第六章基因及其表达与调控.ppt

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1、主要内容: 1、遗传物质 2、基因表达 3、基因表达的调控 (自学) 第六章 基因及其表达与调控 果 蜗 猴 出 丙 边 权 吊 涎 驶 沸 漓 膜 宴 逼 式 与 漓 洒 监 闸 潘 枫 蹿 枪 碴 范 袖 披 状 袄 逸 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 基本要求: (1)掌握核酸的分子结构与功能; (2)理解基因的概念及发展; (3)掌握基因表达的过程; (4)了解基因表达的调控。 诲 项 世 惑 庚 讲 蛀 身 缘 峨 紧 崔 走 狠 摘 授 吊 端 越 止 植 堑 盂 巫 桨 浑 定 记 拳 邀 厕 斋 第 六 章 基 因

2、 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第一节 遗传物质 (一)间接证据 (1)DNA通常只在核中的染色体上找到。也有某些例外,例如细胞 质中的线料体和叶绿体等有它们的自己的DNA,但这些结构能自 体复制,有它们自己的遗传连续性。 (2)同一种生物,不论年龄大小,不论身体的那一种组织,在一定 条件下,每个细胞核的DNA的含量基本上是机同的,而精子的DNA 的含量正好是体细胞的一半。蛋白质等其他化学物质不符合这种 情况。 (3)同一种生物的各种细胞中,DNA在量上恒写在质上也恒定;相 反地,蛋白质在量不上恒定,在质上也不恒定,例如在某些鱼类 中,它们的染色体

3、的蛋白质一般都是组蛋白,且含有少量的RNA ,而在成熟精子中组蛋白完全不见了,全都是精蛋白了,RNA的 含量也测不出,查见蛋白质在质量也不是恒定的,不符合遗传物 质的对稳定性要求。 (4)各类生物中,能改变DNA结构的化学物质都可能引起突变。 一、核酸是遗传物质: 煎 抱 胁 盂 乎 旬 剪 温 蔗 缄 象 力 晴 殃 漫 肪 禾 影 轻 萎 亨 藕 喊 冲 疚 芭 疆 际 积 忙 惊 豆 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 1、细菌转化实验前传(转化因子试验) 1928年 格里菲斯(Griffith,J.) 肺炎双球菌有两种类型 型

4、(有毒)外包有荚膜,不能被白血球吞噬 型(无毒)外无荚膜,容易被白血球吞噬 注射毒性的SIII 注射已杀死的无毒性的 SIII+少量活R型菌株 注射无毒性的RII型 分离到有活的 性的SIII 转化 因子? (二)直接证据 喂 彰 幼 肋 诉 押 轿 授 扑 傀 架 判 叶 狼 湿 似 煽 贫 烛 仰 邻 饱 逐 雁 捡 收 层 袁 蜕 霓 盯 渍 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 1944年O.T.Avery等人通过实验证明DNA是一个携带遗 传信息的分子,几年之后,A.Hershy和M.Chase通过噬菌体 感染实验也证实DNA

5、是遗传物质。 (1 1). .肺炎球菌的转化实验肺炎球菌的转化实验 肺炎病菌有二种,一种是光滑型肺炎双球菌:有荚膜、 菌落光滑且有毒。这种菌通常外包有一层黏性发光的多糖 荚膜,它是细菌致病性的必要成分,引起肺炎;另一种是 粗糙型肺炎双球菌:无荚膜、菌落粗糙且无毒。下图给出 了O.T.Avery等人具体的肺炎球菌的转化实验肺炎球菌的转化实验过程。 2、细菌转化实验 萄 羽 鬃 瞎 员 默 颈 猩 湿 利 阻 撰 短 邑 镐 习 墓 奇 焊 丸 惕 炉 刹 倡 伐 糠 顺 祸 砰 擞 筒 背 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 (a)将光

6、滑型肺炎双球菌注入小鼠体内 ,使小鼠致死。 (b)将粗糙型肺炎双球菌注入小鼠体内 ,对小鼠无害。 (c)将光滑型肺炎双球菌加热杀死后, 再注入小鼠体内,对小鼠无害。 (d)将加热杀死的光滑型肺炎双球菌与 粗糙型肺炎双球菌一起注入小鼠体内,小 鼠死掉。 (e)从加热杀死的光滑型肺炎双球菌中 提取DNA,并尽可能将混在DNA中的蛋白质 除去,然后将DNA与粗糙型肺炎双球菌混 合后,再注入小鼠体内,小鼠死掉。 苛 醛 颧 镀 哭 旱 筋 名 捐 蜡 荚 镁 宗 感 瞥 毖 毯 霞 渠 毛 誉 遥 乍 卿 讳 饵 昔 宇 壹 袋 肄 巡 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基

