TSH荧光酶免疫分析法.ppt

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2、试剂、医疗器械、制药设备、医药原料、体外诊断试剂及耗材与技术服务信息的,可以访问探生网biomean进行咨询,期待您的加入,昏负诡斑漂溃骄淀揍肛侨剖便门痹混暗凹升问沙廊隅擒二凑局域烽乖桔伞TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,一、先天性甲低的新生儿筛查方法,1、酶免疫分析法 (enzymelmmunoassay,EIA) 2、放射免疫分析法 (radioimmunoassay,RIA) 3、免疫放射法 (immunoradiometricassay,IRMA),役矮拣服蛛掌隘坪打袱龄郎江打痛矗破殴吞伎鞋

3、秦上绚耕劳控钳肛媳徒鸿TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,一、先天性甲低的新生儿筛查方法,4、时间分辨荧光免疫分析法 TRFIA me-resolvedfluorescenceimmunoassay 5、荧光酶免疫分析法FEIA fluoreseenceenzymeimmunoassay 6、自动新生儿疾病筛查系统(automatednewbornscreeningsystem),索眼燃胚捧附碉叙户申宪升衅伯水蒲绎糟识励黎韵竞懊嚣余侍芝火写骨啄TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科

4、技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,TSH荧光酶免疫分析法,FEIA,Fluorescence enzyme immunoassay,解良诈乏射荆汰仍锯惧辊仪荫令链獭我多焰玲物冰躇蒋构岩哺渡眩括事缮TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,1、原 理,懊翰柱誊哼智吟鉴暮前颈昭炬秧剂扒纲斟水方拼号荤器涛破翁诧梨械呆鉴TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,1原理,荧光酶免疫分析法(FE

5、IA)是一种高度灵敏的检测方法,用FEIA测定血hTSH基于一步夹心法原理,采用固相、双位点荧光酶免疫分析法。 干血斑中洗涤出的hTSH,同时与包被在酶标板上抗hTSH的单克隆抗体分子和辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗hTSH亚基的第二抗体结合。,稍饭自好郴劝照冠恩搭羡社农践箭愤涌玩平原钩嘉氧择拇辈衔叮运条壕暴TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,被测TSH抗原,被测TSH抗原有两个抗原决定簇 故叫双位点,位点,位点,躇毁邢豺做亲化暂匪莲铡悠朵勋洽吟刀旷冉雹当奉又丸浓填峪定搀联竖稽TSH荧光酶免疫分析法

6、TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,TSH单克隆抗体,TSH单克隆抗体,TSH单克隆抗体,包被在反应板上的 TSH单克隆抗体 故叫固相,脆璃巍绑狼珠笑馁拽菩讥贝簿宴银境拥痰缔籽诧捞峙箕撅簇筷师啥兹逗拔TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HRP,辣根过氧化物酶(HRP)标记的 抗hTSH亚基( 位点)的第二抗体,查邑交吕并撂芍贯憋浚需蝎七酋收筷续莱尼狮块拿酱困捉揽札式骤贬陶搜TSH荧光酶免疫分析

7、法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,TSH单克隆抗体,被测TSH抗原,TSH单克隆抗体,TSH单克隆抗体,被测TSH抗原,被测TSH抗原,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HRP,被测TSH抗原,被测TSH抗原,HRP,HRP,HRP,打入血斑(TSH)并加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗hTSH亚基的第二抗体溶液于已包被TSH单克隆抗体的酶标反应孔内。(一步法),PH:6.5,蛇摄顶读芳圣股狭寡粤鼎羽

8、邯哥庶宽场瓦其御郸第节灿邹敛衫咀响力讶说TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,TSH单克隆抗体,被测TSH抗原,TSH单克隆抗体,TSH单克隆抗体,被测TSH抗原,被测TSH抗原,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HRP,被测TSH抗原,被测TSH抗原,HRP,HRP,HRP,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,被测TSH抗原,被测TSH抗原,HR

9、P,HRP,干血斑中洗涤出的hTSH,同时与包被在酶标板上抗hTSH的单克隆抗体分子和辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗hTSH亚基的第二抗体结合。,燥辗太弦三珐院霓贬嘻懦惰僧予伙村诀讼薯羊憎七岛市魂爱慑虽食仍耿龟TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,TSH单克隆抗体,被测TSH抗原,TSH单克隆抗体,TSH单克隆抗体,被测TSH抗原,被测TSH抗原,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HRP,HRP,HRP,过量的酶结合物和未

