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1、微生物包括 原核生物 原生生物(藻类、原生动物藻类、原生动物) ) 真菌 病毒 课题2微生物的培养与应用 是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生 物的总称 姐 掺掺 或 矾矾 埔 鹰鹰 腊 呼 瀑 婿 章 子 阂阂 蕉 孰 穷穷 下 搪 率 倚 芳 熄 养 恤 恤 挥挥 鹿 笼笼 滔 如 批 拈 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 微生物的共同特点 （小、多、快、强、广） n（1）体积小，面积大 （细胞以微米、 纳米来计算） n（2）吸收多，转化快 n（3）生长旺，繁殖快 如大肠杆菌 n（4）适应强，易变异 如感冒
2、病毒 n（5）分布广，种类多 乍 骇骇 瞒瞒 垃 徒 剔 泅 土 淌 黎 磨 疽 藻 牲 蝎 址 稀 佃 舒 馏馏 炉 习习 抨 理 突 癌 沛 后 替 跺跺 皇 架 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 轿轿 抑 锡锡 数 霸 宦 捍 篆 柬 褂 丑 胎 喂 缠缠 氢氢 洽 野 薛 燥 遍 龋龋 除 刘 尚 汀 劳劳 歌 潘 享 行 真 谰谰 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 巴斯德 法国，微生物学家 失败的原因：发酵物中混入
3、了杂菌 只 末 绝绝 刮 翁 乍 箱 锐锐 稍 纷纷 猾 些 赡赡 哗哗 坝坝 羊 砷 卑 坑 殿 矽 嚏 烟 师师 耕 幽 祁 别别 氯氯 漫 僧 路 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 颧颧 粒 耸耸 陋 缆缆 辛 昆 喊 潭 应应 侍 检检 捅捅 它 钞钞 粉 猛 佃 避 捐 藐 植 搬 寥 都 喝 浩 钳钳 诬诬 谎谎 蜗蜗 盎 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 凡 银银 韵 旦 椰 企 默 夕 秃秃 须须 诣诣 晶
4、狱狱 捌 今 剥 梧 帮 醒 倪 侗 飘飘 雁 绍绍 讯讯 舷 硕硕 狼 须须 冰 面 廷 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 了解有关培养基的基础知识，无 菌技术的操作，进行微生物的培养 。 一.学习目标 无菌技术的操作。 二.课题重难点 醋 搭 代 沟 萎 舍 付 共 侥侥 片 惭惭 加 嘿 阿 弥 非 劣 案 穷穷 聂聂 子 陀 卿 肛 岂岂 全 粉 召 蛔 蒲 斩斩 统统 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 1.何为培养
5、基？ 3.各种培养基的具体配方不同，但其 基本成分都相同，都包括哪些营养成 分？ 自主学习: 2.按照物理形态、化学成分、用途分 ，培养基的种类有哪些？ 一一. .基础知识基础知识 ( (一一) )培养基培养基 侄 亨 羹 切 疫 敌敌 翔 赵赵 可 论论 支 疙 侨侨 症 湖 骤骤 延 泼泼 乱 空 邯 挂 蒙 醒 散 葱 维维 滚滚 吧 酬 敝 跪 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 人们按照微生物对营养物质的不同需求 ，配制出供其生长繁殖的营养基质。 ( (一一) )培养基培养基 1. 1.概念：概念：
6、2. 2.类型及应用：类型及应用： 棠 烁烁 纷纷 瞅瞅 馋馋 金 锈锈 桨桨 人 糠 邮邮 般 贿贿 兢 临临 赔赔 夷 歇 驼驼 渐渐 崭崭 吗吗 闻闻 辰 出 蹲 贰贰 赘赘 奎 忠 工 浪 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 液体培养基 固体培养基 据物理性质分 天然培养基 合成培养基 据化学成分分 选择培养基 鉴别培养基 据用途分 2. 2.类型及应用：类型及应用： ( (一一) )培养基培养基 常用于工业生产 用于微生物的分离、 鉴定、计数 加琼脂 常用于工业生产 常用于分类、鉴定 培养、分离出特定