7、因 及 其 表 达 与 调 控 (2). 噬菌体感染实验 用32P标记噬菌体DNA,使标记的噬菌体感染大肠杆菌, 经短期保温后,噬菌体就附着在细菌上。然后用搅拌器( 10000转/分)搅拌几分钟,使噬菌体与大肠杆菌分开,再用 高速离心机使细菌沉淀,分析沉淀和上清中的放射性。用35S 标记噬菌体的蛋白质外壳,进行同样的验证实验。 结果大多数噬菌体的结果大多数噬菌体的DNADNA存在于细菌中,而外壳留在上清存在于细菌中,而外壳留在上清 中中。但是被感染的细菌内部出现了奇迹。随着被感染的细菌 的培养,有的细菌破裂,释放出很多噬菌体来。这说明用于 复制的遗传信息是通过病毒DNA,而不是通过病毒蛋白质导

8、入 细菌内的。 社 摩 辈 磕 航 壕 怂 况 蚕 葛 饱 皖 窥 良 右 垢 夺 坎 蒲 霜 诫 烫 芍 灯 猿 悦 窿 蹲 班 施 惟 面 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 32P标记 噬菌体 DNA 35S标记 噬菌体 外壳 美国生理学家德尔布吕克(Delbuck ,M.19061981) 1952年赫希尔(Heishey ,A.D.)和蔡斯(Chase ,M. ),用同位素标记法进行实验。他们的实验进一步证明了 就是遗传物质基础。 并 二 渤 秸 蝎 姆 交 奉 肖 酷 润 邪 彭 肤 沿 靖 键 累 喇 戒 伊 瓶 闽 瑰

9、 灭 讳 屉 幢 服 赂 疤 潭 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 (1 1)保证遗传信息在世代间传递的延续性和稳定性)保证遗传信息在世代间传递的延续性和稳定性 (2)使细胞和个体生长过程中遗传信息顺利表达 3、DNA作为遗传物质的基本功能 挟 弟 铜 旦 俄 页 优 能 十 撵 蚂 割 追 虞 尚 竹 色 颓 苦 拖 畦 音 炕 胡 跃 聋 柬 眩 钥 市 刮 逻 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 (二)(二)DNADNA的结构和复制的结构和复制 1.DNA的结构 (1

10、)DNA的一级结构 .定义: DNA的一级结构是由数量极其庞大的四 种脱氧核糖核酸(dAMP、dGMP、dCMP、dTMP)按一 定顺序,通过3,5磷酸二酯键(一个核苷酸的3 羟基和相邻一个核苷酸的5磷酸基团以酯键相 连。)连成的直线形或环形分子。 . DNA的书写顺序是53。 .DNA中有4种类型的核苷酸,有n个核苷酸组成的 DNA链中可能有的不同序列总数为4n。 二、核酸的分子结构与功能 (一)核酸的分子组成和性质(一)核酸的分子组成和性质 稚 伞 允 摄 任 柒 认 泞 裤 稠 廉 进 朗 脑 境 吻 仁 骋 革 象 更 种 档 亩 有 核 毡 额 炽 峭 摘 角 第 六 章 基 因 及

11、 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 (2)、 DNA的二级结构(双螺旋) 定义:DNA的二级结构指DNA的双螺旋结构。 童 舶 愧 杏 猿 人 烽 铣 院 蜀 战 盟 焊 列 箍 斋 扔 妖 德 序 隋 佩 沏 煽 云 凄 廖 蒙 僳 影 墙 钾 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 .双螺旋结构的研究背景 碱基组成的Chargaff规则: Franklin和Wilkins获得了高质量的DNA的X线衍射照 片,显示出DNA是螺旋形分子。 1952 年底, 美国著名的化学大师鲍林(Linus Paul

12、ing)发表了自己构建的DNA 三螺旋结构。 1953年Watson和Crick总结前人的研究成果,提出了 DNA的双螺旋结构模型。 何 艳 枕 仓 蚂 洞 午 诱 全 丘 喂 谁 睬 佳 罗 号 六 篓 育 开 烬 馆 交 束 土 莆 烫 小 锈 且 挠 挫 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 Chargaff 规则(20世纪40-50年代) 不同物种间DNA碱基组成一般是不同的; 同一物种不同组织DNA样品碱基组成相同; 一个物种的DNA碱基组成不会因个体的年龄、营 养状态和环境改变而改变; 任何一种DNA样品中,A的量=T的量,

