细胞科学报告选题20111112.ppt

《细胞科学报告选题20111112.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《细胞科学报告选题20111112.ppt（25页珍藏版）》请在三一文库上搜索。

1、削 磐 斌 嘱 深 食 领 卧 伶 锻 咖 樊 尧 零 益 族 去 脖 沏 穴 涉 碘 部 靠 篡 蛮 茸 输 团 娶 粮 滨 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 转基因动物 焙 氟 邀 加 腥 援 赣 志 鱼 怒 挝 倪 酚 辅 兜 藩 浅 啄 兰 碳 吞 蹭 妮 目 恭 狠 寝 闭 窝 尉 蔚 控 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 转基因动物 n1982年美国华盛顿大学 Palmiter等将大鼠生长激素基

2、因导入小白鼠的受精卵里， 再将这一受精卵植入借腹怀 孕的母鼠体内，生下一个比 正常体格大一倍的“超级小鼠” 。 n按照转基因小鼠的思路，人 们已经成功的获得了转基因 大鼠、鸡、山羊、绵羊、猪 、兔、牛、蛙、鱼等。 撂 帚 肾 熊 弄 纫 柏 济 瓢 姚 兰 腕 圈 链 妆 诫 爹 春 抱 善 鸿 性 珐 袭 皋 玄 衷 十 泰 痴 仑 世 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 转基因动物技术 n概念 n研制的方法 n技术的优点 n发展前景 雾 咖 陇 枷 盘 羞 贸 搜 唤 捉 玖 沿 糊 汽 支 者 惩

3、 夏 啼 什 娇 孪 汀 恃 孔 化 抢 智 诅 舷 寐 盘 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 含 外 源 基 因 的 载 体 基因微注射 移植受精卵 小鼠出生 转基因鼠的检测 繁殖后代 女 掐 谰 兄 伸 驻 永 押 激 婆 详 茶 呐 况 员 厅 稀 众 吝 穿 箱 碾 绝 霓 找 肥 协 淑 察 茫 贼 伤 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 转基因动物 n一、转基因动物概述 n（一）转基因动物概念 n转

4、基因动物是指通过基因工程对DNA进行体外操作，添加 或删除一个特殊的DNA序列，然后导入早期的胚胎干细胞 中，产生遗传结构得以修饰的动物，其改变的性状可以遗 传给后代。 n这些改变包括： n（1）外源DNA片段至少整合到一条染色体上； n（2）由于外源DNA的插入使任何一个基因发生改变； n（3）由于外源DNA的插入或内源基因的删除使染色体发 生重排； n（4）有意识地导入可以持久存在的遗传实体。 轨 脾 胖 再 椎 拷 领 墩 斌 雪 钟 镍 渡 属 徘 叛 惩 骡 诚 厢 遁 事 烘 爹 境 惑 炕 摄 卉 要 寓 沧 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞

5、 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 （二）转基因动物的命名 n1符号 n(1)一个转基因符号由以下三部分组成： qTgX (YYYYYY) Zzz， nTgX=方式； n(YYYYYY)=插入片段标示； n= 实验室指定序号； nZzz = 实验室注册代号； 洋 瞧 拓 奏 鸳 艳 瘴 吃 色 确 互 单 苛 涟 错 膳 硕 冶 威 切 社 闭 廷 瞎 鸡 苛 伸 入 陀 捌 额 醛 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 (2) 方式 转基因符号通常冠以Tg字头。 随后的一个字母（X

6、）表示DNA插入的 方式： H 代表同源重组； R 代表经过逆转录病毒载体感染的插入 ； N 代表非同源插入。 础 刽 痉 演 胀 颧 汉 乐 益 峙 肮 哆 酱 跑 定 遏 钵 寺 塑 汇 桃 睦 馁 渺 励 恫 怨 琉 炎 漂 坛 灭 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 （3）插入片段标示 An 匿名序列； Ge 基因组； Im 插入突变； Nc 非编码序列； Rp 报告基因； Sn 合成序列； Et 增强子捕获装置； Pt 启动子捕获装置。 煎 妆 匹 佣 凉 送 宛 典 体 狗 正 猪 瑞 墨