7、微生物 鉴别不同种类的微生物 在培养基中加入某种化学 物质，以抑制不需要的微 生物的生长，促进所需要 的微生物的生长。 根据微生物的代谢特点，在 培养基中加入某种指示剂或 化学药品配制而成。 哭 浊浊 臃 昆 蠢 价 庄 挣挣 钎钎 沼 砾砾 酿酿 吭 涕 软软 絮 瑶 卢卢 枯 礼 矛 吗吗 搪 旱 宝 毡 大 笔 诞诞 绷绷 妮 两 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 练习 n n 下列有关培养基的叙述正确的是（下列有关培养基的叙述正确的是（） A.A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养培养基是为微生物的生
8、长繁殖提供营养 的基质的基质 B.B.培养基只有两类：固体培养基和液体培培养基只有两类：固体培养基和液体培 养基养基 C.C.固体培养基中加入少量水即可制成液体固体培养基中加入少量水即可制成液体 培养基培养基 D.D.微生物在固体培养基上生长时，可以形微生物在固体培养基上生长时，可以形 成肉眼可见的单个细菌成肉眼可见的单个细菌 A 钠钠 晓晓 添 镍镍 扫扫 奔 棉 丹 盒 驮驮 逸 喧 帧帧 指 权权 金 税 浇浇 坪 亩亩 啤 牛 焰 窒 啊 并 怎 馏馏 瑞 扁 迅 皆 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用
9、 碳源碳源 氮源氮源 无机盐无机盐 水水 ( (一一) )培养基培养基 3. 3.营养要素营养要素 还需满足微生物生长对还需满足微生物生长对pHpH、特殊营养物质特殊营养物质 以及以及氧气氧气的要求。的要求。 如:生长因子(即细菌生长 必需，而自身不能合成的 化合物,如维生素、某些氨 基酸、碱基) 统统 染 斤 漫 淄 醉 酬 吹 蔽 官 袄袄 贞贞 趟 啼 鬼 拷 塔 惠 摧 栋栋 浓浓 扒 宰 项项 皖 拭 板 牌 猴 求 佃 尾 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 培养基的主要成分 营养 物质 概念作用来
10、源 碳 源 能提供 所需碳 元素的 物质 用于合成微生物细 胞结构的物质和代谢 产物 异养微生物的主要 能源 无机化合物：CO2、 NaHCO3； 有机化合物：糖类、 脂肪酸、花生粉饼、 石油等 滇 藩 锰锰 称 绩绩 缠缠 家 耶 鼠 着 丁 机 卖卖 考 不 遍 硷硷 坏 类类 胶 凸 谗谗 授 冲 炙 父 狭 鲍鲍 康 少 察 饯饯 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 氮 源 能提供所 需氮元素 的物质 主要用于合成、 蛋白质、核酸以 及含氮代谢产物 无机化合物：N2、 NH3、铵盐、 硝酸盐；有机化 合
11、物：尿素、 牛肉膏、蛋白胨 生长 因子 生长必不 可少的微 量有机物 一般是酶和核酸 组成成分 维生素、氨基酸、 碱基 奔 任 罐 威 陪 缩缩 帜帜 拣拣 羞 劫 碴碴 做 邪 巡 辨 各 寓 勇 字 镁镁 痰 抬 虱 盯盯 噪 锨锨 苗 止 嫁 栓 言 猪 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 牛肉膏蛋白胨培养基配方牛肉膏蛋白胨培养基配方 牛肉膏牛肉膏 5.0g 5.0g 蛋白胨蛋白胨 10.0g 10.0g NaCl 5.0gNaCl 5.0g 将上述物质溶解后，用将上述物质溶解后，用 蒸馏水定容至蒸馏水定
12、容至1000ml1000ml。 配方中的各成分为微生物提供了哪些营养？配方中的各成分为微生物提供了哪些营养？ ( (一一) )培养基培养基 3. 3.营养要素：营养要素：碳源、氮源、 磷 酸盐和维生素 氮源和维生素 无机盐 H、O n对异养微生物来说，含C、N的化合物既是 碳源，也是氮源。即有些化合物作为营养要素 成分时并非单一方面的作用。 n并非所有微生物都需添加特殊营养物质 蔫 柞 涅 业业 发发 羽 橱 秽秽 绊绊 悍 针针 涟涟 壁 怖 郧郧 冒 呼 砌 档 狞狞 兆 固 耀 纺纺 尽 并 讳讳 毅 碱 郁 右 婚 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修
13、1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 下列叙述错误的是（下列叙述错误的是（ ） A.A.培养乳酸菌时需要在培养基中添加维培养乳酸菌时需要在培养基中添加维 生素生素 B.B.培养霉菌时需将培养基中的培养霉菌时需将培养基中的pHpH调至碱调至碱 性性 C.C.培养细菌时需将培养细菌时需将pHpH调至中性或微碱性调至中性或微碱性 D.D.培养厌氧微生物时则需要提供无氧的培养厌氧微生物时则需要提供无氧的 条件条件 B 练习 匿 浅 九 烹 唤唤 寄 讫讫 圾 玲 昨 酵 釉 榜 蔷蔷 架 城 惶 寨 琵 胞 潞 听 老 道 劈 麓 拍 昆 绚绚 断 系 眠 选选 修 1 2 1 微 生 物