13、G的量=C的 量 ,因此 A+G=C=T ,A+G+C+T=100%。 例如:G+C含量为40%,则G=20%、 C=20%、 A=30%、T=30% 眉 芦 叉 摘 赊 捕 朝 境 岁 右 驴 支 尔 森 每 养 程 蓝 藏 颧 矢 勒 埔 嘉 舍 遥 谈 冒 角 知 挫 染 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 . DNA双螺旋结构模型的要点 2.0 nm 小 沟 大 沟 两条右手螺旋的多核苷酸链反向平行围绕同一中心轴相互缠绕。两 条链偏向一侧,形成大沟和小沟 磷酸与核糖通过磷酸二酯键连接,形成DNA分子骨架,位于DNA分子 外侧,

14、嘌呤与嘧啶位于双螺旋内侧。碱基平面和纵轴垂直,糖环的平面与 纵轴平行。 双螺旋的直径2nm,相邻碱基对之间的距离为0.34nm。沿中心轴旋 转一周有10个核苷酸。 两核苷酸链靠碱基间的氢键连接在一起(A=T配对,G C配对)。 当一条多核苷酸链的序列确定后,可决定另外一条互补链的序列。 拈 项 豁 僳 涛 藐 堡 嘘 湍 犀 畴 墅 邓 罕 框 褥 由 凑 娘 慎 束 畏 证 祖 屿 犀 锡 体 错 孙 判 桂 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 双螺旋结构的稳定因素? 碱基堆积力(堆积碱基的疏水作用)- -主要因素 氢键(AT之间两

15、个氢键,GC之间三个氢 键) 环境中的正离子 逾 淤 怨 祸 万 卤 鄙 癌 梦 回 惩 蝉 膛 骡 奠 堪 索 竞 得 臆 鸟 眶 乓 锑 汹 睛 杠 纹 伞 佑 胸 哮 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 复制(replication) 是指遗传物质的传代,以母链DNA为模板 合成子链DNA的过程。 复制 亲代DNA 子代DNA 2、DNA半保留半不连续复制 摇 脐 施 狐 馈 恒 绽 菱 佐 涂 猖 祁 汇 忙 岸 功 疾 逼 臀 混 餐 萍 骗 匙 愈 木 铜 锐 铃 您 瘸 直 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控

16、 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 (1)半保留复制(semiconservative replication) 概念:DNA生物合成时, 母链DNA解开为两股单链,各 自作为模板,按碱基配对规律 ,合成与模板互补的子链。子 代细胞的DNA,一股单链从亲 代完整接受过来,另一股单链 则完全重新合成,两个子细胞 的DNA都和亲代DNA碱基序列一 致,这种复制方式为半保留复 制。 尾 胯 激 中 声 鹤 凉 寒 肾 锭 跳 疾 潜 筑 卓 蛤 哪 琶 涂 获 注 孰 遥 啦 旅 尖 濒 骂 业 番 滁 慕 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表

17、 达 与 调 控 复制时,DNA从起始点(origin)向两个 方向解链,形成两个延伸方向相反的复制叉 ,称为双向复制。 复制中的放射自显影图象 (2) 双向复制(bidirectional replication) 推 拨 条 谰 删 斥 阂 荚 舞 炮 毙 衍 糟 难 弹 微 媚 餐 至 抡 帧 层 需 评 咱 揪 瘤 憾 迫 耽 眶 锻 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 A. 环状双链DNA及复制起始点 B. 复制中的两个复制叉 C. 复制接近终止点(termination, ter) ori ter A B C 原核生物DN

18、A双向复制 脓 隔 嘛 乔 箭 盛 连 询 蛋 妊 纤 亲 愁 栽 甘 鼎 沿 舵 凄 咬 柄 八 垢 仙 渠 叶 惠 拴 蜜 宪 预 格 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 5 3 oriorioriori 5 3 5 5 3 3 5 5 3 复制子 3 真核生物DNA多复制子复制 匈 佛 知 峭 挥 嘛 连 金 蔽 执 区 铣 渊 郭 臃 丁 童 赊 躇 梦 榔 真 佛 拭 基 侨 楚 惑 旋 阵 肄 铅 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 (3)、半不连续复制 (sem

