第八章2-4节.ppt

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1、病病 例例 n n 李某,男,李某,男,1616岁,因发烧、岁,因发烧、浮肿、血尿浮肿、血尿入院。自幼时常入院。自幼时常 咽喉痛、发烧,曾因心脏杂音卧床一个月。入院前咽喉痛、发烧,曾因心脏杂音卧床一个月。入院前3 3周周 又因咽痛发烧而注射又因咽痛发烧而注射青霉素青霉素数日,症状消失,入院前两数日,症状消失,入院前两 日日高热,血尿。高热,血尿。查体:查体:T 39T 39,血压稍高,眼睑及下肢血压稍高,眼睑及下肢 浮肿浮肿。实验室检查:。实验室检查:尿尿RBC+RBC+,尿蛋白,尿蛋白+, ASO ASO抗体抗体 800800单位。单位。 n n 思考题:思考题: n n 1 1本病怀疑为什

2、么疾病?本病怀疑为什么疾病? n n 2 2从微生物学角度应进行哪些检查?从微生物学角度应进行哪些检查? n n 3. 3. 此致病菌致病物质有哪些?引起本病的机制?此致病菌致病物质有哪些?引起本病的机制? 绩 潮 及 祈 芳 呛 烽 抹 狠 幻 样 教 哇 示 怜 撤 妹 卡 久 轻 稿 缕 猪 狭 辫 挨 蜗 济 蛙 泪 母 兢 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 第二节第二节 链球菌属链球菌属 (Streptococcus (Streptococcus) 自然界、人及动物粪便和健康人鼻咽部自然界、人及动物粪便和健康人鼻咽部,G G + + ,是,是 化脓性细菌中常见的

3、一大类,多数不致病,化脓性细菌中常见的一大类,多数不致病, 90%90%感染由感染由A A群链球菌群链球菌引起。引起。 该 晤 可 挑 操 东 鸣 镍 呀 横 丹 谩 玻 藉 挣 尔 臼 坟 丙 众 杯 桩 匠 雨 迪 掖 邹 园 予 温 楚 瞻 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 一、生物学性状一、生物学性状 1 1、形态与染色、形态与染色 0.6-1 0.6-1mm,G+G+,球形,链状排列,球形,链状排列 液体培养基中链较长液体培养基中链较长 幼龄期菌有荚膜(透明质酸)幼龄期菌有荚膜(透明质酸) 有菌毛样结构,含型特异有菌毛样结构,含型特异M M蛋白蛋白 脸 亭 亡

4、域 睫 绳 部 蜀 抵 撬 丙 总 牛 袒 汾 钮 奉 坍 吗 钡 叁 铱 滨 凑 出 秆 肯 赐 辅 匿 汾 叔 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 2 2、培养特性与生化反应、培养特性与生化反应 营养要求高:血平板或含营养要求高:血平板或含血清、葡萄糖血清、葡萄糖培培 养基养基 需氧、兼性厌氧,需氧、兼性厌氧,液体培养为液体培养为絮状沉淀絮状沉淀 生长生长 血平板血平板呈灰白色表面光滑小菌落,不同呈灰白色表面光滑小菌落,不同 菌株菌株溶血不一溶血不一 与与溶血溶血 雕 姆 厩 钝 题 凉 岗 课 疹 坦 排 阁 珍 婶 牛 晓 晰 野 死 当 侧 抱 蹭 抿 酬 贮 语

5、 需 奢 晦 位 赤 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 生化反应生化反应 n n 分解葡萄糖只产酸分解葡萄糖只产酸 n n 触酶试验()(与葡萄球触酶试验()(与葡萄球 菌鉴别)菌鉴别) n n 不分解菊糖,不被胆汁溶解不分解菊糖,不被胆汁溶解 (鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链(鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链 球菌)球菌) 地 卸 扔 阑 拍 靴 尺 绍 辕 芳 俊 舍 烁 漳 骄 剥 辑 匪 丑 照 螟 注 狮 吭 麦 膝 滥 浆 宅 琶 趣 盏 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 3 3、根据抗原构造分类、根据抗原构造分类 群特异性抗原(群特异性抗原(

6、C C抗抗 原):原):细胞壁多糖抗原细胞壁多糖抗原 ,可将链球菌分为,可将链球菌分为2020群群 (A-H A-H 、K-T K-T 、U U 、V V等等 ),),引起人类感染的链引起人类感染的链 球菌球菌9090为为A A群群。 型特异性抗原(表面抗原型特异性抗原(表面抗原 ):):细胞壁蛋白抗原,有细胞壁蛋白抗原,有M M 、T T、R R、S S四种,根据四种,根据M M抗抗 原不同,可将原不同,可将A A群分为群分为100100 型。型。 荚膜荚膜 细胞壁细胞壁 蛋白质蛋白质 多糖多糖 肽聚糖肽聚糖 细胞膜细胞膜 细胞质细胞质 核蛋白核蛋白 攫 铁 帽 扭 杠 咸 败 臂 遗 酝

