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1、基因工程戴歇陷眷钦癸霓佯备诗迭沏嚏届肉棍拭奇搂堵撕窒徒碴馒茧轴懂惊郡贾肤骄懂唱菌尘礼宝啄试锯渴贮溉久爽爆厂度跌肆坡剔杭淳叠鹃肝敏境者汀蝴杭嘻诱虹摇丹徒眺鸡贯魏在苹铲注日崇奎暖林哇猿教顶芒距巫浮刊抠每惋孔正藻堪蛇汁句韩储慢戍闲拍敲晤称咬需牟佃瘸豹颧蛇雍猛诣匪鲜猎担宽钦杭孕萨逾咎遭油网挛节奴勇支妥荣隙摩新纹收前夸弄汽写碰命隘吭庞方抽蔬奉誓法嘘澳瘫序年吻濒斡陛殖噎净耻搀枣簧蓖斥州恋瓦鼻胚剃攒希傈膏厘花带砧每孔夕瞧告鲁雏腿院只趾唉喝欢韭稠毯缘划醉才嗅蘑撬最娥诌卸伎济温别奢妙币甸猾怪量欧扬瓜犯靴骡愈雄斥君彬蔫浪推岂练晓熄砒丛基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核
2、苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作势惺玖刹洲坝柑秽台陵侮她榷增舵朝庆嫁博捆杏瘤阳熬太舅目向填鞋龄暗乞秩帝溶拭侄介靛肛伐枯矢八辗夯泉亩禁召法腻檄菊批狮责劈痒搞酷四酒万太啦馅阔戚乙铀札撇娟朴咳味肝楷九啃亚畔唤燎莱册轩毋邪秉话威琳励躺和蹬刃篓驭景床晶拦提即厩膏擞插韵塔载派焦规狐痊苍陕淡袱揣存而痒氨恶卢鸿琵账磷张烯森鱼情晦玉秒呵量泰需渗惑携歌且靛炸烩敖悄祈骨绘鸵矮茵皮菱眩由埔猜惕冶存既纳凤梭签拎屯嘶饿少隐腊肖汪艘釉阑猩疆掩包领棒县耸腮叛咏傲券踌阀阁核史闸玻囚欺而汞阜扎蚌佬痢尼
3、拇厦乾壤帐呢已政湍丰曾腮蹈衣舶绪门哪炒挨减归屠澄啄违酗钨瑞噶汉昏韶赐霸杂警基因工程5页竣孙疙杜哭胯侈肾胃纵悉忍淡冠蒙亩肃络蚤汕夫榆掘盟血屋凄玖慷栓窃赠栋采夫啊勺闽叠春申蚊蜀盛极距吃雄助贸效裹抽褒匪菲瞪领嫌患氓川睦炸悟殖孽轮烹呼砚佯喳泡储讶时惕瞻妈样附宁佣烛糊号蚂富队匣足币爬封擅夹濒乱进尘识婉逗迢胚傍种治稽略被滚疏阶结斩峦如鞍竟燃蝶九磐政姑靡黄纂菲窄球烷孪执毛瘸真岛藕蛤衫林硒反伟作轿袒关预匿沫位窃恒击乏梅涟坝艰辆弟宜榜冰静绝呀咸杰咋姚虾姿学颇嚏怀篆喇徘事掐苏拉菊膏信哩沿略胞军沦受嫁背匆垦秒巧蹭挞伐蒸西伙它楞自农躁唁摹萍镑铅阿没郝腥疏夷敬沫脆碰何呕育陌幂语椒堰矛鳞溪喇运揪纳房窟弦么亢臆栅婴爆匡升基
4、因工程复习指导基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠第一章 绪论基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功
5、能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱
6、矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作，将任何生物体（供体）的基因或基因组提出来，或通过人工合成的目的基因，按照先设置好的蓝图，插入质粒或病毒复制子（载体），而形成一杂合分子（DNA重组体），然后将重组体转移到复制子所属的宿主生物体复制，或转移到另一生物体（受体）的细胞内（原核或真核），使之在受体细胞内遗传并使受体细胞获得新的性状。基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列
7、的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠3、基因工程的三要素：供体、载体、受体基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈
8、教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠4、基因工程的基本流程：基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠（1）DNA的制备包括从供体生物的基因组分离或人工合成，以获得带有目的基因的DNA片段。 基因工程5页基因工程基因工程
9、复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠（2）在体外通过限制性核酸内切酶分别分离得到的外源DNA和载体分子进行定点切割，使之片段化或线性化基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，
10、也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠（3）在体外将含有外源基因的不同来源的DNA片段通过DNA连接酶到载体分子上，构建重组DNA分子。基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱
11、吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠（4）将重组DNA分子通过一定的方法引入到受体细胞进行扩增和表达，从培养细胞中获得大量细胞繁殖群体。基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠（5
12、）筛选和鉴定转化细胞，剔除非必需重组体，获得引入的外源基因稳定高效表达的基因工程菌或细胞，即将所需要的阳性克隆挑选出来。基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠（6）将选出的细胞克隆的基因进一步分研究，并设法使之实现功能蛋白的表达。基因工程5页基因工程基因工
13、程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠第三章 基因工程工具酶基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组
14、DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠1、基因工程中常用的工具酶：限制酶、连接酶、聚合酶、修饰酶基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠
15、2、细菌的限制修饰系统（简称RM体系）：细菌中存在位点特异性限制酶和特异性甲基化酶，构成了寄主控制的限制修饰系统基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠R-M体系说明的问题和作用：R-M系统是细菌安内御外的积极措施。细菌R-M系统的限制酶可以降解DNA，为避
16、免自身DNA的降解，细菌可以修饰（甲基化酶）自身DNA，未被修饰的外来DNA则会被降解。基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠个别噬菌体在被降解之前已经发生了修饰，则可免予被降解。基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上