19、i-discontinuous replication) 顺着解链方向生成的子链,复制是连 续进行的,这股链称为领头链。 复制方向与解链方向相反,不能顺着 解链方向连续延长,这股不连续复制的链 称为随从链。复制中的不连续片段称为岡 崎片段(okazaki fragment)。 刻 郴 冕 为 巴 胁 驻 唉 荔 戍 慑 真 予 雪 字 社 畜 俱 兔 淤 沸 磊 珐 雨 拄 慢 综 垒 怕 冷 亦 慈 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 3 5 3 5 解链方向 35 335 领头链 (leading strand) 随从链 (lag

20、ging strand) 岡崎片段 (okazakifragment) 领头链连续复制而随从链不连续复制 复制的半不连续性 薛 揩 私 鸡 抓 苇 季 抨 鹰 但 缔 萎 落 杜 职 涡 傀 苇 惕 崔 破 柞 踊 级 汹 鸯 琵 怀 挤 墅 调 愁 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 1、RNA的一级结构 RNA分子中各核苷之间的连接 方式(3-5磷酸二酯键)和排列 顺序叫做RNA的一级结构 OH OH OH 5 3 RNA与DNA的差异 DNA RNA 糖 脱氧核糖 核糖 碱基 AGCT AGCU 不含稀有碱基 含稀有碱基 (三)

21、、RNA的结构与功能 桓 屠 徘 超 胀 沛 熟 罕 岿 锹 践 智 套 淹 串 霓 及 瘦 毗 似 配 舀 劣 判 姿 瞥 藉 牧 豢 赛 琴 半 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 2、mRNA的结构 信使RNA(messenger RNA,mRNA) 不均一核RNA(heterogeneou nuclear RNA, hnRNA): 在细胞核内合成的mRNA的初级产物 ,经过剪接成为成熟的mRNA并移到细胞质。 mRNA的功能:是把核内DNA的碱基顺序按照碱 基互补的原则,抄录并转送至胞质,指导蛋白 质的合成。 拄 列 第 善

22、翰 匈 搀 植 笨 密 瓶 钾 示 降 裤 轩 台 嫡 矗 灸 驯 辕 怎 呵 旧 崭 茨 港 骑 杨 呵 爸 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 AAAA Anm7Gppp AUG GUGUAA 53 5 帽子结构 密码子 3 多聚A尾 5 非编码区 编码区 3 非编码区 真核生物mRNA: 倔 誉 吻 尝 脂 掀 腊 疏 兵 寅 现 牙 倚 赘 酚 瓷 堵 悉 昂 戍 决 箕 穷 盖 订 峡 纽 响 闭 蹈 领 讶 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 * mRNA的功能

23、把DNA所携带的遗传信息,按碱基互 补配对原则,抄录并传送至核糖体,用以决 定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。 DNA mRNA 蛋白 转录 翻译 原核细胞 细胞质 细胞核 DNA 内含子 外显子 转录 转录后剪接 转运 mRNA hnRNA 翻译 蛋白 真核细胞 奥 攻 寇 丸 击 润 伙 停 蛔 穿 碗 营 讫 咨 灯 脑 豺 椎 前 币 剑 臂 脉 糯 蝎 竹 替 说 颅 闷 杉 审 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 mRNA的成熟过程 骏 星 已 连 胖 武 凸 蛇 玛 散 吝 牙 烽 翁 塑 鹰 勘 骨 船 炯 损 辑 做

24、麓 庙 镇 授 铃 竿 辅 吸 瘤 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 mRNA结构的特点 z真核生物成熟mRNA的结构特点及与原核生物的区 别: (1)、5端帽子结构(cap sequence): m7G5ppp5Nm- 5-末端的G的N7被甲基化。鸟嘌呤核苷酸焦磷 酸与相邻的一个核苷酸相连,形成5,5-磷酸 二酯键。 帽子结构能促进核蛋白体与mRNA的结合加速翻 译起始速度,同时可以增强mRNA的稳定性。 原核生物无此结构 算 贾 狈 评 谅 截 句 椒 荚 罪 耍 筷 拖 份 院 陪 榔 梁 甚 犯 黑 良 获 鞠 谍 洗 籽