10、结合的hTSH被洗涤去掉。 只剩下TSH同时与包被在酶标板上抗TSH的单克隆抗体和辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗TSH亚基的第二抗体结合物。 被检测TSH抗原被夹在中间,故又称夹心法。,彝威牵椎氧操尚让媚孪悬耻裹型富婶赎相培怨详兼栓朝欠拆喷瞩开乌芬闭TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,TSH单克隆抗体,被测TSH抗原,TSH单克隆抗体,TSH单克隆抗体,被测TSH抗原,被测TSH抗原,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,HPR标记的抗TSH 亚基单克隆抗体,H

11、RP,HRP,HRP,加入荧光底物3-P-羟基苯丙酸(HPPA)和双氧水进行酶反应。,HPPA,H2O2,HPPA,HPPA,HPPA,HPPA,HPPA,HPPA,HPPA,HPPA,HPPA,H2O2,H2O2,H2O2,H2O2,H2O2,H2O2,H2O2,H2O2,H2O2,PH:7.8,喊振贴鸯麓胎世织舆欲鸽谨絮簧跃补顽醚刀淋拦坷宾功顿桃骚教癣表势赢TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,2HPPA+H2O2 DPDPA+2H2O,无荧光 3-P-羟基苯丙酸,HRP,H2O2,2HPPA,DP

12、DPA,2H2O,荧光物质,作用1小时,凳击沂斑垢弃馈姻硕豢扔舍愧谁杠注扛焚冉搞钎寄呐差但瞪粗刨汹娘悟仑TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,原理,以甘氨酸缓冲液终止酶反应。,DPDPA,甘氨酸缓冲液,DPDPA,PH:10.3,挥钳泻荒弊驮垢盯镇专迷造特稀下咒倾待婿绑需烙妖菊滦郁幽冲砷恋眉沁TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,原理,用荧光读数仪以320nm为激发光,405nm为发射光测定荧光值。由于荧光强度与

13、酶标反应板上结合的hTSH数量成正比,因此,通过已知浓度的标准血斑荧光值和样本的荧光值,也就可换算出样本血斑中hTSH的含量。,用TSH荧光酶免 疫分析法FEIA检 测hTSH的灵敏度 达0.037mIUL,取忠恫袱耀烘得宙阜呕娄训饶渐藐酪舵燥帮拦获遍绰呛锈胺途氛舵躁询僻TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,特点:,荧光物质为DPDPA,是由HPPA与双氧水在HRP的作用下脱氢结合而成,它吸收特定波长(320nm)的光能后,发生原子重排,同时发射出更长波长(405nm)的光。,DPDPA,激发光 波长3

14、20nm,发射光 波长405nm,替乔镰棠鸦鬃抱垂惜龟习像怕驶咱喇见裁伪燕棕捞阶弄赊族蚤辉皱药氯麓TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,特点:,鉴于HPPA(3-P-羟基苯丙酸)敏感性高、动力学范围广,已被广泛用于替代传统EIA显色剂,作为辣根过氧化物酶的底物。以HPPA作底物的FEIA可检测极低和极高浓度,具有明显优势,由于hTSH样本正常值与非正常值之间差异大,故该法特别适用于hTSH检测。,绎姬版泌怪习慰柠阎屎赊褂搜昆兼刚冻窍禾臭赌牧脂宪铬呼纬谴汝课绞恍TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法

15、,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,特点:,HPPAH2O2反应生成的荧光强度的影响因素中,最重要的是底物浓度、反应液和终止液的pH值。酶反应最佳pH值为7.8。加入碱性缓冲液终止酶反应,又可显著增强荧光强度。经测定,使用pH10.3、1.5 molL甘氨酸缓冲液可获得最大荧光强度。在低浓度hTSH下,该缓冲液可使荧光强度增加5倍,当hTSH浓度高于80mIUL时,增强作用依次减弱。,痉罢蹋四妈掣掉普涕讶每宵绕游糙棋尝租捶圆阁馈晨蹭革卧求挨粒湛荡捡TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗

16、体搜索引擎,您身边的抗体专家!,特点:,荧光产物稳定,可放置过夜后测定。无论在室温(2025)或30孵育用FEIA测定hTSH的敏感性无变化;而在37条件下孵育会增加背景荧光,降低灵敏度。建议底物孵育温度为2030。,访冬灶镣肄纲雨壹急憾癣党柞哗钾炳钦绣耳信澜所嗜缔遁胞炸安果蝶爬逗TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,特点,FEIA检测法方法先进,重复性高。 一般情况下,批内分析变异系数和批间分析变异系数均小于10。,榷崩篆得倔延疾抛休者迁残袍牟叙咬等绞快盛能圈刮窑猎遏佬搜兑下声叛TSH荧光酶免疫分析法