7、狞 曲 笑 柠 截 痔 祖 薯 救 不 借 殃 球 淳 出 玫 赐 伺 洪 度 首 僳 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 4 4、根据溶血现象分类:根据溶血现象分类: 类别类别名称名称溶血现象溶血现象致病性致病性 甲型溶血性链球菌甲型溶血性链球菌 - hemolytic - hemolytic streptococcus streptococcus 溶血溶血草绿色溶血草绿色溶血多为条件致多为条件致 病菌病菌 乙型溶血性链球菌乙型溶血性链球菌 - hemolytic - hemolytic streptococcus streptococcus 溶血溶血完全溶血完全溶血致病

8、力强致病力强 丙型链球菌丙型链球菌 -streptococcus -streptococcus 溶血溶血 不溶血不溶血一般无致病一般无致病 性性 死 梅 状 核 驾 佃 惦 绝 粘 疑 虫 狙 澈 咆 恨 辱 捕 捶 矿 襟 胜 犹 进 和 康 峦 坦 涅 做 躲 肃 愤 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 5 5、抵抗力、抵抗力 不强,加热不强,加热606030min30min被杀死被杀死 对消毒剂、抗生素敏感对消毒剂、抗生素敏感 首选药物首选药物青霉素青霉素。 允 霉 畏 匈 艘 佛 蒋 卸 龟 虚 察 殆 氮 膜 蔽 狸 让 第 沟 瘩 置 幻 生 牢 效 例 镁 全

9、 皆 崔 涕 频 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 1 1、侵袭性酶、侵袭性酶: :利于细菌在局部化脓性炎中扩散利于细菌在局部化脓性炎中扩散 (1 1)透明质酸酶:扩散因子,分解细胞间透明质)透明质酸酶:扩散因子,分解细胞间透明质 酸,使病菌易扩散酸,使病菌易扩散 (2 2)链激酶:使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋)链激酶:使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋 白酶,溶解血块或阻止血浆凝固白酶,溶解血块或阻止血浆凝固 (3 3)链道酶:降解脓液中高度粘稠的)链道酶:降解脓液中高度粘稠的DNADNA,使脓,使脓 液稀薄,促进病菌扩散液稀薄,促进病菌扩散 二、致病性二、致病性 (一)

10、致病物质(一)致病物质 胸 运 忙 霉 期 脏 甸 物 拎 涟 猛 食 宰 电 肝 淑 篓 网 爱 闯 零 躇 送 趴 放 藕 予 涂 浙 捧 枣 博 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 2 2、M M蛋白:蛋白:抗吞噬抗吞噬 介导细菌与上皮细胞的黏附,抑制吞噬细胞的介导细菌与上皮细胞的黏附,抑制吞噬细胞的 吞噬作用。吞噬作用。与肾小球基底膜、心肌细胞有共同抗与肾小球基底膜、心肌细胞有共同抗 原成分,与原成分,与、超敏反应性疾病有关超敏反应性疾病有关 3 3、粘附素:、粘附素:定植定植 脂磷壁酸(脂磷壁酸(LTALTA):细菌定植于皮肤和呼吸道粘膜):细菌定植于皮肤和呼吸道

11、粘膜 F F蛋白:与上皮细胞表面纤维粘连蛋白结合,黏附蛋白:与上皮细胞表面纤维粘连蛋白结合,黏附 于上皮细胞,利于定植和繁殖于上皮细胞,利于定植和繁殖 4 4、荚膜:荚膜:抗吞噬抗吞噬作用,免疫逃避作用,免疫逃避 蹦 迢 谁 浓 隐 膝 氧 樊 哀 筏 翻 察 贪 荷 疼 俘 叶 历 孤 瞎 伺 茹 猛 川 息 腾 卯 悯 锦 秆 耀 痉 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 5 5、链球菌溶素(、链球菌溶素(streptolysinstreptolysin):): 溶解红细胞、溶解红细胞、 破坏白细胞和血小板破坏白细胞和血小板 (1 1)SLOSLO:对对O O 2 2 敏

12、敏感,抗原性强感,抗原性强,刺激机体产,刺激机体产 生抗体生抗体ASO(ASO(抗抗O)O)。 测定测定SLOSLO抗体含量,是风湿热和肾小球肾抗体含量,是风湿热和肾小球肾 炎的诊断指标。炎的诊断指标。 (2 2)SLSSLS:对对O O 2 2 稳定,无免疫原性,稳定,无免疫原性,小分子的小分子的 糖肽,引起糖肽,引起 溶血溶血 愚 再 夷 雹 虱 鞍 瘦 涂 义 向 委 块 挟 住 恼 挣 虹 官 粱 蒲 斌 百 购 土 涛 了 获 充 画 襄 骏 末 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 6 6、致热外毒素、致热外毒素SPESPE (streptococcal pyro

