第四章发酵工艺控制修改版.ppt

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1、第4章 发 酵 工 艺 控 制 生化生产工艺学 Technology of Biochemicals production 弓 存 磷 瞧 痢 芯 壤 鸣 侣 值 告 篱 稚 背 敖 潞 儒 其 控 柜 粱 娶 俱 橙 慌 菊 讣 列 汤 微 拍 慨 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第一节 温度对发酵的影响及其控制 庞 梭 侮 鹏 传 矽 辞 拦 节 咱 挣 簿 沪 唉 械 鸡 油 马 按 市 盐 俩 南 拷 孕 锁 玛 篙 履 倾 挝 馋 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改

2、 版 一、 发酵热 - 发酵过程中释放出的净热量。 J / m3 h 或 - 单位体积的发酵液在单位时间内释放出来的净热量。 箱 厕 召 宫 秩 嗡 慢 想 殊 到 拍 谦 侯 杰 鳃 兔 烙 混 铃 揪 涸 驻 扮 废 庆 报 借 救 代 揩 黑 摹 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 Q发酵 = Q生物 + Q搅拌 - Q蒸发 - Q显 Q辐射 饲 兵 塔 靳 巾 饼 涝 匆 神 鳖 赞 稗 厄 讼 竟 草 丙 矩 谈 腺 漏 鸵 膛 爸 疡 虑 凄 长 颗 晤 捡 千 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章

3、发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 1、生物热 (Q生物) 产生菌在生长繁殖过程中本身会产生大量的热,此为 生物热。 这种热的主要来源是培养基中的碳水化合物、脂肪和 蛋白质等的分解。 释放出的能量部分用来合成高能化合物(ATP),部分用来 合成产物,其余的则以热的形式散发出来 纹 丈 沸 信 菜 卷 晕 贞 耀 上 陷 趁 揖 缚 命 回 泥 慰 伦 玖 抱 粳 己 钓 笼 殖 俯 滑 贾 企 嘉 缨 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 影响生物热的因素: 菌株特性 培养基成分和浓度 发酵时期 菌株对营养物质利用的速率越大,培养基成分

4、越丰富,生 物热也就越大。 发酵旺盛期的生物热大于其它时间的生物热 (四环素20- 50小时; 苏云金杆菌10-18小时) 蛾 挤 腾 己 徒 龄 机 操 芳 有 蔼 咳 枯 棒 拔 闭 痘 忠 瞩 凤 抒 瘤 烧 衙 柠 恕 扰 拨 眶 穴 仁 汗 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 2、搅拌热 (Q搅拌) 搅拌带动发酵液作机械运动,造成液体之间、 液体和设备之间的摩擦,产生数量可观的热。 呼 掐 仔 杉 搐 呀 释 巷 熊 骏 希 贞 个 胆 勃 苟 虏 社 帮 葵 狡 幼 砰 厉 础 狐 渤 路 臻 惜 涝 埂 第 四 章 发

5、酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 搅拌热与搅拌轴功率有关,可用下式计算: Q = P 860 4186.8 (J / h) P - 搅拌轴功率,kW 8604186.8 - 机械能转变为热能的热功当量, J /kW.h 影响因素: 搅拌器的类型及搅拌速度 雄 烟 眩 腰 谷 膛 的 故 么 枝 压 陡 颓 蟹 簿 齐 遏 硒 扎 畅 督 蛙 猫 粗 爬 浅 遣 对 霖 腿 纲 曾 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 3、蒸发热 (Q蒸发) 空气进入发酵罐后,就和发酵液广泛接触进行热交换 ,

6、同时必然会引起水分的蒸发,蒸发所需的热量即为蒸发 热。 4、显热 (Q显) 排出气体所带的热 吟 父 冉 脑 大 佑 庞 无 几 虽 吐 庚 痰 美 膏 又 侩 现 荫 侄 校 斥 惠 蚌 穴 代 映 废 潭 拍 殉 绞 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 5、辐射热 (Q辐射) 因罐内外的温度不同,发酵液中有部分热通过罐体 向外辐射。 辐射热的大小决定于罐内外的温差 熬 垫 纬 鲜 煌 糟 盒 帅 刚 沫 器 食 腔 役 甲 扣 宿 听 煤 盾 秽 噬 晃 勾 盘 逗 顺 莹 声 低 奖 淬 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修

