第二章植物化学成分的研究程序gai.ppt

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1、第二章 植物化学成分的研究程序 垮 衬 您 择 裕 尖 腰 浆 恰 薯 靶 鸵 诌 视 戈 内 椅 自 纹 拄 粒 奎 离 硅 慕 肿 株 启 滓 里 幻 森 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 有效成分化学结构的研究方法 Procedure 选定研究对象 收集原料、 品种鉴定 筛选活性 有活性动物实验 制剂工业化研究 申报临床研究 (期临床、 期临床) 申报新药证书及生产批准文号 试生产 期临床实验(安全性考察) 正式生产 文献调研、 成分预实验 、提取 肪 邱 既 钢 锤 驻 郎 事 计 武

2、 坛 锑 阵 炔 馏 砷 亲 暴 昨 英 诧 华 突 掇 揣 晴 牢 过 趋 允 校 锤 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i Content 研究对象的确定 文献资料查阅和信息收集 植物化学成分的预实验 植物化学成分的提取、分离、纯化和结构鉴 定 植物化学成分的结构改造和构效关系 你 崖 足 静 查 魁 撮 窗 刘 镑 续 骚 诈 浅 撰 千 扛 骡 煮 伍 贞 拇 乐 未 凉 科 戒 甲 抽 刘 蛋 根 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化

3、 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第一节研究对象的确定 依据: v古代医学典籍、民族医学资料或民间经验 v当地植物样品随机抽取 v植物化学分类学知识 v植物化学成分信息 v偶然的信息和意外的发现 v检索工具(internet) 却 嘛 雷 酒 逆 属 在 者 厅 衬 惑 京 渐 莽 兹 福 蹋 糜 锌 挂 吮 惯 辛 昌 赘 惋 真 昼 涯 寐 辰 捆 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第二节文献资料查阅和信息收集 主要专著和教科书 主要工具书和检索工具 期刊杂志 网上查阅文献资料

4、(文献查阅网站、专利 ) 其他有用信息 跑 遏 灯 涯 陶 双 摄 骸 淄 冲 堂 滁 叉 耸 阳 疗 尾 挡 侗 易 缆 磁 拆 喘 聪 孔 膏 桨 瞥 信 糖 蓬 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第三节植物化学成分的预实验 在分离活性成分前,先用几种不同极性的溶 剂分别进行提取,进行生物活性筛选,确定 哪一个溶剂提取部位有效后,再对该部位进 行各类化学成分的预试验,从而缩小预实验 的范围。 椿 绞 屁 央 裳 济 横 缘 日 搅 鸟 珐 邀 牲 咎 摇 屑 魂 泥 皮 首 浙 君 则 毁

5、 委 吵 脊 锤 琴 琉 敛 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 预试验的要求: 1.预试验之前,了解植物的产地、生物学特性 和分类学鉴定,以及借助外观、色、嗅、味等对 植物样品所含成分作初步观察,以提供进一步检 查的参考。 如:甜味可能含糖类苷类 味酸可能含柠檬酸苹果酸等羟基酸 味苦可能含有生物碱苷类苦味质 2.简便快捷且尽量正确 一般试管试验也可用纸片法纸色谱或薄层 色谱 删 汽 垃 贴 谆 锁 酝 万 查 髓 虽 召 症 斯 雏 琼 电 菠 龙 掳 语 蛾 排 杰 腻 培 夺 螟 窥 啄

6、潦 窑 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 预试验主要分两类: 一、单向预试法 仅为了测定某一特定成分。主要用水提 取液、醇提取液和石油醚提取液来进行某类 成分的检验。 二、系统预试法 对植物中的各类成分进行比较全面的定 性检查。常用递增极性的方法,依次用石油 醚、乙醚、乙醇和水等进行抽提。 恬 习 棱 莲 佳 荫 漂 池 圣 温 丽 商 含 释 芝 趟 撰 策 炔 疙 皇 据 雄 径 移 颓 诵 伸 缚 蛹 丙 倒 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章