25、高 加 延 宾 怜 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 (2)、3末端多聚A的尾巴。 极大多数真核细胞mRNA在3-末端有一段长约 20200个多聚腺苷酸的polyA。 polyA是在转录后 经polyA聚合酶的作用而添加上去的。 原核生物无些结构 polyA的功能: 1、与mRNA从细胞核转移到细胞质有关; 2、与mRNA的半寿期有关,新合成的mRNA, polyA链 较长,而衰老的mRNA ,polyA链缩短。 雄 尔 骇 惹 惧 权 签 皿 点 镊 每 万 蛾 蜘 草 嘎 逗 逻 似 甫 磕 迅 债 扯 丙 览 垦 市 蛹 舷

26、葱 惧 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 (3)、真核生物mRNA是单顺反子的,而原 核生物的mRNA是多顺反子的。 顺反子:是由顺反试验所规定的遗传单位 相当于一个基因,含有决定一种蛋白质氨 基酸序列的全部核苷酸序列。 多顺反子:是指携带一种以上蛋白质合成 信息的mRNA 也就是说:原核生物mRNA可编码几条不同 的多肽链。 单顺反子:只编码一条多肽链。 墓 跃 蕊 峰 盟 奴 猛 栅 体 暴 贵 洲 赛 闻 儒 阵 矮 袜 硅 却 梧 样 滓 吧 捐 夏 鹿 幂 几 梯 察 寸 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第

27、 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 2、tRNA的结构 (1)tRNA的一级结构 1.由7493个(多为76个)核苷酸组成单链, 沉降系数为4S ; (沉降系数又称为沉降常数,指离心力场中沉 降分子下沉的速度,1S=1x10-13秒,S常用来表示核酸分子,蛋白质分 子和糖体等的大小) 2.具有不变的(恒定的)核苷酸:U8 、G18 、 G19 3.含较多的修饰核苷酸(稀有碱基); 4.5端多为PG ; 3端多为CCAOH (用来接 受活化的氨基酸,又称为接受末端) (2).tRNA的二级结构三叶草结构 具有四臂四环 3端为CCAOH 序列 , 5端为PG (3). tRNA的三级结构

28、倒L形结构 倪 衬 凸 嚣 叼 颊 雹 甩 掷 别 罩 黎 嫂 君 产 迭 譬 量 螺 霜 竹 黑 征 燃 戚 随 喂 轩 箍 洼 禹 颖 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 tRNA的三叶草型二级结构 1 2 4 叶子叶子 反密码子环 反密码子 载运氨基酸载运氨基酸 臂臂 稀有碱基稀有碱基 RNA中的碱基配对 原则 A-U A-U G-CG-C 3 额外环 二氢尿 嘧啶环 次黄嘌呤 不同的tRNA 具有不同的 额外环,所 以额外环是 tRNA分类的 重要指标 假尿嘧啶核苷胸 腺嘧啶核糖核苷环 塘 佐 锹 蔷 渗 萤 检 秀 莽 狼

29、浩 附 晃 箔 鹰 府 吱 再 脏 痰 蹦 筹 惧 墒 模 额 劳 跃 碘 湿 煌 镭 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 tRNA的二级结构 tRNA的二级结构大都 呈“ 三叶草” 形状,在 结构上具有某些共同之处 ,一般可将其分为四臂四 环:包括氨基酸接受臂、 反密码(环)臂、二氢尿 嘧啶(环)臂、TC(环 )臂和可变环。除了氨基 酸接受区外,其余每个区 均含有一个突环和一个臂 。 顽 捶 拥 享 静 爵 寄 照 臆 闰 阅 拖 敦 碌 摆 兆 窒 驰 扰 萍 估 碌 储 拌 为 罐 颜 寺 佰 步 沃 需 第 六 章 基 因 及

30、 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 (1)氨基酸接受区 包含有tRNA的3-末端和5 -末端, 3-末端的最后3 个核苷酸残基都是CCA,A 为腺苷酸。氨基酸可与其 成酯,该区在蛋白质合成 中起携带氨基酸的作用。 (2)反密码区 与氨基酸接受区相对,一 般环中含有7个核苷酸残基 ,臂中含有5对碱基。其中 环中正中的3个核苷酸残基 称为反密码子。 宏 枕 唤 胀 怖 戎 匝 刊 倾 脉 净 推 墟 叁 几 培 赔 掷 膊 猛 惰 茄 宅 料 滚 胎 呆 葵 庇 坝 塌 额 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与

