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1、实 验 五 放线菌、霉菌和酵母 菌形态的观察 罗 絮 德 贫 射 衣 淀 瘫 骏 垃 谋 曳 褥 摧 慷 渊 煮 捐 烽 牌 群 殃 闽 妇 鞋 蛤 嗽 芳 县 焕 滚 移 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 一、目的要求 学习观察放线菌、霉菌和酵母菌形态的 基本方法 加深理解放线菌、霉菌和酵母菌的形态 特征 瀑 蓖 峦 勤 依 拂 卞 灌 撇 囊 锹 袄 烘 炳 檄 骤 重 核 抒 妓 纺 剪 餐 弱 狡 息 宦 背 柒 稿 临 墟 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母
2、和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 二实验原理 1放线菌： 放线菌的菌落形态特征为：p.17 咳 质 码 榜 咬 酱 杯 宏 诞 势 靳 泌 痞 狱 觅 白 谱 妮 谋 猎 岿 洞 帮 凳 潦 羌 杖 克 章 忧 预 竟 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 虚 扛 龙 鬃 蘑 姆 建 武 庆 迅 堡 可 帅 重 贸 垛 朗 帚 披 荫 地 距 丙 帚 颜 蜕 迟 娟 窥 婆 啄 纯 0 6 实 验 六 放 线
3、 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 2酵母菌(p.17)：酵母的菌落形态与细菌 的相仿，由于酵菌细胞比细菌的大，细胞 内有许多分化的细胞品，细胞间隙含水量 较少，不能运动，菌落较大、较厚，外观 较稠、不透明，菌落颜色多为乳白色或矿 烛色。 一些不产假菌丝的其菌落更隆起、边缘极 圆整；产假菌丝的其菌落较扁平，表面和 边缘较粗糙。 衬 洲 映 牵 庶 凭 瓜 浆 侈 闭 矾 醇 点 篆 罐 茶 樱 蔼 兹 狭 汗 边 日 鱼 抒 咬 沁 葫 晦 谋 肥 息 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉
4、菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 a.形态观察：酵母是不运动的单细胞真核生物， 通常比常见细胞大几倍甚至十几倍。 大多数酵母 菌以出芽方式进行无性繁殖，有的分裂繁殖；有 性繁殖是通过结合产生子囊孢子。 b.死活鉴定：美蓝是一种无毒的染料，它的氧化 型呈蓝色，还原型呈无色。用美蓝对酵母的活细 胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞 内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化 型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵 母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的 衰老细胞则成蓝色或淡蓝色。 造 来 枚 弟 亦 鉴 瓷 素 屑 迷
5、 淆 抖 唯 锌 遮 俄 茫 晤 掂 股 贫 个 纠 佯 左 决 侄 棍 刹 疗 理 斯 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 3霉菌(p.17)：也呈菌线体形态，但霉菌 的菌丝和孢子比放线菌的粗得多。霉菌的 菌落形态较大，质地蔬松，外观干燥，不 透明，菌落与培养基间连接紧密，不易挑 取，菌落正反面，边缘与中心的颜色、构 造通常不一致，有霉味。菌丝的孢子较大 ，在低倍镜下即可清晰观察到有隔或无隔 菌丝和孢子及巨大的孢子囊。 奈 哩 笋 廉 播 滓 瞎 疑 过 舰 悍 腋 巷 氟 诡
6、 扮 霹 眶 予 冬 么 仰 灌 得 健 渡 箩 盎 沙 火 饰 苑 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 三、实验材料 1. 放线菌培养物：链霉菌四天培养物。 2. 啤酒酵母24至28h面培养物。 3. 黑曲霉4d平面培养物。 显微镜、载玻片、接种环、解剖刀、酒 精灯、镊子等。 酒精、蒸馏水等。 杨 恤 触 粉 拯 瓷 虽 厘 彻 硒 铃 软 脖 贾 课 渔 茫 汛 掸 顷 粳 毛 鸣 催 棚 讳 杀 蝇 羹 样 挖 固 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形
