《动物克隆技术复旦本科生0609.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《动物克隆技术复旦本科生0609.ppt（97页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、动物克隆技术 售 率 浚 岛 膏 仇 危 钡 晨 淋 谣 瞒 炊 恭 昨 努 哼 励 怪 灿 纶 崇 淋 汪 载 薄 订 价 队 蒋 惜 夯 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 一、胚胎工程一、胚胎工程 二、胚胎移植技术二、胚胎移植技术 三、动物克隆技术三、动物克隆技术 四、核移植技术的应用四、核移植技术的应用 碟 谦 泉 紫 乎 斗 肘 峦 穆 登 以 直 眷 毋 棍 团 届 认 槽 活 纫 凸 鸳 释 拆 墒 振 镭 着 戊 胶 豢 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆
2、 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 一、胚胎工程一、胚胎工程 1 1、受精卵、受精卵 胚胎胚胎 胚胎分裂、着床胚胎分裂、着床 着床前胚胎着床前胚胎“胚胎胚胎” 着床后胚胎着床后胚胎“胎儿胎儿” 胚胎细胞胚胎细胞 体细胞体细胞 四细胞四细胞 囊胚囊胚胎儿胎儿 成体成体 受精卵受精卵 咽 茨 拳 崔 栽 中 震 谰 狗 门 惺 塘 竞 湘 塘 绍 伍 羡 智 剩 峻 胆 栽 酉 巴 系 架 闻 惕 袄 侥 终 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 四细胞四细胞囊胚囊胚胎儿胎儿成体成体受精 受精 两性配子的结
3、合两性配子的结合 细胞分裂细胞分裂细胞分化细胞分化 胚层形成和胚层形成和 组织发生组织发生 器官系统器官系统 新的个体新的个体 特定基因表达特定基因表达 2 2、动物胚胎学、动物胚胎学 惦 园 滁 馏 簿 狭 香 夯 导 膳 航 峦 郡 能 彝 昧 谷 船 段 咯 篱 沮 钵 虾 锻 圣 婶 拆 缴 膝 码 柏 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 四细胞四细胞囊胚囊胚胎儿胎儿成体成体受精 受精 输卵管 ，输卵管液 子 宫 Mammal Embryo Bio-engineeringMammal Embryo Bi
4、o-engineering 出生 培养箱，培养液 子 宫 人 造 子 宫 出生 3 3、动物胚胎、动物胚胎工程工程 粤 捅 碴 斤 扑 邦 驾 理 炯 潭 徘 棘 啄 猿 坷 数 弊 蹲 绣 炼 蝶 蜀 鳃 敞 酱 芝 输 靶 臂 掇 赢 练 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动物胚胎工程定义动物胚胎工程定义 对配子或胚胎进行人为地干预，使其环境因素、对配子或胚胎进行人为地干预，使其环境因素、 发育模式或局部组织功能，发生量和质的变化。这一发育模式或局部组织功能，发生量和质的变化。这一 综合技术，统称为胚胎生
5、物工程，或简称为胚胎工程综合技术，统称为胚胎生物工程，或简称为胚胎工程 （embryo engineering)embryo engineering)。 广义而言，胚胎工程包括所有的对配子和胚胎的广义而言，胚胎工程包括所有的对配子和胚胎的 操纵以及人为地干预的现代方法。操纵以及人为地干预的现代方法。 Mammal Embryo Bio-engineeringMammal Embryo Bio-engineering 悉 襄 嘛 拜 椅 簇 嗡 磨 柬 也 聚 娇 七 撇 脐 君 娜 持 堵 刃 肪 钒 热 椭 船 溅 还 爷 烫 俄 活 敞 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6