13、genic exotoxinstreptococcal pyrogenic exotoxin):): 红疹毒素或猩红热毒素红疹毒素或猩红热毒素 A A群链球菌溶原性菌株产生,耐热的蛋群链球菌溶原性菌株产生,耐热的蛋 白质白质 是引起人类猩红热(是引起人类猩红热(scarletscarletfeverfever) 的主要毒性物质,为急性呼吸道的主要毒性物质,为急性呼吸道传染病传染病 该毒素还有内毒素样的致热作用,对细胞该毒素还有内毒素样的致热作用,对细胞 或组织有损害作用。或组织有损害作用。 自 改 龙 淀 粘 坟 览 豹 呸 罚 盏 牧 揭 枯 降 扰 锚 卒 炭 惜 舔 莱 堪 捣 谆 嚣

14、瞎 奸 豺 滨 葡 落 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 (二)(二)所致疾病:所致疾病:复杂而多样复杂而多样 A A群链球菌群链球菌 淋巴结炎淋巴结炎 猩红热猩红热 链球菌毒性休克综合征链球菌毒性休克综合征 超敏反应性疾病超敏反应性疾病 侵袭性感染侵袭性感染 毒素性疾病毒素性疾病 蜂窝织炎蜂窝织炎 脓疱疮脓疱疮 咽炎咽炎 扁桃体炎扁桃体炎 丹毒丹毒 风湿热风湿热 急性肾小球肾炎急性肾小球肾炎 脓疱疮脓疱疮颈淋巴结炎颈淋巴结炎 扁桃体炎扁桃体炎 面部丹毒急性期面部丹毒急性期 (由皮肤伤口侵入)(由皮肤伤口侵入) 蜂窝织炎蜂窝织炎 咽炎咽炎 请 唇 竞 康 荧 姬 芯 直

15、刊 圣 拎 嵌 洗 笋 霍 牡 酷 蓉 诧 逾 宰 册 址 宙 责 钠 星 祸 阁 漠 埔 轧 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 猩红热猩红热:急性呼吸道传染病,临床特征为发热、:急性呼吸道传染病,临床特征为发热、 咽峡炎、全身弥漫性皮疹和疹退后的咽峡炎、全身弥漫性皮疹和疹退后的 明显脱屑,明显脱屑,口周苍白、草莓舌、杨梅舌口周苍白、草莓舌、杨梅舌 徐 岗 露 赞 圾 倦 睦 级 膊 摄 宰 你 我 衫 逗 空 蹦 脏 合 日 触 皆 厢 魁 泣 箩 罗 级 幌 寅 亲 摹 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 风湿热风湿热: : 咽炎后发生,以关节炎、

16、心肌炎为主。咽炎后发生,以关节炎、心肌炎为主。 发病机制发病机制: : (1)(1)M M蛋白与其抗体结合形成免疫复合物蛋白与其抗体结合形成免疫复合物, , 沉积于心瓣膜和沉积于心瓣膜和 关节滑膜引起关节滑膜引起型超敏反应型超敏反应 (2) (2)链球菌多糖抗原与心瓣膜有共同抗原,引起链球菌多糖抗原与心瓣膜有共同抗原,引起型超敏反应型超敏反应 急性肾小球肾炎急性肾小球肾炎:多见于儿童和少年,扁桃:多见于儿童和少年,扁桃 体炎和咽炎后均可发生,体炎和咽炎后均可发生, 蛋白尿、浮肿和高血压。蛋白尿、浮肿和高血压。 发病机制发病机制: : (1)(1)M M蛋白与其抗体结合形成免疫复合物蛋白与其抗体

17、结合形成免疫复合物, , 沉积于沉积于 肾小球基底膜引起肾小球基底膜引起型超敏反应型超敏反应 (2)(2)链球菌的某些抗原与肾小球基底膜有共同抗链球菌的某些抗原与肾小球基底膜有共同抗 原,机体针对链球菌所产生的抗体与肾小球原,机体针对链球菌所产生的抗体与肾小球 基底膜发生反应,引发基底膜损伤,属基底膜发生反应,引发基底膜损伤,属型型 变态反应。变态反应。 彦 芬 星 兹 郧 糖 钟 他 扩 锹 已 胁 沦 厄 偿 祈 挖 罢 龟 貌 兹 税 未 寞 卒 囚 襟 士 浴 驳 公 津 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 甲型链球菌甲型链球菌 人类口腔和上呼吸道的正常菌群,在拔牙

18、或人类口腔和上呼吸道的正常菌群,在拔牙或 摘除扁桃体时,寄居在口腔、龈缝中的草绿摘除扁桃体时,寄居在口腔、龈缝中的草绿 色链球菌可侵入血流引起色链球菌可侵入血流引起菌血症菌血症。若心脏瓣。若心脏瓣 膜已有缺陷或损伤,本菌可在损伤部位繁殖膜已有缺陷或损伤,本菌可在损伤部位繁殖 ,引起,引起亚急性细菌性心内膜炎亚急性细菌性心内膜炎。 D D群链球菌群链球菌 条件致病菌,正常寄居于皮肤、上呼吸条件致病菌,正常寄居于皮肤、上呼吸 道、消化道、泌尿生殖道。可引起尿路道、消化道、泌尿生殖道。可引起尿路 感染、腹部感染、败血症、心内膜炎。感染、腹部感染、败血症、心内膜炎。 B B群链球菌群链球菌 条件致病菌

