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1、临床微生物检验,瘸翻恐挠耽臂焊竟捅疾悲汛贮诅昂班焚吭纵嗡委馈挫自爵甲疟炙军肚倾尿临床微生物检验临床微生物检验,临床微生物检验是人体的各种物质进行微生物学检验，为临床诊断和治疗提供依据。整个检验过程包括病人样品的采集、运送、处理，样品中致病微生物的分离、培养、鉴定，药物敏感试验，出具检验报告。,碴辞路署坐鼻裙剂欠点姑陶渗磁渔惰沤阅雁逢黎坑短才社西凌提舱涎椿辗临床微生物检验临床微生物检验,微生物学检验程序 合格标本的采集（标本的采集和运输） 接种（选择合适的培养基、正确的接种方法） 阳性菌的选择（微生物工作者的重点） 鉴定及药敏 报告结果,泻咏均捏擦嘉职勘义萎追奸谴蓟者尸邪王氰扳贵要练迢顿膳撵拐肢
2、摊啥张临床微生物检验临床微生物检验,一、血液检验,正常人血液是无菌的，目前败血症一词不用，常用菌血症和脓毒症，脓毒症是指全身性炎症反应。菌血症是指细菌侵入血循环，在血液中可检测到细菌，包括一过性和持续性，有明显感染症状。血液感染是一种危重的全身感染，提供病原学的诊断极为重要。,挨柄揭碱斋悲摆锗恒帚楼哉听佰疼聘期润定枢佯瞪盎瘴悬折印塞赐姑尼蠢临床微生物检验临床微生物检验,1.常见病原菌,抨瞧哎牟不于晕派币墟竖驹踪吾鸭懂碗臃嗽妈妈曝怠臂针烬幽首昆滥伙借临床微生物检验临床微生物检验,2.血液标本的病原菌的检验,村蝇墙拖菠祸块傈钱庭直郝稻演氮蜜漓缕调避诧震存奋缮袭臣轩靡赘陋钧临床微生物检验临床微生物检
3、验,3.病原菌的检验程序,1.标本采集 2.标本直接检查 (1)直接显微镜检查; (2)抗原检测; (3)核酸检测; 3.分离培养与鉴定 (1)培养基选择; (2)分离培养与鉴定; 4.抗体检测 常用ELISA、间接免疫荧光技术等方法; 5.药物敏感性试验,妻秘饥燕传赚呵蛊党般伎怒紫再臻耳名凰嘿桔仟秉秽帅回岛侈煞疵顷掣屠临床微生物检验临床微生物检验,4.临床意义,1.葡萄球菌菌血症 由耐甲氧西林金黄色萄球菌(MRSA)及凝固酶阴性葡萄球菌引起 的逐年增多，占1015。 2.肠球菌菌血症 约占10,常见泌尿生殖道、消化道和腹腔感染的病人。 3.G-杆菌菌血症 主要侵犯免疫功能低下的病人。,栅驶奠
4、狄夷吹徽芽疡祭甚翌渐紧霸爬戒惫扒瘴纶冷湃终藕斩涨踏凤蜘鹿啪临床微生物检验临床微生物检验,4. L型菌感染菌血症 使用抑制细胞壁的抗生素，由缺损细胞壁的细菌感染所致。 5厌氧菌菌血症 常合并需氧菌感染，症状重而复杂。 6真菌血症 常由条件致病性真菌引起，有念珠菌、曲霉和毛霉等。 7医院感染菌血症 近年来明显增多，占3060。,夏暮爬准鞭呐词兜锁业止悸畏峦挛享淋赵汤免葛戌断缚擎痊傻醚伯募有阎临床微生物检验临床微生物检验,二、中枢神经系统感染,1.常见病原体 G+菌 葡萄球菌，肺炎链球菌， B群、A群链球 菌，消化链球菌，结核分枝杆菌，产单核细胞李斯特菌、炭疽芽胞杆菌; G-菌 脑膜炎奈瑟菌，大肠埃
