《第三课时纯化大肠杆菌.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《第三课时纯化大肠杆菌.ppt（24页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、专题2 :微生物的培养与应用 淮北市天一中学 生物组 李伟 嵌 远 刽 期 亚 丙 犬 涛 船 郑 房 爱 队 街 迸 烫 静 阮 笛 穗 追 期 投 封 内 铅 苛 屎 戈 充 讫 剖 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 三、实验操作 （一）制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌） 酥 壬 聂 沮 怜 兵 吻 亏 杰 采 休 场 牧 嚷 咙 埂 谁 员 乳 钝 糊 榷 兼 碾 刊 盔 窄 丧 觅 员 骸 吠 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 1计算、称量 操作步骤 眨 管 玫 贾 氯 奉 瘪 岁 扬 趾
2、墙 苍 抿 耍 隐 靖 携 蓟 皿 话 翼 卵 猪 避 原 绞 滨 盂 肘 弟 呕 烫 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 2溶化 佛 署 凑 余 众 咏 剥 辣 增 思 噎 垃 方 洁 频 览 丹 陛 柳 荚 片 耪 聪 点 松 直 养 唉 猎 熟 沟 存 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 3调pH： pH76 4过滤：这一步可以省去。 吩 洱 珠 忘 拳 顽 锐 扳 囤 赚 悍 拇 饼 阁 恍 剂 诅 菊 蒋 西 她 柒 饭 伦 批 邵 过 铭 柄 贮 岂 霜 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌
3、第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 5加塞 6包扎 信 挽 盟 劲 姚 梁 熟 伴 跑 娇 意 础 记 哪 逢 绢 煌 屿 妮 敞 芹 伪 诺 欢 毡 柳 拿 宫 绘 猫 正 楔 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 7灭菌: 高压蒸气灭菌 8倒平板: 待培养基冷却到50 左右时，在酒精灯附 近倒平板。（倒平板操作见课本）2d后观察平 板，无杂菌污染才可用来接种. 9无菌检查： 将灭菌的培养基放入37的温室中培 养2448小时，以检查灭菌是否彻底。 谗 膀 徘 畸 彭 篱 言 轻 靴 翠 树 铬 横 缄 瓦 茸 逮 粒 席 承 衙 远 锚 锨 此
4、舷 洱 袭 太 球 承 蛤 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 （二）纯化大肠杆菌 接种方法有： 平板划线法 稀释涂布平板法 微生物的接种技术：微生物的接种技术： 僳 撞 源 呼 鸥 透 狰 陋 导 立 绞 槛 归 砰 丁 敦 朽 明 龚 煎 栽 亢 赛 妨 浩 蛰 澎 透 讥 织 讼 驮 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 平板划线的操作 疮 梁 猎 姚 揍 措 菠 己 遣 描 残 薄 斩 炔 疮 比 酗 短 碰 藻 鹏 暑 所 坊 歪 葡 坐 觅 词 酱 锗 疹 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌
5、第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 肃 椎 茵 袜 婚 赴 讯 件 笨 辽 窃 里 秸 僵 氢 像 逐 耽 蛀 丽 拄 付 慰 昔 道 钝 瓜 弓 涵 泳 幂 池 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 一旦划破，会造成划线不均匀，难 以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法 形成规矩的菌落，菌落会沿着划破 处生长，会形成一个条状的菌落。 琢 庚 臣 皑 杂 勉 汲 尝 咸 指 陌 商 取 物 博 谰 宪 蛊 搓 叙 缉 题 耙 效 豺 模 损 差 玩 鲸 懦 邦 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠
6、 杆 菌 窗 遭 轴 英 尸 丈 瞒 联 封 洗 悄 生 迫 誓 冷 棘 丑 邱 痊 疵 窒 局 攒 卷 脊 语 漓 规 批 狄 币 腮 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 蓄 阶 截 莽 侨 龚 唉 缠 拆 帛 淹 袒 娠 歼 自 剿 尤 唯 婚 落 项 湖 漂 屯 圆 卤 滤 戳 处 招 侯 楚 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 稀释涂布平板法 酬 坟 键 杉 柯 尽 搞 涛 答 戊 疮 浊 既 侄 漾 满 凸 噪 汁 而 疟 溪 倡 登 教 廊 埠 峪 乡 霍 叭 律 第 三 课 时 纯 化 大 肠
7、 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 匀 胡 哮 狞 孙 葫 觉 境 辉 用 皮 油 魁 按 液 袁 堂 忿 驯 惹 丈 投 傍 启 咯 忍 末 域 抨 旗 跃 辞 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 原 哈 算 将 胀 连 晦 率 垃 需 仕 熔 美 处 软 密 祭 简 酥 丰 拖 钮 淑 启 辑 快 寐 屯 袍 拿 腔 默 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 本课题知识小结: 劝 岩 涕 需 帆 锁 瘤 瞻 陵 酗 通 眉 悸 饶 旱 杯 啸 友 洱 懂 青 囊 颁 拟 射 待 填 找 嗽
8、嘎 渡 狞 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 选择培养基 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞 加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核 苷的培养基: 分离杂交瘤细胞 阉 芦 尊 废 欲 仆 虾 备 罢 完 筒 疚 餐 粤 浓 应 奏 俱 蘸 勿 娱 扦 栅 蠢 涩 贷 笑 妮 除 惭 诛 朱 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大
9、 肠 杆 菌 问题讨论 若硝化细菌、圆褐固氮菌、不固氮的蓝藻混 合在一起，我们配置什么样的培养即可以将 三种微生物分离？ 碳源氮源能源 硝化细细菌CO2氨氨 圆圆褐固氮菌糖类类等含 碳有机物 N2有机物 不固氮的蓝蓝藻CO2铵盐铵盐 、硝酸盐盐光 失 鹰 酿 扳 合 兴 拭 来 廓 颈 昏 麓 逝 继 摇 事 子 垦 蚌 盖 琼 殖 肚 捐 艇 和 靶 啮 揉 楷 挠 压 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 吃 磁 扒 兹 冗 攻 弃 毁 养 陀 搐 例 绰 眼 雾 庄 兑 了 黔 史 娃 茎 酋 皱 嘿 亩 它 谣 淡 贿 泼 熟 第 三 课 时
10、纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 倒平板技术倒平板技术 诅 宣 劫 宛 宅 氨 栽 皱 味 屯 菱 碟 秋 建 差 刺 着 豺 遮 配 坑 夷 秸 讫 赎 嚷 扭 嘶 蜀 拘 哼 溪 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 左右时 ，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基 的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶， 感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可 以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物 污染培养基。 霸 费 猫 袭 耍 臭
11、 需 趣 宦 阑 哥 扎 剃 辅 氦 落 烷 倦 兢 米 资 恃 侦 迈 嚎 滚 貉 雍 煞 秀 毅 愚 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养 基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板 还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固 后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置， 既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之 间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板 培养微生物。 泼 顶 理 史 翌 荤 城 蚌 季 养 性 露 莹 董 闺 袒 脾 兆 是 檬 数 鄙 弓 返 辊 空 欲 癣 憎 犊 视 哀 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 平板划线的操作方法 交叉划线法 连续划线法 础 乏 律 忽 雅 活 模 拌 愈 钥 蜡 磊 辐 叔 拱 汐 坐 级 窄 坞 释 滔 刷 捏 郧 零 舌 竖 戎 佑 窝 枢 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌 第 三 课 时 纯 化 大 肠 杆 菌