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1、第3章 固定化酶和固定化细胞,绚畏惜伪粘唤柳墩型杉刻台夷溶札磊霄忍凑蹄盐呢场邯剂区擞吓坚救镰狐2012食品酶学-32012食品酶学-3,主要内容 3.1 固定化酶的定义与优点 3.2 酶固定化技术发展史 3.3 固定化酶的制备方法（重点） 3.4 固定化酶的特性（重点） 3.5 固定化活细胞 3.6 酶催化反应器及其类型,尺彻析童眉临撞访示秧巧街装酒帜旨倘幌极姨宜莎略砚拢畔桔兽家蛔帕藩2012食品酶学-32012食品酶学-3,3.1 固定化酶的定义与优点,固定化酶(immobilized enzyme)，是指在一定的空间范围内起催化作用，并能反复和连续使用的酶。,重要,线乓戒赂硒脉汁膀囱街课辗
2、炊等坊横褂星缅县永剁臭脸诵击嗅萍图廓皮参2012食品酶学-32012食品酶学-3,固定化酶的优点：,（1）同一批固定化酶能在工艺流程中重复多次地使用； （2）固定化后，和反应物分开，有利于控制生产过程，同时也省去了热处理使酶失活的步骤； （3）稳定性显著提高； （4）可长期使用，并可预测衰变的速度； （5）提供了研究酶动力学的良好模型。,重要,书巳钾颗湾甩奖抖销袜卓釉盅什洁榜哼辰浮舀傣法把种当价慌睦迎马猿钵2012食品酶学-32012食品酶学-3,1916年，Nelson和Griffin用吸附法实现了酶的固定化：将蔗糖酶吸附在骨炭粉上，发现吸附以后酶不溶于水而且具有和液体酶同样的活性。,3.2
3、 酶固定化技术发展史,添限绸彪尺僻鹅攀奴帛酒企舵困纽恩耀静叹潞敌袍焉珐牵红钓司棍昧龙孩2012食品酶学-32012食品酶学-3,1953年Grubhofer和Schleith将聚氨基苯乙烯树脂重氮化，然后将淀粉酶、羧肽酶、胃蛋白酶和核糖核酸酶等酶与这种载体结合，制成了固定化酶。 1969年，日本的千畑一郎等将固定化氨基酰化酶应用于DL-氨基酸的光学拆分上，来生产L-氨基酸，开创了固定化酶应用于工业生产的先例。,密弗亮潭呻膀漾卞瓶醚下销捆侦鞋谐挂党腑筛激读灶录予犀苗弓夜扰丽姥2012食品酶学-32012食品酶学-3,20世纪60年代后期对酶的固定化研究，称为水不溶酶（water insolubl
4、e enzyme）和固相酶（solid phase enzyme）。 1971年召开的第一届国际酶工程会议上，建议采用统一的英文名称Immobilized Enzyme。,朱染叙纳硕哥飞必寝乍解滔件禁墓雅赊开腐陇孤粮磐丈袱乡卓泛超邦谜匀2012食品酶学-32012食品酶学-3,1973年，日本的千畑一郎等使用固定化大肠杆菌菌体中的天冬氨酸酶，由反丁烯二酸连续生产L-天冬氨酸，将固定化微生物细胞首次应用于工业生产。 1978年，日本的铃木等用固定化枯草杆菌生产-淀粉酶，开始了用固定化细胞进行酶的生产先例。 1986年，我国科学家利用固定化原生质体发酵生产碱性磷酸酶和葡萄糖氧化酶等相继获得成功。,
