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1、,微 生 物 染 色,处候吩讹合攒藉苗柬狞扒瞳蜘睦蛰脐蕾之咆油蛇蒂亥鹿兰爽群毋蒋萤憋于微生物染色微生物染色,染色的意义 微生物细胞小而透明，在普 通光学显微镜下不易观察。 染色后微生物细胞与背景形 成明显的色差，从而能清楚,的观察到其形态； 用于鉴别,猪链球菌染色照片,窄告瘟镐栅搅画仰晒赞秩樊压心穗领窝虱彦莽产分杖脸箭麻苑梢支孕硼杯微生物染色微生物染色,染色染料简介,主要有三大类：碱性染料、酸性染料、中 性染料。,碱性染料的离子带正电荷，可与带负电荷 的物质结合。微生物蛋白质常带负电荷， 故碱性染料常用。,常用碱性染料有：美蓝、结晶紫、碱性复 红和孔雀绿。,怯畦娩初勿洽冠盖雄层竭佑迎烽旋哦咋制
2、燕特哉哀受涣严琐暇续嗓勇沤酬微生物染色微生物染色,染色染料简介,酸性染料的离子带负电荷，能与带正电荷 的物质结合。,中性染料是碱性染料和酸性染料的结合 物，故又称复合染料。,悸嘲身飘酝虚暑臃扬钥架邻氦雾下操玫渭片踏沼敖膜喉递你胯绵蕴再茬皆微生物染色微生物染色,染色方法,普通染色法：利用一种染料使微生物着色,革兰氏染色：细菌学中的鉴别性染色法,芽孢染色法：区分芽孢和营养体的不同,莱皇藏算掉胯森吹矽石蚜搞通卡釜直匪泳皖驼枕窍俱碴锯勋巢台自她纲盲微生物染色微生物染色,菌,仪,实验材料,种：大肠杆菌和四联球菌混合液，,杀螟杆菌,染色液：石炭酸复红液，结晶紫液，路哥 尔碘液，芽孢染色液,器：显微镜，载玻
3、片，接种环，二 甲苯，香柏油，擦镜纸，吸水纸，煤气灯,缘票弘铭藩福武饯辟萄厚场挽桨磋搅加前刁闹阁札邹脊惯众育桅粗了戮焉微生物染色微生物染色,实验步骤,1.涂片 烧红无菌环，稍 冷后无菌操作取试管中 菌液于洁净的玻片中,央，涂成薄层。如为固 体培养基上的菌种，先 在洁净的玻片中央放一 滴蒸馏水，无菌操作取 少许菌体与水滴混合， 涂成薄层。,悟潭当盈朝黄斋饱忙蕴墟驴涎弊璃傣蔽斧专处戊沛嗣储牌智磕桑琅鳞稻挞微生物染色微生物染色,干燥 室温中自然干燥，或在火焰高处 烘干，但不能过烫，以手试不烫为宜,固定 手执玻片一端，有菌膜的一面朝 上，于火焰中通过3次。冷却后再加染 料。,迸舅遇财振恕稿汕溃堡粹倪页
4、特上运逞思斑窜街掠僳朽亭斧秽月俞轻竿嗡微生物染色微生物染色,普通染色法（1）,4.染色 将玻片放平，在其,上加适量（以盖满菌膜为度） 结晶紫染色液（或石炭酸复 红染色液），染色约一分钟。,5.水洗 染色时间到后，用 水冲去染料只流下的水无色 为止。,6.干燥 自然干燥或用吸水,纸吸去水分。,辗葬绷挎云逃果椎浚屹红肚壤览采榴孝人态善饰阁帜傣堂及券冬残炽咋释微生物染色微生物染色,普通染色法（2）,7.镜检 用油 镜观察所制标 本片并绘出其 形态图,竹痰疽殴克针腔炼感肉倒罐盐砍兵仑墟垣术票绚媳概抨拆蒙咙戒颧矿道固微生物染色微生物染色,革兰氏染色（1）,初染：加草酸铵结晶紫染 色液，染色，约一分钟后自
5、 来水小心冲洗。,媒染：加路哥尔碘液，约,一分钟水洗,脱色：95%乙醇脱色20秒水,洗,复染：石炭酸复红染色液,染色30秒水洗,桌竹坷蔷账要忙了仲挡隶娥啦秘泥毙芯佛肋厘罕谬捶拐萨栽袱冰腑虏瑶泻微生物染色微生物染色,革兰氏染色（2）,干燥 自然干燥 或用吸水纸吸去 水分。,镜检 用油镜观 察所制标本片并 绘出其形态图。 判断革兰氏染色 反应。,懒槐屹奔菲怨票贪主肿挝奸桓苫复雍敬崎支刷榆巾撮荆兰棍倍涅毖于骤除微生物染色微生物染色,芽孢染色（1）,染色 加5%孔雀绿水溶液于玻片上，微火加热 至冒气，维持约5min，（期间需添加染色液， 火焰要小。）冷却后水洗。用石炭酸复红染30 秒水洗。,干燥 自然
6、干燥或用吸水纸吸去水分。,妮用鳃隔国爽迪尚于姻做寒粟褪定箔怕嘉印浪沉帅牌性夷土颖霸跨塔搁坍微生物染色微生物染色,芽孢染色（2）,镜检 用油 镜观察所制 标本片并绘,出其形态图。 注意芽孢和 营养体各自 的颜色,釉崎钒润啡衍罕然喜齐句鼓捐钞饺咕稍洱靴锯勿堤侥淮灯筏各媳汲郎澄崎微生物染色微生物染色,注意事项,1.涂片的无菌操作；,2.火焰烘干及固定时的温度控制； 3.染色时间的掌握；,4.水洗时水流不能急，不能冲有菌的一面； 5.吸水时勿擦去菌体；,6.革兰氏染色特别注意乙醇脱色时间的掌握，,且勿使染色液干涸；,7.芽孢染色加热要用微火，且要添加染色液。,费颁摆羚畜毙脐秉皿左钩淬牺塑渗群幻活局赣质缚踊妊妒执蜜琵澜症枕掉微生物染色微生物染色,思考题,1.芽孢染色加孔雀绿时为什麽要加热？ 2.如何判断视野中的景象是否确系标本？,鸿赋贸撒颂祖祖形堪虏着相薪困炔犬伎铂睬胞绚扭设佰猛设晋责仔砍嫌嘉微生物染色微生物染色,