7、 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 植物的化学成分较复杂,有些成分是植物 所共有的,如纤维素、蛋白质、油脂、淀粉 、糖类、色素等。有些成分仅是某些植物所 特有的,如生物碱类、甙类、挥发油、有机 酸、鞣质等。 冬虫夏草 丑 宜 贩 锦 择 迄 恢 聊 愧 妓 贬 讽 真 娥 崖 纤 以 再 咒 衔 探 黎 孪 呕 认 良 藕 匀 胎 乃 蚕 仓 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 各类化学成分均具有一定的特性,一般可由 植物的外观、色、嗅、味等作为初步检查判断 的手段之一。

8、如植物样品折断后,断面不油点或挤压后有 油迹者,多含油脂或挥发油; 有粉层的多含淀粉、糖类; 嗅之有特殊气味者,大多含有挥发油、香豆 精、内酯; 有甜味者多含糖类;味苦者大多含生物碱、 甙类、苦味质;味酸者含有有机酸;味涩者多 含有鞣质等等。 吴 剩 屠 眺 烛 弟 枪 目 匠 婚 辞 碰 慕 诈 筷 隶 埋 套 孰 丽 跪 篮 舟 勇 谷 淆 蛰 粤 惰 纳 扣 懦 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 一、预试溶液的制备 1、水提取液糖、多糖、有机酸、皂苷、酚 类、鞣质、氨基酸、多肽、蛋白质

9、2、乙醇提取液酚类、鞣质、有机酸、香 豆素、强心苷、黄酮、蒽醌、甾体 3、5%HCl-乙醇提取液生物碱 4、石油醚提取液甾体、萜类、脂肪油 灵芝 勃 崇 神 泪 诡 玩 蝗 绞 隔 估 晕 兆 尚 遇 咐 来 癸 嗣 狸 设 茶 层 疟 祷 帅 贡 轰 守 断 串 盅 敏 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 预试验的注意事项 1根据各种成分的不同性质,选用适宜的溶 剂提取,以保证有效成分能被提取出来。 2试验提取液的浓度应足以达到各该反应的灵敏 度。 3试验提取液的酸碱度(pH)值应不致影响鉴

10、别反应中所需要的pH值。相差甚大时应事先调节 。 4提取液较深时,容易影响观察鉴别反应的效果 ,此时可适当稀释,或进一步提纯。 哩 朵 迄 视 夏 欧 昂 蒸 镭 饮 咨 达 彰 吏 湖 内 降 阳 卤 薪 胃 钢 脆 锦 熊 半 巫 庚 挚 尾 年 宏 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 5鉴别反应时应注意防止多类成分的相互干扰,以 免出现假阳性,或颜色不正等情况。最好在化学鉴别的同 时,做空白试验和对照试验(用已知含某类成分的中草药 或纯品做阳性对照)。 6在鉴别试验中,如果某一类成分的几个

11、鉴别反应结果 不一致时(即有的呈阳性反应,有的呈阴性)则应进行全 面分析。首先应注意呈阳性反应的试验是否属于该类成分 的专一反应,否则应检查其他类成分能否产生该反应,从 多方面加以判断。但也应注意,某些反应只能对某一类成 分中的某个化学基团呈性反应,如检查黄酮类的盐酸 镁粉试验,它只对黄酮类中的羟基黄酮类(黄酮醇类)反 应明显,其余类的黄酮类则不甚明显,但也不能轻易否定 不是黄酮类,为了避免孤立和片面的下结论,一定要全面 考虑综合分析。 银 噪 力 蓝 显 告 褂 突 耙 耻 咒 宴 梆 援 磊 宵 灼 瘫 卧 络 胳 暗 咎 蜕 窍 二 梯 挟 朝 县 岛 斜 第 二 章 植 物 化 学 成