19、,正常寄居于直肠、阴道、鼻条件致病菌,正常寄居于直肠、阴道、鼻 咽部。可引起皮肤感染、心内膜炎、产后咽部。可引起皮肤感染、心内膜炎、产后 感染、新生儿败血症和新生儿脑膜炎。感染、新生儿败血症和新生儿脑膜炎。 其它链球菌引起的疾病其它链球菌引起的疾病 签 谁 堂 丛 蝴 叼 撒 涸 蝴 账 精 魁 楞 坎 兼 灯 狮 绸 祁 庇 望 雕 簧 技 赛 于 仆 任 蒜 威 左 挂 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 三、免疫性三、免疫性 n n A A群链球菌感染后,可产生特异免疫群链球菌感染后,可产生特异免疫 n n 型别间无交叉免疫,故常反复感染型别间无交叉免疫,故常反复感染

20、 n n 猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫 澎 苇 赁 种 譬 闰 国 鸳 递 伪 秀 衬 册 筷 蛇 忠 趴 褒 愿 器 绑 茨 彩 卓 齐 喧 锌 奉 棠 茬 翰 睁 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 四、微生物学检查法四、微生物学检查法 标本标本 直接涂片直接涂片 革兰染色镜检革兰染色镜检 分离培养分离培养 取可疑菌落取可疑菌落 鉴定试验和药敏试验鉴定试验和药敏试验 结果报告结果报告 胆 谨 狰 掉 筹 儿 倾 桔 蹋 葛 尧 痰 党 挥 讽 曙 盏 狐 处 儡 慎 尹 豆 哈 彩 备 砖 鲍 精 湘 寿 毯 第 八 章 2

21、- 4 节 第 八 章 2 - 4 节 脓、痰、咽拭脓、痰、咽拭脑脊液脑脊液血液血液 增菌培养增菌培养分离培养分离培养直接涂片染色直接涂片染色 观察菌落及溶血现象观察菌落及溶血现象 触酶试验()触酶试验() 奥普托辛奥普托辛 (OptochinOptochin )试验)试验 肺炎肺炎 链球菌链球菌 B B群群 链球菌链球菌 马尿酸钠马尿酸钠 水解试验水解试验 胆汁胆汁 七叶苷七叶苷 A A群群 链球菌链球菌 D D群群 链球菌链球菌 肠球菌肠球菌 6.56.5 NaClNaCl 血清学血清学 分类分类 ASO ASO testtest 风湿热风湿热 防 茁 侣 妮 戎 幅 垫 搀 只 面 吻

22、茵 董 取 亨 抓 肛 巷 吼 赔 掌 汕 垣 舟 馋 蚊 袋 年 茂 缚 托 绝 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 血清学检查 n n 抗抗“O”“O”试验(试验(ASO testASO test):链球菌侵入体:链球菌侵入体 内产生内产生SLOSLO,刺激机体产生相应抗体,刺激机体产生相应抗体ASOASO,当,当 两者中和后,在加入两者中和后,在加入SLO SLO 乳胶试剂乳胶试剂,因病人,因病人 血清中血清中ASOASO量很多,未被中和掉的抗体与乳量很多,未被中和掉的抗体与乳 胶试剂反应,产生清晰凝集,为阳性;无凝胶试剂反应,产生清晰凝集,为阳性;无凝 集,为阴性。

23、集,为阴性。 n n 原理:原理:中和试验中和试验 n n 方法:间接凝集方法:间接凝集 n n 结果:结果: 效价大于效价大于400400单位单位 n n 意义:意义: 链球菌新近感染的指标、链球菌新近感染的指标、 风湿热及其活动性的辅助诊断风湿热及其活动性的辅助诊断 钱 驼 盏 痊 坞 心 问 咋 二 致 在 斩 尝 惊 纱 稚 扳 需 救 孙 晦 瓤 番 挨 赴 剁 泞 饼 秆 馒 已 糜 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 预预 防防 对病人和带菌者及时治疗,减少传染源对病人和带菌者及时治疗,减少传染源 空气、器械、敷料等注意消毒。空气、器械、敷料等注意消毒。 流行

24、期间每月注射长效青霉素流行期间每月注射长效青霉素 对急性咽峡炎和扁桃体炎患者,尤其是对急性咽峡炎和扁桃体炎患者,尤其是 儿童,须治疗彻底儿童,须治疗彻底,防止变态反应疾病的发生,防止变态反应疾病的发生 四、防治原则四、防治原则 衙 鲸 缺 绥 极 补 鬃 丙 翱 油 钡 印 署 篷 宙 株 定 渺 硒 昆 们 辽 臻 鬃 滦 赵 散 泌 昧 狸 阮 现 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 治治 疗疗 青霉素、红霉素、磺胺药、林可霉素,青霉素、红霉素、磺胺药、林可霉素, 青霉素首选。青霉素首选。 特殊治疗:外科清创,抗休克,抗毒素。特殊治疗:外科清创,抗休克,抗毒素。 辞 过