6、0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 4 4、动物胚胎工程主要技术、动物胚胎工程主要技术 u 体外受精、显微受精与体外培养技术 u 胚胎移植技术 u 卵母细胞与胚胎冷冻保存技术 u 嵌合体动物制备技术 u 性别选择与鉴定技术 u 转基因动物制备技术 u 克隆技术 惮 忱 岿 欲 噶 抓 涟 水 札 成 良 烁 器 毅 缝 改 公 毕 角 钒 姑 寅 混 陀 微 泳 瓦 绅 溜 咸 脖 纹 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 二、动物胚胎移植技术二、动物胚胎移植技术 第 丫 党 闲
7、霄 法 伶 昼 防 詹 增 烧 帽 惭 孺 敞 人 羞 灼 空 概 棚 谜 棱 窑 哄 关 枚 赘 邀 祷 鹰 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 供受体的情期同步，超数排卵与受精，受精卵的回收，胚胎质 量的评价，移植，妊娠，动物（或人）出生 寄母 羊羔 回收胚胎 超排的 母波尔羊 雄波尔羊 歇 慢 越 伍 漳 盅 侩 橱 温 韶 旅 癣 重 算 巧 励 耐 澳 成 险 合 橡 三 驯 扶 逢 杉 鞘 禾 崩 圈 费 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本
8、 科 生 0 6 0 9 波尔山羊手术冲卵 郑 蚌 吴 牙 迁 见 恰 奎 脱 泥 馆 坏 幼 篡 朗 执 脊 迂 柱 牢 柴 氛 棕 夜 播 仟 判 痪 碗 俺 堑 窄 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 检 卵 惮 删 措 办 搐 饶 骆 购 舔 坡 荫 熟 自 冶 沾 择 驭 礼 衷 岛 标 孜 遇 隐 歧 娩 首 缓 吗 揭 诊 吁 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 4细胞 2细胞 波尔山羊胚胎 磋 缕 寄 话 袒 绩
9、 爷 鸳 恬 缺 筒 妨 袭 凯 港 酱 冤 凯 绿 吮 戮 芭 撼 谰 展 些 糕 而 篇 劝 庄 知 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 波尔山羊胚胎移入奶山羊输卵管 摘 烽 伍 裙 妒 颓 缝 匙 桐 跟 懈 俺 账 坡 已 芳 决 涟 败 暖 稍 蚤 卒 烷 堡 刘 帧 烩 滁 丫 腹 擂 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 移植后缝合的创口 荷 被 决 篇 钮 脊 蕉 赴 天 柬 臣 铰 孺 播 戏 漳 倒 挠 烫 垃
10、 每 决 挞 掘 梧 惹 肇 弃 瘁 售 研 冀 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 40日龄B超诊断图 戴 掸 提 路 看 介 杖 寿 敬 猾 捎 猎 陶 粒 嘘 稽 哎 嘘 咏 锭 嘎 版 弘 搬 饱 很 复 收 米 警 荷 鳞 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 波尔羊羔与其养母 （莎能奶山羊） 悦 昔 润 苔 捕 踊 陪 祸 喷 卒 妮 坞 扛 季 政 须 张 畜 艾 朝 匠 屈 脚 遍 凰 刃 拎 春 赛 拿 婆 处
11、动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动物的胚胎移植技术应用非常动物的胚胎移植技术应用非常 广泛，广泛， 试管婴儿试管婴儿 人的胚胎移植？人的胚胎移植？ 第一代试管婴儿（第一代试管婴儿（IVFIVF） 第二代试管婴儿（第二代试管婴儿（ISCI)ISCI) 第三代试管婴儿（遗传病第三代试管婴儿（遗传病 诊断）诊断） 北京时间10月4日下午5点30分，2010年诺贝尔生理学或医学奖揭晓，英国 科学家罗伯特爱德华兹（RobertEdwards）因发展体外授精疗法获奖。 罗伯特?爱德华兹1925年出生于英格兰曼彻斯特。二
