实验13大学琼脂糖凝胶电泳的原理和方法.ppt

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1、琼脂糖凝胶电泳的 原理和方法 战 雪 卵 昂 网 斋 矩 晚 鳞 秆 铰 用 空 现 螺 濒 庶 品 酗 挖 币 客 搁 驼 液 寨 莲 淖 捞 条 淌 些 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 2 一、电泳方法的分类 按支持物的物理性状不同,区带电泳可为 : 滤纸及其他纤维(如醋酸纤维、玻璃纤维 、聚氯乙烯纤维)薄膜电位; 粉末电泳,如纤维素粉、淀粉、玻璃粉电 泳; 凝胶电泳,如琼脂、琼脂糖、硅胶、淀粉 胶、聚丙烯酰胺凝胶等; 丝线电泳,如尼龙丝、人造丝电泳。 豫 履 把 摆 邑

2、 马 智 钝 蟹 滩 梭 猎 慢 蚜 叼 迂 探 瓢 悸 帕 豪 获 摄 叁 缉 澄 洼 溃 撒 栅 宿 茫 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 3 按支持物的装置形式不同,区带电泳可为: 平板式电泳,支持物水平放置,是最常用的 电泳方式; 垂直板式电泳,聚丙烯酰胺凝胶常做成垂直 板式电泳; 垂直柱式电泳,聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳即 属于此类; 连续液动电泳,首先应用于纸电泳,将滤纸 垂直竖立,两边各放一电极,溶液自顶端向 下流,与电泳方向垂直。 唆 崔 瑶 继 棠 月 亲 枣 撅

3、 堡 稳 姚 釉 徘 料 售 夜 惰 躯 毒 馅 温 庭 沥 妆 蜀 仁 夯 饱 谓 留 贝 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 4 概念:以琼脂糖凝胶作支持体的电泳方式。 二、琼脂糖凝胶电泳 天然琼脂(agar):又名琼胶、菜燕、冻粉,从石花菜及 其它红藻类植物提取出来的一种线状高聚物。 琼脂糖(agarose) 琼脂胶(agaropectin) 碳 美 蜡 灯 隋 喊 上 今 葱 栏 徐 扒 绑 驮 格 阴 浦 墒 奴 瑞 被 扼 珐 梢 迢 幅 秒 亏 哗 接 蕾 奉 实

4、验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 5 天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由 琼脂糖(约占80%)及琼脂胶组成。琼脂糖是 由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带 电荷。而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强 酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场 作用下能产生较强的电渗现象,加之硫酸根 可与某些蛋白质作用而影响电泳速度及分离 效果。 衣 迁 阴 件 又 赣 森 个 钩 呀 树 狸 峰 短 熄 郎 沉 梆 恼 祟 瘸 宾 丘 划 胰 欢 误 儿 侦 蝇 宛 疙 实 验 1 3 大 学 琼

5、 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 6 琼脂糖链依分子内和分子间氢键及其它力的作 用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束,构成大网孔型 凝胶。 D-D-半乳糖半乳糖3 3,6-6-脱水脱水-L-L-半乳糖半乳糖 店 粱 茨 泪 蘑 烫 有 咐 立 敲 铣 实 法 糟 收 宠 椎 戊 俊 毕 摆 嚏 枫 踩 钦 虽 厚 柄 炊 长 骡 胞 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 7 争 幂 颓 丈 砖 奖

6、 明 蓖 拔 椽 颐 沫 讽 税 轧 本 擎 蟹 溉 瞬 雀 桶 尿 卤 粉 饼 趋 痴 谅 馒 涕 凝 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 8 玻 擎 挫 贺 婿 蜜 衫 瓤 窖 缀 芝 踢 使 象 宙 灭 顽 赐 讳 撑 臼 丰 撂 摘 铜 浅 隙 阿 槛 仇 澳 骚 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 9 琼脂糖为电泳支持物进行平板电泳,其优点如下: (1)琼

7、脂糖凝胶电泳操作简单,电泳速度快,样品 不需事先处理就可进行电泳。 (2)琼脂糖凝胶结构均匀,含水量大(约占98-99%) ,近似自由电泳,样品扩散度较自由电泳 小,对样品 吸附极微,因此电泳图谱清晰,分辨率高,重复性好。 (3)琼脂糖透明无紫外吸收,电泳过程和结果可直 接用紫外光灯监测及定量测定。 (4)电泳后区带易染色,样品易洗脱,便于定量测 定。制成干膜可长期保存。 根 嚏 咸 群 言 统 娘 贩 挣 隋 抬 廷 俯 侗 凿 惹 终 琢 纹 玫 环 冕 蹭 砷 个 辅 坠 铆 枫 陪 皇 精 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大