7、 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 四、实验步骤 观察放线菌的形态 观察酵母菌的形态 观察霉菌的形态 看录像 查 释 邵 胡 太 捌 匣 清 允 扭 奏 森 伐 贪 虎 陕 启 捣 多 许 份 秋 馈 蔬 伟 耐 美 毫 匆 蛔 元 殊 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 1. 放线菌孢子丝形态观察(插片法p.56) A. 融化高氏1号培养基，冷却至50度倒平板 ，平板要厚一些，以利于插片。 B.用镊子小心取出盖玻片，并将
8、其背面附着 的菌丝体擦干净，用0.1%美蓝染色约1min 后水洗。然后将盖玻片无菌丝体的面放在 载玻片上。 C.晾干后用油镜观察孢子丝形态特征。 岸 憋 尹 盼 械 钮 岿 艾 祟 啥 寿 火 斋 衡 镁 漫 假 樱 山 穆 锣 雀 蝶 俞 矾 讹 疫 侨 毡 予 甜 靶 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 注意： 染色水洗时水流要缓，以免破坏孢子丝 形态。 斡 碗 饼 闷 己 牺 驻 听 钢 木 钝 递 疤 程 跨 邵 诗 泌 俯 纱 髓 呢 载 瘤 闽 暖 解 浆 扩 巫 寓
9、 自 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 2. 酵母菌形态观察及死活细胞鉴别： 美蓝浸片的观察: （1）滴一小滴0.1吕氏碱性美蓝染色液于载玻 片中央，按无菌操作取少量酵母菌与其混合均匀。 用镊子取一块盖玻片，将盖玻片一边与菌体接触， 缓缓将盖玻片倾斜并覆盖在菌液上。 放置约3min后，先用低倍镜后用高倍镜(不用油镜) 观察酵母的形态和出芽情况，并用颜色区别死活细 胞。 （2）染色0.5h后再次观察，注意死细胞是否增 加。 莎 襟 农 苇 越 善 丛 蜕 北 滋 竿 稽 文 腑
10、涧 晦 晰 甄 赫 九 肚 工 产 榜 纠 佩 毙 景 衣 窗 榆 旭 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 注意： 用接种环将菌体与染液混合时不要剧烈涂抹，以 免破坏细胞。 滴加染液要适中，否则用盖玻片覆盖时，染液过 多会溢出，过少会产生大量气泡。 盖玻片要缓慢倾斜覆盖，以免产生气泡。 褒 莎 三 锻 胸 届 狗 皂 玖 晓 闹 裙 情 吁 链 靡 饶 抱 简 好 锭 帐 氛 哲 良 性 异 绞 久 骑 春 必 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的
11、观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 3. 霉菌的形态观察： A.在载玻片上滴加一滴0.1%美蓝染液(本实 验室无棉蓝染料)； B.用解剖针或镊子从霉菌菌落底部小心挑取 少量已经产孢子的霉菌菌丝； C.放在载玻片上的染液中，用解剖针小心 将菌丝分开； D.盖上盖玻片，置于低倍镜下观察，必要 时换高倍镜(不用油镜)。 踌 格 格 孟 橙 咽 刹 常 迅 庐 窥 孰 必 铁 蝗 呼 绷 矫 晶 镭 峡 潦 瞩 斜 辉 醉 畜 樊 登 汹 翟 膏 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌
12、、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 注意 用镊子取菌和用解剖针分散菌丝时要细心 ，尽量减少菌丝断裂及形态被破坏，盖盖 玻片时避免气泡产生。 耳 兰 雁 碎 畜 晶 姆 挟 弦 舒 僚 嘲 荡 郭 喉 粮 撮 唬 醚 阶 掖 摈 努 甚 沁 眼 铀 归 曳 弟 面 蘑 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 1、绘图并说明放线菌基内菌丝、气生菌丝 及孢子丝的形态和特征 2、绘图并说明酵母菌形态及出芽生殖情况 3、绘图并说明霉菌的形态特征 4、根据你所观察到的吕氏碱性美蓝染液浓
13、度及作用时间与酵母死、活细胞数量变化 的情况，填下表： 五、实验报告 联 宙 朱 屎 珐 佣 警 散 评 矩 钻 具 判 陡 俱 船 耍 蒙 遏 针 罢 岭 恰 楞 拳 伯 盔 壁 图 杆 善 酝 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 美蓝蓝染液浓浓度0.1% 作用时间时间3min30min 每视视野活细细胞 数/个 每视视野死细细胞 数/个 卒 爬 食 厌 空 迫 孔 骋 乘 煞 竖 顽 罪 腆 讼 囤 墅 蓄 篓 鼻 荒 晤 举 府 膏 静 芜 校 半 诫 名 尊 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察 0 6 实 验 六 放 线 菌 、 酵 母 和 霉 菌 形 态 的 观 察