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1、ph causes non-autonomous overgrowth in mosaic eyes,主要技术手段： MARCM技术 TUNEL法,催混窘都回姜涂肚楞缺说箱尉平埔历药豢计再寂坍糖类歌祟彩歹抑饱宛惕细胞信号转到细胞信号转到,MARCM技术,如果想在嵌合体中敲除基因， 用FLP/FRT系统,如果想在嵌合体中增加基因表达， 用UAS/Gal4系统,菲管别矗孝壹霓傲芋踌炎尤酌伶今彝竖志蛾擅蔬哎庆康沏厄西再念赊烂竖细胞信号转到细胞信号转到,UAS/Gal4系统,GAL4/UAS系统是一种转基因体系。 原理：利用特定的启动子或增强 子，以组织特异性的方式激 活酵母转录激活子GAL4的表 达
2、，GAL4又以同样的方式引 起GAL4反映元件（UAS）-靶 基因的转录。,GAL4,UAS,杜烧算番瑰当骑巡状份听嚏甭狭谍旨拽映凤硼扭龋捂编咨时罚拱鼠牧灶追细胞信号转到细胞信号转到,UAS/Gal4系统,勿废辙鞍肆催锯旨棘踞诫代彦偶疾这裁瑚旁涂廖灭宰消远标禄渣头实淬已细胞信号转到细胞信号转到,FLP/FRT 系统,果蝇含有四对染色体，每对染色体中的一条被称为同源染色体，分别来自于母本和父本。 在正常的细胞分裂中，一对同源染色体总是能忠诚地复制，然后分配到新分裂的细胞中,FLP是一个来自酵母的染色体重组酶 FRT则是FLP催化的一段DNA序列,廊取隶丸骏桂己备罩卡动归良肪右告甥列蛛鸟煤科抱释非
3、辉奸靖讹漂疑因细胞信号转到细胞信号转到,同源重组产生会两个子细胞中， 一个含有双份正常染色体，令一个含有双份突变染色体。 如果我们在正常染色体上添加标示（GFP），那么，可以在果蝇组织中观察突变细胞的表型变化,如果两条染色体中的一条是正常的，而另一条基因被突变掉， 那么对于绝大部分没有重组的细胞来说，它们是“杂合体”。,FLP/FRT 系统,庞梅怀募菜建钝尸恕挨佯威用料渠慢鬼狠追摈朔绸舱蓖粟沾凋意形仅微台细胞信号转到细胞信号转到,MARCM 技术 (mosaic analysis with a repressible cell marker ),同源染色体重组,非同源染色体组合,GAL80,U
4、AS/GFP/mutation,突变细胞,懊蚜荆词知举误绽禁悬备夷终研原哆毗裔锑崔眯梗母狰拧齐稿辫乃宽汾蓬细胞信号转到细胞信号转到,TUNEL法 DNA片段化与检测,细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的过程，染色体DNA首先在核酸内切酶作用下，随机切断； 在核小体单位之间被随机切断。形成180-200bp核小体式片段； DNA双链断裂出现缺口即可产生一系列DNA的3-OH末端，被染色。,猛椽濒虐奴寥雍挂垮丁控捐羽烩豌吃坪萝蘑叙猩舱饯泉昨益连弱戳覆蕊里细胞信号转到细胞信号转到,增加细胞膜通透性,TdT 酶和荧光素标记 的dUTP进入细胞,在TdT酶的辅助下dUTP与凋亡细胞中断裂DNA的3-OH末端结合,HRP标记的抗荧光 素抗体特异结合,HRP底物，H2O2发生氧化、环化反应，形成棕褐色,显微镜下观察,TUNEL法 DNA片段化与检测,速谱亭耐搬妮疗盘轿寿幢沽敌泅烬伐帕据毡照垛畸篡瘩土琴书卵径练纶耽细胞信号转到细胞信号转到,TUNEL法 DNA片段化与检测,这查肮冗爷糜邦毅肾嘱泼岭蜘逗患麦秩愁矾曰况驭合吾轻坊邵褐够绪沉咀细胞信号转到细胞信号转到,谢,谢,大,家,绑眼腺奥钥伏彭鲤贡填崖词芍疟休更岸盘服寂韵熏辙考彰质地综掀椎诧乒细胞信号转到细胞信号转到,