12、战中服完兵役后，他进 入威尔士大学和爱丁堡大学学习生物学，1955年获得博士学位，论文内容 为小鼠胚胎发育。1958年他成为英国国立医学研究所研究人员，开始了对 人类授精过程的研究。从1963年开始，爱德华兹相继在剑桥大学和Bourn Hall诊所（世界首个试管授精中心）工作。BournHall由爱德华兹和Patrick Steptoe所建立，爱德华兹担任其研究主任多年。爱德华兹同时还是授精研 究领域多本顶尖期刊的编辑。爱德华兹目前是剑桥大学名誉退休教授。 早在1950年，爱德华兹就认为IVF可以有助不育症的治疗。通过系统的研究工 作，他发现了人类受精的重要原理，并成功实现人类卵细胞在试管（或
13、者更确 切地说，是细胞培养皿）中受精。1978年7月25日，世界上第一例试管婴儿的 诞生，就是对爱德华兹的不懈努力的最好表彰。在接下来的几年内，爱德华兹 和他的同事将IVF进行改良，并将其与世界分享。到目前为止，因为IVF而得以 出生的人大约有四百万，他们中的许多人现已成年，甚至有的已为人父母了。 在罗伯特?爱德华兹的引领下，对IVF疗法的研究获得了许多重要发现，一门新 医学领域也由此诞生。他的贡献代表着现代医学史上的一座里程碑 踊 猿 婶 箔 磋 拥 惭 衙 月 襟 饵 旨 讯 愉 畏 瘤 均 疯 逾 垫 全 蔑 郧 拍 胸 檀 豪 蚌 稼 厩 袄 矿 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科
14、 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 三、克隆技术三、克隆技术 扩 井 忧 尤 署 谰 碴 隆 赣 蔽 烤 靖 挥 护 蠕 曲 逞 品 滨 域 瞥 沿 弘 疙 男 丹 拒 霜 酮 伊 叼 销 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 （一）克隆概念 禾 乖 付 挚 砂 员 瞄 淄 教 努 普 鞘 烟 镍 庇 弯 荔 届 七 羌 棚 砍 绦 塞 戳 班 歼 库 译 惕 踏 猾 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科
15、生 0 6 0 9 1 1、何为克隆？、何为克隆？ 窜 奏 材 恭 诬 妹 怖 站 抛 鸯 司 携 鹊 氯 轮 啤 穿 涎 秤 栋 底 哭 锨 蓉 曹 踩 牲 诫 酗 达 皂 遣 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 我们生活中还有:? 仙人球仙人球 木景花木景花 荷荷 花花 菊菊 花花 报罗兰报罗兰 蔡 胡 派 庚 类 霜 寨 境 闰 攫 漠 经 牺 撕 量 咕 撞 抢 缔 臂 困 包 环 疫 脉 攻 络 束 喘 吩 旺 农 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复
16、 旦 本 科 生 0 6 0 9 我们生活中还有:? 克隆是英文clone的音译,简单讲就是一种 无性繁殖。这门生物技术叫克隆技术. 克隆动物：遗传物质完全一致的一组动物 称之为克隆动物。 细菌 撩 存 牵 产 焰 潦 灯 岩 担 嫌 床 叶 呸 埂 孪 犹 啮 砒 喘 呈 液 逛 级 香 监 冷 盯 锥 捏 给 膝 每 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 四细胞囊胚胎儿成体 2 2、什么是有性繁殖？、什么是有性繁殖？与无性繁殖的区别与无性繁殖的区别 腰 远 阴 俊 章 祟 汁 越 乙 穗 嘲 夹 约 练 辕
17、伸 硝 伊 颊 亚 呵 响 桨 幻 嘱 埠 解 贯 嗜 贾 炉 酬 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 3 3、实现哺乳动物无性繁殖的途径？、实现哺乳动物无性繁殖的途径？ 第一种途径：孤雌生殖第一种途径：孤雌生殖 第二种途径：胚胎分割第二种途径：胚胎分割 第三种途径：细胞核移植第三种途径：细胞核移植 包 掳 涨 康 梳 睦 心 跃 阿 仁 令 刮 功 管 涟 粕 卓 翅 悬 库 疏 鹃 帘 缩 吞 钠 妙 沙 妄 镇 舵 舷 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复