7、改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 1)菌种特性 2)培养基 (成分及配比) 3)发酵阶段 4)搅拌类型及搅拌速度 5)通气速度 (影响Q蒸发和Q显) 6)罐内外的温差 影响发酵温度的因素: 由于Q生物、Q蒸发、Q显在发酵过程中随时间而变化 ,因此发酵热在整个发酵过程中也随时间变化。为了使发 酵在一定温度下进行,必须采取措施加以控制。 不 摆 袖 气 荔 音 悍 垣 厕 瞅 拉 障 污 皆 滇 猾 批 峻 纶 款 臃 翼 浸 衅 保 泪 彻 践 狙 巡 竣 袖 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 二、发酵热的测定

8、方法一: 通过测定一定时间内冷却水的流量和冷却水的进出口温 度,由下式求得这段时间内的发酵热: Q发酵 = GC (t2- t1) / V (J / m3 h) G - 冷却水流量,kg/h C - 水的比热, J/kg t 1、t 2 - 进、出口的冷却水温度, V - 发酵液体积 , m3 擎 浇 遇 墒 焊 职 含 蛾 续 莫 毁 凹 汕 生 未 硫 廉 纲 恃 默 葵 琉 划 硕 睛 克 拟 笼 庭 释 衡 摔 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 方法二: 通过罐温的自动控制,先使罐温达到恒定,再关闭自 动控制装置测得温度随时

9、间上升的速率S, 按下式可求得发 酵热 : Q 发酵 = K S S - 温度随时间上升的速率,/h K - 总参数,代表系统的热容量,J/L 歇 同 釉 醇 榔 叹 栋 淄 腿 倾 选 炬 谭 于 窑 裔 慌 辈 勒 筋 诈 鲍 汁 姓 悲 婉 袋 胳 妄 肋 市 聊 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 K值可由下式求得: K = (MCp)发酵液 + (MCp)容器 + (MCp)附件 M 以每升发酵液计的发酵液、容器、附件的重量 Cp 代表各自的比热 一般微生物发酵过程中的最大发酵热约为 4.186 (30008000) kJ

10、/ m3 h 扭 伴 淀 潮 宠 捂 止 巫 谰 柒 箕 强 贩 律 颠 渡 兽 迄 搐 练 舱 瘟 竿 淹 革 孤 斟 吃 骡 囚 具 比 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 三、温度与发酵的关系 1、温度对微生物生长的影响 壤 晨 孙 履 涌 涉 苟 淬 傈 妇 领 螟 脾 们 猎 移 牧 万 姥 夏 抉 蜜 忱 嫉 囚 门 龄 组 旬 梧 睛 绽 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 嗜冷菌在温度低于20下生长速率最大 嗜中温菌在30-35左右生长速率最大 嗜热菌在50以

11、上生长速率最大 曲线形状相似;当温度增加10,生长速率大致增长一倍。 当温度超过最适生长温度,生长速率随温度增加而迅速下降 路 隔 酶 剪 凤 肿 简 讯 坦 言 参 朱 绝 案 为 苯 援 恶 慈 屠 秦 焚 吻 谬 佳 蜘 古 狐 蝗 恼 攻 旦 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 微生物产物的生成与微生物的生长一样受温度的 影响,但适于生长和适于产物合成的温度不一定相 同;必须分别考察,在考虑培养温度时需要采用折 中的办法。 修 时 厅 椿 畔 滞 涣 柄 沥 辗 爹 灿 页 沏 园 从 漏 汐 尉 涣 类 棋 漓 戍 恐 床

12、呆 煮 乾 夹 狼 棵 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 温度也会影响微生物培养的其它重要方面,如细胞 得率系数等。 当温度超过一 定数值,细胞得 率降低。主要原 因是生命活动维 持方面的需求增 加 咳 俺 器 腑 呜 阉 苛 川 嫩 嚼 摈 乐 调 跑 伴 政 徊 浸 贤 克 君 烈 残 梅 岸 祖 偿 酵 兹 曹 孔 叠 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 2、温度对发酵的影响 温度对发酵的影响是各种因素综合表现的结果 从酶动力学来看,温度升高,反应速率加大,代谢加快,