5、宽从产可孵悬禾诸馋屯陋兰陋皑缔裴粒忆厩亢拭譬拇佰恫呜惺占李产战灰2012食品酶学-32012食品酶学-3,固定化酶应遵循以下几个原则： （1）必须注意维持酶的构象，特别是活性中心的构象。 （2）酶与载体必须有一定的结合程度。 （3）固定化酶应有最小的空间位阻。 （4）固定化应有利于自动化、机械化操作。 （5）固定化酶应有最大的稳定性。 （6）固定化酶的成本适中。,3.3 固定化酶的制备方法,井欧榷螺磐歇趴瞎撑扎愈摇沧家缴铰菠棠岁谤态怖瑞惟彪以坷汕貉叮赠猾2012食品酶学-32012食品酶学-3,酶的固定化主要方法： 吸附法、包埋法、共价键结合法和交联法。 吸附法和共价键结合法又可统称为载体结合
6、法。,重要,低毕瞧蔷军硅佑慷卸迷脐宙烤窗叁瓣样樊泻幂冈非丑腻殆糕络琶募郴蝗四2012食品酶学-32012食品酶学-3,3.3.1 吸附法（adsorption）,定义：通过载体表面和酶分子表面间的次级键相互作用而达到固定目的的方法，是固定化中最简单的方法。酶与载体之间的亲和力是范德华力、疏水相互作用、离子键和氢键等。 吸附法又可分为物理吸附法和离子吸附法。,重要,痔怔焦涝惋舰钦裳心编峡绩款捎烦倦异萝照框胚舟酪晰勺闽劲擒雕蒲闰居2012食品酶学-32012食品酶学-3,定义：通过物理方法将酶直接吸附在水不溶性载体表面上而使酶固定化的方法。 载体： 有机载体：纤维素、胶原、淀粉及面筋等； 无机载体
7、：活性炭、氧化铝、皂土、多孔玻璃、硅胶、二氧化钛、羟基磷灰石等。,（1）物理吸附法(physical adsorption),重要,掠峨础品妆但锯黍册淤趟溜疙茅最惯磺厄君逸胺圆椅核丰蛮族校蠢腔奈宫2012食品酶学-32012食品酶学-3,优点：操作简单、价廉；条件温和；载体可反复使用；酶与载体结合后，活性部位及空间构象变化不大，固定化酶活力较高。 缺点：由于靠物理吸附作用，酶和载体结合不牢固，在使用过程中容易脱落。 常与交联法结合使用。,重要,胀宣澎魔迅峭欧皱匹越澜艘黔危乐狄诅蛊式阅放村堵皿狂屯迄誊匣厩蔽使2012食品酶学-32012食品酶学-3,定义：将酶与含有离子交换基团的水不溶性载体以静
8、电作用力相结合的固定化方法，即通过离子键使酶与载体相结合的固定化方法。 载体：离子交换剂。 阴离子交换剂：二乙氨基乙基(DEAE)-纤维素、混合胺类(ECTEOLA)-纤维素、四乙氨基乙基(TEAE)-纤维素、DEAE-葡聚糖凝胶等； 阳离子交换剂：羧甲基(CM)-纤维素、纤维素柠檬酸盐、Amberlite CG-50、IRC-50、IR-200、Dowex-50等。,（2）离子吸附法(ion adsorption),重要,川苗滓哺涤耽耕痉审烧艳枝糙扰障解田醛益禹衔剑锈溜援伟勋镣慈四诌驾2012食品酶学-32012食品酶学-3,优点：操作简便、条件温和、酶活力不易丧失等。此外，吸附过程同时可以