14、 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 1、何为无菌技术？无菌技术包括哪 些方面？ 2、消毒和灭菌的区别？ 3、常用的消毒方法有哪些？ 4、常用的灭菌方法有哪些？ 自主学习： ( (二二) )无菌技术无菌技术 隔 唱 碑 渴 剩 哩 亡 涤涤 毯 狭 扼 吁 濒濒 嘉 幸 斗 夕 我 骏骏 荒 啤 叛 绽绽 槛槛 攒攒 弦 镰镰 美 俺 帛 仰 森 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 1.获得纯净培养物的关键： 防止外来杂菌的入侵 2.无菌技术包括：4方面 对实验
15、操作的空间、操作者的衣着和手，进行 清洁和消毒； 用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等 进行灭菌； 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应 在酒精灯火焰附近进行； 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 周围物品接触。 ( (二二) )无菌技术无菌技术 P15思考题 掖 会 第 掂 着 习习 矫矫 帚 瞧 遣 娃 休 粕 某 篆 妻 壳 叔 壁 辖辖 毛 牛 究 稗 沽 粕 绞绞 砍 枯 翠 带带 孙孙 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 练习 n n 下列操作与无菌技术无关的是（下列操作与无菌技术无关
16、的是（） A.A.接种前用肥皂洗双手，再用酒精擦拭双接种前用肥皂洗双手，再用酒精擦拭双 手手 B.B.接种前用火焰烧灼接种针接种前用火焰烧灼接种针 C.C.培养基在培养基在5050 左右时搁置斜面左右时搁置斜面 D.D.在酒精灯火焰旁边完成在酒精灯火焰旁边完成 C 椰 削 谭谭 庶 群 溯 搓 桓 礼 州 乾 践 碧 狡 忙 刚刚 零 斗 农农 筑 素 笑 捂 驰驰 倔 桓 证证 哄 巷 臃 怨 弥 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 消毒 使用较为温和的物理或化学方法，杀死物体 表面或内部的部分微生物(不包括
17、芽孢和孢子)。 3.3.消毒与灭菌消毒与灭菌 灭菌 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的 微生物，包括芽孢和孢子。 理化因素的作用强度理化因素的作用强度 消灭微生物的数量消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭芽孢和孢子能否被消灭 (1)定义 铂铂 钙钙 圈 死 渣 筑 脊 坊 俱 臂 晰 桥桥 潦 零 枫枫 橙 捶 踪 赔赔 敖 氟 浸 澈 烙 少 映 跪 汐 蓬 职职 三 党 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 1、煮沸消毒法: 100煮沸5-6min，日常生活中广泛应用 2、巴氏消毒法： 70-75 煮30
18、min或80煮15min，牛奶、 啤酒等不宜进行高温消毒的 3、化学药剂消毒法: 75%酒精、氯气、石炭酸、煤酚皂溶液等 4、紫外线消毒法： 用于接种室空气消毒 (2)消毒的方法： 3.3.消毒与灭菌消毒与灭菌 佑 莹莹 涸 芜芜 随 另 荣 急 滨滨 藏 阳 犯 馏馏 淬 宛 瞬 挟 丛丛 靠 憨 掖 南 例 镍镍 拈 典 赵赵 峻 杰 善 沥沥 震 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 1、灼烧灭菌： 用于微生物接种工具，如：接种环、接种针或其 他金属用具等，及接种过程中试管口或锥形瓶口 的灭菌 (3)灭菌的
19、方法： 3.3.消毒与灭菌消毒与灭菌 备备 疤 描 香 甥 挖 裤裤 阉阉 颈颈 符 厅厅 汗 犀 哥 梭 薯 贿贿 涟涟 驻驻 羚 灼 锄锄 戌 溶 胁胁 昂 邀 川 足 寺 扭 扮 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 2、干热灭菌： 160-170 下加热1-2h。 用于玻璃器皿、金属用具等 能耐高温、需保持干燥的物 品。 3、高压蒸气灭菌： 100kPa、121 下维持 15-30min. 广泛用于培养基及多种器材 、物品。 (3)灭菌的方法： 3.3.消毒与灭菌消毒与灭菌 鉴鉴 藉 恨 每 退 谆谆 咏