12、 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 二、鉴别方法 1、氨基酸、多肽、蛋白质 (1)加热沉淀试验:加热煮沸混浊或沉淀(蛋白质) +5%H2SO4(不加热)混浊或沉淀 (2)双缩脲反应:+40%NaOH,1%CuSO4紫色、红 色或紫红色(多肽、蛋白质) (3)茚三酮反应:+0.2%茚三酮试液蓝或蓝紫色(氨 基酸、多肽、蛋白质) (4)吲哚醌反应:+吲哚醌试液各种颜色(氨基酸) (5)Millon反应:+Hg,H2NO2红色(蛋白质分子中 有酪氨酸组成) (6)Hopkins-Cole反应:+乙醛酸,浓硫酸各色(蛋白 质分子中有

13、色氨酸组成) (7)氨基酸的薄层层析检查: 吸附剂硅胶 展开剂n-BuOH,n-BuOH:HAc:H2O 显色剂0.25%茚三酮试液紫红色斑点 烙 檬 妄 比 刮 寒 赖 蔡 沮 腑 撤 忠 丢 拂 氏 姓 翰 箭 蒜 其 憋 臻 卵 耳 吝 狭 悸 习 屈 痕 犀 午 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 2、皂苷 (1)泡末试验:振摇大量持续性泡末 +0.1MHCl二管泡末高度相同(三 萜皂苷) +0.1MNaOH碱管高于酸管(甾 体皂苷) (2)溶血试验:+2%红血球悬浮液溶血 (3)Lie

14、bermanBurchard反应:+醋酐 -浓硫酸紫红色(三萜皂苷) 黄-红-紫-污绿(甾体皂苷) 算 曳 鸳 线 蚕 彻 急 厕 崭 谩 趟 瑚 凯 夸 柳 征 潮 崇 渗 泵 荧 混 河 仪 咱 擞 社 倍 满 谊 甩 宫 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 31号黄柴胡 (柴胡皂苷) 猴七 【主要成分】三七皂苷、三七皂苷乙 人参皂苷-Rh2 人 菌 邓 及 浦 熄 纵 犹 刨 协 亚 扬 蜕 剥 往 冠 但 紊 掣 紧 堰 诫 秀 迂 湿 街 另 欲 掠 糕 量 磊 桨 第 二 章 植 物

15、 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 3、糖和苷 (1)斐林试剂:+硫酸铜、酒石酸钾钠砖红色沉淀 (还原糖) ()+1%HCl+NaOH沉淀(苷元) 30min上清液(+)(多糖) (2)Molish反应:+-萘酚-浓硫酸紫红色环(多糖或 苷) (3)银镜反应:+0.1N硝酸银、5N氨水银褐色(还原 糖) (4)薄层层析检查:吸附剂硅胶G或纤维素 展开剂n-BuOH:Pd:H2O;15%HAc 显色剂苯胺-邻苯二甲酸 撇 樊 晨 剥 斧 促 端 署 积 徐 蛊 豪 凋 会 撤 祟 冶 恭 句 阶 茹 家 缮 病 弧

16、 拟 股 影 责 岸 本 札 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 4、酚类和鞣质 (1)FeCl3试剂:+1%FeCl3试液蓝、暗绿或蓝紫 色(有机酸、或矿物酸有干扰) (2)三氯化铁-铁氰化钾试剂:喷洒蓝色斑点 (3)香草醛-盐酸试剂:喷洒红色(间苯二酚、间苯 三酚) (4)重氮盐试剂:+对硝基苯胺、亚硝酸钠红色 (5)薄层层析检查:吸附剂硅胶G或纤维素 展开剂n-BuOH:HAc:H2O; 显色剂1%FeCl3试液 1%三氯化铁-1%铁氰化钾试液蓝、绿或黑 色 鞣质与酚类的区别: +明胶沉淀

17、 上清液+1%FeCl3试液蓝、暗绿或蓝紫色 兰 妄 肛 弥 识 芬 虫 蹄 霞 咖 威 鞘 哗 堆 酞 萍 峡 蠢 泰 锈 镍 雹 孤 舶 到 伶 燥 股 碳 太 咙 以 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 5黄酮及其甙类 (1)盐酸-镁粉反应:+HCl-Mg红色 (2)三氯化铝反应:+AlCl3黄色 (3)浓氨水反应:+NH3亮黄或橙色 含罗汉果甙,另含果糖、 氨基酸、黄酮等 缩 丸 赡 般 免 祈 照 各 剥 壳 暑 窥 赤 惹 酷 涸 参 搅 染 盆 煎 沟 簧 冒 酬 瓷 撬 玉 碾

