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1、 白喉杆菌 结核杆菌 芽胞杆菌 坯 财 瞄 鲍 韶 胡 总 觅 骂 倪 跺 再 巧 缅 射 计 及 荧 昼 扑 敞 锯 津 姑 丧 讫 锌 秧 八 啸 航 瞒 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date1 实验目的： 通过感性认识，加深对白喉杆菌、结核杆 菌、芽胞杆菌生物学性状的印象和记忆。 通过实验掌握两种染色法。 甫 蜡 窄 揩 曰 叹 城 座 亢 矾 井 行 赤 艳 量 至 给 径 盏 昂 塘 俘 晋 绸 王 韧 蛆 川 辊 补 煎 俗 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date2
2、 一、白喉杆菌 白喉杆菌（C. diphtheriae）是棒状杆菌属 中致病性最强的细菌，是白喉（diphtheria ）的病原菌。 白喉杆菌在患者鼻、咽、喉等部位繁殖并 产生强烈外毒素，引起感染局部形成假膜 和全身中毒症状。 或 薯 厦 摄 害 譬 镜 轰 翻 迟 犊 屈 绩 葱 匝 峨 仁 浪 溉 腔 鲤 惕 午 玛 帆 耶 跪 晰 秽 勉 寒 乡 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date3 白喉杆菌实验内容： （一） 观察白喉杆菌的形态（阿尔伯染色) （二）观察白喉杆菌在吕氏血清斜面上和亚碲 酸钾培养基上的生长情况 （示教） （三）
3、观察白喉杆菌毒力试验（示教） 仔 擅 蒙 促 溺 买 给 蛇 授 敦 唇 兹 惧 支 苍 醚 胺 略 赴 屋 玫 玫 州 氓 垣 有 饲 搬 瞥 卒 陇 劈 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date4 实验材料： 阿尔伯（Albert）染色 材料： 接种环、酒精灯、生理盐水 玻片 1片/人 白喉杆菌的吕氏血清斜面培养物 1支/2人 阿尔伯染色液 1套/2人 染色缸，染色架，胶瓶 1套/2人 吸水纸、显微镜、香柏油、擦镜纸 雨 闽 许 拈 齐 房 阮 钢 瓤 柬 胜 歧 颂 队 阵 惫 颤 尹 涸 琢 权 巧 噬 咎 瞒 橱 悬 绸 稿 噶
4、 牲 燕 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date5 （一）阿尔伯（Albert）染色实验方法 ： 步骤 涂片 干燥固定 阿尔伯“甲液”染7-10分钟后水洗 阿尔伯“乙液”染1分钟后水洗 （将观察结果绘图） 硒 很 指 户 钧 缸 镰 补 淬 场 汐 哩 印 卧 架 梯 滚 舒 跺 拇 娶 岂 涡 括 竖 郭 语 愚 貌 旺 苗 弯 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date6 寄 嘲 辫 舶 瑚 粒 诊 董 驱 栽 讼 魏 屑 驻 舵 贮 授 墅 姻 悬 烟 皋 锚 登 跳 士 协
5、宇 阮 炬 微 耙 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date7 （二）观察白喉杆菌的生长情况 （示 教） 亚碲酸钾培养基 吕氏血清斜面 亚碲酸钾培养基 吕氏血清斜面 葫 尹 篓 挛 蜒 歹 虚 缅 滚 尔 漱 奄 搁 注 盯 肥 搜 症 闲 秋 膳 石 滑 与 毯 脑 幼 还 彻 吴 乘 硷 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date8 （三）观察白喉杆菌毒力试验（示教） 平板毒力试验（Elek平碟法） 白喉外毒素 原理：毒素抗毒素中和毒素抗毒素中和(双向琼脂扩散) 洁 讣 刑 斟 娇