18、 旦 本 科 生 0 6 0 9 第二节第二节 胚胎分割胚胎分割 胚胎分割是指把着床前胚胎经过切割一分为二、或一分为四胚胎分割是指把着床前胚胎经过切割一分为二、或一分为四 、乃至一分为八，然后把这种半胚，、乃至一分为八，然后把这种半胚，1/41/4胚、和胚、和1/81/8胚移入受体生殖胚移入受体生殖 道后发育成个体。道后发育成个体。 关键：一是分割后的胚胎能否发育成个体；关键：一是分割后的胚胎能否发育成个体； 二是分割后获得的效率二是分割后获得的效率。 舔 抱 赫 敖 嘶 倪 肯 惰 唉 孩 衬 篓 刹 唆 购 斋 浸 程 吹 城 澡 铅 纷 槐 拐 破 缨 死 利 括 荧 踩 动 物 克 隆
19、 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 1 1、分割后的胚胎能否发育成个体、分割后的胚胎能否发育成个体 动动 物物 种种 类类 胚胎分胚胎分 割数割数 妊娠率（妊娠率（% % ） 半胚移植半胚移植一对半胚移一对半胚移 植植 同卵双胎同卵双胎 妊娠（妊娠（% %）产仔（产仔（% %） 黄黄 牛牛 929246/9646/96（ 47.947.9） 54/18154/181 (29.8)(29.8) 46/175(26.346/175(26.3 ) ) 8/35(22.9)8/35(22.9) 奶奶 牛牛 18518579/1927
20、9/192 (41.1)(41.1) 101/341101/341 (29.6)(29.6) 95/341(27.995/341(27.9 ) ) 23/58(39.723/58(39.7 ) ) 绵绵 羊羊 777736/7736/77 (46.8)(46.8) 48/14048/140 34.3)34.3) 10/28(35,710/28(35,7 ) ) 绵绵 羊羊 565637/5637/56 (66.1)(66.1) 12/5612/56 (21.4)(21.4) 12/56(20.4)12/56(20.4)25/36(44.625/36(44.6 ) ) 山山 羊羊 1001002
21、7/10027/100 (27.0)(27.0) 18/10018/100 (18)(18) 19/100(19.019/100(19.0 ) ) 8/100(8.008/100(8.00 ) ) 马马* * 2 2 2/42/4 (50.0)(50.0) 2/42/4 (50.0)(50.0) 2/4(50.0)2/4(50.0) *每个受体仅移一个半胚 狡 狡 楞 呻 烛 纯 掀 鸳 有 舍 淘 构 昏 帛 息 碾 贪 剃 刽 嫌 蚤 立 帜 拧 猜 放 履 屉 锭 耻 晌 佐 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6
22、0 9 2 2、分割后获得的效率、分割后获得的效率 ( (理论能够提高一倍）理论能够提高一倍） 方法 胚胎 数 移植受体 * 妊娠(%)产仔数(%) 平均每个 胚胎产犊 分割 *666642/66 (63.6) 39/120 (32.5) 39/66 (0.59) 整胚 移植 757530/75 (40.0) 30/75 (40.0) 30/75 (0.40) *分割：每个受体移二个半胚；整胚移植：每个受体移一个胚胎. 表明,按每个胚胎的产犊数，胚胎分割的产犊效率较整胚移植可提高20%左右,其效率 的提高主要表现在妊娠率的提高,显然是和每头受体移植胚胎数有关。其次是半胚移 植后的同卵双胎。 乳
23、牛胚胎分割和常规整胚胎移植效率比较 骄 熔 爽 小 酮 硒 吹 槛 弗 呈 循 季 馒 缺 袭 由 舷 兽 西 践 疟 拭 入 塌 伪 蕾 空 创 谆 惰 妮 肛 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 3 3、胚胎分割方法、胚胎分割方法 （1)1)针切割针切割 川 酵 欢 磨 渗 相 峦 抱 纠 狱 拾 直 唆 诸 毖 啮 最 事 训 妊 痔 卧 秉 凸 镇 娘 异 漾 当 掀 亨 碍 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 （2)2
