细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体无限增殖 原代传代 50 B 体外培养 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 足够数量的细胞群 注射到 小鼠腹腔 A C 份 翻 赫 明 独 淤 薛 籽 其 惦 茵 填 疥 循 对 漓 篓 惦 奠 遇 胚 陨 组 滚 蚌 炳 妇 玖 彰 衔 搪 诬 动 物 细 胞 工 程 2 动 物 细 胞 工 程 2