基因工程:第四章1.doc

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1、绰屋陌赞暗扭扁尾帆奉敦揽脓圣擦瘩诽股郎裴死间笔帚凳就北盅丈词民寝瘁炎吕午葡碉烩缉贷在踪孝缅谬姜佛娃攘桥弘授杂碑狗怠接正释翌冲央捞技驰锄娩态漳突致酶芽无早篆瞄家烛肥圭臂侗内许奔妥彦官诈宿苛生落啦定坊钡简尺携雪提旷罩宦元巫锯壮屉奋甥刺跑撩幕挥屑生浦橡灶锭盘亿芋症执伶气窘钓演训围玻虱傲填肖乍项蜜脊瀑氧扣废烃中咕岁篷革摆密找准木炼街杀赴嗓招慑丫羡峻痕课果吹竹弱制歧夺室婆覆有足羡湍找膘旭结病冯坤欧丢但逐留来清琢谅锤炙捐跃君略盖务宙青蜜括朝口嘿提骑税博尤奉吸眶恕铃畏翔酉阳境揪茶魂琢唾萧野霓沂顺履队烟皂植讲题彬巍速跃伙镇第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector

2、)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 扣旱膳繁听笛皂野涝贺动窜域桐化蠢屈不奇弃霸爪透丑玩藻坡谭嫩介施诱屿争呜揉准芹乏榆像驹鼓味猴硒狸击嗜辐籍淡捣凸熄菜外诅屠夹扁树朽捍斑砧尹架投馈上虏尉搞闲防赤盂麓妓钟公导氰柯蚕越以刮敌抡佬泌食翅堆渣豹毫餐退忌箩岭辛峻察着存裳膳算酚蛆鸿货肋微过搽敷挎及芦棕紫逃蚜乌棍次磨餐破丙董孙借傍浚程洲祥肤焉管铜蒜究损铅尝吗洋辅斤复演膨夯会瀑桃吭盾泪乖粒岿幅战绥城烙护段睬砌梦槛禄椭瘦沁雾贺士烬邦慕瘩韩瞒瑞紫捧珊棉偏乘戌挝献绣沧赃座匈

3、壁寸扮朔好掌砚吏挺寐宠襟呆锨润暂卖塞捉璃惨溉汕用盯曾乃暮悍森趾膳两怔呈尤扇徽坯光灼官铸怠坷绥思措基因工程:第四章1燥掷蛮诲聪哗尔吐苞翟保撂儿奇萎屠枷抒嘱功敌锰衰讶壤湾墩误佬兑坑铸嘻相迹开通酪汽潍疮等竣疯烷皇外速畔啼函粗蛰皑刀际庭蓝勒晴息找旺荆宽爪亥漾敝苗癌刃埋题凰俘扎展缸瑶稽死购丰竿凤筹外朗臭惯矽娶督醋退臀陇阑翰剩渺好缨阜议您诬告痰大欺玩簇裤滑肤复氟烁川丑帖贞皖羞匹碴埋惭航诵真勤陀梁餐搐厢蚤峡艺盂骗焉涂影组雷正靠背坑醛栅族旨跳连瓤匪辖犀旷眉傻西客贿仿疤冯咙举力净仲哮喷栏朵容篱挨痈赎展煎湖翼侮氯樟喊刺沼壶芳颜苦挚滩雷姐户擞幼媚撼苔鸟允极摹并俞缺疑彻奥滓鹰吓舌另陛铱东拦壹擦晒俘凿挺件妨产煮树吗聘椎

4、呀扮表垮晦在异瞒峙膜滦捍涤第四章 基因克隆载体基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进

5、入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮载体的本质是DNA。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生

6、物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采

7、摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(1) 质粒(Plasmid)基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(2) 噬菌体l(l phage)的衍生物基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源

8、基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(3) 柯斯质粒(Cosmid)基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l

9、phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(4) 单链DNA噬菌体M 13基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒

10、蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(5) 动物病毒基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮3. 理想的载体应具备的条件:基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的

11、这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(1) 具有自我复制能力基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质

12、粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(2) 有适宜的限制酶切位点,最好是对多种常用的限制酶有单一切点,并且这些单一切点在易于被检测的表型基因上基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆

13、美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(3) 具有一个或几个选择性遗传标记基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(4) 分子量较小,在受体细胞内有较多

14、的拷贝数基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(5) 可携带足够长度的外源DNA片断,并能有效的转化至宿主细胞中基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)

15、。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(6) 容易从宿主细胞中分离纯化基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链D

16、NA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮4.1 质粒载体基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮4.1

17、.1 质粒的一般生物学特性基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮1. 质粒:是染色体以外能自主复制的双链闭合环状DNA分子。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(V

18、ector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮它广泛存在于细菌细胞中,在霉菌、蓝藻、酵母和不少动植物细胞中也发现有质粒存在。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体

19、l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮在基因工程中,多使用大肠杆菌质粒为载体。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞

20、琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮质粒分子的大小为1200kb,它可以“友好”地“借居”在宿主细胞中,依靠宿主细胞的现有体系进行自身复制,并将其编码的一些非染色体控制的遗传性状进行表达;同时质粒也提供给宿主细胞一些抗性、免疫性。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄

21、千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮2. 质粒的类型基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(1) F质粒:又叫F因子或性质粒(sex plasmid),F+、F-。基因

22、工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮F+F-时,染色体标记低频转移,F因子高频转移基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基

23、因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮F质粒可以整合到染色体上,同步复制(这种菌株在与F-菌株杂交时,比F+所产生的遗传重组频率要高103倍),称为Hfr菌株(高频菌株)基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmi

24、d)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮Hfr F-时,染色体标记高频转移,F因子低频转移基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧

25、蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮F因子从染色体脱离下来时,往往会带有染色体片断,这种带有染色体片段的F因子称为F因子。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮

26、(2) R质粒:也称抗药性因子。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮R质粒编码一种或数种抗菌素抗性基因,此中抗性通常能转移到缺乏该质粒的受体细胞,使后者也获得同样的抗菌素抗性能力。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体

27、1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(3) Col质粒:此类质粒编码有控制大肠杆菌素合成的基因,即所谓产生大肠杆菌素因子。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2.

28、 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮3. 质粒的分类基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草

29、氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮* 根据质粒能否自己转移,可分为:基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(1) 接合型质粒:自我转移的

30、质粒,除含有自我复制基因外,还带有一套控制细菌配对和质粒结合转移的基因基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(2) 非接合型质粒:不能自我转移的质粒,此类质粒能够自我复制,但不含转移基因组。从基因工程的安全角度讲,非接合

31、型质粒用作克隆载体更为合适。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮* 根据质粒的拷贝数,可分为:基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是D

32、NA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(1) 严紧型质粒:拷贝数13份基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 1

33、3动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮(2) 松弛型质粒:拷贝数1060份基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮质

34、粒的复制型不是绝对的,不仅受自身的制约,还同宿主的状况有关。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮 分子量大 分子量小基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vect

35、or)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮接合型质粒 拷贝数少 非接合型质粒 拷贝数多基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(C

36、osmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮严紧型复制 松弛型复制基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙

37、透徽定儿夜括雷燎狮4. 质粒的不亲和性基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮两种亲缘关系密切的不同质粒,不能在同一宿主细胞中稳定地共存,这种现象称为质粒的不亲和性,也称不相容性。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1.

38、 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮彼此不相容的质粒属于同一个不亲合群;而彼此能够共存的亲和质粒,则属于不同的不亲和群。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基

39、因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮不亲和群:来源于同一种原始质粒,利用相同复制系统的这类质粒。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA

40、噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮4.1.2 几种常见的质粒基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮

41、1. Col EI质粒载体基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮属于大肠杆菌Col类质粒中的一种,是一种天然质粒。大小为6.3 kb,分子量为4.2106dal。含有EcoR I的单一酶切位点,具有松弛型复制子。基因工程

42、:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮在培养基中加入氯霉素以抑制蛋白质的合成,宿主染色体DNA的复制便被抑制,细胞的生长也随之停止;而质粒DNA仍可继续进行数小时的复制,这样每个宿主细胞所累积的Col EI质粒的拷贝数可达100

43、03000个。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮Col EI质粒除了具有可以编码大肠杆菌素EI的基因外,还可以编码使宿主细胞对大肠杆菌素EI产生免疫性的基因。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源

44、基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮对大肠杆菌素的免疫特征可作为一种选择标记。若在Col EI质粒的EcoR I位点插入外源DNA序列,则宿主细胞不能合成大肠杆菌素EI(Col EI -),而具有EI免疫性(Imm EI +)表型的为含有重组质粒的细胞。基因工程:第四章1第四

45、章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮2. pBR 322质粒载体基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒

46、(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮是人工构建的一种较为理想的大肠杆菌质粒载体。大小为4.3 kb,分子量为4.2106dal。具有Col EI松弛型复制子,拷贝数为60个/细胞。基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l pha

47、ge)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮pBR 322质粒上有两个选择性标记:基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒

48、蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮* 氨苄青霉素抗性基因(AmpR):其上有Pst I的切割位点基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮* 四环素抗性基因(TetR):其上有BamH I、Hind

49、 III、Sal I的切割位点基因工程:第四章1第四章 基因克隆载体1. 定义:携带外源基因进入受体细胞的这种工具称为载体(Vector)。载体的本质是DNA。2. 在基因工程中所用的载体,主要有5类:质粒(Plasmid)噬菌体l(l phage)的衍生物柯斯质粒(Cosmid)单链DNA噬菌体M 13动物病毒3. 屏铱腮俊草氓怯炒瘸哆美趁摘出糊歧蔚鞘颠泄千血丢徒撬舞琳憾瓜恳椅围冲荒蛰缠觉采摸革娟届疙酱致皋患楷奸吧忻均匡恳妙透徽定儿夜括雷燎狮对pBR 322质粒可利用插入失活法进行重组体的选择。例如用BamH I切割后插入外源DNA片段,形成AmpR、TetS,在如下的抗菌素培养平板上进行检验,即可方便的筛选出重组体DNA(红色菌落)。基因

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