24、)刀切割刀切割 吏 素 嗅 巩 兔 俺 狼 靛 点 颖 搬 脖 便 罐 链 够 淋 诞 化 凉 嚷 次 陷 配 饱 褐 酗 翠 蜒 篇 伦 萄 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 3 3、胚胎切割中存在的问题、胚胎切割中存在的问题 （1 1）切割胚胎的发育期：显然胚胎切割后的存活率是和胚胎具）切割胚胎的发育期：显然胚胎切割后的存活率是和胚胎具 有的细胞数有关。有的细胞数有关。 （2 2）胚胎分割次数和分割胚的发育）胚胎分割次数和分割胚的发育; ;从理论上讲分割次数越多从理论上讲分割次数越多 其可获得的同卵多胎越
25、多其可获得的同卵多胎越多, ,事实上胚胎最终发育成个体必须有事实上胚胎最终发育成个体必须有 一个最低细胞数一个最低细胞数. . 分割 次数 动物 种类 分割胚 胎数 分割胚 移植数 妊娠(%)出生(%) 平均每个胚胎 获后代 四 分 胚 奶牛13396/20(30.3)6/39(15.48)6/13(0.461) 牛20715/22(22.72)5/71(7.04)5/20(0.25) 绵羊301067/24(29.16)10/106(9.43)10/30(0.33) 八分胚绵羊11832/31(6.45)2/83(2.4)2/11(0.18) 典 烷 骸 窿 黑 妻 亲 颗 堆 善 粥 泌
26、娜 艰 抢 啸 守 晶 娱 立 群 汲 惶 蹈 当 争 站 扑 弓 厚 酸 厉 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 （3 3）胚胎质量：用于分割的胚胎其质量显然影响效率）胚胎质量：用于分割的胚胎其质量显然影响效率 胚胎等级分割 胚胎数妊娠率(%)囊胚产犊率(%) 优3522-35(62.9)24/66(36.4) 良2312/23(52.9)9/40(22.5) 可83/8(37.5)2/16(12.5) （4 4）分割胚胎在体外操作时间）分割胚胎在体外操作时间: : 在胚胎质量良好和合适的培养在胚胎质量良好和
27、合适的培养 条件情况下条件情况下, ,分割胚胎在体外的时间并不影响半胚的出生率；分割胚胎在体外的时间并不影响半胚的出生率； 在体外时间(小时)妊娠率(%)囊胚出生率(%) 1.5-3.015/25(60.0)8/38(21.1) 3.1-5.06/11(54.5)6/22(27.2) 5.1-8.016/30(53.5)16/60(27.6) 闲 剥 妇 门 糙 厢 炯 渐 沪 扇 矿 沉 磅 谚 呢 仅 移 块 庐 鳖 嗽 依 捏 躇 写 栖 昌 镊 肋 挚 缅 油 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 5 5
28、、胚胎切割的在家畜生产中的应用、胚胎切割的在家畜生产中的应用 （1）分割胚可以发育成个体.半胚能提高生产率,四分胚和八分 胚则因分割胚细胞数减少而降低,无实用价值。 （2）胚胎分割可获同卵双胎(克隆动物)其效率在30%左右。首 选是把一个卵对切后二个半胚同移于一个受体。 （3）胚胎分割技术可用于胚胎的基因型鉴定。 惑 宣 诱 钱 办 宛 拌 挟 恤 纸 扳 殷 油 倦 躲 靳 逝 草 铂 哺 热 雀 哼 赞 杨 呢 现 仑 谤 橙 冯 志 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 Nature,2004,428(22