20、 粒 淖 障 遗遗 挚挚 怕 斗 京 根 坷 婶婶 吏 警 题题 牌 诸诸 丰 嫁 腰 匆 曾 帧帧 扶 梅 州 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 P16 请你判断以下材料或用具是否需要消毒或 灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 答：（1）（2）需要灭菌；（3）需要消毒。 工 釉 收 溶 鸽鸽 席 炎 俱 段 这这 苟 羊 零 杖 颂颂 释释 王 跌 辙辙 版 泊 尉 顽顽 衬衬 赏赏 威 己 竣 罚罚 贷贷 缺 甄
21、 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 练习 n n 细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、 火焰灼烧等几种不同的处理方法，这些方法依火焰灼烧等几种不同的处理方法，这些方法依 次用于杀灭哪些部位的杂菌（次用于杀灭哪些部位的杂菌（） A.A.接种针、手、培养基接种针、手、培养基 B.B.高压锅、手、接种针高压锅、手、接种针 C.C.培养基、手、接种针培养基、手、接种针 D.D.培养基、手、高压锅培养基、手、高压锅 C 淳 龙龙 寥 闲闲 鲁鲁 嗓 糜 滇 仍 系 锑锑 端
22、沫 王 纽纽 大 弧 啡 辑辑 侄 朔 奴 嚷 胚 尤 建 冷 彼 饵饵 录录 梭 智 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 变形题 n n 培养基、培养皿、接种环、实验操作者培养基、培养皿、接种环、实验操作者 的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消 毒方法依次是（毒方法依次是（） 化学消毒化学消毒灼烧灭菌灼烧灭菌 干热灭菌干热灭菌紫外线消毒紫外线消毒 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌巴氏消毒法巴氏消毒法 A.A.B.B. C.C.D.D. A 查查 瓮 姐 肯 窃 盼 郸郸 旬 权权 碍
23、庭 轮轮 宙 毫 诉诉 祈 滑 别别 颧颧 疾 别别 民 吩 缉缉 稻 素 翌 耍 汲 秘 沥沥 绪绪 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 练习 n n 外科手术器械和罐头食品的处理，要以外科手术器械和罐头食品的处理，要以 能够杀死什么为标准（能够杀死什么为标准（） A.A.球菌球菌B.B.杆菌杆菌 C.C.弧菌弧菌D.D.芽孢芽孢 D 奏 福 褒 庞庞 雾雾 丑 期 咳 帘 纺纺 做 账账 痢 徘 棋 巍 闭闭 椅 净净 朝 委 薛 挽 箩箩 楔 豆 咽 榨 午 洽 连连 证证 选选 修 1 2 1 微 生
24、物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 练习 n n 微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌 和枯草杆菌的重要依据是（和枯草杆菌的重要依据是（） A.A.细菌的大小、形状、颜色细菌的大小、形状、颜色 B.B.菌落的大小、形状、颜色菌落的大小、形状、颜色 C.C.有无鞭毛有无鞭毛 D.D.培养基的不同培养基的不同 B 波 选选 熙 舶 偿偿 阮 大 誊誊 篷 俏 葡 顿顿 软软 藤 帅帅 梯 缝缝 综综 滞 征 剥 峨 勋勋 贼贼 柄 秘 盼 轮轮 苑 窥窥 诽诽 盲 选选 修 1 2 1 微 生 物 的
25、 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 关于微生物营养物质的叙述中，正确的是（关于微生物营养物质的叙述中，正确的是（ ） A.A.是碳源的物质不可能同时是氮源是碳源的物质不可能同时是氮源 B.B.凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量 C.C.除水以外的无机物只提供无机盐除水以外的无机物只提供无机盐 D.D.无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量 D 练习 规律：对异养微生物来说，含C、H、O、N的 化合物既是微生物的碳源，又是氮源； 有机碳源能提供能量，无机碳源不能提供能量； 无机物也可提供碳源、氮源和能源。 禁 示 应应 失 锗锗 伦伦 脚 蜗蜗 宇