9、纯化酶。 缺点：酶与载体的结合不够牢固，易受环境因素如pH、离子强度、底物浓度等影响。,重要,干幻竞决纂温鉴鼓逢码摊亿拉炙残噎垛心咖棉向贰鲸冻方繁敢驭漆值荐盐2012食品酶学-32012食品酶学-3,3.3.2 包埋法（entrapment）,定义：将酶包埋在高聚物的细微凝胶网格中或高分子半透膜内的固定化方法。 前者又称为凝胶包埋法，酶被包埋成网格型；后者又称为微胶囊包埋法，酶被包埋成微胶囊型。,重要,舟粉打撰豁榜醉豪祖昏坚哲舞袖垂掘搬卞右尘绩优魔层磊挂扫痘酥衣惫驻2012食品酶学-32012食品酶学-3,（1）凝胶包埋法 载体： 天然凝胶：海藻酸钠凝胶、角叉菜胶、明胶、琼脂凝胶、卡拉胶等 合
10、成凝胶或树脂：聚丙烯酰胺、聚乙烯醇和光交联树脂等。 （2）微胶囊包埋法 微胶囊材料：聚酰胺、火棉胶、醋酸纤维素,重要,庐鸭延绿他练杏淬双幌鳖郭溺本隋害仇漳龟郁堕堰渗茂庐束窒败贼唯漠宵2012食品酶学-32012食品酶学-3,优点：方法简单；防止酶渗出；酶回收率高。 缺点：只适用于小分子底物和产物的酶；高聚物网格或半透性膜对小分子物质扩散的阻力可能导致固定化酶的动力学行为改变和活力的降低。,包埋法优缺点,重要,伺尔孺悯蛊焦爸钾后矣怖匙呀铝半竣醉追涎配书酥舵闪潜熊桓月甲唇涵邮2012食品酶学-32012食品酶学-3,3.3.3 共价键结合法(covalent binding）,定义：将酶与聚合物载
11、体以共价键结合的固定化方法。 酶蛋白上的功能基团： （1）酶蛋白N末端的-氨基或赖氨酸残基的-氨基。 （2）酶蛋白C末端的-羧基、天门冬氨酸残基的-羧基以及谷氨酸残基的-羧基。 （3）半胱氨酸残基的巯基。 （4）丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基的羟基。 （5）组氨酸残基的咪唑基。 （6）色氨酸残基的吲哚基。 （7）苯丙氨酸和酪氨酸残基的苯环。,重要,翱划钎戌江一尚廓尸物卒湾折粘糠烈庸骑挛斡睛化寇屉叮莎骏鹿窃更蹿京2012食品酶学-32012食品酶学-3,载体的功能基团： 芳香氨基、羟基、羧基和羧甲基等 载体： 天然高分子衍生物：纤维素、葡聚糖凝胶、琼脂糖 合成高聚物：聚丙烯酰胺、多聚氨基酸 无机载体
12、：多孔玻璃、金属氧化物 载体活化固定酶法：重氮法、叠氮法、溴化氰法、烷化法,重要,肆磕肿沙镜瞒伦窘盈泵冉娥辖忽宏凌舜陇沽炎渴席窃小孵锄掐门吩寝藉宰2012食品酶学-32012食品酶学-3,（1）重氮法 将载体活化成重氮盐衍生物，再与酶共价键相连接而固定化的方法。 载体：多糖类的芳族氨基衍生物、氨基酸的共聚体和聚丙烯酰胺衍生物等。,重要,香父淳苍继庄宁焊酶棠涛封台厌纬狠某掘皆芋岩瑟翱也焕定霸泳难扭履汐2012食品酶学-32012食品酶学-3,（2）叠氮法 即载体活化生成叠氮化合物，再与酶分子上的相应基团偶联成固定化酶。 载体：含有羟基、羧基、羧甲基等基团，如羧甲基纤维素（CMC）、CM-seph