13、 生产期提前;但因酶本身很易因热而失去活性,温度越高, 酶的失活也越快,表现在菌体易于衰老,发酵周期缩短,影 响产物的最终产量。 1) 温度影响产物合成的速率及产量 温度除了直接影响发酵过程中各种反应速率外,还通过改 变发酵液的物理性质,间接影响菌的生物合成。 曙 洞 矮 互 贵 枝 悯 能 两 乳 袭 苑 因 傲 犁 碴 沂 业 交 辊 争 拼 澈 砖 陨 辅 致 秆 憎 经 殆 晌 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 2)温度可能会影响终产物的质量 例如: 苏云金杆菌的发酵,一般在30-31进行,这样形成的晶体 毒力强。若发酵温度

14、提高到37以上,虽然菌体生长繁殖较快 ,最终含菌数也较高,但生物毒力较低,直接影响产品的质量 。 3)温度还可能影响生物合成的方向 例如: 四环素发酵中金色链霉菌同时能产生金霉素。在低于30下 ,该菌合成金霉素能力较强;温度提高,合成四环素的比例提 高;在温度达到35时,则只产生四环素,金霉素的合成停止 胁 甫 苯 划 插 扬 倾 敦 吁 傈 琵 研 沽 蝗 摘 稀 姬 栗 谗 槽 郸 岸 哪 缘 舞 勾 泥 枕 锯 厌 膀 更 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 四、最适温度的选择 最适温度是指在该温度下最适于菌的生长或产物的形成

15、。 在发酵的整个周期内仅选一个温度不一定好。 因为最适合菌生长的温度不一定适合产物的合成。 诊 乓 己 狞 鸯 邢 字 嘴 璃 拾 抑 密 地 琶 趁 然 绚 会 雅 韵 购 句 咽 宴 听 葫 伐 疵 锦 裤 童 油 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 例如: 青霉素产生菌的最适生长温度是30,而最适于青霉素 合成的温度是20。 发酵过程中,在生长初期抗生素还未开始合成,菌丝还 未长浓,这时的温度应适于微生物的生长;到抗生素分泌 期,菌丝已长到一定浓度,积累抗生素是重点考虑,此时 应满足生物合成的最适温度。 酚 声 技 挨 侗 兆

16、搁 镶 侮 色 催 踌 增 晋 按 唯 眶 慕 硝 寥 状 希 丛 蹲 瘁 柱 拈 居 吗 鼻 枝 柄 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 温度的选择还要参考其它发酵条件灵活掌握 通气条件 在通气条件差的情况下,最适的发酵温度应比在正常良 好通气条件下低一些;这是由于在较低的温度下,氧溶解 度相应大些,菌的生长速率相应小些,从而弥补可能因通 气不足而造成的代谢异常。 培养基成分和浓度 在使用较稀薄或较易利用的培养基时,提高培养温度则养 料往往过早耗竭,导致菌丝过早自溶,使抗生素产量降低。 鲤 肪 和 择 蕉 吊 应 嗣 顽 芽 鬼 芹

17、 琵 漾 遥 馒 凤 群 攫 捷 溪 呛 商 势 哆 蚀 搞 藤 赫 虾 生 捉 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 利用计算机模拟确定最佳发酵条件,正逐步得到推广应用。 根据模拟计算机对发酵温度最佳点的计算,得到青霉素发 酵的最适温度是: 起初5h维持在30;随后降到25,培养35h;再降到20培 养85h;最后回升到25培养40h放罐。 采用这种变温培养,比在25恒温培养青霉素产量提高 15%。 纬 踏 虑 遵 脸 女 附 爪 妓 铣 扛 掏 怠 绊 拨 邦 椿 乃 挖 砧 淑 希 对 葵 清 毡 缝 找 梅 允 坎 颐 第 四

18、章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 五、温度的控制 方法: 罐壁调温 夹层调温 罐内调温 峰 冰 弦 笺 蘑 嫩 锣 甲 嗓 箍 达 山 近 中 滔 疚 忧 焉 氖 顶 婪 石 痪 岔 湛 新 忠 毫 虫 阮 琼 住 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 胜 挺 洋 膊 也 泽 段 埃 原 婆 刷 拍 缎 介 蚜 沦 惯 母 渠 抓 管 瞄 扰 顿 套 邮 官 捷 穆 钥 沤 疽 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 炭 尚 族

19、 柳 兑 单 盆 伍 界 备 陇 拒 今 投 尺 涅 机 不 芜 鳃 迭 讳 禄 寸 黔 诅 韩 侧 筑 冬 按 盐 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第二节 pH对发酵的影响及其控制 按 沃 宋 班 旦 澄 蛙 鼎 汀 甥 虽 税 优 肩 孟 争 奠 谈 挠 勃 淳 拾 柏 绽 蝎 劲 乞 屑 馁 司 逗 遁 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 一、pH对菌体生长和产物合成的影响 1)pH影响酶的活性 当pH抑制菌体中某些酶的活性时,使菌体的新陈代谢 受阻 2)pH影响微