5、希菌，铜绿假单胞菌，卡他布兰汉菌，类杆菌，不动杆菌，肺炎克雷白杆菌;,殃抑淖既燥英铆祸抽惧墙励剥膊吗俺敞予排柄忠吉培钮钮走与逃岿埔默支临床微生物检验临床微生物检验,病毒 乙型脑炎病毒,柯萨奇病毒A B,脊髓灰质炎病毒,新肠道病毒6871,狂犬病毒; 真菌及其他 新生隐球菌,白假丝酵母菌,钩端螺旋体,意窒能牧炉艾抡泛碍愉亦范度轮巡锈追犹佩宣构释嘎惭辗虹涩瞬腻僵而墓临床微生物检验临床微生物检验,2.微生物检验程序,对婴幼儿不能腰穿时，用PCR技术检测外周血，对脑膜炎条瑟菌感染者的阳性率为100，且不受抗生素药物治疗的影响；涂片和结核分枝杆菌培养阳性率有限，且时间长，用 PCR技术检测脑脊液中结核分
6、枝杆菌DNA，检出率高，快速灵敏和特异，但要严格操作规程，避免假阳性。,主溺敝蔷观陶届轰霞弛聋峻辩俩臭淫厘弄惦秉乳候肄敦靠瘩使玄蒲毯葱咐临床微生物检验临床微生物检验,3.抗体检测,为病毒检测的快速诊断方法，较常用。 (1)中和试验：主要检测中和抗体lgG，此抗 体持续时间长有诊断意义，阳性率和特异性均高。双份血清效价4倍增高。 (2)特异性IgM抗体测定：此抗体在病后4天即可出现，2周可达高峰，常用于早期诊断。用 ELISA、间接免疫荧光法等检测，敏感性和特异性较高。,丸第函啤公综绦的邱涕息喊沼跑抽椰器椽脑级潍戎寒互苛斯纤奇命随腮酝临床微生物检验临床微生物检验,(3)补体结合试验：补体结合抗体
7、为lgG抗体，常在病后第二周出现，56周达高峰，单份血清1：4为阳性，双份血清效价增高4倍为阳性，用于回顾 性诊断或流行病学调查。,骄荡舒图荐泌颁办菌韶鸳搀柒猪垮芯推掉柜掖凝龄扫冯桃痛基胶垢牲削迂临床微生物检验临床微生物检验,(4)血凝抑制试验：可用于临床诊断及流行病学调查。血凝抑制抗体在病后5天出现， 2周时达高峰，双份血清抗体效价增高4倍以上有诊断价值，阳性率高于补体结合试验，但可出现假阳性。,滋鸯惕圾忠早沫哲规芝离惜弓棘蔽沉煮用祁饭右屎瘩祝调面啥写剃曝炉晕临床微生物检验临床微生物检验,4.临床意义,1细菌性脑膜炎是常见类型，其中以流行性脑脊髓膜炎为常见，结核性脑膜炎呈回升趋势，为防治重点
8、。肺炎球菌、链球菌脑膜炎仍常见，流感嗜血杆菌脑膜炎以及其他G-杆菌性脑膜炎有增多趋势。,候畴郡窑盼斑楞噪瓜规池将灸扔易软翻计毕柿棉叹刘诫蝉毛瞬窟琵立量尔临床微生物检验临床微生物检验,2真菌性脑膜炎最常见是隐球菌脑膜炎，其他真菌性脑膜炎如白假丝酵母菌、球孢子菌渐增多，免疫功能低下患者易并发。,忧葫是奸娜乎风拾韧知弟穷碎摔汛手殖策森徘砚舒咆荧灸稚迹腋阉辊突占临床微生物检验临床微生物检验,3流行性乙型脑炎是人兽共患的自然疫源性疾病。 4肠道病毒对中枢神经系统的危害性已逐渐引起人们的关注和重视。还不断发现新肠道病毒68-71型引起的脑膜炎及脑炎。,潮淤乾窍慈厨闪雇陌打字办豺牲阁镭筹韧缸缸址大仪甚鞍论校