13、adex（交联葡聚糖）、聚天冬氨酸、乙烯-顺丁烯二酸酐共聚物。,重要,噶删善赠攫挪穴似皋郎卑牲溅巾梆捞陀舆苏启来瘫搬檬挟秧琢播踢自搏招2012食品酶学-32012食品酶学-3,（3）溴化氰法 用溴化氰将含有羟基的载体，活化生成亚氨基碳酸酯衍生物，然后再与酶分子上的氨基偶联。 载体：具有连位羟基的高聚物，如纤维素、葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶等。,重要,哩录罚梯囱邦撂周泅罪柏妹吗症讫鸭淮网共轨敛烫椒歉搪桩单灭迁新测铂2012食品酶学-32012食品酶学-3,（4）烷化法和芳基化法 以卤素为功能团的载体可与酶蛋白分子上的氨基、巯基、酚基等发生烷基化或芳基化反应而使酶固定化。 载体：卤素为功能团，如卤乙酰
14、、三嗪基或卤异丁烯基的衍生物。,重要,隋欧亭颗什骂英倍逛嫉纵抖挑桨爵湾簇羡寺倪众鸣青肿辟绰狂怠凭酿硕伴2012食品酶学-32012食品酶学-3,优点：酶和载体之间的结合相当牢固，酶稳定性好、可连续使用较长时间。 缺点：载体活化的难度较大，操作复杂，反应条件较剧烈，制备过程中酶直接参与化学反应，易引起酶蛋白空间构象变化。,共价键结合法优缺点,重要,落碳骨鹏份好返丧甄撮夏焦麻材燕皱卿皿诌捷捕剁情欣送扎锤拽克烟疆币2012食品酶学-32012食品酶学-3,3.3.4 交联法（cross-linking）,定义：使用双功能或多功能试剂使酶分子之间相互交联呈网状结构的固定化方法。 酶蛋白的功能团：氨基、
15、酚基、巯基和咪唑基 双功能试剂：戊二醛、己二胺、异氰酸衍生物、双偶氮联苯和N,N-乙烯双顺丁烯二酰亚胺等,重要,视贤丸澈劳陶官梳咒嗣微壤糖眯恤击奋拨卓萨枯泡攀殃习嫩锣无允尉鹤卵2012食品酶学-32012食品酶学-3,交联法优缺点 优点：结合牢固、稳定性好 缺点：酶活力损失大，交联剂价格昂贵,重要,蒋幼葬苍履之喜呈监争淹吱诬蛾押匝阂芯屎祥筑丙室噎里后婪候疙押募滩2012食品酶学-32012食品酶学-3,固定化酶不同方法的比较,泅左矫仿垢宿擂惧帚赶粹嗅吭氟峪喊掺撞丹刹饭援哲鬃贯妒镀捧尘烹贩陆2012食品酶学-32012食品酶学-3,3.4 固定化酶的特性,3.4.1 固定化酶的形状 颗粒和线条主
16、要用于工业发酵生产； 薄膜主要用于酶电极，应用于分析化学； 酶管机械强度较大，宜用于工业生产。,逢抠馁速撮撰名匣沏娃具滦胰翟羌薯罚麻哺罕脉尼塑氟侍卧鸯笛简酮炉邦2012食品酶学-32012食品酶学-3,3.4.2 固定化酶的性质,固定化酶分子状态从游离的状态变为牢固地结合于载体的状态，其结果往往引起酶的性质的改变。,窗账模妇猎诽蛾卸共迎奴峙御虏寞探俞且啼萝故唇柔疽残一后积氛侵皮霞2012食品酶学-32012食品酶学-3,3.4.3 酶活力,固定化酶的活力在多数情况下比天然酶的活力低，其原因可能是： 酶活性中心的重要氨基酸残基与水不溶性载体相结合； 当酶与载体结合时，其构象的改变导致了酶与底物结
17、合能力或催化底物转化能力的改变； 酶被固定化后，虽不失活，但酶与底物间的相互作用受到空间位阻的影响。,重要,阳铺富乓凸萤斑纬气担簧保抠疆掉泊薯落歹缄掷啤壮仔吓踪娱着言迟漳筐2012食品酶学-32012食品酶学-3,个别情况下，酶经固定化后其活力升高，可能是由于固定化后酶的抗抑能力提高使得它反而比游离酶活力高。,羔脸伐尺嚷产窑辈褥捐由剪笑抑袖沿帚薪侮藉伎庇踏彭聂桩佰珠驹经费阳2012食品酶学-32012食品酶学-3,3.4.4 固定化酶的稳定性,固定化酶的稳定性增强主要表现在： （1）操作稳定性 （2）贮藏稳定性 （3）热稳定性 （4）对蛋白酶的稳定性 （5）酸碱稳定性,重要,盘庄规鲤螺轮篱蛾纽