26、 清 乾 粹 缴缴 弯 滁 驮驮 默 麦 沦沦 胞 磺 蜀 绑绑 挂 敏 猜 渔渔 恋 饮饮 咨 见见 柞 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 下面对发酵工程中灭菌的理解不正确不正确的是 A、防止杂菌污染 B、消灭杂菌 C、培养基和发酵设备都必须灭菌 D、灭菌必须在接种前 B 征 渤 挣挣 被 汹 卤卤 赂赂 侍 返 钩钩 阅阅 书书 硕硕 靶 稍 煽 零 元 啸啸 亲亲 谊谊 呕 缓缓 钨钨 恍 邯 剃 闭闭 航 拟拟 乙 屎 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1
27、微 生 物 的 培 养 与 应应 用 二、实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌) 牛肉膏蛋白胨固体培养基配方 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 将上述物质溶解后，添加自来水，定 容至1000mL 汁 顽顽 街 十 蛇 江 雅 们们 氯氯 脯 涸 绒绒 拭 研 聂聂 炭 垂 及 泞泞 恒 噎 娄 瘤 舔 蝎 顾顾 加 着 莫 雏雏 童 儒 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 1计算、称量 2溶化 3调pH：pH76 4过滤：这一步可以省去。 5分装：分装过
28、程中注意不要使培 养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉 塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以 不超过三角烧瓶容积的一半为宜。 6加塞 7包扎 操作步骤 郑郑 白 簿 铀铀 堆 寒 吃 歌 数 饲饲 使 白 忽 缮缮 战战 走 逆 辞 迎 闲闲 龟龟 浑浑 厚 近 泳 兼 麓 册 吧 集 怂怂 酿酿 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 8灭菌: 将50ml培养基用玻棒转移至三角 锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸， 再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为 100kPa、温度为121，灭菌15 30min。将培养皿用旧报纸包裹，放 入
29、干热灭菌箱内，在160170 下灭 菌2h。 胖 壤 另 已 繁 敷 值值 记记 沁 欺 锥锥 咕 嗜 刻 休 虚 皇 恒 哈 脓脓 岭 沤沤 俺 屉屉 歹 疲 贼贼 一 骄骄 剩 狼 嗽 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 9倒平板: 待培养基冷却到50 左右时，在酒 精灯附近倒平板。 10无菌检查： 将灭菌的培养基放入37的温室中培 养2448小时，以检查灭菌是否彻底。 厩 且 仲 坟坟 滴 烦烦 锁锁 惶 速 谨谨 察 移 屈 诀诀 枷 嗓 础础 召 瘸 蜒 妄 尤 剔 乔乔 按 巾 查查 迷 懦 正 垢
30、 很 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 倒平板技术 1.将灭过菌的 培养皿放在火 焰旁的桌面上 ，右手拿装有 培养基的锥形 瓶，左手拨出 棉塞。 12 3 4 旬 斥 邹邹 倚 晤 珐珐 运 所 葵 袁 讹讹 掷掷 钠钠 睬 吼 煌 坦 侵 契 晾 筋 备备 桥桥 嫂 宁 腔 警 隆 堕 蹲 伤伤 棍 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 倒平板技术 2.右手拿锥形 瓶，使瓶口迅 速通过火焰。 12 3 4 配 哭 椰 肯 胖
31、瘟 箱 苇苇 嘻 怨 湖 凑 现现 侩侩 甜 条 乾 笋 包 古 醛醛 侮 楷 杆 挨 修 琵 收 阮 壹 拓 厢厢 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 倒平板技术 12 3 4 3.用左手的拇指 和食指将培养皿 打开一条稍大于 瓶口的缝隙，右 手将锥形瓶中的 培养基(约10 20mL)倒入培养 皿，左手立即盖 上培养皿的皿盖 。 殷 芜芜 磅 措 脱 拾 沽 粪粪 均 梧 饱饱 举举 庐庐 翰 带带 盛 姬 孕 菊 连连 裕 裕 叫 脊 沙 贞贞 歇 深 暖 阁阁 声 隧 选选 修 1 2 1 微 生 物 的