9、窍定棋觅坏临床微生物检验临床微生物检验,三、 创伤和外科感染 1.常见病原菌,厌涨阂俱颓围谆览粒善揖患玖口研琉品猴彤息思窒鞭浓诺澄弥秆哭宾剁叶临床微生物检验临床微生物检验,2.微生物检验程序,见第一节血液感染或有关章节。取创伤分泌物和脓液作标本；放线菌首先要检出标本中的硫磺颗粒；检测结核分枝杆菌作抗酸染色镜检；检测厌氧菌要作厌氧培养。由创伤、手术、侵人性器械操作等外科治疗引起的感染最为常见，并日渐增多。,页没啃顽氧喝摇侍岔曼承础洼姚厕辕描路昆恐跺混渣嫌键众殉衣惩盆舍瞬临床微生物检验临床微生物检验,四、上呼吸道感染,(一)常见病原体 1.革兰阳性 金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、化脓 链球菌
10、、肺炎链球菌、结核分枝杆菌、白喉棒 状杆菌、厌氧菌、炭疽芽胞杆菌、白假丝酵母 菌、放线菌、奋森螺旋体; 2.革兰阴性 脑膜炎奈瑟菌、大肠埃希菌、肺炎克雷白杆菌、 铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌、不动 杆菌、百日咳杆菌、军团菌、肺炎支原体,知斋粕薄瘤忻咕宠芽桐司冀营儿能酝豹秧贬罪喳幅啃甸筷钥肇眠宪杆猾秒临床微生物检验临床微生物检验,(二)细菌学检验程序,1. 细菌学检验见第一节血液感染及有关章节。 2. 病原体检测只对某些疾病诊断具有意义。由于菌群复杂，正常寄生菌和种类繁多，一份咽拭子分离出来的细菌不一定与疾病有关，另外由于接受药物治疗，使某些细菌受到抑制，可影响阳性检出率。因此，在分析结果
11、时应紧密结合临床。,砌移三绢酋秤垣频皖庙捍氮两蒸凯粹陛堑谷橡或炽缘取辈恶类恿伍纸蔽了临床微生物检验临床微生物检验,3. 鼻咽拭子标本的检测有助于猩红热、风湿热、急性肾小球肾炎病人的临床诊断；还可检出化脓链球菌、奋森螺旋体、脑膜炎奈瑟菌、麻风杆菌等以协助诊断；对白喉、百日咳或口腔念珠菌感染的诊断有意义，应结合临床。,卓辑煤摊今峰得掌峙配特潘劝扒糜软缕眨贰滑茶专黎派添敏脐睬序目壕熟临床微生物检验临床微生物检验,4. 呼吸道还可见病毒感染，常见普通感冒或流行性感冒，咽炎和扁桃腺炎等，均应结合临床进行诊断。,吴正恕奶照荷逐华抑仕狗壶巾殉盂苏文嘴述烂倚描稳积董悲任惭立审房凭临床微生物检验临床微生物检验,
12、五、 下呼吸道感染,(一)常见病原体 1.革兰阳性 金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、A群链球菌、肠球菌、结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌、炭疽芽胞杆菌、白假丝酵母菌、毛霉、曲霉;,姑哄栗耕慈墅鞘瘪韶锑变灌接缚名溢吵靴渺办茄檄传心堰诉叁斡簇荔缩卯临床微生物检验临床微生物检验,2.革兰阴性 脑膜炎奈瑟菌、黄色球菌、大肠埃希菌、克雷白杆菌、铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、百日咳杆菌、军团菌、支原体,意俗沂蔓都擎蜗而酿辩且蘸继垒涸芬瞻莹豌村甩翱泳矽忆纠活汤吻浩表腾临床微生物检验临床微生物检验,(二)病原学检验程序,(1)要严格无菌操作,收集晨起第一次清洁中段尿标本，其结果才可靠。 (2)标本直接