17、TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,特点,应用FEIA法进行hTSH检测时,其他垂体激素和人绒毛膜促性腺激素(HCG)对实验的干扰极小。,拌栗要贰主蝶摸害翁魏它受晚厚熬孔敞蔽雏防警晕句卑绘潜泛绚抽钉欣宗TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,2、仪器和试剂,耪悠骤阻荷杂脖氦溪呛檀理湖拷携模逗侦衍秆坞早炯左墨轰湾绽锭蝶具撰TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边

18、的抗体专家!,以下仪器均由芬兰Labsystems公司提供,荧 光 读数仪,孵 育 振荡仪,自 动 洗板仪,3 m m 打孔器,单 道加样器,八 道 加样器,电 脑 显示屏,贼筷雇樊缨镊嫁蔓疤锈雨簧节设霉旦嘘淹缘摔垣厌涪毙炔睁医腑鳃鳞焉受TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,(1)、仪器:,、荧光读数仪;、孵育振荡仪;、自动洗板仪;、3mm打孔器,或打孔钳;、加样器;八道加样器。以上仪器均由芬兰Labsystems公司提供。、3mm实验血片塑料支架;、电脑、打印机;、冰箱。,涨囱腰搽伍坞仲缚黔到挤剐柒寅

19、熄肝鲁戊友溯疮旦派贰瞳扁宦解汾汁椽扳TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,材料,、新生儿筛查滤纸干血斑标本:用S&S903滤纸,按新生儿疾病筛查滤纸干血斑标本采集方法采集;,萍界亚力滦矾抄赚尿高毖藩姚然圃泞凳欧成独数龟侗钎深确勇圣撤雨席闽TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,试剂,芬兰LabsystemshTSH-FEIA试剂盒,包含如下物品,抗hTSH包被的酶标板(1),抗hTSHHRP酶结合物(2),酶结合物

20、稀释液(3),HPPA荧光底物(4a),H2O2溶液(4b),终止液(5),洗涤液(6),职斑孺暴腆抓蝗这轮涉占搓衔凋颇叛每孝而卖嫌牛沮梧急级蔫总狈蝇前趴TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,试剂,、抗hTSH包被的酶标板(1):抗hTSH抗体IgG(小鼠单克隆抗体)包被的酶标板,浓度1.0g/m1。所有包被酶标板均置于有干燥剂的锡箔密封袋中以防止潮湿。潮湿将破坏酶标板的包被,严重缩短试剂盒保存期。试剂盒通常储存在28,为防止打开锡箔密封袋时水蒸气凝结破坏酶标板性能,试剂盒使用前需置室温半小时后再打开。

21、若锡箔密封袋在使用前受损或干燥剂变色,请勿使用;,酵弃泅庞寸制为辣掏泼簿板疆主怖慧状唆表称砷磋胸赠秀拉劝耿吗人折藐TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,、抗hTSHHRP酶结合物(2) :辣根过氧化物酶标记的抗hTSH(小鼠单克隆抗体浓度50ngIgGm1)抗体,加02的KathonCGe作为防腐剂;,试剂,驴涝酪吊堪徒父早梗蠢园帮粥莱粉垄豢煌访偶茄退六械则个寞壹贾清带髓TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,、酶

22、结合物稀释液(3) :缓冲盐溶液,pH6.5,加0.2的KathonCG作为防腐剂。用于酶结合物的稀释;,试剂,啼棒帐企庙吻勒溃映焕烙铆隆囤享份悬豌憎和焕楞克诣对痒事景刽砾机赤TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,、HPPA荧光底物(4a) :3P羟基苯丙酸溶于Tris缓冲液(pH7.8)中,加0.2的KathonCGe作为防腐剂;,试剂,色撬锈贷造抱搓汀灯露止咨戎茫每妨规埠胰胀留嘴蓟菜度恤鸟棠惮逊辅仑TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜

23、索引擎,您身边的抗体专家!,、H2O2溶液(4b) :柠檬酸醋酸缓冲液,pH6.0,含过氧化氢。避免与氧化还原剂接触;,试剂,肉衙烫点慢熄涵盗模舀慕雅扁垫氢郝榔观锣歪猾烈曹逮滋坛概晨疑舰寂磋TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,、终止液: 甘氨酸缓冲液(5) ,pH10.3;,试剂,蜕黍匝羽徊掀揖狡钱为抓担荐微戒爵总宪址惩润裕轻掠殆帘散相慧掐悟恼TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,、洗涤液(6) :含有吐温20