7、抄 靶 侧 彪 染 孤 缠 瓦 屈 待 溜 咙 侄 跃 尾 棋 蔫 毒 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 2.举例 C57BL/6J-TgN(CD8Ge) 23 Jwg： 来源于美国杰克逊研究所（J）的C57BL/6品系小 鼠被转入人的CD8基因组（Ge）；转基因在Jon W.Gordon (Jwg) 实验室完成，获取于一系列显微注 射后得到的序号为23的小鼠。 罕 捆 辛 辞 皿 服 辜 馆 陀 史 耍 蓬 武 比 托 鸭 紊 榔 钮 藩 踏 茅 摈 蔡 著 坐 出 鹊 少 缉 坚 数 细 胞 科

8、学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 二、转基因动物的基本原理和方法 n（一）基本原理 将改建后的目的基因用显微注射等方法注 入实验动物的受精卵，然后将此受精卵再植入 受体动物的输卵管中，使其发育成携带有外源 基因的转基因动物，人们可以通过转入外源基 因培育优良品种的工程动物等。 唆 跟 教 掠 朝 站 盈 嗜 笺 帕 崔 奠 谚 浪 舍 萎 迁 誓 疟 弱 嚏 戏 揪 循 质 写 娩 楼 吻 粗 并 云 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1

9、1 1 1 2 1.外源目的基因的分离 2.外源目的基因与转性基因表达启动子、增强子、报告基 因等构件的拼接重组 3.重组DNA导入生殖细胞或胚胎干细胞 4.胚胎移植技术 5.鉴定及筛选 6.目的基因整合率及表达效率的检测 （二）转基因动物的关键技术 宾 诡 语 斥 咀 霓 潘 橡 手 马 酿 否 谐 矽 通 悉 鞠 箔 朔 乾 鸭 裳 葵 吮 刑 伶 格 鲁 堂 搬 帛 只 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 1.采取受精卵 采取受精卵的方法分为获得自然排卵的受精卵的方法和 以激素诱发排卵的方法，还有

10、采取未受精卵，然后在体外受精 的方法。 2.向受精卵雄性原核注入DNA溶液 通过微分干涉显微镜观察受精卵，会看到两个大的原核 。两个核不久即可融合，接着核膜消失。雄性原核要比雌性原 核能容纳更多的DNA溶液，一般是向雄性原核注入DNA溶液。 3.向假妊雌小鼠移植 （1）假妊雌小鼠的制作 （2）将操作卵移植至输卵管 4.转基因动物的检测 显微注射法 衔 互 垒 肚 桌 椎 羔 埋 呢 春 丧 醒 榜 量 辊 侧 铰 迢 售 喜 激 悟 曳 祝 辕 锻 编 社 书 痹 革 定 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1

11、 2 逆转录病毒法 原理： 逆转录病毒的核酸为一条单链RNA分子，其基因 由两部分组成，一是顺式作用序列，为病毒复制和整 合所必需；二是反式作用序列，编码病毒的包装蛋白 。将外源基因取代反式作用序列构建成重组载DNA。 另外将包装蛋白基因导入专门的细胞并使之整合 到染色体上，形成包装细胞。 如果重组病毒DNA导入这种包装细胞中，病毒包 装蛋白能将DNA包装成具有感染力的重组蛋白颗粒， 能浸染动物细胞而将重组DNA引入宿主细胞。 唤 域 终 肤 轩 仲 机 申 移 括 套 赊 厅 辊 嵌 治 亦 浦 粳 擦 只 施 踏 落 蹈 隧 扩 俱 识 饵 蓟 回 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0

12、1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 逆转录病毒法 步骤： 1.逆转录病毒载体的构建 2.选择和培养包装细胞系 3.重组病毒DNA导入包装细胞 4.收集重组病毒颗粒 5.感染胚细胞，使细胞转化 此法是目前制备转基因鸡 最有效和最成功的方法。 治 唾 卡 羚 建 词 哉 锗 囊 狭 漂 查 简 袁 蜘 贬 拽 捶 获 渐 绪 美 左 烯 煌 码 您 鳖 傈 谎 督 戏 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 胚胎干细胞法 胚胎干细胞是在人（哺乳动物）胚胎发育早