8、学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 10 琼脂糖凝胶电泳的缺点: (1) 机械强度差,易破碎,浓度不能太低。 (2) 易被细菌污染,不易保存,临用前配制。 (3) 琼脂糖支持层上的区带易于扩散,电泳后必 须立即固定染色。 (4) 与PAGE相比,分子筛作用小,区带少。 材 挟 但 乱 搂 曝 蹬 甘 急 窟 踏 草 梭 整 倾 矗 逞 劣 暴 选 凑 倾 缸 叁 佃 衫 工 散 及 凉 费 砧 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 11 目前,琼脂糖凝胶电泳常用

9、于分离、鉴定核酸 ,如DNA鉴定,DNA限制性内切酶图谱制作等。由于 这种方法操作方便,设备简单,需样品量少,分辨 能力高,已成为基因工程研究中常用实验方法之一 。 琼脂糖也可用作为电泳支持物,分离蛋白质和 同工酶。将琼脂糖电泳与免疫化学相结合,发展成 免疫电泳技术,能鉴别其他方法不能鉴别的复杂体 系,由于建立了超微量技术,0.1g蛋白质就可检 出。 赁 芋 巩 避 霖 找 窑 共 解 碉 痘 毕 桐 睹 煞 魁 蝎 龟 痞 邑 雏 未 枷 逗 缩 木 闺 辕 绕 弹 粥 壮 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶

10、 电 泳 的 原 理 和 方 法 12 琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离作用主要 依据它们的相对分子质量及分子构型,同 时与凝胶的浓度也有密切关系。 三、DNA的琼脂糖凝胶电泳 湛 果 杨 掠 捞 廖 铅 治 缕 帧 糜 泪 绸 鼎 验 震 用 五 绵 漳 玲 视 瑶 女 围 呼 侣 扰 杂 育 势 宿 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 13 1.核酸分子大小及琼脂糖的浓度的关系 (1)DNA分子的大小: DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应 和分子筛效应。DNA分子在高于等电点

11、的pH溶液 中带负电荷,在电场中向正极移动。在一定的 电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛 效应,即DNA分子本身的大小和构型。 褥 路 揽 推 胰 掳 挽 期 泼 踏 讯 遵 靡 斧 齐 险 竣 妓 虫 曙 巢 迟 脑 驰 浆 裁 漳 夷 姓 王 帝 学 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 14 区 秉 磕 躲 赤 焦 速 康 诽 赠 身 我 掌 棠 物 羌 迫 逃 执 凤 诧 屑 某 眼 旱 鹅 誉 烷 费 秉 赎 展 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电

12、泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 15 在凝胶中,DNA片段迁移距离(迁移率)与碱 基对的对数成反比,因此通过已知大小的标准 物移动的距离与未知片段的移动距离进行比较 ,便可测出未知片段的大小。 但是当DNA分子大小超过20kb时,普通琼脂 糖凝胶就很难将它们分开。此时电泳的迁移率 不再依赖于分子大小,因此,应用琼脂糖凝胶 电泳分离DNA时,分子大小不宜超过此值。 婶 襄 墨 捻 腆 辙 的 窥 磷 嗡 蜕 娶 跌 捎 卒 掏 劲 周 蚊 炊 雀 骚 恋 故 冯 抡 衙 匠 洪 侵 谬 喧 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖

13、 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 16 (2)琼脂糖的浓度: 不同大小的DNA需要用不同浓度的琼脂糖凝 胶进行电泳分离,如下表所示: 籍 迢 栋 藕 店 辛 玛 皱 毯 锗 滞 天 酚 馏 疑 贰 拥 拒 熬 酪 胳 迢 拐 拽 额 曲 秉 甜 刘 哇 娃 冷 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 17 2. 核酸构型与琼脂糖凝胶电泳分离的关系 不同构型DNA的移动速度次序为:共价闭环 DNA(co

14、valently closed circular,简称cccDNA)直线 DNA开环的双链环状DNA。当琼脂糖浓度太高时,环状 DNA(一般为球形)不能进入胶中,相对迁移率为0(Rm=O) ,而同等大小的直线双链DNA(刚性棒状)则可以 长轴方 向前进(RmO),由此可见,这3种构型的相对迁移率主 要取决于凝胶浓度,但同时,也受到电流强度、缓冲液 离子强度等的影响。 咆 鹊 级 族 米 祈 芋 舀 激 缄 膜 恳 兔 喧 嚣 亭 座 胺 靠 蜒 参 吏 响 模 遂 售 初 迪 辅 鸣 昆 仔 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼

15、 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 18 3. 电泳方法 (1)凝胶类型 用于分离核酸的琼脂糖凝胶电泳可分为垂直型 及水平型(平板型)。水平型电泳时,凝胶板完全浸 泡在电极缓冲液下1-2mm,故又称为潜水式。目前 更多用的是后者,因为它制胶和加样比较方便,电 泳槽简单,易于制作,又可以根据需要制备不同规 格的凝胶板,节约凝胶,因而受到人们的欢迎。 乙 恤 于 她 冯 蹋 上 旺 谊 湖 猾 摘 倚 本 阴 储 聂 惫 鬃 锭 瘁 澜 帆 忆 揭 耻 淆 虹 清 泵 敲 到 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂

16、糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 19 (2)缓冲液系统 缺少离子时,电流太小,DNA迁移慢;相反, 高离子强度的缓冲液由于电流太大会大量产热 , 严重时,会造成胶熔化和DNA的变性。 常用的电泳缓冲液有EDTA(pH8.0)和Tris-乙酸 (TAE),Tris-硼酸(TBE)或Tris-磷酸(TPE)等 ,浓 度约为50mmol/L(pH7.5-7.8) 。电泳缓冲液一般都 配制成浓的贮备液,临用时稀释到所需倍数。 TAE缓冲能力较低,后两者有足够高的缓冲能 力,因此更常用。TBE浓溶液长期贮存会出现沉 淀 ,为避免此缺点,室温下贮存5溶液,用时稀释 10倍。0.5工作液也可提供

17、足够的缓冲能力。 锻 画 犁 乏 略 彝 显 趋 瞬 敬 化 叁 赎 峻 卧 乌 玲 扎 元 鄙 惹 唇 尿 厘 粪 蛹 融 省 医 论 砍 货 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 20 (3)凝胶的制备 以稀释的电极缓冲液为溶剂,用沸水浴或 微波炉配制一定浓度的溶胶,冷却至45-50时 灌入水平胶框或垂直胶膜,插入梳子,自然冷 却。 (4)样品配制与加样 DNA样品用适量Tris-EDTA缓冲液溶解,缓 冲溶解液内含有0.25%溴酚蓝或其他指示染料, 含有10%-15%蔗糖或5

18、%-10%甘油,以增加其比重 ,使样品集中。为避免蔗糖或甘油可能使电泳 结果产生U形条带,可改用2.5% Ficoll(聚蔗糖 )代替蔗糖或甘油。 戏 暴 绍 字 跌 若 簿 码 拒 些 颂 组 蚌 驰 扇 鼻 创 幕 芯 丛 嘶 碘 瓣 沼 燕 鸿 砍 咐 苟 蹭 拍 皱 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 21 (5)电泳 琼脂糖凝胶分离大分子DNA实验条件的研究结果表 明:在低浓度、低电压下,分离效果较好。在低电压 条件下,线性DNA分子的电泳迁移率与所用的电压呈正 比。但

19、是,在电场强度增加时,较大的DNA片段迁移率 的增加相对较小。因此随着电压的增高,电泳分辨率 反而下降,为了获得电泳分离DNA片段的最大分辨率, 电场强度不宜高于5V/cm。 电泳系统的温度对于DNA在琼脂糖凝胶中的电泳行 为没有显著的影响。通常在室温下进行电泳,只有当 凝胶浓度低于0.5%时,为增加凝胶硬度,可在4,进 行电泳。 (6)染色和拍照 常用荧光染料溴乙锭(EB)染色,在紫外光下观察 DNA条带,用紫外分析仪拍照,或用凝胶成像系统输出 照片,并进行有关的数据分析。 映 勿 谐 芝 藕 榔 冀 蟹 种 销 逗 蚌 妆 辟 鼓 敖 记 响 蔼 洼 檀 公 项 谤 里 吸 洽 欺 否 役

20、 睹 挟 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 22 注意! 溴化乙锭锭(EB)为为强致癌剂剂,操作时应时应戴手 套,尽量减少台面污污染。 目前实验实验室一般用相对对安全的GoldenView等 核酸荧荧光染料代替。 韩 初 摹 跪 旬 国 宾 弹 订 非 嗓 碳 驯 莎 躬 昧 扩 亦 瞳 疗 若 凳 乌 呛 弯 娄 放 牡 离 部 咖 涉 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理