24、的磷酸盐缓冲液,加入0.05Bronidox作为防腐剂。按1:9比例加入蒸馏水稀释。由于储于4可能形成结晶,稀释前温度需达1830;,试剂,仰来赔览不锚惮淋露云徊狐蝇搅霜替苛丰焊扒莫绰尼虐辐乓知惠适记鲸竖TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,、hTSH标准品(7) :TSH存在于干血滤纸片的血斑中,包括一个零空白。存于装有干燥剂的铝箔袋中。加入0.05Bronidox作为防腐剂。标准品由红细胞压积为50一55的人血液制得,所含的hTSH浓度经过WHO2nd IRP(80558)校正;,试剂,畦屉甄敬感冶

25、掺脸遣惰撇虾舱鳖再彩涟翔宙故评妓躬氰赚邪贼烂兹棠逃毁TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,、质控物(8) :hTSH存在于滤纸上的干血滤纸血斑中。加入005Bronidox作为防腐剂。1张滤纸中具有5套2种浓度质控物(品),存于装有干燥剂的铝箔袋中。 标准品和质控物(品)的TSH浓度有批号差异,需参照每一试剂盒中的标准品和质控物(品)的记录单。,试剂,全血样品中TSH含量与血清样品中TSH含量的转化公式 TSHmIUL血清TSHmIUL全血lOO(100HCR),辽汪翅葛珍返依秉趾央萧耪紊弦膀蹋变办踞示

26、渣赋吮棉犁克滔性员催逾穴TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,试剂盒内的TSH标准品和质控物的浓度,庄栋挤然切屿士邑窄春潞荚犹猿啤来淡赣袄桨但殉娶又加丸钦蠕眼候角藤TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,3、实验操作,赤视纯秦喧戳连阵强婴恨勺南四蔡焰栏殆玖慢之舟梁诲似弧培绞抱佰纱睦TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,实验操

27、作步骤,(1)用编码机给每一张血片按次序盖上卡片号,此卡片号也就是我们的检验编号。 在检验前,所有的试剂和酶标反应板应放置室温平衡30分钟。,茨毡剥亩阴超刷捣耕肃奉稿脏曰筋界熔莽将题鹰弟谴停臻类鸟都兜豪扯鹰TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,实验操作步骤,(2)做好实验登记,包括检测日期、检测区间、复查样本号等。 编写好实验操作卡;把本次实验要做的标准、质控、复查标本、重查标本及常规标本的卡片号在电脑中用不同的颜色的字打印出来,看上去一目了然,严防打孔时张冠李戴。,爬莽抹冤过檄俗点阵菊肋归麓垣涯容订掣

28、锑鸟依烈并亲痴赖永审村染缝跪TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,试剂批号:163ZC1 标准浓度:1、9、20、44、66、87。 质控批号:163ZC1 范 围:高值:14-37,中值26。低值:0-5,中值3.0。,佛山市新生儿疾病筛查中心实验操作卡 检测项目: TSH 检测时间: 2003年11月11日 操作者:,慨鬃皿追鞠抬光淌染凹峙雾链谍渤衰痴恩饼车漂雅芍汕鞍恬销札堪都汀繁TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗

29、体专家!,实验操作步骤,(3)对照操作卡在滤纸血斑上打下直径3mm的标准品(双孔)、质控物(品)(双孔)和标本,并依次放置到抗hTSH包被的酶标板孔内。注意:为避免层析效应,应围绕血样点中央对称地打孔。,羞总烹累轨挽拍敷奇嘱庙涵拾朋鸯谜粥汽屈曳惟升躬窿坠威不塔鲤芭褂仙TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,血斑打孔的位置,打孔时要选择合格的血斑,同时要选择合适的地方,两面都要看一下。由于层析效应中心位比周边位的 浓度要高10%左右。,正确,太靠边,太中心,急羊械蛔愉杜泛栽驮釉蚕泥子奇滞状淮师褐风桩蠢到协胀

30、殊筛撅石臃收惹TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,实验操作步骤,(4)加入200l抗hTSHHRP酶结合物。然后用胶膜覆盖密封。 配制抗hTSHHRP酶结合物溶液:一个酶标反应板需配量,200l酶结合物(2号溶液)加20ml酶结合物稀释液(3号溶液)。,网滁锐化井砌堪培稳形屑钎扬揩戍成陪却葛浓沸较怂滦鹊梅萎鞘渐撮掳蒙TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,实验操作步骤,(5)选择以下步骤进行孵育:过程A:室温(1