13、期囊 胚（受精后约57天）中未分化的细胞。囊胚含有约140 个细胞，外表是一层扁平细胞，称滋养层，可发育成胚胎 的支持组织如胎盘等。中心的腔称囊胚腔，腔内一侧的细 胞群，称内细胞群，这些未分化的细胞可进一步分裂、分 化，发育成个体。 由于内细胞群可以发育成完整的个体，因而这些细胞 被认为具有全能性。当内细胞群在培养皿中培养时，我们 称之为胚胎干细胞。 踩 吗 菱 哭 峰 跑 舒 掀 愁 严 啥 筏 奔 芽 祁 有 蹈 徽 馒 守 稠 汝 榔 多 肤 晾 眉 阮 骨 挟 姚 趁 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1

14、 1 2 利用胚胎干细胞法制备转基因小鼠的过程 1. 3.5天的孕鼠 2.分离胚细胞 3.转入培养皿中培养 4.分离内层细胞团 5.收集干细胞克隆 6.酶处理解散细胞 7.培养干细胞 8.转染干细胞 9.植入代孕母鼠体内 癣 们 炼 援 抖 宽 绕 溶 蛋 掂 吭 别 商 鸡 葱 亭 头 掌 早 跟 旨 陡 与 佛 媳 般 云 缀 综 锡 则 斑 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 在胚胎干细胞 基础上的基因 打靶技术 2007年诺贝尔生理学或医学奖 分别授予两名美国人马里奥卡佩 基、奥利弗史密斯和一名

15、英国人 马丁埃文斯，以表彰他们在“基因 靶向”技术方面的突出贡献。诺贝 尔奖评审委员会发布的公报说， 三位科学家“在涉及胚胎干细胞和 哺乳动物重组方面有着一 系列突破性发现”，为“基因靶向” 技术的发展奠定了基础。在“基因 靶向”技术的帮助下，科学家可以 使小鼠体内的特定基因丧失功能 。此类“基因敲除”试验可以帮助人 们了解基因在胚胎发育等多种现 象中发挥何种作用。“基因靶向”技 术为阐明人类疾病的发生机理方 面发挥了至关重要的作用 。 穆 衬 炼 湍 粘 泰 筷 振 禾 胡 芒 悼 哼 栏 锥 豹 恍 陀 填 勒 淋 毋 唆 源 迢 趟 千 段 歌 搓 型 库 细 胞 科 学 报 告 选 题

16、 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 在胚胎干细胞基础上的基因打靶技术 基因打靶是指通过DNA定点同源重组，改变基因组中的 某一特定基因，从而在生物活体内研究此基因的功能。 基因打靶技术是一种定向改变生物活体遗传信息的实验 手段，它的产生和发展建立在胚胎干(ES)细胞技术和同源重 组技术成就的基础之上，并促进了相关技术的进一步发展。 通过对生物活体遗传信息的定向修饰包括基因灭活、点突变 引入、缺失突变、外源基因定位引入、染色体组大片段删除 等，并使修饰后的遗传信息在生物活体内遗传，表达突变的 性状，从而可以研究基因功能等生命科学的重大

17、问题，以及 提供相关的疾病治疗、新药筛选评价模型等。基因打靶技术 的发展己使得对特定细胞、组织或者动物个体的遗传物质进 行修饰成为可能。 囤 畜 鼻 端 层 鸟 荷 赡 纬 浓 闹 拇 礁 践 腾 忘 恭 农 玻 都 魏 眶 凭 闺 垫 佰 站 坟 蹿 烹 车 退 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 精子载体法 精子载体法是精 子和外源DNA混合 培养时，外源DNA 可直接进入精子的 头部，通过受精将 外源基因引入动物 细胞中。 外源DNA导入 精细胞的方法有 DNA与精子共育法 、电穿孔导入法、 脂质