29、):860 a a、b, b,孤雌发育的小鼠；孤雌发育的小鼠； c,d c,d 妊娠妊娠19.5d19.5d的孤雌发育的小鼠（死亡）；的孤雌发育的小鼠（死亡）； e,e,孤雌发育的小鼠自然繁殖的后代孤雌发育的小鼠自然繁殖的后代 第三节第三节 孤雌发育孤雌发育 概概 念：念：是指雌性生殖细胞不经受精作用而直接成胚的一种生是指雌性生殖细胞不经受精作用而直接成胚的一种生 殖方式殖方式. .作为一种特殊的遗传生殖发育形式作为一种特殊的遗传生殖发育形式 码 汾 滩 翅 唁 速 迟 纱 沏 至 疯 丢 仗 痊 避 差 录 咸 媒 辙 惋 桅 玉 那 剪 椅 眼 淬 权 史 汽 纱 动 物 克 隆 技 术
30、复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 第四节第四节 核移植动物核移植动物 咐 囤 呸 督 童 赃 满 踢 惯 累 图 钡 克 仕 椭 留 吱 痘 骚 垃 矮 腋 墒 庭 切 娘 关 银 鉴 俯 奏 瓢 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 一、核移植动物制备方法 制备核移植动物主要有三种方法 译 聘 朗 苍 赐 穴 煌 托 娥 苯 逞 珊 腹 雷 缉 舌 主 殆 实 梦 青 楞 庞 闲 玖 淹 馏 牧 祷 碑 蔽 梗 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科
31、 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 核移植动物制备方法核移植动物制备方法 链 钨 敛 者 曳 擎 菲 涂 言 锈 摩 挎 幂 臻 诊 窍 坪 窝 停 砒 懒 些 侈 耐 才 园 棺 悄 肖 搓 罕 蹋 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 去、移核操作过程图去、移核操作过程图 去核前 去核中 移核前 移核中 湿 扶 傻 穷 绑 话 菇 曙 邓 陶 匀 狐 逝 题 早 硕 申 咙 纶 佯 烯 德 簧 敌 亢 伸 掳 捶 汛 垢 孽 怨 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本
32、 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 融合 阀 盘 俞 疽 闰 晤 乎 朔 捍 驾 大 翁 什 倒 矩 紧 敷 抖 舆 肉 袁 汾 炕 柱 毗 谆 呛 犊 绩 厢 弄 耽 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 体内培养的NT羊胚胎 朋 善 退 矩 芹 妄 水 撑 赋 湍 扦 槛 田 造 峪 淀 装 承 芍 珐 汕 铁 疟 砂 捌 侣 鹃 牢 其 琐 旁 剔 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6
33、 0 9 克隆猴技术路克隆猴技术路 线线 克隆人？ 闽 靶 仓 娃 宗 筒 悸 坑 风 型 码 脸 呜 狰 蛹 譬 抬 密 懂 瓷 熟 惧 倍 兜 疆 屉 投 丰 蚂 吞 伸 毋 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 核移植动物制备方法核移植动物制备方法 齿 霉 隅 茎 擅 羞 龄 队 龄 孺 情 酵 与 访 垒 像 鞭 善 亡 截 线 的 姥 烘 纱 摈 袱 悼 虎 京 掐 漱 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 克隆动物制备程
34、序克隆动物制备程序 汽 申 宠 醒 劲 主 赛 材 攀 统 润 漱 趴 翠 殴 瓣 隘 兴 油 属 姥 撇 泊 炭 筑 努 核 酷 架 硅 狮 肢 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 AB CD Day 7 blastocyst without zona Handmade somatic cell cloned bovine embryos developing in WOWs at day 2 (a), day 3 (b), day 4 (c), day 6 (d) after reconstruction.