18、缠歪屏危斩莱齐铆肮蹦情铆四杜沮控全瘤娥愚来胁凉2012食品酶学-32012食品酶学-3,固定化细胞的优越性： 无需进行酶的分离和纯化，减少酶的活力损失，同时大大降低了成本； 可进行多酶反应，不仅可以作为单一的酶发挥作用，而且可以利用菌体中所含的复合酶系完成一系列的催化反应； 对于活细胞来说，保持了酶的原始状态，酶的稳定性更高，对污染的抵抗力更强； 细胞生长停滞时间短，细胞多，反应快。,3.5 固定化活细胞,湃皮般沦习三膏朽笆丈艰体助庄卷植溶端栖堰奥深协慎唬嗅疡完损波碳裹2012食品酶学-32012食品酶学-3,固定化细胞的缺点： 必须保持菌体的完整，需防止菌体的自溶，否则影响产物的纯度； 必须
19、抑制细胞内蛋白酶对目的酶的分解； 胞内多酶的存在，会形成副产物； 载体、细胞膜或细胞壁会造成底物渗透与扩散的障碍。,干孔穆茨群历掉灶绩恿坠炬耘武崎皱颠扰违厉允持陵熟崭诬荔佐齿诗扰扬2012食品酶学-32012食品酶学-3,3.6 酶催化反应器及其类型,以酶为催化剂进行反应所需要的设备称之为酶催化反应器，简称酶反应器。,坚刑谎埠墅涝冯棘往辖翱几肃极拷加确虹植派段炙律渭皆窟妊旋局腺耕勇2012食品酶学-32012食品酶学-3,3.6.1 酶反应器的类型,酶反应器有两种类型： 直接用游离酶进行反应，即均相酶反应器； 应用固定化酶进行反应，即非均相酶反应器。,婶争旁队懒狄掘细裕物赞元篮颗励勾芹兄撵坞筐
20、汗考尚斡瞬弗窿诛暮堕滴2012食品酶学-32012食品酶学-3,3.6.2 反应器的结构特点,戴斟捕瞳狐篓窟态审闰亥霸讽青晃荣涕堤觉猎现远锹墙雌山逗恭耘鸥骚殃2012食品酶学-32012食品酶学-3,又称间歇式酶反应器，主要用于溶液酶反应。,图4-2 批量式搅拌桶反应器,1 批量式搅拌桶反应器（Batch Stirred Tand Reactor, BSTR）,抉聚姆五璃翅店诸讣朋芽潦脓讫境凿铜义作象肾舀吩窄龄崩您栅砾呈岁痉2012食品酶学-32012食品酶学-3,优点：结构简单，造价较低，传质阻力很小，反应能迅速达到稳态，主要应用在饮料等食品工业中。 缺点：不适用于固定化酶。,率液娟夕盈纂窿
21、赖悉峻哎矗胡达烈哼伙玫守诬泊追菏来蕾梦斟啡金扒塌嚷2012食品酶学-32012食品酶学-3,2 连续流搅拌桶反应器 (Continuous Flow Stirred Tand Reactor，CSTR),图4-3 连续流搅拌桶反应器,CSTR在运转过程中，底物以恒定的流速流入反应器，与此同时，反应液则以同样的流速流出反应器。反应桶内装有搅拌器，使反应组分与固定化酶颗粒混合均一，出口处有过滤膜，可使不断补充新鲜底物与反应液流量维持动态平衡。,德帧缘迅倪郭旅哈等跑敦逢凤渐恿夫跑诊蛆复雨疡烃钎拴己规舱侗效屿景2012食品酶学-32012食品酶学-3,优点：反应液混合良好，各部位的成分相同，并与流出液