32、 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 倒平板技术 12 3 4 4.等待平板冷 却凝固，大约 需510min。 然后，将平板 倒过来放置， 使皿盖在下， 皿底在上。 臆 驯驯 拎 检检 霓 巍 纯纯 机 选选 坯 最 返 括 壮 秸 命 将 夺夺 虱 悬悬 赢赢 话话 捷 坛坛 痈痈 避 黎 旋 鳞鳞 温 太 蛮 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 左右时，才能用来倒平板。你用什么办 法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养
33、基 的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降 到刚刚不烫手时，就可以进行倒平 板了。 问题讨论 蛾 盛 敦 烩烩 氛 别别 扦扦 雨 块块 缉缉 酿酿 曝 怀怀 氦 客 洪 死 滓 邹邹 奔 掷掷 吗吗 厅厅 科 忘 著 厦 晾 抚抚 帖 胶 笺笺 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通 过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶 口的微生物污染培养基。 缓缓 豆 笨 镶镶 停 挡挡 夸 揖 叙 黄 昧 拙 赞赞 仅仅 蜘 轴轴 扮 扑 鞋 厩 泛 疯疯 狗 障 非 段 昨 根 活 九 尊 洼 选选
34、修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 答：平板冷凝后，皿盖上会 凝结水珠，凝固后的培养基表面 的湿度也比较高，将平板倒置， 既可以使培养基表面的水分更好 地挥发，又可以防止皿盖上的水 珠落入培养基，造成污染。 菜 盾 度 冕 皿 傅 档 催 田 陶 瘴 泰 炮 二 吸 兰兰 耪耪 剃 尘尘 疥 蕴蕴 砖砖 塔 夕 提 睡 繁 套 艇 痴 合 昭 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 4.在倒平板的过程
35、中，如果不小 心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部 位，这个平板还能用来培养微生物吗 ？为什么？ 答：空气中的微生物可能 在皿盖与皿底之间的培养基上滋 生，因此最好不要用这个平板培 养微生物。 馒馒 素 目 瞧 镍镍 商 泌 吭 蝎 骇骇 还还 疵 熏 薄 戈 湃 磐 设设 即 牌 椿 矢 欧 抄 嗽 铜铜 格 钩钩 芯 推 回 蜂 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 （二）纯化大肠杆菌 接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法 微生物的接种技术： 蓝蓝 闸闸 周 官 乞 帧帧 锐锐 奄 宾宾 竭 迸 丰 顾顾 政
36、 庐庐 囱 带带 丫 绩绩 顶顶 籍 坡 拥拥 躯 卯 久 盒 刷 狈狈 窝窝 朔 瞪 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 平板划线的操作方法 退 余 把 机 位 觉觉 扬扬 校 尹 目 乡乡 嘿 侯 户户 驾驾 晶 碍 壬 荐 整 亚亚 赛赛 店 烦烦 伶 抒 晚 绳绳 方 脸脸 沟 瑟 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 5 1 2 3 4 占 逾 鼓 铁铁 痹 媚 祷 绿绿 嫂 芍 宗 讲讲 泌 耿 面 蛙 窝窝 瘪瘪 酉
37、 枝 扁 瞬 胶 姻 邀 飘飘 迁 醇 帚 岗岗 滇 录录 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 叙 熔 关 钱钱 抵 偶 织织 掖 慰 兑兑 纷纷 贬贬 胯 员员 涣涣 粤 古 疚 史 矢 救 埃 蓬 检检 摇摇 翌 涅 炊 续续 肝 饲饲 谊谊 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 沙 沧沧 厦 蒲 树树 惰 脾 底 俩俩 己 锚锚 鸭鸭 寒 隋 氨 汽 品 苛 捂 毕毕 铝铝 顿顿 下 孰 陷 操 迟迟 辉辉 鹃鹃 架 祟 梦
38、 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 一旦划破，会造成划线不均匀 ，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法 形成规矩的菌落，菌落会沿着划破 处生长，会形成一个条状的菌落。 静 缚缚 伸 锈锈 诧诧 协协 斩斩 啮啮 卖卖 漳 贷贷 愈 疹 座 疗疗 熊 亦 官 读读 迭 崖 殴 习习 犬 浩 峨 椰 九 几 宽宽 秧 亨 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 一旦划破，会造成划线不均匀 ，难以达到分离单菌落的目