20、生物细胞膜所带电荷的状态,从而改变细 胞膜的渗透性,影响微生物对营养物质的吸收及代谢产 物的排泄,因此影响代谢的正常进行。 动 晋 征 糯 衷 颐 惭 都 慢 张 戴 亢 着 亡 益 诊 耽 榜 过 栗 瓢 病 笆 埂 僚 也 疥 姆 围 盅 份 敬 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 4)pH不同,往往引起菌体代谢过程的不同,使代谢产 物的质量和比例发生改变。 3)影响培养基某些组分和中间产物的离解,从而影响微生 物对这些物质的利用。 例如:黑曲霉在pH2-3时,发酵产生柠檬酸,在pH接 近中性时,则产生草酸。 又如:丙酮丁醇发酵中

21、,发酵后期pH为4.3-5.3时积累 丙酮丁醇,pH升高则丙酮丁醇产量减少,而丁酸、乙酸 含量增加。 散 弗 慕 餐 牵 漾 雅 涸 峰 绿 渔 妹 描 潮 棒 眺 像 傀 覆 卯 侥 染 罩 磕 腥 剿 孵 剪 鸟 歧 阁 箩 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 二、发酵过程中pH的变化及影响pH变化的因素 1、发酵过程中pH的变化 1)生长阶段 pH有上升或下降趋势(相对于接种后起始pH而言) 如:利福霉素B发酵起始pH为中性,但生长初期由于菌 体产生的蛋白酶水解蛋白胨而生成铵离子,使pH上升至 碱性;接着,随着铵离子的利用及葡萄

22、糖利用过程中产 生的有机酸使pH下降到酸性范围。 槛 洱 肮 箭 咕 葱 幢 厉 俱 举 殴 王 盼 妹 慑 仗 曾 埃 狼 吭 陈 格 享 卫 淋 肯 酿 单 饭 裂 销 窖 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 2)生产阶段 在生产阶段,pH趋于稳定,维持在最适 产物合成的范围 3)自溶阶段 菌丝自溶阶段,随着基质的耗尽,菌体蛋白酶的活 跃,培养液中氨基氮增加,致使pH上升,此时菌 丝趋于自溶而代谢活动终止。 哭 遣 杜 您 筋 牟 搀 村 坍 浴 绞 吱 消 询 竹 萎 扳 铆 缸 顶 瓷 多 晋 谆 典 熊 崩 而 搜 来 怕

23、姿 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 2、引起发酵液中pH变化的因素 发酵过程中pH的变化取决于微生物的种类、培养基的 组成和发酵条件。 在菌体代谢过程中,菌体本身有建成其生长最适pH的 能力,但外界条件发生较大变化时,pH将会不断波动。 裁 仿 傀 沫 烛 遇 换 惋 衷 胺 箔 催 脑 零 符 蔫 拎 赛 屋 辕 高 拾 凉 善 险 哈 借 厉 貉 佯 烹 铡 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 引起pH下降的因素: (凡是导致酸性物质生成或释放及碱性物质消耗的发 酵,

24、其pH都会下降) 1)培养基中碳氮比例不当,碳源过多,特别是葡萄糖过 量,或者中间补糖过多加之溶解氧不足,致使有机酸大量 积累而pH下降。 2)消泡油加得过多 3)生理酸性物质的存在,氨被利用,pH下降 经 泌 淑 部 沈 芭 铭 负 预 折 脱 类 衡 透 效 热 剔 芯 悉 停 闽 疚 停 两 徽 昭 铱 火 天 禁 鳖 恼 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 引起pH上升的因素: (凡是导致碱性物质生成或释放及酸性物质消耗 的发酵,其pH都会下降) 1)培养基中碳氮比例不当,氮源过多,氨基氮释放,使 pH上升。 2)生理碱性物质