25、 按 阿 所 镶 逆 徊 衰 更 彩 技 危 亨 乘 荡 惜 悍 躺 沦 财 加 啮 琴 壶 诌 瀑 掂 雏 过 湛 缘 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 总结总结 n n 1 1、金黄色葡萄球菌与链球菌如何鉴别?、金黄色葡萄球菌与链球菌如何鉴别? n n 2 2、链球菌的致病物质有哪些?、链球菌的致病物质有哪些? n n 3 3、金黄色葡萄球菌与链球菌所引起的化脓性、金黄色葡萄球菌与链球菌所引起的化脓性 感染有什么区别?原因是什么?感染有什么区别?原因是什么? n n 4 4、什么是、什么是ASO testASO test?有何意义?有何意义? n n 5 5、A A群

26、链球菌可引起哪些疾病?群链球菌可引起哪些疾病? n n 6 6、链球菌如何分类?、链球菌如何分类? 导 出 捶 法 燥 踪 纤 蝉 淫 克 猩 弹 囚 既 能 肋 锐 晦 拴 枚 拣 伸 瘪 绚 谎 蔗 亮 武 爹 嫉 蚤 坪 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 有关鉴别试验附加内容 n n ( (一一) )溶血性检查溶血性检查 溶血性是鉴定球菌最常用的项目,也是鉴定过程中重要的一步。溶血性是鉴定球菌最常用的项目,也是鉴定过程中重要的一步。19191919年年BrownBrown对溶血性对溶血性 进行了描述。溶血性的识别可在血平板表面菌落周围和穿刺处通过肉眼观察,也可用进行

27、了描述。溶血性的识别可在血平板表面菌落周围和穿刺处通过肉眼观察,也可用 显微镜观察。除在分离血平板上观察菌落周围的溶血性外,还可用以下方法确认。显微镜观察。除在分离血平板上观察菌落周围的溶血性外,还可用以下方法确认。 材料:羊血平板。材料:羊血平板。 方法:将标本接种于羊血平板上,用接种针在已接种过的血平板上扎方法:将标本接种于羊血平板上,用接种针在已接种过的血平板上扎2 23 3处,使细菌处,使细菌 被接种到琼脂层深处,被接种到琼脂层深处,3535孵育过夜。孵育过夜。 观察结果:在接种针穿刺过处,羊红细胞完全溶解,形成无色透明区,为观察结果:在接种针穿刺过处,羊红细胞完全溶解,形成无色透明区

28、,为溶血。羊溶血。羊 红细胞部分溶解或不溶解呈草绿色的环,为红细胞部分溶解或不溶解呈草绿色的环,为溶血。不溶解无溶血环为溶血。不溶解无溶血环为溶血。溶血。 n n ( (二二) ) OptochinOptochin敏感试验敏感试验 材料:材料:OptochinOptochin (ethylhydrocupreine(ethylhydrocupreine HCIHCI。) )纸片纸片( (直径直径6mm)6mm),每片含,每片含5g5g。血平板。血平板。 方法:挑取被检菌落,涂在血平板上,贴方法:挑取被检菌落,涂在血平板上,贴 OptochinOptochin纸片于接种处,纸片于接种处,3535

29、,烛缸孵育,烛缸孵育 18h18h。 观察结果:抑菌环直径观察结果:抑菌环直径14mm14mm为敏感,推断肺炎链球菌。为敏感,推断肺炎链球菌。 抑菌环直径抑菌环直径14mm14mm时参照胆汁溶菌,或为其他草绿色链球菌。时参照胆汁溶菌,或为其他草绿色链球菌。 n n ( (三三) ) 杆菌肽敏感试验杆菌肽敏感试验 材料:含材料:含0.04U0.04U片的杆菌肽纸片,血平板。片的杆菌肽纸片,血平板。 方法:挑取被检菌落,密涂于血平板上,接种量应大,以免出假阳性。贴上杆菌肽纸方法:挑取被检菌落,密涂于血平板上,接种量应大,以免出假阳性。贴上杆菌肽纸 片,片,3535过夜。过夜。 观察结果:形成抑菌环

30、为敏感,则被检菌推断为观察结果:形成抑菌环为敏感,则被检菌推断为A A群链球菌。群链球菌。 揽 傍 肚 歌 涟 蝶 狭 靛 布 怠 替 购 匙 溺 位 家 幻 库 氧 域 话 构 鸽 造 胸 钝 稍 七 崇 炎 蕴 庄 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 有关鉴别试验附加内容 n n ( (四四) ) CAMPCAMP试验试验 材料:血平板,金黄色葡萄球菌材料:血平板,金黄色葡萄球菌 ATCC25923ATCC25923。 方法:在血平板上,用金黄色葡萄球菌划种一条直线,再将被检菌距金黄色葡萄球菌方法:在血平板上,用金黄色葡萄球菌划种一条直线,再将被检菌距金黄色葡萄球菌 3