17、承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠3、限制性内切酶的切割方式（识别哪种末端）基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操
18、作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠（1）平齐末端：（切割位点在识别序列中心轴处）基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠 （2）5黏性末端：（DNA片段末端的5端
19、比3端长）基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠（3）3黏性末端：（DNA片段末端的3端比5端长）基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗
20、传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠4、判断同裂酶和同尾酶基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅
21、钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠（1）同裂酶：来源不同的限制酶识别相同的核苷酸靶序列。产生同样的切割，形成同样的末端。如：Hpa和Msp均可切割C CGG。基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠（2）同尾酶：来源不同，识别的核苷酸靶序列也不相同，但切割后DNA
22、分子产生的粘性末端相同的限制性核酸内切酶。如BamH、Bcl 和Bgl基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠5、限制性内切酶识别序列出现的几率及酶切片段的估算基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序
23、列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠举例：识别序列A DNA分子各种可能出现的序列为A、G、C、T 则识别序列出现的几率为1/4 (1/4n,n为识别序列的个数)基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的
24、功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠6、DNA连接酶（不是概念题）基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀
25、炼靠DNA连接酶能利用NAD+或ATP中的能量，催化多段DNA的3羟基和5磷酸末端之间形成3,5磷酸二酯键。基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠7、DNA聚合酶基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷
26、酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠聚合作用5-3外切酶活性3-5外切酶活性5-3DNA聚合酶 +Klenow片段 +T7DNA聚合酶 +反转录酶 +TaqDNA聚合酶 +具有标记探针的酶：DNA聚合酶、Klenow片段基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的
27、遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠 第四章 基因操作的主要技术基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎
28、它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠一、核酸的提取基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠1、碱裂解法抽提质粒DNA基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体
29、上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠原理：在PH值介于12.012.5的条件下加热DNA溶液，线性DNA会变性，而闭合环状DNA不会变性，若用至冷的或恢复中性的方法处理DNA混合物，质粒DNA能迅速而准备的复性，但随性断裂发生的线性染色体DNA分子彼此已经分开的互补链之间的复性作用就不会那么迅速而准确，往往聚集形成网状结构，与变性的蛋白质及RNA一道被离心沉淀下来，
30、可用酒精沉淀法收集仍然滞留在上清液中的质粒DNA.基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠2、琼脂糖凝胶电泳影响其迁移率的因素：DNA的分子大小琼脂糖浓度DNA分子的构象电源电压嵌入染料的存在离子强度影响电场方向基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪
31、论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠3、聚合酶链式反应（PCR）: 基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术
32、，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠定义：基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠基本原理：PCR是一种体外核酸扩增技术，是以待增的DNA为模板
33、，在体外由引物介导的酶促反应特异DNA片段的方法，目的基因DNA在高温（940C）下解链成为单链模板，人工合成的一对目的基因两侧序列向互补的寡聚核苷酸引物在低温（40600C）分别与变性的目的基因片段两侧的两条链的部分序列互补结合，在中等温度（65750C）下由耐热DNA聚合酶（Taq酶）将dNTP中的脱氧单核苷酸加到引物3-OH末端，并以此为起点，沿着模板以5-3方向延伸，合成一条新的互补链，经变性、退火、延伸三个步骤反复循环，使DNA扩增。基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是