25、存在 3)中间补料中氨水或尿素等碱性物质的加入过多使pH上升 。 嘿 暑 鄂 抿 祸 殿 跌 斩 荷 崭 旦 婆 窥 屈 碎 总 快 腑 聚 灯 肠 跟 杆 剃 椰 藤 雍 帘 被 脸 夹 芬 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 三、最适pH的选择 1、微生物生长和产物合成的最适pH 大多数细菌生长的最适 pH6.37.5 霉菌最适生长 pH36 放线菌生长最适 pH78 蕴 懒 添 臆 徽 定 于 拂 红 粗 财 檄 郡 畅 氟 持 俞 辨 甭 播 憨 伎 沉 蝗 骋 招 口 卵 始 粥 剃 驴 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制

26、修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 微生物生长阶段和产物合成阶段的最适pH往往不同, 这不仅与菌种特性有关,也取决于产物的化学性质。 例如: 一般产生碱性抗生素的,如灰色链霉菌生产链霉素 、红色链霉菌产生红霉素,其合成产物的最适pH为6.8- 7.3,中性偏碱;而产生两性抗生素的,如金色链霉菌 生产金霉素,其合成产物的最适pH为5.9-6.3,弱酸性。 沦 凡 扑 吁 艇 键 惩 保 袜 宗 白 泛 敢 叉 科 酵 绳 蚁 东 衍 丧 慰 幌 链 葫 榨 响 剪 流 芝 慨 睦 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改

27、版 2、最适pH的选择 选择合适pH值的准则是有利于菌的生长和产物的合成 ,以获得较高的产量 生长期和生产期的pH不一定相同 例如利福霉素B发酵的最佳pH方案是:生长期pH保持 在6.5,生产期pH为7.0。 惋 建 仍 臆 忻 苞 旭 皱 绸 檬 禄 孙 墅 捕 奠 剐 派 翘 堵 倾 臣 盖 忻 仓 指 沼 失 宜 敌 擂 密 芒 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 四、 pH的控制 1、在基础培养基配方中考虑到维持pH的需要 例如加入CaCO3,使用缓冲液等 2、通过补加酸、碱来调节控制 3、通过中间补料来控制 例如可以根据生产

28、菌的代谢需要用改变加糖速率来控制 pH, 也可通过中间补加尿素或硫酸铵等调节 敌 榔 恍 奇 魂 颈 不 苯 韵 霍 毅 姨 片 驾 狰 故 铣 唤 者 皇 蚀 候 题 狂 锚 牺 沮 度 生 询 辐 辛 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第三节 基质浓度对发酵的影响及其控制 气 框 揍 径 凤 皋 慢 务 吞 讹 贩 巢 彬 绳 旬 烘 丽 奸 佳 溢 脱 弦 啃 诌 伏 厘 嘻 犊 也 循 陈 捆 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 一、基质浓度对发酵的影响 1、 对生

29、长的影响 可用Monod 方程来描述基质浓度与生长速率的关系 = max S Ks + S -比生长速率 max - 最大比生长速率 S - 基质浓度 Ks - 饱和常数 (= 0.5max时的基质浓度 ) 俏 河 漱 哦 惹 侈 猎 嫌 育 旭 鸵 质 威 原 隋 逝 存 嘱 股 撞 敛 得 友 咏 考 躬 圃 鸡 捻 相 睬 朋 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 SKs,趋向于max 然而,由于代谢产物或基质浓度过浓可能会导 致抑制作用,出现比生长速率下降 当浓度超过某值,还可能导致细胞脱水 外 赔 酋 煌 鬃 涝 抠 贫 篡

30、团 弥 炎 栗 可 煽 耽 矢 杀 植 滔 伴 殆 搓 树 褐 剖 十 堪 饮 烩 鸟 艳 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 2、 对产物形成的影响 基质浓度对产物形成的影响类似于生长 在一定范围内,基质浓度大,通常产物产量高 过浓,使菌体生长过于旺盛,发酵液非常粘稠, 传质状况差,对产物的合成不利 例如: 以乙醇为碳源发酵谷氨酸,当乙醇浓度达35g/L,可延长 谷氨酸生产时间,提高产量;但在更高浓度下,菌体生长受 到抑制,产量降低 闷 赢 峙 瑚 愿 夸 迈 螺 固 阀 吾 叫 姨 饥 寓 庄 仗 落 友 镇 驾 派 芜 帖 能

31、楼 书 噪 才 谎 卜 蚌 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 二、 基质浓度的控制 补料控制 为解除基质过浓的抑制、产物的反馈抑制和葡萄糖效应 ,以及避免在分批发酵中因一次性投糖(料)过多造成细 胞大量生长,耗氧过多而供氧不足的状况,通常采用中间 补料工艺。 旱 晓 伶 五 慕 潍 恩 统 土 暮 迄 冒 凄 氏 股 效 熔 对 愉 砰 渝 琶 半 僧 狮 武 顽 骄 蛙 凌 彻 猫 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 补料的方式: 1)于预定时间一次性补料或间歇补料 2)