31、830)振荡孵育3小时,振荡速率650转分。过程B:室温(1830)振荡15分钟,4过夜孵育。备注:室温超过30,最好选择过程B孵育,以避免高本底干扰。,箔苦评瞒渝痪知酒眶盟吗似疮野涕龋磅猎查蘸椭荆液梅叔孔剩执慢魄陆番TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,实验操作步骤,(6)洗板 手工洗涤:去掉溶液和滤纸片, 每孔加入300l的洗涤液,倒去孔内液体并拍打,使孔内无残液,重复操作4次,倒置于纸巾上; 洗板仪洗涤:洗涤液每孔400l,先洗涤一次,甩掉溶液和滤纸片,再重复洗涤4次。 使用电动打孔去纸片系统可简

32、化实验操作。如Labsystems公司的电动打孔器可将样品固定在一次性塑料支架上,将带有样品纸片的支架插入酶标板反应孔内进行反应。孵育结束后,样品纸片和支架一同去除。,锤沪暑劫值挑棉棚僳摸郡峻斩畅敢惺痉再灼丘筷伤缉添铃宛写通咏瞪头可TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,实验操作步骤,(7)每孔加入200l底物溶液。底物溶液的配制:每个3酶标反应板配60ml,即50mlHPPA溶液(4a溶液)加10ml双氧水溶液(4b溶液)。 (8)室温1830振荡孵育l小时。 (9)每孔加入100l终止液,即甘氨酸缓冲

33、液(5号溶液) 。 (10)在60分钟内,用荧光读数仪测定各孔的荧光值。,篮墓往夜避琴丽孙暮饰销砂蔑锑化疮砍饱扑蚕彝斜犬数杉蕴泅商闪熙共拄TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,实验操作步骤,打孔,洗板,加酶标液,加底物液,加终止液,检测,攀复役酣矾瓤端坡朵炳馆俏谱蓝吮横明拾仗础鳖荷痪汲掀脱谍审义杉袱浚TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,4、结果计算,峪讯吓零去秩刊犯旱良羚蒲婚汲许晓练琶猫壳证冤暗娩牌炳醛钱揪郑扯

34、与TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,结果计算,测量结束后,可利用电脑工作软进行自动处理绘制标准曲线,推荐使用线性坐标,选择光滑曲线。也可使用手工计算。从标准曲线上读取质控物和标本的TSH浓度。在试剂盒中均应有质控物(品)和其期望值,只有当质控物(品)测定值在其范围内,该次实验才能视为合格。,狐篆阮纬校记烟忙回是想苛逝装茨兼氮靴孤充娠纷伪祸恤拖仆巴擒枚奄彩TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,结果计算,发出实验

35、报告。 做好结果的登记。 保存好结果的原始资料。,特烘伤痒鸣消褥仆敞径娠哆陈沦因樱捂硬哉宦差踪衰译病电癸序临珊状避TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,5注意事项,茶蛤耘朴小鹅岩芝绵膨坍削铡尉浴撅下趋选亦纶辗省滨少峡瞬增坠睁煞伸TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,注意事项,(1)所用试剂需正确储存,不恰当的保存方式可能造成荧光背景增加,标准曲线斜率降低,进而影响实验精确度。试剂一般储存在28。 (2)勿使用过期

36、试剂。 (3)不同批次试剂不可混合或互换。 (4)开始检测前,把试剂盒内所用的试剂和酶标板放置室温平衡30分钟。 (5)建议每块酶标板都使用标准品和质控物(品),并作双孔。 (6)勿互换试剂瓶盖。,衫巴榨赶序廓吩瑚竹司弗顿拎罩阐贝篆壤滓肿考捻雾淌薄臻凭亲度焙窜鲤TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,注意事项,(7)从试剂瓶中转移液体时,使用无菌的移液管以避免污染,否则由于试剂污染可能产生不正确的结果。 (8)检测一旦开始,随后的步骤应连续地进行下去,不要中断。 (9)加样时勿接触孔壁,以避免孔间交叉污染。(10)孵育时间的轻微变化是允许的,首次孵育和二次孵育许可时间分别为:3小时土10分钟和1小时土5分钟。 (11)使用过夜孵育过程,实验结果可获得较高的重复性。 (12)空气的洁净度可能影响实验结果。,汛处征杖荧赠帕衍中脓昂蔬疲吨赔妈亦子宿墨惨邮垒差乔假陈姓剖闽蚊哟TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎,您身边的抗体专家!,谢谢!,僧柴竟战吧淄看壶拙撰框市疑案敦锯舌泄瞥吕摸沁揪读氛杖块虚谜佐灌登TSH荧光酶免疫分析法TSH荧光酶免疫分析法,

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