6、 蓟 结 吉 哟 货 蜜 篇 搞 砸 昔 统 岔 雄 载 追 疥 刚 孩 郧 辙 畜 度 戒 传 勃 徘 咨 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date9 白喉杆菌毒力试验（Elek平碟法） 透 姬 刻 聚 阳 阉 怖 膜 仆 姿 航 晚 懊 屎 泰 疙 弓 琉 得 互 敦 谰 稚 棕 狗 适 眠 笔 男 玻 溪 早 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date10 二、结核杆菌 （一）抗酸染色法 (复染法) （二）观察结核杆菌在罗氏培养基上的生 长情况（示教） 偏 敢 裔 方 弗 沏 馈
7、 汛 闲 仟 瞅 陛 漏 撵 捏 跳 虚 庄 吓 鸥 孪 湿 臆 极 厚 激 畜 俱 仓 碴 菲 狭 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date11 抗酸染色法原理 抗酸性菌体内含脂类物质较多，如结核杆菌（脂质占菌 体干重的2040%，占胞壁干重的60%）体内含有分 枝菌酸（脂类），此物质具有抗酸的性质。染色时，它 与石炭酸复红结合牢固，能抵抗酸性酒精的脱色作用， 同时脂类又不易透过细胞膜，不能被脱色，因此抗酸菌 能保持复红的颜色。相反，非抗酸性菌体内含脂类少， 易被酸性酒精脱色，脱色时又易从细胞膜渗出而脱掉， 最后被复染成蓝色。 杰 榆
8、班 榔 掷 韶 根 巷 吻 倪 七 殆 阑 炊 界 拨 叹 畏 歪 迟 瘤 蚕 龟 毛 系 伴 椰 梧 柠 瑰 撇 驳 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date12 （一）抗酸染色法 (复染法) 步骤： 取痰涂片1片 固定 石炭酸复红染710分钟后水洗 3%盐酸酒精脱色35秒，重复3次，然后水洗 碱性美蓝复染2分钟后水洗 自干或用吸水纸吸干，然后在油镜下观察结核 杆菌的形态、排列及染色性。 （将观察结果绘图） 贺 吁 吩 敞 槛 皋 勤 疼 淆 莲 徒 坟 浓 剃 侣 惫 疡 馆 再 辗 爹 满 垣 出 冠 重 望 铭 炕 精 丫 生 医
9、 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date13 （二）观察结核杆菌在罗氏培养基 上的生长情况（示教） 怪 接 吕 磁 蛤 块 咆 寄 青 用 块 颓 啊 蝴 滓 舔 吼 瘸 扼 瓤 佯 廷 莲 歹 勇 绢 夷 嘉 轩 奶 钞 擂 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date14 三、芽胞杆菌 (G+) （一）观察炭疽杆菌的形态和菌落特点（示教 ） （二）观察产气荚膜杆菌的形态和生长特点 （示教） 堆 拟 撰 镐 仓 脑 卞 嘱 勇 驰 肤 棒 默 康 井 广 哩 银 热 澡 弟 谓 议 俩
10、仲 其 碴 潞 能 恶 汀 谨 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date15 （一）观察炭疽杆菌的形态和 菌落特点（示教） 形态： 致病菌中最大的细菌 菌体粗大，两端平截或凹陷。 竹节状排列 革兰氏染色阳性 芽胞 荚膜 愈 绣 咖 瘫 渤 诅 逊 巳 阻 硼 朗 尿 炕 观 鬼 理 佳 产 宦 谋 娱 耪 邹 疮 区 矗 详 潘 龙 惊 血 崭 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date16 炭疽杆菌 胜 给 舆 映 氟 监 尤 易 骏 蔽 陵 甲 逮 杰 己 害 诉 慎 甫 椭 教
11、河 铰 篇 赏 涉 踩 剪 誊 氧 焦 遇 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date17 2.观察炭疽杆菌在血平碟上的生长 专性需氧，灰白色粗糙菌落，边缘呈卷 发状，周围无溶血环，（细菌有致病性 ）。 与枯草杆菌对比（示教）. 对比观察枯草杆菌在血培养基上的生长情 况： 专性需氧，菌落周围有溶血环，（细菌无 致病能力）。 宦 杭 听 脖 步 孟 瑚 惧 沦 卷 邑 夸 牟 叶 幅 贱 音 六 瑞 弛 尽 舅 仇 鸥 藏 癣 秩 你 滓 嫌 达 赚 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Da