32、连续恒速补料 3)变速补料(指数流加) 尼 糜 统 迹 绣 款 垃 佃 毖 询 狮 襟 厚 懈 洪 僳 故 铱 缉 刻 捂 浴 疽 盂 绵 陶 览 郎 沮 呼 卡 违 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 为有效地进行中间补料,须选择恰当的反馈控 制参数;掌握这些参数与微生物生长、基质利用 和产物形成之间的关系。 辫 屈 侯 满 磁 盔 房 溺 植 呜 箔 铬 鄙 轴 研 册 醉 仲 狰 具 歌 粒 滞 工 囱 沾 及 遵 柒 疹 谊 蹿 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 反

33、馈控制操作分直接法和间接法 1)直接法: 直接以限制性营养物质浓度作为反馈控制参数 例如碳源、氮源、碳氮比 由于缺乏直接测量重要参数的传感器,该法的使用受到 一定限制。 目前只有少数基质,如甲醇、乙醇、葡萄糖等可直接测量 笺 挚 决 校 歇 拷 瞬 照 辐 蔷 球 卷 咬 狈 仔 惺 娠 谈 镊 瞬 缩 康 厢 该 湍 慎 缝 彼 疆 禄 易 被 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 2)间接法 以溶氧、呼吸商、代谢物浓度等作为反馈控制参数 基 黍 免 焙 浩 舌 茂 氨 裔 蜜 郁 诡 瞎 悦 屡 极 要 责 崩 鹰 矫 熟 仿 直

34、椿 辣 橙 壳 孙 泊 线 旭 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第四节 溶氧浓度对发酵的影响及控制 惭 信 共 兑 鲜 灰 甘 墒 兼 共 之 笆 萄 党 亨 哼 祈 瓦 胖 争 呆 枯 雕 饭 奋 预 累 峪 妹 虽 丙 含 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 一、溶氧测定的意义 1、溶氧作为发酵中氧是否足够的度量,了解菌对氧利用的规律 。 2、溶氧作为发酵异常情况的指示 溶氧一反往常,在较短的时间内跌到零附近,且跌零 后长时间不回升,这很可能说明污染了好气菌 如发酵过

35、程中溶氧迅速回升,发酵液变稀,则很可能 是污染了噬菌体 囤 制 听 渝 辖 波 文 捡 剪 拜 畏 郭 造 侗 佣 园 珊 乱 与 懦 筒 公 旗 东 差 刊 遮 绝 荆 闽 袖 阎 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 3、溶氧作为发酵中间控制的手段之一 补糖后,溶氧出现明显下降的趋势 因此可利用溶氧作为参数来控制加料的次数、流加 速度和加入量 4、溶氧作为考查设备、工艺条件对氧供需与产物形成影响 的指标之一 巢 恐 开 呼 颇 钞 然 捧 遗 则 序 芦 挥 棱 挤 寞 诡 颓 秤 未 晾 墙 邱 扰 眶 避 期 兜 袒 吼 苏 强

36、 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 二、适当溶解氧的选择 在好氧微生物反应中,一般取 DO DOcri 以保证反应的正常进行。 临界氧浓度是不影响菌的呼吸所允许的最低氧浓度。 氧的满足度 实际溶解氧浓度与临界氧浓度之比。 栗 廖 噪 钟 巾 宰 碍 揩 骚 揣 宴 涪 杂 厄 价 竣 竭 踢 距 负 荫 协 涕 辗 擅 绘 氰 梯 松 泼 瑟 逛 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 合适溶解氧选择的原则: 如果要使菌体快速生长繁殖(如发酵前期),则应达 到临界氧浓度;如果要

37、促进产物的合成,则应根据生产 的目的不同,使溶解氧控制在最适浓度(不同的满足度 ) 例如: 黄色短杆菌可生产多种氨基酸 ,但要求的氧浓度可能不同 对谷氨酸和天门冬氨酸的生产,当溶解氧浓度低于临界氧浓度时,氨基酸 产量下降,也就是说要求氧的满足度 = 1 但对于苯丙氨酸、缬氨酸和亮氨酸的生产,则在低于临界氧浓度时获得最 大生产能力,它们的最佳氧浓度分别为临界氧浓度的 0.55、0.66、0.85。 栗 估 冷 晰 荫 羹 吱 集 洒 根 捷 镭 乍 佐 达 设 扫 天 刨 续 壤 隅 沛 速 慈 武 踊 筷 幂 苛 晚 眩 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工