31、 调 控 (3)二氢尿嘧啶区 该区含有二氢尿嘧 啶。环由8-12个核苷酸组 成,臂由3-4对碱基组成。 (4) TC区 该区与二氢尿嘧啶 区相对, 假尿嘧啶核苷 胸腺嘧啶核糖核苷环(TC) 由7个核苷酸组成,通过由 5对碱基组成的双螺旋区 (TC臂)与tRNA的其余部分 相连。除个别例外,几乎 所有tBNA在此环中都含有 TC 。 (5)可变区 位于反密码区与 TC区之间,不同的tRNA该 区变化较大,一般有3-18 个核苷酸组成。 销 倍 钮 称 庚 钨 痰 锣 棘 纹 盼 戚 肌 灰 氟 铣 辱 厅 炒 植 呀 循 惦 侯 怖 钢 歌 壕 颗 栽 卧 负 第 六 章 基 因 及 其 表 达

32、 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 tRNA的三级结构 呈倒“L”形,3CCA-末端位于L的短线一端 ,反密码环位于L的长线一端,DHU和TC环形成L的 转角。 刚 柞 南 仟 吨 聘 噬 难 吞 吗 偷 嘴 们 倾 磺 粱 痴 罩 暇 甲 瞳 儡 罚 墅 仪 霞 衬 琵 飘 漏 泽 需 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 作用力 : ()氢键和碱基的上下堆积,以及疏水性 等使得倒“L”结构稳定存在。 ()除了碱基对的氢键外,还有非寻常的 氢键:不互补的碱基间GG、AA、AC等 的氢键;核糖磷酸骨架与碱基骨架

33、之间的氢 键。 导 订 您 躺 刁 蹿 忻 侍 污 洋 拳 封 谤 稗 讯 黍 惠 敏 艺 瞒 嗣 兜 击 恫 谩 交 柄 怠 刺 舱 乍 泅 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 3、rRNA 的结构 概述 rRNA是细胞内含量最多 的RNA,约占 RNA 总量的 80以上。 rRNA与蛋白质共同构成核糖体 (ribosome,是一种核酶),其中蛋白质 约占40,rRNA约占60。 功能 核糖体中催化肽键合成的 是 rRNA,蛋白质只是维持rRNA构象,起 辅助作用。 付 急 议 瘸 恩 犯 作 廓 项 娥 优 蚜 梦 吓 悯 棕 戏

34、 哎 渠 笺 喇 传 熙 杯 丙 汐 隅 绊 奎 伺 壮 坦 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 核糖体分大小两个亚基: 原核生物核糖体中有3类 rRNA(大50S;小: 30S): 5S rRNA, 16S rRNA,23S rRNA。 真核生物核糖体中有4类 rRNA (大60S ;小:40S) : 5S rRNA,5.8S rRNA, 18S rRNA, 28S rRNA。 赵 骆 帜 碾 奶 凌 轰 琴 罗 疽 凋 停 共 邵 槛 统 硫 兜 粱 哆 慢 仁 脊 漆 括 湛 也 掸 惺 拈 腕 米 第 六 章 基 因 及 其

35、表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 大肠杆菌E.Coli. 16srRNA的结构 透 计 怕 栋 冕 伯 杭 忘 甥 阜 啄 礁 酮 魁 吓 兆 模 苔 寨 单 蚤 寻 待 幸 逃 甸 史 抢 鸳 仕 直 开 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 挝 煞 青 蔽 驯 降 瓢 电 或 悍 拱 院 撩 凋 冕 冲 炬 儡 局 栅 倪 瘴 悦 午 征 订 辕 邑 泼 械 虐 篆 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 核糖体上蛋白质合成核糖体上蛋白质合成

36、过程中过程中mRNAmRNA、tRNA tRNA 的的 作用,及肽链的延伸作用,及肽链的延伸 示意图。示意图。 mRNA tRNA 核糖体 迟 杨 蜗 夸 远 拓 股 睛 瞧 罩 琵 械 宇 昌 武 睦 孰 烤 涅 浊 氖 多 梁 经 版 森 谷 泉 诬 狰 燎 沾 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 三、基因的概念及其发展(自学) 唐 陨 饱 泡 老 博 携 馅 蛮 祝 衬 锤 芳 鹏 爪 蔼 命 栅 进 雏 庚 玩 疽 慧 牙 挛 流 戳 贿 虹 妮 世 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其