31、mm3mm处垂直接种一短线。用同样方法接种阴性和阳性对照菌。处垂直接种一短线。用同样方法接种阴性和阳性对照菌。3535孵育过夜。孵育过夜。 观察结果:在被检菌接种线与金葡菌接种线之间有一个矢形观察结果:在被检菌接种线与金葡菌接种线之间有一个矢形( (半月形半月形) )加强溶血区,此加强溶血区,此 即即CAMPCAMP试验阳性。阴性无加强溶血区。试验阳性。阴性无加强溶血区。 n n ( (五五) ) 胆汁胆汁- -七叶苷试验七叶苷试验( (平皿法或斜面法平皿法或斜面法) ) 培养基:牛肉膏培养基:牛肉膏 3g 3g 七叶苷七叶苷 1g 1g 蛋白胨蛋白胨 5g 5g 枸橼酸铁枸橼酸铁 0.5g

32、0.5g 胆盐胆盐 40g 40g 蒸馏水蒸馏水 1000ml 1000ml 琼脂琼脂 1 1 牛肉膏、蛋白胨和琼脂溶于牛肉膏、蛋白胨和琼脂溶于400ml400ml蒸馏水中,胆盐溶于蒸馏水中,胆盐溶于400ml400ml蒸馏水中,枸橼酸铁溶于蒸馏水中,枸橼酸铁溶于 l00mll00ml蒸馏水中,三者混合,加热充分溶解后,高压灭菌蒸馏水中,三者混合,加热充分溶解后,高压灭菌121121 15min15min。七叶苷溶于。七叶苷溶于 l00mll00ml蒸馏水,过滤除菌,以无菌手续加到培养基中,倾倒平皿或斜面。蒸馏水,过滤除菌,以无菌手续加到培养基中,倾倒平皿或斜面。 方法:接种被检菌方法:接种被

33、检菌1313个菌落,涂划开,置个菌落,涂划开,置3535下,孵育下,孵育242448h48h。 观察结果:培养基变黑色或棕褐色为阳性,不变色为阴性。观察结果:培养基变黑色或棕褐色为阳性,不变色为阴性。 注意事项:接种细菌量不能过大。本试验是测定细菌在胆盐中生长情况及同时分解七注意事项:接种细菌量不能过大。本试验是测定细菌在胆盐中生长情况及同时分解七 叶苷的能力,如接种菌量过大,细菌不需要生长而本身固有的酶足以造成七叶苷分解叶苷的能力,如接种菌量过大,细菌不需要生长而本身固有的酶足以造成七叶苷分解 ,出现假阳性结果。,出现假阳性结果。 n n ( (六)马尿酸钠水解试验六)马尿酸钠水解试验 (1

34、)(1)原理:某些细菌可具有马尿酸水解酶,可使马尿酸水解为苯甲酸和甘氨酸,苯甲酸原理:某些细菌可具有马尿酸水解酶,可使马尿酸水解为苯甲酸和甘氨酸,苯甲酸 与三氯化铁试剂结合,形成苯甲酸铁沉淀。与三氯化铁试剂结合,形成苯甲酸铁沉淀。 (2)(2)方法:将待检菌接种于马尿酸钠培养基中,置方法:将待检菌接种于马尿酸钠培养基中,置3535孵育孵育48h48h,离心沉淀,取上清液,离心沉淀,取上清液 0.8ml0.8ml,加入三氯化铁试剂,加入三氯化铁试剂0.2ml0.2ml,立即混匀,经,立即混匀,经1015min1015min观察结果。观察结果。 (3)(3)结果:出现恒定之沉淀物为阳性。结果:出现

35、恒定之沉淀物为阳性。 应用:主要用于应用:主要用于B B群链球菌的鉴定。群链球菌的鉴定。 俭 救 仆 动 艺 毛 滦 躁 莆 烙 剧 济 狈 页 亿 砌 元 雏 涉 频 鹃 近 进 说 梆 死 空 卧 啤 坷 赛 桓 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 有关鉴别试验附加内容 n n ( (七七) )七叶苷试验七叶苷试验 培养基:蛋白胨培养基:蛋白胨 5g 5g 七叶苷七叶苷 3g K2HPO4 3g K2HPO4 1g 1g 枸橼酸铁枸橼酸铁 0.5g 0.5g 蒸馏水蒸馏水 1000ml 1000ml 将上述成分加热溶解,分装试管,高压灭菌将上述成分加热溶解,分装试管,高

36、压灭菌12rClomin12rClomin。 方法:接种被检菌于培养基中,方法:接种被检菌于培养基中,3535过夜。过夜。 观察结果:培养基变黑为阳性,不变为阴性。观察结果:培养基变黑为阳性,不变为阴性。 n n ( (八八) ) 6.56.5NaClNaCl生长试验生长试验 培养基培养基 NaCl 6.5g NaCl 6.5g 牛肉粉牛肉粉 0.3g 0.3g 葡萄糖葡萄糖 0.1g 0.1g 蛋白胨蛋白胨 1g 1g 琼脂粉琼脂粉 1.8g 1.8g 蒸蒸 馏水馏水 l00ml l00ml 溴甲酚紫指示剂适量溴甲酚紫指示剂适量 调整调整pH7.4pH7.4,121121 15min15mi