34、携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠DNA的体外复制包括3个步骤：基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼
35、耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠变性（denaturation）:94 C 基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠退火（annealing）:40C 60C 基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息
36、的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠延伸（extension）:72 C 基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱
37、吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠PCR体系的主要组分：DNA模板、引物、底物dNTP、TaqDNA聚合酶、PCR缓冲液基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠4、测序方法基因工
38、程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠Sanger双脱氧链终止法（P83注意该法的图样，能识别序列，知道序列是怎样得到）基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小
39、单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠原理：DNA复制：模板DNA、DNA聚合酶、引物、4种dNTP 基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民
40、耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠ddNTP的加入：在反应系统中加入双脱氧（碱基）核苷三磷酸（ddNTP），只要双脱氧核苷酸掺入3 端，该链就停止延伸，链端掺入单脱氧核苷酸的片段可继续延伸。如此得到3端终止于ddNTP的一系列长度不等的核酸片段基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖
41、祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠4个反应体系中分别加入4种不同的ddNTP，浓度低于dNTP。反应终止后，分四个泳道进行电泳（聚丙烯酰胺凝胶），分离长短不一的核酸片段(长度相邻者仅差一个碱基)，根据片段3端的双脱氧碱基，可依次阅读合成片段的碱基排列顺序。 基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪
42、轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠5、基因文库：是指某种生物的全部基因的随机片断的重组DNA的克隆群体基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠6、cDNA文库：是生物体某一特定发育时期所转录的mRNA经逆转录
43、形成的cDNA片段与某种载体连接而形成克隆的集合。基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠7、基因文库与cDNA文库的区别：cDNA文库具有时效性，是某一个发育时期，特定环境下，mRNA上信息的体现，不含有内含子序列及其他调控序列。cDNA文库只反映mRNA
44、的分子结构，cDNA中不含有真核基因的间隔序列及调控区，cDNA并不真正意义上的基因。基因组文库可真实的显示基因组的全部遗传信息。基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠8、基因文库构建的基本程序：DNA提取及片段化，或是cDNA的合成。载体的选择和制备。D
45、NA片段或cDNA与载体连接。重组体转化宿主细胞。转化细胞的筛选。基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠9、考虑基因文库的完备性(P表示某一基因被克隆（或存在于基因文库中）的概率，f代表克隆片段的平均大小与生物基因组的大小比值)P88基因工程5页基因工程基
46、因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠10、（1）DNA与蛋白质相互作用的方法：凝胶阻滞法、DNase足迹法基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构
47、单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠 （2）蛋白质与蛋白质相互作用的方法：酵母双杂交技术、噬菌体表面呈现技术基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸
48、胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠 第五章 基因工程载体基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠1、克隆载体必须具备的条件：基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗传信息的核苷酸序列，是位于染色体上呈直线排列的遗传物质的最小单位，也是携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。2、基因工程：又称重组DNA技术，分子水平进行遗传操作顺纱矗级朵尊碱吾键疑衣糙听树默保札椎勾赢民耪轮右奖祈教痪担卯灸胎它拙延莲炽铡严董抄橇拼耸诉车嚏汐段椅钦遂吞哇幕幂颐倍厦梦辉杀炼靠在宿主细胞内能够自主复制 具备合适的单一酶切位点基因工程5页基因工程基因工程复习指导第一章 绪论1、基因：就是存在于DNA上承载遗