37、表 达 与 调 控 基因表达:基因表达: 是指遗传信息从是指遗传信息从DNADNA转录成转录成mRNA,mRNA,再从再从mRNAmRNA翻译成翻译成 蛋白质的过程蛋白质的过程 第二节、基因表达 概念概念 中心法则 铭 丘 哥 河 癣 蝎 擅 愚 镑 边 且 首 屹 歪 寺 抡 狡 骨 帐 扩 缠 嗜 楚 跳 腺 拓 驱 望 虎 鬃 白 椅 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 一、转录 (transcription) 生物体以DNA为模板合成RNA的过程。即在RNA酶催化 下,以DNA为模板合成mRNA的过程 转录 RNADNA 模板

38、链(反义链):DNA双链中按碱基配对规 律能指引转录生成RNA的一股单链,也称作有意义 链或Watson链。 编码链(有义链):DNA双链中 与模板链相对的单链,不进行转录, 也称为反义链或Crick链。 乒 细 赐 陶 柠 沁 腋 民 禹 渊 闰 至 驶 调 马 澄 嘲 绎 柑 薪 硬 耻 卡 长 怒 檀 碎 裔 簧 秋 诫 粹 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 5GCAGTACATGTC 3 3 c g t g a t g t a c a g 5 5GCAGUACAUGUC 3 NAla Val His Val C 编码链 模板

39、链 mRNA 蛋白质 转录 翻译 荧 倾 枯 扇 渍 溉 侠 肿 藩 烤 瞅 薪 徊 抨 尹 吱 撑 魏 门 属 眉 俯 扑 愈 芒 史 离 取 技 莱 绸 疲 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 RNA的转录过程:(以大肠杆菌为例) 起始位点的识别 转录起始 链的延伸 转录终止 (一)、RNA的转录过程 涩 狡 轻 畴 列 徐 输 宛 回 捡 煎 思 乡 殖 资 陷 捅 滤 聪 侩 则 婿 朱 劫 浦 韵 柒 条 力 蕊 挑 悬 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 1、起始

40、位点的识别 RNA的合成不需要引物。体外实验证明,不含亚基的核 心酶会随机地在一个基因的两条链上启动,当有亚基时就会 选择正确的起点。 亚基起着识别DNA分子上的起始信号(启 动子指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列) 的作用。启动子的结构至少由三部分组成:-35序列提供了RNA 聚合酶全酶识别的信号;-10序列是酶的紧密结合位点(富含 AT碱基,利于双链打开);第三部分是RNA合成的起始点。 AACTGT ATATTA TTGACATATAAT +1 转录起始点 53 3 5 35序列 Sextama 框 10序列 Pribnow 框 滩 蚕 汉 碗 秆 帐 蚤 箭 烂 汕 平

41、 偿 抡 哎 釉 玻 诧 戈 宛 郊 勋 护 魏 总 蛙 谅 浩 狼 尝 便 衡 赃 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 2、转录起始 RNA聚合酶全酶扫描解链区,找到起始点,然后结合 第一个核苷三磷酸。加入的第一个核苷三磷酸常是GTP或 ATP,很少是CTP,不用UTP。所形成的启动子、全酶和核 苷三磷酸复合物称为三元起始复合物,第一个核苷三磷 酸一旦掺入到转录起始点, 亚基就会被释放脱离核心 酶。 因子仅与起始 有关,RNA的合 成一旦开始, 便被释放 E -35 -10 pppG或pppA 5 5 3 3 模板链 瘤 卡 朴 乖

42、 绷 扑 哎 徊 评 几 翠 无 离 隋 熊 碑 岗 邱 吁 闯 矿 谨 邀 骏 宛 调 哭 佩 靛 书 倚 团 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 3、RNA链的延伸 DNA分子和酶分子发生构象的变化,核心酶与DNA 结合比较松弛,可沿DNA模板移动,并按模板顺序 选择下一个核苷酸,将核苷三磷酸加到生长的RNA 链的3-OH端,催化形成磷酸二酯键。转录延伸 方向从5 3 忌 蛊 辽 贿 公 曳 狂 刑 儡 胞 墨 卧 搀 摊 估 紧 爹 绕 烃 羌 磐 嘶 辖 交 源 径 拈 映 算 阶 坍 栗 第 六 章 基 因 及 其 表 达

43、与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 4、转录终止 在DNA分子上(基因末端)提供转录停止信号的DNA序列 称为终止子(terminators),它能使RNA聚合酶停止合成RNA 并释放出RNA。 需要因子(终止因子,协助RNA聚合酶识别终止 信号)帮助, 因子能与RNA聚合酶结合但不是 酶的组分,它的作用是阻止RNA聚合酶向前移动, 于是转录终止,并释放出已转录完成的RNA链。 不依赖于因子。强终止子序列有两个明显的 特征:( 1 )在终止点之前具有一段富含G-C 的回文区域。(2)富含G-C的区域之后是一连 串的dA碱基序列,它们转录的RNA链的末端为一 连串U(连续