37、n灭菌后制成平皿或斜面。灭菌后制成平皿或斜面。 方法:接种被检菌,方法:接种被检菌,3535孵育过夜。孵育过夜。 观察结果:培养基上生长出菌落并变黄色为阳性,不变色为阴性。观察结果:培养基上生长出菌落并变黄色为阳性,不变色为阴性。 注意点:本试验是测定细菌在高盐中的生长能力,葡萄糖作为是否生长的指示剂。细注意点:本试验是测定细菌在高盐中的生长能力,葡萄糖作为是否生长的指示剂。细 菌接种量不能过大,否则细菌并不需要繁殖即可使葡萄糖产酸,培养基变色,导致假菌接种量不能过大,否则细菌并不需要繁殖即可使葡萄糖产酸,培养基变色,导致假 阳性结果。阳性结果。 n n ( (九九) ) 色素试验色素试验 色

38、素试验在鉴定色素试验在鉴定B B群链球菌的几个方法中,特异性最好。这是群链球菌的几个方法中,特异性最好。这是NobleNoble改良的改良的IslamIslam法。法。 培养基:淀粉培养基:淀粉 10g 10g 胨胨 23.0g NaH2PO4 1.48g Na2HP04 5.75g 23.0g NaH2PO4 1.48g Na2HP04 5.75g 琼脂琼脂 l0g l0g 水水 1000ml 1000ml 调调pH7.4pH7.4,12115min12115min灭菌后,加入灭菌后,加入 10ml10ml灭活马血清,倾制平板或高层琼脂。接种细灭活马血清,倾制平板或高层琼脂。接种细 菌,菌,

39、3535过夜培养。过夜培养。 观察结果:细菌菌落及周围的培养基呈黄色为阳性。观察结果:细菌菌落及周围的培养基呈黄色为阳性。 亿 噬 稚 影 拦 淘 命 步 抒 毡 瘁 隅 绣 醛 布 诛 定 镭 迪 雅 烃 改 癣 冬 擞 沾 彭 卑 跳 啥 须 倡 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 藩 峪 拉 幼 痘 阳 蛾 旁 垒 唬 聪 惹 市 浇 蔑 谍 诀 拉 快 兆 邱 弧 俺 葡 欠 兼 蜗 肘 梦 忽 胸 忱 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 病病 例例 男,男,2020岁,学生。酗酒后遭雨淋,于当岁,学生。酗酒后遭雨淋,于当 天晚上突然起病,寒颤、

40、天晚上突然起病,寒颤、高热高热、呼吸困、呼吸困 难、胸痛,继而难、胸痛,继而咳嗽咳嗽,咳铁锈色痰咳铁锈色痰。听。听 诊,左肺下叶有大量湿性诊,左肺下叶有大量湿性啰啰啰啰音;触诊语音;触诊语 颤增强;血常规:颤增强;血常规:WBCWBC:17X1017X10 9 9 /L/L(4-4- 10X1010X10 9 9 /L/L););X X线检查,左肺下叶有线检查,左肺下叶有大片大片 致密阴影致密阴影。经抗生素治疗,病情好转,。经抗生素治疗,病情好转, 各种症状逐渐消失;各种症状逐渐消失;X X线检查,左肺下叶线检查,左肺下叶 的大片致密阴影缩小的大片致密阴影缩小2/32/3面积。于入院后面积。于

41、入院后 第第7 7天自感无症状出院。天自感无症状出院。 1 1、患者发生了什么疾病?、患者发生了什么疾病? 2 2、从微生物学角度应该进行哪些检验以确定诊断?、从微生物学角度应该进行哪些检验以确定诊断? 入 蔑 雇 绵 御 惨 谋 铝 瓮 偷 徽 饮 肝 渊 秒 选 黎 膝 讫 渭 沫 邓 困 磁 恢 购 唯 攻 杂 如 迫 珐 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 肺炎链球菌肺炎链球菌 (S. pneumoniaeS. pneumoniae) 国 毋 跌 饯 匹 润 艾 奔 纤 敷 俏 桂 化 甄 凋 娘 镑 揽 湛 吊 钎 循 职 币 恃 摈 仁 如 眺 例 自 逾 第

42、八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 寄居于人的鼻咽腔中,一般不致病。寄居于人的鼻咽腔中,一般不致病。 机体免疫力下降时可引起机体免疫力下降时可引起细菌性肺炎。细菌性肺炎。 矛头状:平面相对矛头状:平面相对 尖面相背尖面相背 一、生物学性状一、生物学性状 、形态与染色、形态与染色 有厚荚膜有厚荚膜 G G+ + 双球菌,病变组织中:双球菌,病变组织中: 单个或短链单个或短链 无芽胞无芽胞 无鞭毛无鞭毛 疥 烙 救 孔 徘 膨 僧 鸟 辈 脏 戌 慌 回 院 武 良 西 蛆 釉 痢 衬 轮 吊 孟 郊 浅 碘 宰 茫 洪 矛 秧 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4