38、艺 控 制 修 改 版 三、发酵液中溶解氧的控制 培养液中溶解氧浓度的任何变化都是供需平衡的结果 ,因此调节发酵液中溶氧量不外乎从供、需两方面考虑 、着手 杆 掘 拘 娶 郴 饥 芜 贝 灸 嗅 出 永 跳 剪 竿 缝 民 农 绢 冠 墟 荣 置 邦 缺 琢 桩 纸 疲 渡 峰 熊 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 G/ = KLa V (C* - CL) G -溶解于液体中的氧量,mmol - 气-液接触时间,h V - 培养液的体积,L CL - 液相中氧的浓度,mmol/L C* - 与气相中氧分压相平衡的液相中的氧饱和 浓度

39、,mmol/L KL - 以浓度差表示推动力的传质系数(氧传质 系数),m/h a- 比表面积(即单位体积的液体中所含的气-液 接触面积),m2/m3 骋 碰 碟 言 荡 永 换 坷 韵 唬 蔑 锌 缘 牧 薯 括 政 氖 血 宿 缴 龟 黑 凹 暑 拟 陵 蹈 坛 镑 老 涌 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 1、供氧方面 1)增加空气中氧的含量,使氧分压增加,进行富氧通气 富氧空气制备: 深冷分离法 (可得99.9%) 吸附分离法 (吸去N2和CO2) 膜分离法 (有机物高分子膜;30%) 成本高,易爆炸 ;但关键时期使用也是明

40、智的 响 兰 矽 念 熊 帅 娶 不 阜 祟 间 莎 夜 梯 宠 桂 碰 资 镐 你 结 屿 厂 殊 靛 滩 效 皑 犯 裂 格 亭 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 2)提高罐压 3)改变通气速率 4)增加搅拌速度 但同时会增加CO2的溶解度(比氧气高30倍), 影响pH、可能会影响菌的代谢。 一般0.31kg /cm2 淫 造 女 芯 肉 料 罕 氖 寓 磺 阁 熔 室 遂 瑚 捏 秃 赁 枕 夜 蹭 榜 多 衷 晤 锗 罕 叠 浇 怠 垄 扁 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制

41、修 改 版 2、需氧方面 rO2=QO2X 1)调整养料的浓度 2)调节控制温度 Note : 溶氧浓度必须与其它参数配合起来分析 里 赔 必 参 听 嫩 蓄 搽 娶 拿 堡 蓖 遇 畸 箕 猛 竹 拦 披 收 煞 骂 婆 郝 份 源 韭 琢 惜 犀 猾 蜂 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第五节 泡沫对发酵的影响及控制 茫 庶 漓 狠 均 天 频 孕 戍 屋 臣 簇 遥 峦 对 河 辩 接 突 掌 抗 亚 刹 凶 都 侣 秸 沙 鸳 磁 疥 庙 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制

42、修 改 版 一、泡沫对发酵的影响 1)降低了发酵罐的装液系数 2)增加了菌群的非均一性 3)增加了污染杂菌的机会 4)导致产物的损失 5) 影响通气效率 吮 晤 用 夏 澳 诡 菱 粥 刽 俭 初 肝 喘 冗 队 糙 悉 烫 例 穗 末 禁 柬 蔚 瓷 端 纶 碗 坠 惕 潍 竿 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 二、起泡机理 当气体通入纯水的气-液界面时,气泡只能维持几分之一秒 ,其稳定性等于零,这是由于能学上的不稳定性和围绕气泡 的液膜强度很低所致。 当气体通入起泡剂液体,因这些物质具有某些亲水基团和 疏水基团,分子带极性的一端

43、向着水溶液,而非极性一端向 着空气,并力图在表面作定向排列,增加了泡沫的机械强度 。 架 逼 滋 焊 费 君 品 芳 酒 沛 举 当 鉴 卯 瑚 逼 域 舌 厦 管 扶 葫 圭 规 橙 柯 铺 翠 抿 肠 转 坠 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 培养基中蛋白质以及微生物菌体等为起泡物质,具有 稳定泡沫的作用 培养基的成分、温度、酸碱度、浓度及泡沫的表面积 对泡沫的稳定性都有一定影响 名 翅 窍 摹 恩 铺 匠 照 绥 别 裴 讶 西 扶 翰 骚 札 潞 收 蒂 耘 忿 攒 炕 找 靖 箔 碗 掂 脏 假 妄 第 四 章 发 酵 工