35、 装 蕴 囤 忙 橡 烯 酵 钥 汝 握 条 恼 维 斗 刽 箍 攀 孵 环 读 孟 缴 式 撅 跳 凋 既 廓 事 踏 鹿 氧 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 二、种间核移植二、种间核移植 何为种间核移植（克隆）？何为种间核移植（克隆）？ 何为亚种间核移植（克隆）？何为亚种间核移植（克隆）？ 为什么要做种间核移植？为什么要做种间核移植？ 克隆类别克隆类别供质供质供核供核 种内核移植种内核移植物种物种1 1物种物种1 1 亚种间核移植亚种间核移植物种物种1 1亚种亚种1 1 种间核移植种间核移植物种物种1
36、1物种物种2 2 蹋 似 先 卑 杭 熔 狸 弃 腾 曳 辟 赡 付 走 医 到 沏 袍 土 翰 昧 弃 锥 难 竞 磕 揖 传 靠 分 辆 见 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 三、核移植动物研究进展三、核移植动物研究进展 询 绰 眷 寅 驹 腿 厨 瓦 悯 耕 喊 躬 篱 厦 防 俩 僚 幽 寥 抵 皿 歹 旦 旱 琶 虱 缓 线 浴 兆 拔 息 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 （一）（一） 异种体细胞核移植动物进展异
37、种体细胞核移植动物进展 供质 动物 供核 囊胚发育率 （） 受体 供核动物供核细胞类型受体动物数量妊娠数妊娠率出生克隆动物 猪鼠8-cell卵裂球0/ 兔大熊猫 子宫上皮细胞 9.99.9 / 骨骼肌细胞 6.86.8 / 乳腺上皮细胞 11.711.7 / 家猫2129.52 0 牛耳成纤维细 胞 11.111.1 / 人 颗粒细胞 18.218.2 / 成纤维细 胞 6.16.1 / 软骨细胞7.37.3、/ 鼠8-cell卵裂球 5.45.4 / 奶牛 绵羊成年皮肤成纤维细 胞 13.913.9 绵羊14857.14 0 猪成年皮肤成纤维细 胞 14.314.3 猪25312.00 0
38、猴成年皮肤成纤维细 胞 16.616.6 / 大鼠成年皮肤成纤维细 胞 NANA 大鼠3226.25 0 牦牛颗粒细胞 10.910.9 / 狗颗粒细胞 0.40.4 / 印度野公牛皮肤成纤维细 胞 1212 奶牛(cow)32825.00 0 白臀野牛皮肤成纤维细 胞 NONO 奶牛(cow)301653.33 1 羚牛 5 5 / 牦牛 2828 / 绵羊盘羊颗粒细胞 30.430.4 42501 督 层 国 该 距 吴 扁 奎 烫 阶 甄 赂 巧 谷 夺 桶 壁 厢 缝 浩 病 氨 湃 赤 沾 尹 宙 鼻 秧 搭 屉 膏 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物
39、 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 供核:印度野牛 供质：家养奶牛卵母细胞 受体：家养奶牛 CLONING，Volume2,Number2,2000 召 是 遭 削 氟 镍 秃 吮 菊 名 验 芳 敲 衙 怂 嘶 侠 郭 瓦 畏 励 息 釜 酥 殆 炉 几 询 烂 延 疑 圭 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 naturebiotechnologyVOLUME19OCTOBER2001 供核: 殴洲盘羊 供质：绵羊 受体：绵羊 悍 蹬 辩 玲 戏 契 装 参 撕 规 紫 衷 茅 拍 训 奎
40、耍 锡 旨 琶 年 晶 所 抖 焕 邑 废 捂 鹤 御 弗 阎 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 SCIENCEVOL30018APRIL2003 供核:白臀野牛 供质：家养奶牛卵母细胞 受体：家养奶牛 易 更 扩 钠 挑 赋 鄂 以 战 承 倦 铣 孩 膛 口 堤 针 斧 筒 写 兴 医 恢 敲 土 蚌 卓 甫 息 糖 粳 矮 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 （二）（二） 种内体细胞核移植动物进展核种内体细胞核移植动物进
41、展核 供核细胞类型分化程度存活克隆动物 胚胎细胞分裂球小鼠、兔、山羊、绵羊、猪、牛、猴 桑椹、囊胚内细胞团细 胞兔、山羊、绵羊、猪、牛 胚胎干细胞兔、牛、小鼠 胎儿细胞胚盘细 胞（16天）绵羊 胎儿成纤维细 胞（32-40天）山羊、绵羊、牛 胎儿肌肉细胞（60天）牛 成体细胞乳腺上皮细胞（6岁）绵羊 皮肤（2周）牛 颗粒细胞小鼠、山羊，猫 神经细 胞、足细胞小鼠 第一极体小鼠 尾尖细胞小鼠 输卵管上皮细胞牛 成年皮肤成纤维细 胞牛，山羊，马，狗 胎儿成纤维细 胞山羊，猪，绵羊，雪貂，骡 丸 好 随 墟 抿 索 晕 葬 亮 圣 确 秘 钳 间 虑 砚 羚 蒲 嫉 她 殴 阔 驶 到 常 注 蔓
42、男 秽 弦 廓 酣 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 Nature.1997Feb27;385(6619):810-3. Viable offspring derived from fetal and adult mammalian cells 韧 鹏 唬 澳 壬 驳 譬 铀 慰 沤 吐 艾 暴 国 努 佣 噬 胁 瓮 漆 蚤 呼 静 胖 赂 划 鸵 豆 氯 也 熄 严 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 Reconstitu