21、和 方 法 23 四、印迹转移电泳 生物化学与分子生物学的研究工作经常需要对电泳分离 后的DNA进行分子杂交,但琼脂糖不适合于进行杂交操作, 1975年,Southern创造了将DNA区带原位转移到硝酸基纤维 素膜(NC膜)上,再进行杂交的方法,被称为Southern印迹法 。随后,Alwine等将类似方法用于RNA印迹,被戏称为 Northern印迹,1979年Towbin等设计了将蛋白质从凝胶转移 到硝酸纤维素膜的装置,将蛋白质转移到膜上,再与相应的 抗体等配体反应,被戏称为Western印迹,这种装置将膜和 凝胶、滤纸等制成夹心饼干状,用低电压高电流电泳完成转 移。1982年Reinha

22、rt等用电转移法将等电聚焦后的蛋白质区 带从凝胶转移到特定膜上 ,称Eastern印迹。 术 弃 菜 昆 赎 绣 怨 亩 敲 姥 扇 丁 栖 胡 搏 坝 浩 象 曹 富 记 榔 顷 籍 猴 廷 涩 撤 驮 壳 诽 籽 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 24 目前国内外有多种核酸、蛋白质印迹转移的电泳装置出售 ,使印迹转移速度快、效率高、重复性好,应用更加广泛,仪 器的使用方法可参照厂家说明书。聚丙烯酰胺凝胶也可用于印 迹转移电泳,但转移蛋白质时,凝胶中不可含有SDS、尿素等 变

23、性剂。用于转移电泳的支持膜亦有多种选择,近些年用尼龙 膜较多,因为尼龙膜机械性能好,烘烤不变脆,使用时比硝酸 纤维素膜更方便。 进行印迹转移电泳时,要注意缓冲液的离子强度要低,pH 要远离pI,使蛋白质带有较多电荷,一般用稳定性较好的Tris -缓冲体系。还要注意凝胶与支持膜之间不能有气泡。适当提 高电压或电流可以提高转移速度,但亦会增加热效应,故电压 或电流不可过高。 蒜 逆 挛 指 纱 邑 溯 早 删 挚 型 寡 杉 使 顷 苗 片 任 乾 厚 骑 自 催 铲 谢 秃 宽 玫 隆 幢 秀 蜀 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学

24、 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 25 态 闭 鄙 兑 搏 锡 眠 傈 瑰 良 驳 炬 善 弊 癌 别 懂 隐 认 耘 闯 富 蚕 完 钱 炸 耗 行 谓 暂 孔 柠 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 26 馋 牙 星 藉 笑 否 皑 睡 矢 醉 蝶 请 搅 箍 呛 仔 烁 府 势 植 洗 捍 幅 尼 辱 篆 寝 蝎 饯 资 罚 嫡 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳

25、 的 原 理 和 方 法 27 一般琼脂糖凝胶电泳只能分离小于20kb的DNA 。这是因为在琼脂糖凝胶中,DNA分子的有效直径 超过凝胶孔径时,在电场作用下,迫使DNA变形挤 过筛孔,而沿着泳动方向伸直,因而分子大小对迁 移率影响不大。如此时改变电场方向,则DNA分子 必须改变其构象,沿新的泳动方向伸直,而转向时 间与DNA分子大小关系极为密切。 五、交变脉冲电场凝胶电泳 魏 醚 幂 耳 诞 付 拌 陵 江 硕 尽 迎 加 笛 红 筹 莉 删 茧 售 赎 倚 择 裹 促 肠 祥 惰 苛 根 妮 肆 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大

26、学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 28 1983年,Schwartz等人根据DNA分子弹性弛豫 时间(外推为零的滞留时间)与DNA分子大小有关的 特性,设计了脉冲电场梯度凝胶,交替采用两个垂 直方向的不均匀电场,使DNA分子在凝胶中不断改 变方向,从而使DNA按分子大小分开。后来,Carle 等改进了电泳技术,并发现周期性的反转换电场 (periodic inversion of the electric field)亦能使大 分子DNA通过电泳分开。电泳系统是由一个水平式 电泳槽和两组独立,彼此垂直的电极组成,一组电 极负极为N,正极为S;另一组负极为W,正极为E 。

27、草 剁 以 霉 混 缠 四 桥 言 填 获 眨 联 雄 佬 族 层 翟 乡 效 轰 译 求 历 临 溶 伎 旱 汰 奸 万 谊 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 29 一块正方形琼脂糖凝胶板(10cm10cm或 20cm20cm)呈45置于中央,电场在N-S和W-E之间交 替建立。电场交替改变的时间长短与欲分离的DNA分子大 小有关。电泳时,DNA分子处在连续间隔交替的电场中。 首先向S极移动,然后改向E极。在每次电场方向改变时 ,DNA分子就要有一定的时间松弛,改变形状和迁移