12、te18 （二）观察产气荚膜杆菌的形 态和生长特点 （示教） 形态 (复习) 生长特点 汹涌发酵现象 柬 代 窑 纪 量 谜 点 辩 思 归 且 蛇 韶 傈 功 杯 火 驻 市 根 哗 哄 货 奠 壬 肥 沃 诫 妒 蓟 壤 古 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date19 1.观察产气荚膜杆菌的形态结 构 是G+大杆菌，菌体粗大，两端钝圆, 散在排列。芽胞呈卵圆形，芽胞宽度不比 菌体大，位于中央或末次端。培养时芽胞 少见，须在无糖培养基中才能生成芽胞。 位于菌体中央或近极端。菌体周围可形成 荚膜。 媳 每 峰 弟 宦 州 喳 逾 定 熬
13、 四 庇 仲 牧 叭 疥 鸦 雾 戈 烛 邢 腿 絮 磐 厕 真 驰 破 碟 矩 戈 闰 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date20 汹涌发酵现象汹涌发酵现象 在在牛乳牛乳培养基中培养基中 分解乳糖，分解乳糖，产酸产酸使酪使酪 蛋白凝固；蛋白凝固；产生大量产生大量 气体气体，将凝固的酪蛋，将凝固的酪蛋 白冲成蜂窝状，甚至白冲成蜂窝状，甚至 冲开管口棉塞，气势冲开管口棉塞，气势 汹猛。汹猛。 氨 熊 法 媚 窗 拇 邵 抬 播 涣 觅 檀 兔 使 聊 散 殷 儡 出 稽 墩 慎 戳 窝 够 疟 煤 壳 仑 皂 蓝 斟 医 学 微 生 物
14、第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date21 1、显微镜（油镜）的使用和保护方法 （1）提供一张细菌玻片标本，要求能正确使用油镜观察到细菌的基本形态； （2）掌握显微镜（油镜）的保护方法 2、血清对倍稀释法 （1）用生理盐水将血清进行对倍稀释，终浓度达到1/2，1/4,1/8三个稀释度； （2）掌握血清对倍稀释的原理和方法，能正确使用刻度吸管。 3、玻片凝集试验 （1）要求用伤寒诊断血清，采用玻片凝集试验的方法检测待检细菌是否为伤寒杆菌； （2）要求操作方法、步骤正确，能准确判断结果； （3）无菌操作正确。 4 、革兰染色法 （1）口试回答细菌涂片的制作方法
15、； （2）将一张已涂好的细菌玻片进行革兰氏染色； （3）要求染色步骤及各项染色时间正确，操作熟练。 5、细菌划线分离培养技术 （1) 将细菌分区划线到普通琼脂平碟上 （2）要求划线分区正确，接种划线手法正确、熟练 （3）无菌操作正确 6、液体培养基的细菌接种方法（无菌操作） （1）将菌种接种到液体培养基内 （2）要求各环节无菌操作正确 7、细菌在培养基中生长情况及细菌特殊结构的观察 （1）正确描述固体培养基的菌落、菌苔 （2）正确描述半固体、液体培养基中的细菌生长情况 （3）正确观察出镜下细菌的特殊结构 8、抗酸染色 （1）正确回答抗酸染色的各个步骤（包括用加热法或不加热法、初染时间） （2）
16、操作技术手法正确熟练 （3）脱色程度控制较好 微生物学与免疫学实验考核办法 考核方式：按学号顺序逐一进场应考。考核内容共8项，每位同学通过抽签考其中一项。 考核时间：每人限6分钟内完成。 考核地点：微免实验课上课的实验室 斯 椎 矽 究 继 迭 年 圭 炼 纂 裳 昂 借 肛 诡 龚 坡 雪 究 姐 淳 镭 涣 盔 括 陋 害 罕 轰 印 烷 诚 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date22 学号为单数： 抗原漂移；隐性感染 简述乙型肝炎病毒的传染源、传播途径及致病 机制。 学号为双数： 抗原转换 ； Virus 简述HIV的传染源、传播途径及防治原则。 奈 介 辅 桩 尉 拂 蛛 衬 券 碑 淹 呢 摸 断 疤 气 弱 儡 剥 籍 慌 啦 乘 玲 囊 腹 胳 婴 宙 旱 晕 导 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 医 学 微 生 物 第 1 2 次 实 验 Date23