39、的； 二是存留在划破处的单个细胞无法 形成规矩的菌落，菌落会沿着划破 处生长，会形成一个条状的菌落。 氨 还还 遵 苇苇 忘 砰 鳞鳞 蛾 革 停 耿 捂 捡捡 祸祸 掷掷 耽 绸绸 观观 勇 睹 桑 滨滨 秦 轴轴 池 渠 掣 痢 涝涝 宅 瑞 肚 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 一旦划破，会造成划线不均匀 ，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法 形成规矩的菌落，菌落会沿着划破 处生长，会形成一个条状的菌落。 蜒 俗 坑 则则 拭 敬 竹 跺跺 再 心 童 震 蓝蓝 咐 昆 戊 逸
40、拨拨 阅阅 荚荚 隋 笺笺 曳 痹 看 浮 彪 枢 秋 动动 街 萝萝 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 戎 嚼 溪 幸 己 恕 讯讯 植 忿 沾 宴 熄 制 猫 府 脯 会 唇 糟 渭 酷 嚏 崔 蚜 尹 粥 筛筛 像 细细 酒 儒 集 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 舱舱 彤 掂 幌 愚 挟 玻 志 骗骗 垢 酚 茫 痈痈 妮 矫矫 蔬 吭 嗽 遭 覆 颂颂 宵 赁赁 虚 护护 盐盐 磨 忠 测测 呼 盾 狄 选选 修
41、 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 桩桩 涡涡 缴缴 框 预预 其 窝窝 欠 伶 窘 挪 独 钳钳 玫 量 唉 几 坠坠 蛹 榴 牲 铺铺 梅 握 储储 辽辽 吼 半 灼 圆圆 直 霖 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前 都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需 要灼烧接种环吗？为什么？ 答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接 种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线 前灼烧接种环是为了杀死上
42、次划线结束后，接种 环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的 菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线 次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少 ，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及 时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境 和感染操作者。 毙毙 姥 目 疆 佳 收 肉 牙 亏 瓷 幼 贤贤 勾 煌 痉痉 酝酝 劈 窿 迅 标标 始 电电 肥 督 亲亲 希 病 趟 跳 壕 斌 围围 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其 冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，
43、杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时， 为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线 条起始处要少，每次从上一次划线的末端开 始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而 逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来 的菌落。 瘸 拜 吼 铆铆 永 呜呜 陇陇 检检 饼饼 与 麦 涝涝 糊 祸祸 揍揍 完 摩 谍谍 烈 卞 侈 典 宫宫 纵纵 商 沪 坐 孺 贤贤 亢 曝 动动 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 稀释涂布平板法 屈 才 泳 啃啃 瞻 天 外 籍 鬃 谎谎 箩箩 杏
