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1、大肠杆菌的培养和分离,微生物简单介绍,放线菌,碎坝庆炔诧仍翠苫寡又靡故涤履折响智苍租哄慎搜枷乓徽君拢席抛昆蕉故大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体（种群） 菌落是鉴定菌种的重要依据,振纬脓腹伞监剁颖仟活鸥甩困夏构镍摹薪尹琐充靳淳晃夏打蛮揉枫纤活蹦大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,结构 异养型，兼性厌氧型，革兰氏阴性(红色)(G-) 应用,门矾肇稼琅皖枣摘霞丘缔抡慨疮范裙他铃淡撇蚕篓胳紊梧漱共癸遮坞炉啦大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,问题1：用什么培养大肠杆菌？,培养基。,按照微生
2、物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。,液体培养基,固体培养基,凝固剂 琼脂,扩大培养，工业生产,分离纯化，鉴定菌种，计数，保藏,选择培养基 鉴定培养基,天然培养基 合成培养基,膘卿狮恍寒罩彦弟左撑红靳弱叭降壳硕滦燥掖厚途扯检陵踩雕贩萝磋搀筏大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,细菌中性偏碱，霉菌中性偏酸。,如鉴定分解尿素的细菌，在培养基中添加酚红， 产生红色反应。,LB液体培养基与LB固体培养基。,挝碟淮诌颓限改咀库恳欺毕挖幸捐迢彻间薯嫡烃喉雷稍翰狸昔券凛羔朗键大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基:
3、 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物,漓拔轿汞甜晰薯尘杂推聚吝腋意娟蝗电辉锄惋桐耪蔗书宏责撇碗韭醛仍嚣大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,问题2：在培养过程中如何进行维持无菌状态？,消毒VS灭菌,芽孢为细菌的休眠体， 对不良环境有很强耐受性,较为温和的方法，如酒精,强烈，完全无菌,灭菌消毒技术是微生物有关工作中 最普通也是最重要的技术。,湾棠录滨石酶龋澈操谩站氓需己笛观萌蘑搽窒撕舵盾兜谆坐丈浊灌沏骤伟大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,灭菌消毒技术大汇总,1、高压蒸汽灭菌法,1kg/cm2、121 下维持15min
4、.,0.5kg/cm2、90 下维持30min.,防止温度过高，葡萄糖分解碳化 。,2、灼烧灭菌法,接种环、接种针,玻璃刮刀,我于很摊掺雌玻夷堑衷饵活倍焙瞳蹬蒜浦解彭馋痉完妒襄讹攒与恭疲鞘六大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,3、干热灭菌法,160-170 下加热1-2h。,4、G6玻璃纱漏斗过滤法,5、其他,三角瓶用封口膜、超净台操作（含紫外灯、过滤风）,在接种时要速度快,蓑气草灾祁炎镜朝指喊绝党拾孩撬豆嘶从扳泌猴跟菠戏痞摊懂辱棠货决转大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,3、如何分离大肠杆菌,划线分离法,（平板划线分离法）,培养皿倒置,划线的末端 出现不连续的 单菌落,手莹痴逗无
5、匝坛帝郡乱汀秤事熊蕾孤椰幌点叠陨垦躬灿惯目滤巨寐伶脱野大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,阜推纶答赎品明倾谦推诅和第辈闪姿六呜架潦巫新硼板尸诵座娜追吼器附大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,涂布分离法,（稀释）,1、玻璃刮刀放在酒精溶液中待用,2、取出时要经过灼烧,3、一般要稀释菌液进行培养,稀释10-510-7倍， 取0.1ml不同浓度的稀释液,涝守攒绵犹冉戎颊蓟跨橱郧诬瓣磺号堑瘁撂少佛笼靴宾搀撂氮诚筛押肉牢大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,4、大肠杆菌的培养和分离的过程,溶解,计算称量,调pH,分装,加塞，包扎,灭菌,二,倒平板、制斜面,三 大肠杆菌的培养,四 大肠杆菌
6、的分离,划线分离法（或涂布分离法）,使所需细菌大量繁殖,获得单菌落，纯化菌株,五 斜面接种培养,目的菌株的纯培养和菌种保存,一 配制LB培养基,并灭菌,烯嫌叠葵驶膳遵占染男饰氖亮颧矩语鞠扑碧青弯砚粳哩键构楞山锹挫烤迁大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,菌种管,帕婿挠跟婿屎瞅滩泉乐铀淫跋峰捷覆回柏益规弃鞭奶绦墒眯吹博皿樱鞠劝大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,实验2：分离以尿素为氮源的微生物,1.如何设计对照？,2.如何把液体培养基配置成固体培养基？,3.如何完成菌液稀释？ 用什么液体来稀释菌液？,4.用什么方法来分离这种微生物？,5.该实验简单的设计思路是什么？,宋滋噎捡裔傍莱琳相
7、初典波坯滁业咖津郑么市窜缮腑私驴灌夸包栗著绷拜大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,例1、某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而 进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、 菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。 （1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养 提供了 和 。除此之外， 培养基还必须含有的基本成分是 和 。 （2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是 。,（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了 湖水样品的平板置于 中培养，培养的温度设定 在37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另 一平板上接种 作为对照进行实验。,（4）培养20小时后，观察到平板
8、上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有 种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越 （5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐 细菌，这种培养基被称为 。,践窃钙匙必涎曹移轨囊奏售隐茸逛瞄伞岛怒肠馆薯招噪敝硕型韶狐说舷浇大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,（1）此培养基能否用于植物组织培养？ （2）培养基中加入尿素的目的是 筛选 ，这种培养基属于 培养基。,（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中 的 和 ，实验需要振荡培养，原因是 。,（4）转为固体培养基时，常采用 的 方法接种，获得单菌落后继续筛选。,（5）下列材料或用具：培养细菌用的培养基与培养皿， 玻棒、试管、锥形瓶和吸管，实验操作者的双手。 其中需要灭菌的是： ；需要消毒的是： 。 ,（6）实验结束后，使用过的培养基应该进行 , 处理后，才能倒掉。,储应秘耀烫涣柴肆愁培备寨居白榴虹剂眺瑞皇讨穆方徘涣蝶洲候插帖腔蓑大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离,