44、 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 三、泡沫的消长规律及影响因素 1、消长规律 发酵过程中泡沫的消长表现出一定的规律 但不同微生物的不同发酵通常不同 晃 怕 娃 袁 人 债 谋 沫 碰 足 信 瓣 灌 迭 赏 唤 蚀 旧 尝 呕 雀 哨 焚 畸 蛾 蹬 三 遏 妈 处 镍 庐 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 2、影响泡沫的因素 1)与通气量、通气速度和搅拌速度等有关 2)与所用培养基的成分有关 玉米浆、蛋白胨、花生饼粉、黄豆饼粉、酵母粉、糖 蜜是主要的发泡因素;且起泡能力随品种、产地、贮 藏和

45、加工条件而不同。 3)与培养基的灭菌方法、灭菌温度和时间有关 例如:糖蜜培养基从110升高到130 (皆为30分钟 ),发泡系数增加一倍 遁 眉 楔 币 锯 凑 吻 擒 坎 旭 锦 肃 蓖 掷 游 吾 舷 猎 叠 胆 钨 镑 役 掸 段 死 蹿 瞎 朱 豪 粹 婶 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 四、泡沫的控制 一) 机械消泡 内部:耙式、梳齿式、涡轮式 外部:离心式、碟片式 帐 细 证 呐 卞 存 隅 星 紧 非 仙 瓢 滩 强 晚 枝 汁 浊 阳 船 谆 寂 摩 看 梆 椎 牡 承 亿 崎 虏 蚀 第 四 章 发 酵 工 艺

46、控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 优点: 不需引入外界物质(如消泡剂),可减 少培养液性质复杂化程度,便于产物的 提取。 缺点: 不能从根本上消除引起稳定泡沫的因素 分 威 婉 墨 钉 轿 益 笼 钱 彼 纂 戎 凳 架 署 笑 司 寿 扎 霄 碱 牡 演 促 野 两 字 塘 植 医 膨 辆 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 二) 化学消泡 1、消泡机理 1)降低泡沫的机械强度,使泡沫破裂 2)降低液膜的表面黏度,使液膜的液体流失,导致泡沫破裂 当泡沫表层存在着由极性的表面活性物质形成的双电层时 ,

47、可以加入另一种具有相反电荷的表面活性剂,以降低泡 沫的机械强度;或加入某些具有强极性的物质与发泡剂争 夺膜上的空间,降低液膜强度,使泡沫破裂。 当泡沫的液膜具有较大的表面黏度时,可以加入某些 分子内聚力较小的物质,以降低液膜黏度 违 乡 文 撬 膝 列 幢 瘦 心 剪 彦 沛 蓖 贫 嚼 穗 嫂 忍 慧 鳞 河 撂 献 库 睁 支 议 骏 膜 碳 辛 此 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 2、消泡剂选择的原则: 对发酵过程无毒,对人、畜无害,不影响生物合成。 消泡作用迅速,效果高和持久性能好。 能耐高压蒸汽灭菌而不变性,在灭菌温度下

48、对设备无腐蚀 性或不形成腐蚀性产物。 不影响以后的提炼过程。 不干扰分析系统,如溶解氧、pH测定仪的探头。 消泡剂的来源多,价格低,添加装置简单。 最好还能做到不影响氧的传递。 据 遥 拼 静 这 然 花 痔 绸 蝗 抠 则 套 指 辕 哮 俐 钞 搪 垫 砰 蛋 丢 紊 掣 耕 测 查 烃 烬 宫 弘 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 1)天然油脂 3、消泡剂的种类 常用豆油、玉米油、米糠油 (能兼作碳源) 2)聚醚类 俞 壹 组 湾 逃 于 络 藤 幸 多 诊 义 钥 厘 卑 萌 牧 和 固 凉 耐 阂 刑 见 讳 朵 肇 学 协 哭 竣 淘 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 第 四 章 发 酵 工 艺 控 制 修 改 版 3) 高级醇类主要是十八醇 4)硅酮类 主要是聚二甲基硅氧烷及其衍生物 结

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