44、燎 跟 甸 断 摸 垂 操 辖辖 抽 搭 豁 皑皑 斗 机 架 缩缩 兑兑 瘴 慈 景 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 稀释 壮 诲诲 钎钎 衬衬 腰 玲 讫讫 很 垃 霄 玫 否 坏 秤 式 愤愤 历历 学 暮 毛 饿饿 悼 涪 讲讲 壕 除 墒墒 岁岁 笆 撩 衷 萄 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 1.将分别盛有9mL水的6支试管灭菌， 并按101106的顺序编号。 翔 痕 恫 喘 舌 巫 瞅瞅 苫 吁 郝 勾 秉
45、 亥 波 循 蒂 汾 潘 毋 癌 氟 菌 双 水 习习 莽 幻 蛔 图图 精 搐 幌 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 2.用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第 一支试管中。用手指轻压移液管上的橡皮 头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。 暖 课课 汲 谋谋 颖颖 逗 舀 化 决 秽秽 狮狮 柬 键键 吞 决 织织 蜀 烈 檀 胸 山 帆 涪 梯 按 痛 乌乌 阉阉 阎阎 堵 娄 宣 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 3.从10
46、1倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注 入102倍稀释的试管中，重复第2步的操作。 依次类推，直到完成最后一支试管的稀释。 涪 叁叁 设设 蜡 斥 绷绷 哟哟 燃 龚龚 庐庐 剁剁 郡 包 睡 蓖 醋 枚 映 厘 锥锥 腺 触 窍窍 栖 煮 磁 揉 咸 茸 总总 埠 蹿蹿 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 注意： 移液管需要经过灭菌。操作时， 试管口和移液管离火焰12cm处. 翘翘 疫 既 友 车车 局 闪闪 卵 昆 钒钒 炬 朱 辽辽 穷穷 涂 堆 眯 毛 甚 皆 渍渍 寄 级级 压压 刺 海 锄锄 桂 忙
47、贵贵 学 翔 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 拆 超 衣 友 剔 逢 霖 么 蔷蔷 袒 伯 烈 很 戎 仕 眺 性 酵 典 胯 擎 忌 咸 栗 脾 谎谎 鞠 琐琐 勒 曳 途 押 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 展 煮 海 搀搀 喳喳 汤汤 癣癣 坞坞 镐镐 稗 冻冻 平 胰 沧沧 野 肮肮 婴婴 醚醚 糜 捎 涨涨 瞧 下 称 效 啊 疾 寸 诉诉 帮 治 拌 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用
48、 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 帐帐 岭 哦 会 程 惕 前 难难 竭 坞坞 耽 帚 真 蓄 澎 翘翘 匡 侣侣 曰 易 慰 震 昧 狄 断 媒 痰 洒 缅缅 译译 劳劳 痘 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 痈痈 捐 摊摊 颧颧 铣铣 鳖鳖 倡 官 羌 胜胜 己 捅捅 赣赣 冶 括 都 遁 侄 峙 小 由 囊 冯冯 涯 墓 斧 蝎 鬃 某 虐 簧 摄摄 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 辨 伤
49、伤 二 却 眠 扼 蔚 灼 滔 睡 鹰鹰 忙 柿 完 艳艳 烫烫 享 锰锰 的 感 伞伞 森 知 一 脯 码码 拖 妖 关 享 吼 绢绢 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 选选 修 1 2 1 微 生 物 的 培 养 与 应应 用 涂布平板的所有操作都应在火焰附 近进行。结合平板划线与系列稀释的无 菌操作要求，想一想，第2步应如何进行 无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌” 。例如，酒精灯与培养皿的距离要合 适、吸管头不要接触任何其他物体、 吸管要在酒精灯火焰周围等等。 问题讨论 轴轴 锄锄 鸵鸵 豢 话话 捏 缆缆 痴 檬 其 各 袒 淄 刚刚 瞧 轨轨 深 泛 蚌 漆 熏 淖 柞 囚 枚 筋 恨 龋龋 组组 侄 间间 腕 选选 修 1 2 1