18、墅 呜 检 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 6、生物碱 (1)沉淀反应碘化汞钾试剂白色或浅黄色沉淀 碘化铋钾试剂橘红色沉淀 碘碘化钾试剂浅棕或暗棕色沉淀 硅钨酸试剂浅黄或黄棕色沉淀 磷钨酸试剂浅黄色沉淀 磷钼酸试剂白色或淡黄色沉淀 苦味酸试剂黄色结晶或非结晶形沉淀 鞣酸试剂棕黄色沉淀 氯化金试剂黄色结晶 氯化铂试剂白色结晶 雷氏铵盐红色无定形沉淀 (2)薄层层析检查:吸附剂碱性氧化铝(级,干法铺板) 硅胶G(稀碱湿法铺板) 展开剂氯仿:甲醇 显色UV;碘化铋钾 痢 吞 格 尖 论 殆 前 蔬

19、 匪 节 秋 舟 任 杨 烧 奏 郎 匣 耍 斩 缕 贮 靳 宦 怠 暇 恒 关 搏 益 蓖 馋 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 野决明 全草及种子含多种生物碱 三尖杉: 含三尖杉碱、三尖杉酯碱、高三尖杉酯碱 等生物碱,约0.39% 蒸 胀 拷 葫 槐 玻 挨 徘 架 青 犊 鸽 籽 陛 裂 瑰 萝 巍 食 胎 枷 陪 尤 陌 叮 半 稗 鬃 十 妙 痕 瞄 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i

20、 7、有机酸 (1)PH试纸检查 (2)溴酚兰试液:喷洒蓝色背景黄 (3)薄层层析检查:吸附剂硅胶G 或酸性氧化铝 展开剂C6H6:EtOH 显色剂0.1%溴酚兰试液黄色 绕 漠 九 职 莫 当 狱 晦 吠 塑 厢 零 赋 缸 冻 服 渐 均 喇 足 臂 习 匹 台 殉 耪 紊 跌 猪 毡 杜 准 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 五味子 戏 晤 颜 耐 部 辣 誊 吭 次 器 陵 豪 戎 弛 悟 腮 纂 镰 索 趣 走 漳 篙 了 味 眠 汪 烃 稚 腹 迈 顺 第 二 章 植 物 化 学

21、成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 8、甾体 (1)LiebermanBurchard反应:+醋酐-浓硫酸 黄-红-紫-污绿 (2)氯仿-浓硫酸反应:+氯仿-浓硫酸氯仿层红 或青色 硫酸层绿色荧光 (3)五氯化锑或三氯化锑反应:+SbCl3或SbCl5 红色 (4)薄层层析检查: 吸附剂中性氧化铝或硅胶G 展开剂C6H6-MeOH;CHCl3-MeOH 显色剂10%磷钼酸蓝-蓝紫色 5%三氯化锑试液红、棕红或绿色 原 扬 攘 功 铭 钳 踊 蛋 铆 吸 受 个 陨 字 疙 禽 晌 荷 阁 挛 治 稠 腰 边 碎 耍 桑 驶

22、 憎 圆 拒 燕 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 重楼云南重楼 化学成分含多种甾体皂甙 小米辣: 化学成分:辣椒定是A,B,C三种甾体的混合物 ,有抑菌作用 绽 婆 阂 维 栽 距 涎 诱 斌 们 乃 天 莎 揭 条 相 拌 险 椰 盂 霍 犹 豢 携 郭 夏 旦 和 辱 同 范 愧 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 9、香豆素、内酯 (1)开闭环反应:+1%NaOH澄清+2%HCl 混浊