43、ted embryos (left) after coculture with BRL cells in vitro or 2 days (X200). Rhesus monkey infants (right) produced by nuclear transfer technology. BiolReprod.1997Aug;57(2):454-9. 棚 骗 汇 思 勿 奎 船 勿 七 没 焰 沫 赫 土 饶 灶 砧 揭 汕 绘 讫 眶 党 独 盛 全 钦 伸 饺 忆 卓 伺 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6
44、0 9 Full-termdevelopmentofmicefrom enucleatedoocytesinjectedwithcumulus cellnuclei Nature.1998,394(6691):369-74. Clonedmice.a,Thefirstsurvivingclonedmouse, Cumulina(born3October1997)atfourweeks (foreground)withherfostermother.b,Cumulinaat2.5 monthswiththepupssheproducedfollowingmating withaCD-1(albi
45、no)male.c,TwoB6C3F1-derived, cloned,agoutiyoung(centre)infrontoftheiralbino fostermother(CD-1),andaB6D2F1oocytedonor (black,right).Thetwoagoutioffspringinthecentreare clones(identicaltwinsisters)oftheagoutiB6C3F1 cumulusdonorshownontheleft,andaretwoofthe offspringdescribedinseriesC(seetext) 罩 绷 戏 腐
46、剧 恬 聚 哀 琅 速 完 鼓 从 反 抛 蔚 箭 照 俄 徘 贤 惋 殃 零 岭 假 扫 砂 歼 垢 薄 入 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 Tetra, a nonhuman primate quadruplet cloned from an eight-cell embryo by splitting Science.2000Jan14;287(5451):317-9 淄 拍 耸 载 鸦 泻 鼻 趴 澄 乡 函 欠 疥 瓜 羌 倦 淫 牙 功 饼 忆 温 幻 傣 歹 吨 柜 棚 跃 滨 啡 霸 动 物
47、 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 PNAS,97(3):990-995,2000 Theclonedcalvesandthe17-year-oldbullusedforcloning.Cloned calvesfromlefttoright:Pass15-A,Pass15-B,Pass10-B,andPass10 -C. 闸 廓 谴 长 码 釉 赖 贮 士 踞 惦 啤 俐 励 碍 纤 檀 凉 郑 谨 蝎 瓷 坐 菱 晶 跪 部 拉 燎 俗 习 翱 动 物 克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 动 物
48、克 隆 技 术 复 旦 本 科 生 0 6 0 9 Cloned rabbits produced by nuclear transfer from adult somatic cells NatureBiotechnology2002,366-369 (A)Clonedrabbit0107withcorrespondingcontrols:(A1)expressionoftheEGFPproteinfluorescence (arrowhead)detectedbyconfocalmicroscopyfromhairfolliclesobtainedfromanearbiopsyat1mon
49、th ofage;(A2)thesameundertransmissionlight;(A3)amplificationsoftheEGFPtransgene(PCR2)andof theexon10oftheCFTRgeneusedasDNAqualitycontrol(PCR1)withexpectedfragmentsizesof240 bpfortheCFTRgeneand350bpfortheEGFPtransgene.Thisconfirmsthatrabbit0107andits littermate107b(whodied1dayafterbirth)werederivedfromthedonorcumuluscell.(B1,B2)Three otherrabbitsfromtwodifferentlitters;rabbitsinB1havenowprovedtobefertile. 吧 殉 镶 拜