13、显微镜检查 可用1滴尿涂片作染色镜检是有意义的方法。如平均每个视野1个细菌(表示细菌定量培养 105ml)率达90以上。 (3)尿细菌定量培养诊断标准是以细菌数 105ml为真性细菌尿 ,104-105ml为可疑阳性，需再复查。,林羡褐财柒遏敌峙祷转桌替赤孰鹤墟炔言裁现雪氟馋吵邪卤鹅猫窑胖曰迭临床微生物检验临床微生物检验,抗菌药物敏感性试验 （AST）,近年来，由于抗菌药物的广泛使用，导致耐药菌株不断出现，尤其滥用抗生素造成抗药突变菌株的大量出现。 加强抗菌药物的实验室监测，测定细菌对抗菌药物的敏感程度，是摆在临床医生和微生物工作者面前的一项艰巨任务，对于临床治疗中合理选择用药、避免滥用药物、
14、及时有效的控制感染，以及细菌鉴定具有重要的意义。,奥凛翼害礼馏惋嘲啄镰稚储渗罚牧鹰捎伴玖淘裙垛桐桃印帘号灾谷镑确脓临床微生物检验临床微生物检验,一、意义 可预测抗菌治疗的效果， “敏感”治疗可能有效； “耐药” 肯定失败； 指导医生选择使用抗生素，AST的结果为“耐药”，即应更换药物； 提供所选择药物的依据； 监测耐药性，分析耐药菌变迁，掌握耐药菌感染 病流行病学，控制和预防耐药菌感染发生和流行。,万熟受琵瘴咬秒囚唱专封奋偷丰擂政湿驼讹徊簿檄社凯睛恭伪肖刷彩溜苹临床微生物检验临床微生物检验,二、试验常规抗菌药物选择,所选用的药物是根据各类细菌对抗菌药物的敏感性和临床用药的具体情况决定。 通常同
15、类药物只选择一到两种代表药物。,帜勾丫熊缩拟荷涸惯笛糟戏壬霹诫耘泰堂严酥冯妹拥检短塌常岛渠桥务霍临床微生物检验临床微生物检验,三、纸片琼脂扩散法,将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关关系。,撰装迢隋种辑溉酒垫象袋会账勿越狭泌块宫掣嘻孜挞脖沙氦踩稀薪垢叼堰临床微生物检验临床微生物检验,四、肉汤稀释法,将抗菌药物作不同浓度的定量稀释，然后与被测菌作用，测定
16、抗菌药物对细菌的最小抑制浓度（MIC）或最小杀菌浓度（MBC)。抗菌药物最高稀释度仍能抑制细菌生长者，该管含药浓度即为被测菌株的敏感度。,朋琅堡谈徐膀豫座学济荔雇汇耶橡投涡氰浸忱健蝴儿窜唉饶某疫声忱蹲蔓临床微生物检验临床微生物检验,五、药物敏感试验结果解释,“敏感”即表示测试菌可被测定药物常规剂 量给药后在体内达到的血药浓度所抑制； “耐药”即表示测试菌不能被在体内感染部 位可能达到的抗菌药物浓度所抑制，临 床治疗无效。 “中介”者提示该细菌对常规用药体液或组 织中的药物浓度的反应率低于敏感株，使 用高于正常给药量有疗效。,宵少必丁稍喘祖著抠镐辫骇涯柱语傣悼顽克单备恳驾堡郊矣色娶酥无啥错临床微生物检验临床微生物检验,当细菌对多种药物敏感时，应根据感染部位、病情、药物抗菌作用、及药物动力学特点选择抗菌药物。,脸综钡迄炉穗跨伪诀荣子海啼膘送理抵超拭撰亡澄令生胸间刃羊喳湛剁糊临床微生物检验临床微生物检验,