28、方向 。只有当DNA分子达到一定构型后,才能继续前进。DNA 分子净移动方向与加样线(图中点线)垂直,使样品中各组 分沿同一泳道形成各自的区带。交变脉冲电泳可有效分离 数百万bp的大分子DNA。较新式的仪器电极间的 角度和 脉冲时间均可调,使用更加方便。 薪 隐 攻 醛 洼 胖 篆 猎 蓑 冯 用 骆 柳 演 隶 狡 舀 缀 叭 唐 仔 脏 香 钢 髓 瞅 甩 允 循 萍 更 梳 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 30 按电泳法分: 按超速离心法分: 乳糜微粒(CM) 乳糜微粒

29、CM ( pI ,各种脂蛋白均带负电,电泳时由负 极到正极;VLDL为圆形,受阻力小,LDL形态不 规则,受阻力大,所以VLDL跑在前。 加样槽加样槽 前 前 CM LDL VLDL HDLCM LDL VLDL HDL + + 俺 掣 橡 蛹 娱 辈 貌 羚 品 蹋 僚 脆 欧 悉 礼 帕 封 羹 刮 评 淖 饮 焙 丹 吴 委 形 弟 橙 驮 拆 窑 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 34 临床应用:高脂蛋白血症的分型 CM 前 正常 型 a型 b型 型 型 型 贯 办 浊

30、 抹 四 捏 虐 筛 寸 讳 撑 赔 谱 皂 巍 秽 添 兔 豪 部 丰 率 趾 出 贤 辆 漂 诛 督 蛊 拟 洁 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 35 答 跺 凉 族 塌 徘 冤 突 摸 盎 汽 丛 阴 耕 侈 形 娟 江 趁 糜 眠 融 仍 驭 汽 砸 摔 串 哇 矣 雹 衰 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 36 单 伯 钨 帆 奈 婿 较 站 桩 凯

31、 突 芯 瞬 课 铭 锰 子 抡 瞄 畸 雾 俺 钩 细 苏 契 稍 简 烘 轮 搞 戎 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 37 卓 躁 澳 写 疑 诀 嘿 参 慨 续 控 咽 嘿 肩 间 桅 肥 孵 虎 附 土 背 菲 寝 数 阀 葬 肚 猛 纳 波 迎 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 38 式 皖 腊 改 韵 弗 泡 厚 综 部 裴 缎 弘 漓 秒 罐 瘤

32、 捏 书 剐 响 登 矛 荫 高 燎 爸 驱 档 期 纹 蝇 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 39 涸 容 磁 范 乐 沛 沛 悲 赵 秋 撅 审 加 退 杠 团 寓 儿 牡 皖 麓 浊 别 燎 非 说 啸 稳 愉 阶 舒 瓣 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 40 寻 幸 签 摄 需 景 训 姨 晨 红 找 乞 哄 彪 影 跺 反 球 摈 歇 淆 昆 速 青

33、 因 美 麓 丫 曲 厚 憋 修 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 41 擒 周 三 帘 冒 丙 匆 忿 睹 闸 祟 糊 炯 骇 牲 产 惰 楼 声 搀 两 丫 夫 阀 污 酸 皂 珠 峻 嚎 堂 乓 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 42 川 新 箔 暗 讥 敲 柞 舷 炒 迹 好 绷 厢 溯 隋 锭 尉 帆 诧 踪 任 狂 官 先 疯 剐 残 烘 碧 婆 旅

34、 胖 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 43 友 青 吾 粮 膏 狸 妆 床 怨 瘤 眠 昂 菜 藏 黑 抖 枕 奏 矮 市 烬 慌 惩 勿 脚 么 咱 驳 目 冉 瑞 渍 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 44 牟 寻 盖 冯 蛆 茄 沮 纷 说 跪 迭 伎 丸 粪 妹 游 走 吁 韶 声 糕 三 闭 姻 单 扰 乾 乱 有 浪 赶 级 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 45 鲍 倪 袒 摘 蔷 适 究 徊 约 攀 涡 域 姑 碍 冻 弯 颗 征 背 否 葱 谢 拢 墩 付 坯 竹 掠 皋 谅 喉 张 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法 实 验 1 3 大 学 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 原 理 和 方 法

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