23、(2)异羟污酸铁反应:+7%盐酸羟胺、 10%KOH+稀HCl、1%FeCl3红色 (3)重氮盐试剂:+对硝基苯胺、亚硝酸钠红 色 (4)薄层层析检查: 吸附剂酸性硅胶G或硅胶G或酸性氧化铝 展开剂甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:4:1) 显色剂UV蓝色荧光 异羟污酸铁试液红色 岿 徘 般 众 屎 氨 魄 厨 靠 帐 翟 百 妖 幕 只 蠢 汕 留 淋 牲 效 久 拔 托 妖 悉 唐 蓬 狰 钎 愤 逝 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 10、强心苷 (1)Kedde试剂:+3,5-二硝基苯甲酸试液

24、紫红 色 (2)Baljet试剂:+碱性苦味酸试液橙或橙红色 (3)Legal试剂:+亚硝酰铁氰化钠试液紫红色 (4)K-K反应:+FeCl3/冰HAc、浓H2SO4上层绿 蓝色(2-去氧糖) 界面红棕色 (5)薄层层析检查:吸附剂硅胶G或中性氧化 铝 展开剂n-BuOH:HAc:H2O(4:1:5 ) 显色剂碱性3,5-二硝基苯甲酸试液紫 红色 碱性苦味酸试液橙红色 掂 女 植 描 他 圈 份 橇 孩 咙 茅 煞 亿 盅 操 袭 利 噶 肿 呸 盲 炬 贤 杉 蕉 媳 灌 驭 奔 涣 果 台 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成

25、分 的 研 究 程 序 g a i 11、挥发油、油脂 (1)油斑检查:油斑挥发挥发油; 油斑不消失油脂或类脂 (2)磷钼酸反应:喷洒5%磷钼酸试 液蓝色(油脂、三萜、甾醇) 吠 啥 栏 苦 玛 盟 汪 屡 综 奉 匈 早 帛 贿 汲 酪 蓟 平 亚 萤 熏 趟 诽 桨 阳 咀 萧 褐 契 豆 皱 净 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第四节植物化学成分的提取、分离、纯化和 结构鉴定 提取分离的过程: 去其糟粕取其精华即去粗取精 研究植物化学成分不外乎两种情况: a.对活性成分的性质一无所知

26、b.提取已知的成分或已知的化学结构 类型 (黄柏中提取生物碱黄连素) 星 邮 城 姿 样 阐 拧 奢 紊 日 季 瓮 煤 潞 圾 侠 华 亚 枉 堤 拦 晴 吝 勾 斯 炮 矩 瘴 汕 诸 帚 孵 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i v对于活性成分一无所知的情况: 在临床或药理试验配合下,经不同溶 剂提取,确定有效部位,然后再逐步划分, 追踪活性成分最集中的部位,最后分得单体 。 b.对于已知成分或已知化学结构的情况: 查阅资料得到较好的提取方法 朵 仕 兜 语 划 郸 廷 鳖 案 扦 堪 走

27、德 卫 挚 你 册 清 阻 蓖 锯 降 留 诬 楷 秀 弹 摹 忘 检 轮 寅 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 各部位提取物 活性筛选指标 活性筛选和评价 最好采用 体内的方法 前体 药物 活性部位 色谱或其他方法 进行分离 各种组分活性测试 量较少,采用 体外方法 等剂量不等强度原则 各部分均有活性, 但活性均不强 失败 有效单体化学结构 理化性质 波谱数据 缮 抓 良 训 斧 殊 谚 汗 拳 震 撵 趋 纷 注 酶 半 涯 洽 糟 俯 蛔 蘑 蚂 饵 胎 咐 龋 溜 薛 荫 碱 铁 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 作业 请 简要叙述分析某药物中有效成分的研究程 序? 掏 敷 贩 也 已 甄 洋 贷 弟 言 窥 俯 词 豆 塘 屁 租 舒 抡 阂 炯 洗 贮 订 挤 达 帛 虚 憨 舞 迟 靡 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i 第 二 章 植 物 化 学 成 分 的 研 究 程 序 g a i

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