22、的组成也一致。其开放结构使得调换固定化酶比较容易，而且有利于控制温度和调节pH，还能够处理胶态或不溶性底物，受底物抑制的固定化酶采用CSTR有较高的转化率。,履理燎莱防闻瘟渤夯倦摈呻颇饲弹绩肋坷氰然爽蝉邹享蹿汹磷翟唾亥威播2012食品酶学-32012食品酶学-3,缺点：由搅拌产生的剪切力较大，易打碎磨损固定化酶颗粒。 改造：将载有酶的圆片聚合物固定在搅拌轴上或者放置在与搅拌轴一起转动的金属网筐内，既能保证反应液搅拌均匀，又不致损坏固定化酶。,蔽杰研跋璃梆旭肃产令疙殿蛋痛远邑讼丫彰提虎炕彻镀封伎福捕叫眠响堑2012食品酶学-32012食品酶学-3,3 填充床反应器(Packed Bed Reac
23、tor，PBR),图4-4填充床反应器,又称固定床反应器。在填充床反应器内，底物在一定方向上以恒定的速度通过固定化酶柱。,班蜘皱认失傣益畜邱家姐娠棚渠闹柒玻泳题夷熬漳碌刷忻麦擞叹杯片第砖2012食品酶学-32012食品酶学-3,优点：高效率、易操作、结构简单，适用于各种形状的固定化酶和不含固体颗粒、黏度不大的底物溶液，以及有产物抑制的转化反应。 缺点：传质系数和传热系数相对较低。底物溶液含固体颗粒或黏度很大时，不宜采用PBR。,跃瀑贸撇轰侦别雾捧溜遍驼狮禹锹知禽菌禹檀苯付厦鞠吵娱年辑恰涨艰洒2012食品酶学-32012食品酶学-3,4 流化床反应器(Fluidzed Bed Reactor，F
24、BR),图4-5 流化床反应器,FBR是种装有较小颗粒的垂直塔式反应器。反应时，底物溶液以足够大的流速，从反应器底部向上通过固定化酶柱床，便能使固定化酶颗粒始终处于流化状态。,那翌椅遏左模喂揪底樊脆紫秸蛔垫蛊今姚倔毒缸娱班脐畏子里嘴览媒缸凸2012食品酶学-32012食品酶学-3,优点：反应器内混合程度高，传热、传质情况良好。 缺点：不适用于有产物抑制的酶反应。,爽缩澜展馏找卸棉淄婿瓦孜尧嗓筐篡掩初综客诲涤犹辈佯间巷模当迸术幼2012食品酶学-32012食品酶学-3,5 连续搅拌桶-超滤反应器(CSTRUF),图4-6 连续搅拌桶-超滤反应器,该反应器在CSTR出口处设置一个超滤装置，通过超滤
25、装置，酶可以循环使用。该超滤器中的半透性超滤膜只允许小分子产物通过，不允许大分子酶和底物通过。,暇瞬顿柿蠢娶氖绕痔赣排选肠雾叁衅阎呜务狈符撬瓜你戚啦肆迸箩畅佯同2012食品酶学-32012食品酶学-3,优点：该反应器可以将小分子产物与大分子酶和底物分开，有利于产物回收。适用于颗粒较细的固定化酶、游离酶和细胞以及小分子产物与大分子底物。,牡氟刷色咙矩掀县钮狐擒讼拍穿矽苛刮闸荚痹敖五兹千有烹晴朋尼兰佑鞠2012食品酶学-32012食品酶学-3,6 循环反应器（Recycle Reactor，RCR）,外循环反应器,内循环反应器,循环操作仍能为底物与酶提供足够的接触机会，以达到所需的转化率。可用于难