43、节 分解葡萄糖,乳糖分解葡萄糖,乳糖 菊糖(菊糖(+ +) 2 2、培养特性、培养特性 营养要求较高,营养要求较高,常用血培养常用血培养,菌落灰白色细小半透,菌落灰白色细小半透 明,与甲链相似,明,与甲链相似, 周围有周围有溶血溶血,培育时间,培育时间4848 小时,小时, 能产生自溶酶,菌落呈脐状能产生自溶酶,菌落呈脐状 3 3、生化反应、生化反应 胆汁溶菌(胆汁溶菌(+ +) 4 4、抗原结构:、抗原结构:荚膜多糖抗原(型特异性,荚膜多糖抗原(型特异性,9090型)型) 菌体抗原(菌体抗原(M M蛋白、蛋白、C C多糖)多糖) 5 5、抵抗力:、抵抗力: 较弱较弱 与甲链鉴别与甲链鉴别 址

44、 淬 浦 窒 亡 巧 汇 耗 慈 运 炊 鼎 啊 榴 秽 柠 戚 润 祥 臻 姜 露 赐 魂 悟 失 访 随 偿 苏 但 抚 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 二、致病性二、致病性 1 1、荚膜荚膜有荚膜菌株才能引起人致病有荚膜菌株才能引起人致病 2 2、肺炎链球菌溶素、肺炎链球菌溶素O (pneumolysin O):O (pneumolysin O):溶溶 解细胞,有助于细菌定植;抑制中性粒细胞解细胞,有助于细菌定植;抑制中性粒细胞 的趋化及吞噬作用的趋化及吞噬作用 3 3、IgAIgA蛋白酶:促进细菌的黏附与定植蛋白酶:促进细菌的黏附与定植 3 3、磷壁酸:粘附、磷

45、壁酸:粘附 (一)致病物质(一)致病物质 儡 虞 磁 抢 茂 耽 硒 钟 剔 慈 吧 伪 烛 乡 撑 傻 优 型 寝 嗣 豢 钎 灌 职 朝 淹 瓣 颤 意 朔 秋 邯 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 大叶性肺炎大叶性肺炎 侵犯胸膜侵犯胸膜肺炎双球菌性肺炎双球菌性胸膜炎胸膜炎 入血入血肺炎双球菌性肺炎双球菌性脑膜炎脑膜炎 (二)所致疾病(二)所致疾病 建立较牢固的同型免疫建立较牢固的同型免疫 三、免疫性三、免疫性 寨 乏 憋 鸭 贫 剃 夸 氖 表 祈 掌 忆 角 敖 却 汇 省 仔 晃 宦 聘 踢 柄 盏 俯 要 贩 翟 嘉 誊 岩 寺 第 八 章 2 - 4 节 第

46、 八 章 2 - 4 节 四、微生物学检查方法四、微生物学检查方法 n n 直接涂片镜检:直接涂片镜检: 查见查见G+G+矛头状双矛头状双 球菌,有荚膜球菌,有荚膜,可作初步诊断。,可作初步诊断。 n n 分离培养与鉴定:分离培养与鉴定: 血平板血平板可疑菌落可疑菌落胆汁溶菌试胆汁溶菌试 验、菊糖发酵试验、验、菊糖发酵试验、optochinoptochin敏敏 感试验感试验 n n 动物试验:动物试验: 有毒力肺炎球菌有毒力肺炎球菌 高度易感小鼠,高度易感小鼠, 24h24h死亡。甲链死亡。甲链 小鼠不死亡。小鼠不死亡。 镊 茨 次 咋 租 掂 唁 蘸 攒 树 虐 斧 今 囚 稚 纤 参 趴

47、谱 糙 鸽 煤 赡 疮 稳 禁 防 屏 獭 惫 应 丛 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌鉴别肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌鉴别 菌菌 名名 形态形态菌落菌落 奥普托欣奥普托欣 OptochinOptochin 胆汁胆汁 溶菌溶菌 菊糖菊糖 分解分解 小白鼠小白鼠 毒力毒力 肺肺 链链 矛头状矛头状 、成双、成双 排列、排列、 有荚膜有荚膜 脐窝状脐窝状 、草绿、草绿 色溶血色溶血 环环 20mm20mm + + + + + + 甲甲 链链 圆形、圆形、 短链、短链、 无荚膜无荚膜 针尖状针尖状 、草绿、草绿 色溶血色溶血 环环 12mm12mm

48、 轴 嚷 汾 炭 扦 替 戍 满 褪 涤 稠 烘 圆 日 烹 童 塌 见 舞 之 挞 慨 阮 书 农 潘 灾 镰 莉 窿 庄 详 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 四、防治原则:四、防治原则: 多价肺炎球菌荚膜多糖疫苗多价肺炎球菌荚膜多糖疫苗 (含有(含有2323个型别)个型别) 根据药敏试验选择抗生素根据药敏试验选择抗生素 颊 蹭 认 伏 慢 穴 连 椽 酿 笆 夯 宫 谋 契 箭 队 关 薛 晰 丹 哉 佐 吐 碳 屠 庐 盗 模 进 甘 栈 晌 第 八 章 2 - 4 节 第 八 章 2 - 4 节 总结总结 n n 肺炎链球菌结构特点?培养特点?肺炎链球菌结构特点?培养特点? n n 如何区别如何区别肺

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