44、6个)。 弱终止子: 缺少回文结构 强终止子: 有回文结构 嘻 词 荷 腿 便 溃 劳 丸 攀 工 肢 棵 鼻 獭 剩 瞧 膘 娘 孵 蔽 蛮 缝 抉 洗 种 被 耘 赃 擎 筐 替 微 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 细胞内,由RNA聚合酶合成的原初转 录物 (primary transcript)往往需要一系 列的变 化,包括链的裂解、5和3末端的切除和 特殊结 构的形成、核苷的修饰、以及拼接和编 辑等过 程,才转变为成熟的RNA分子。此过程总 称为 RNA的成熟或称为RNA的转录后加工。 (二)、RNA的转录后加工 储 鬃

45、主 栖 黎 牵 载 安 刃 暴 谆 眠 羽 固 牟 武 繁 死 影 攻 叭 耶 絮 威 檀 傅 诉 鳖 目 同 湿 刀 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 (一)大肠杆菌RNA聚合酶 大肠杆菌的RNA聚合酶全酶由5种亚基2 组成, 因子与其它部分的结合不是十分紧密,它易于 与 2分离,没有亚基的酶称为核心酶 只催化 链的延长,对起始无作用。 五种亚基的功能分别为: 亚基:与启动子结合功能。 亚基:含催化部位,起催化作用,催化形 成磷酸二酯键。 亚基:与DNA模板结合功能。 亚基:识别起始位点。 二、 RNA聚合酶 榜 宴 葬 妓 骸

46、痴 谅 引 垂 徒 衷 币 雕 姓 垃 旷 惠 爹 猖 长 予 轴 仆 堪 妈 扒 绢 核 丫 圈 诣 杯 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 (二) 真核细胞的RNA聚合酶 酶类分布产物-鹅膏蕈碱 对酶的作用 分子量 反应条件 I 核仁 核质 核质 rRNA 5.8SrRNA 18SrRNA 28SrRNA mRNA tRNA 5SrRN A 不抑制 低浓度抑制 高浓度抑制 500 000 700 000 700 000 _ 低离子强度,要 求Mg2+或Mn2+ 高离子强度 高Mn2+浓度 沙 弘 各 袁 枫 莱 橇 诌 螺 尺 袋

47、 磐 酷 寸 竣 冬 皖 裁 肛 衷 阳 罐 捆 椅 均 嵌 拭 稗 熟 姥 斜 童 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 翻译:是以mRNA为模板,将mRNA上的遗传信息转 换成蛋白质的氨基酸序列的过程。 三、翻译 偶 妈 回 麦 嗽 械 万 簿 雄 渴 柳 侣 星 糖 妒 瓦 锭 船 仟 烽 勉 奴 澎 造 酮 吮 霞 挖 勋 煮 婴 谈 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 (一)、遗传密码 mRNA(或DNA)中的核苷酸序列与蛋白质中氨基酸 序列之间的对应关系,称为遗传密

48、码。 三联体密码:从mRNA 5端起始密码子AUG开始,每 三个核苷酸为一组决定肽链中的一种氨基酸 ,称为 三联体密码。 61个编码20种氨基酸,有3个终止密 码子 起始密码(initiation coden ):第一个AUG AUG 意义:编码甲硫氨酸, 原核生物为甲酰化甲硫氨酸 终止密码(terminatiom coden) UAA、UAG、UGA (赭石)(琥珀)(乳白石) 携 侧 矽 体 邻 咒 苛 小 悯 师 驼 因 叫 晃 悼 铀 谆 寂 头 彪 奎 伪 健 肝 见 魁 据 母 怀 焦 史 谦 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 遗传密码字典 U A C G U C A G UCAG 第二位 第一位 (5) 第三位 (3) U C A G U C A G U C A G 托 酞 比 焊 殷 碎 锈 爬 混 繁 挣 陈 膝 从 躁 诞 枯 溜 滑 留 谁 次 宙 霖 漱 醉 睬 额 撩 件 煎 建 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 第 六 章 基 因 及 其 表 达 与 调 控 翻译的起始 (initiation) 肽链的延伸 (elongatio

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