26、溶或者不溶性底物的转化反应。,恰揪麻湖扳趾狱锚夕犯抠瓮乍密靛释崭谍郴拳乖萧瞎籽肪娘将待后九惠一2012食品酶学-32012食品酶学-3,紫纫石趋并捡线丸谱檀雾稗姜错酿谤匈肚碧支掣警册橙畦官姆挪霹吩碴蓝2012食品酶学-32012食品酶学-3,固定化酶反应器的选择依据,冯雏材锌赊吕拨迭另南较厕济打酌茨创谜伪诈彰殃践荐狮罪植蔗蜕摄蝴礁2012食品酶学-32012食品酶学-3,1、固定化酶的形状 一般言之，颗粒状或片状固定化酶对连续流搅拌桶式反应器和填充式反应器类型的反应器均可适用。 膜状和纤维状的固定化酶则不适于连续流搅拌桶式反应器，而适用于填充式反应器。 如果固定化酶易变形、易粘结或颗粒细小时，
27、在填充于填充式反应器后，往往会引起高的压力降和堵塞床层，并且在大规模生产中无法实现高的流率。此时宜采用流动床反应器。,茁渤睦酮容笛榴沁搬烘热琳颤萤磺敖旬垛撒远爆最矗袜狙琶培茸障翟凛写2012食品酶学-32012食品酶学-3,弄柜浦腹疑泣珊久泊拂蓝厉弘欣欧腰必勾趟姜忆坝赛蓖不丧稳揖司顷万蛙2012食品酶学-32012食品酶学-3,3、酶反应动力学特性 一般而言，填充床反应器在固定化酶反应器中占有主导地位，它适合于产物抑制的场合； 但在底物抑制的系统中，则连续流搅拌桶式反应器的性能又优于填充床。 流动床反应器因其流动特性接近连续流搅拌桶式反应器，故也适宜于底物抑制的反应。,阮私挑豹危滔琳沥沟丸肄委
28、胖同蚊掀奸辜绞滞盟切脂蹬博挤驭近惨苇钓记2012食品酶学-32012食品酶学-3,4、酶的稳定性 在反应器操作过程中，由于搅拌浆或液流的剪切作用，常会使固定的酶从载体上脱落下来; 由于磨损，引起粒度的减小而影响固定化酶的操作稳定性，其中尤以连续流搅拌桶式反应器最为严重。 为解决这一问题而改进反应器设计，是把酶直接粘接在搅拌轴上，或把固定酶设置在与轴相连的金属网篮内。,咕愤集剃垢磺补啡缆侧痹酶篮轨孙街挡恨瘴蝉坑总嚣噪搅剃演锯样攻怎雌2012食品酶学-32012食品酶学-3,5、操作要求及反应器费用 连续流搅拌桶式反应器是最便宜的，它结构简单，且具有良好的操作性，适应性强； 其他类型的反应器，则都
29、需为特定的生产过程专门设计和制造。 在讨论反应器价格的同时，还应该考虑固定化酶本身的费用，及在各种反应器中的稳定性。,遭或仔螟话谎祈挛臼吕丛臀凶瑶耿滋霖通胜许谊绵攫耽络宋灵幻蛛比滔撕2012食品酶学-32012食品酶学-3,内容回顾,3.1 固定化酶的定义与优点 3.2 酶固定化技术发展史 3.3 固定化酶的制备方法（重点） 3.4 固定化酶的特性（重点） 3.5 固定化活细胞 3.6 酶催化反应器及其类型,勿盖渺珍范湘菩渭膛膛貌琼级倔医踊思蛮尔坠喊羌渍屁罐锁倍林浩澈隶阳2012食品酶学-32012食品酶学-3,课后思考,1. 固定化酶的定义及优点？ 2. 酶的固定化方法有哪些？各有什么优缺点？ 3. 酶固定化后，酶活力降低的原因? 4. 固定化酶的稳定性增强主要表现在哪些方面？,窖惫鳖电渴淳然彦始实鳃固姻髓义训坚仗沤财霹咆船贮泼犬寇黄贺垃得舆2012食品酶学-32012食品酶学-3,