18、体转染法。 忠 炔 釉 煎 备 几 汾 桑 把 悬 乾 摈 御 资 妹 酚 霹 栅 甩 载 良 青 左 老 中 献 篱 茵 免 基 起 灌 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 体细胞核移植法 1997年，英国科学家Schnieke 和Wilmut等通过体细胞核移植技术 成功克隆了“多莉”。 1997年6月Wilmut报道用胚胎 细胞为核供体，获得了表达治疗人 血友病的凝血因子IX转基因克隆绵 羊“波莉”。 1999年，美国科学家 Alexander克隆了头山羊，改变 了它们的基因性状，使它们的乳液 内含

19、有一种对心脏病具有疗效作用 的蛋白质。 碴 谭 速 禁 鹊 沤 琶 整 畔 摸 芹 佃 畅 讫 嘻 必 馋 鹊 副 心 俄 植 刚 滑 峡 困 靖 成 甥 顿 甭 份 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 受体介导法 是将外源DNA与受体 分子连接后与胚胎细胞共 培养，受体可以介导外源 DNA进入受体细胞，从而 实现基因转移。 1999年，Ivanava用受体 介导法制作了转基因鼠。 氟 很 豌 温 双 验 竖 乓 仙 甘 汽 轨 谐 品 按 届 瓤 坠 嫁 晶 痞 糠 澜 厢 累 汹 佃 扯 淌 性 笛

20、 轿 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 提高转基因效率的策略 1、对外源基因的整合机制进行深入研究，避免基 因的随机整合，提高基因的表达效率。 2、建立更完善的转基因方法。利用胚胎干细胞介 导可以进行基因表达的体外选择，是提高转基因 效率的有效方法。 3.探索有效的阳性胚胎筛选方法。 4.使用大的外源DNA片段。 5.选择表达效率高的启动子。 6.其它DNA顺序的影响。如顺式调控区元件等。 悉 犊 趾 腑 伯 酉 恰 垦 吏 衅 夸 蜀 硅 岂 杨 栅 挑 撩 短 童 苦 啤 迂 摄 奔 蹈 跳 厂

21、考 炒 堂 环 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 三、转基因动物的应用 n（一）提高动物优良性状、改善动物产品质量 n（二）动物抗病育种 n（三）生产药用蛋白 n（四）生产人用营养保健品 n（五）生产可用于人体器官移植的动物器官 n（六）建立诊断、治疗人类疾病及新药筛选的 动物模型 侩 挽 募 蝇 耻 饶 音 烈 蘸 贸 诱 黍 哨 全 菠 雁 雅 抑 牵 蛇 裴 答 敞 夫 肿 砷 你 娘 凋 遏 碎 钵 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题

22、 2 0 1 1 1 1 1 2 技术优点 1.转基因动物可以提高生产能力。（瘦肉型猪） 2.转基因能增强抗病能力。（转基因鲑鱼） 3.转基因能生产生物医学产品。（转基因猪生产 人血红蛋白） 革 镶 疲 菌 哆 奏 掇 综 答 性 肃 疥 夏 醉 垦 沥 烤 膝 喧 叮 詹 长 漳 藻 忌 打 奇 庞 摸 颖 毖 禽 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 技术的忧患 1.基因污染： 人工组合的基因，可能会通过转基因作物或家养动物扩展到其他 栽培作物或自然界野生物种，并成为后者基因的一部分。这就是 基因污染。 2.基因武器 运用遗传工程技术，按人们需要，在一些致病细菌或病毒中，接 入能对抗普通疫苗或药物的基因，产生具有显著抗药性的致病菌 ；或者在一些本来不会致病的微生物体内接入致病基因，而制造 出新的生物制剂。 转基因生物的危害.flv 不要把他们的成果用于战争 耕 拣 淫 询 穗 刃 墙 讶 鹿 批 乐 棉 胃 彭 颤 灼 人 悬 拨 夷 曲 疯 搐 植 低 剃 舟 皋 棉 驰 浚 充 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2 细 胞 科 学 报 告 选 题 2 0 1 1 1 1 1 2