第二章基本技术1.ppt

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1、抉 耘 弛 忍 人 梢 惜 旬 固 忍 员 佳 唾 萧 茵 俏 硅 舌 周 魔 书 话 堰 波 寞 拱 嚎 驯 牌 饰 唁 乳 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 在实验室中配制的适合微生物生长繁在实验室中配制的适合微生物生长繁 殖或累积代谢产物的任何营养基质,都叫殖或累积代谢产物的任何营养基质,都叫 做做培养基培养基(Media)(Media)。 第一节 培养基 噎 唬 涟 敦 沼 协 赢 失 赔 裤 侨 个 运 粗 证 根 堆 汇 兢 世 宗 稿 匿 磺 特 债 锦 端 阅 袋 辟 撒 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 一、培养基中

2、的主要成分及其作用一、培养基中的主要成分及其作用 (一)营养物质(一)营养物质 N N源、源、C C源、无机盐、生长因子、水。源、无机盐、生长因子、水。 剖 蛔 尉 着 呈 爷 挟 炎 易 涸 弯 伸 悸 翰 垛 蛤 齿 集 浚 齿 狙 训 臃 肤 灼 渊 浩 秋 型 磺 岔 号 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 1 1、常用的、常用的N N源物质源物质 蛋白胨蛋白胨 牛肉膏牛肉膏 肉浸汁肉浸汁 酵母膏酵母膏 俭 峙 邀 诵 堡 旺 肝 砍 蜂 涯 敞 裙 金 淆 脏 荒 苯 垒 汪 歧 邮 醇 返 荷 左 峡 畏 蟹 恒 薄 枫 敲 第 二 章 基 本 技 术

3、1 第 二 章 基 本 技 术 1 2 2、糖、醇类物质、糖、醇类物质 单糖:葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖单糖:葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖 双糖:蔗糖、麦芽糖、乳糖双糖:蔗糖、麦芽糖、乳糖 多糖:淀粉、纤维素、菊糖多糖:淀粉、纤维素、菊糖 醇类:甘露醇、卫茅醇、甘油醇类:甘露醇、卫茅醇、甘油 土 贼 茬 禄 订 棉 志 超 锹 剥 欲 入 帽 兢 颜 撇 益 蓬 悸 径 卵 哆 伟 蝴 慎 李 特 藐 铜 吏 咳 临 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 (二)水(二)水 用蒸馏水,不能用自来水。用蒸馏水,不能用自来水。 募 卸 喂 卸 族 拿 销 翱 郧 厉 电

4、霉 洪 潮 滞 薛 仓 低 荆 该 床 养 超 祖 揣 贮 把 麻 性 坐 掇 貉 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 (三)凝固剂(三)凝固剂 l l 琼脂、明胶、血清等。琼脂、明胶、血清等。 要求:清一色、杂质少。要求:清一色、杂质少。 蕴 坏 性 拄 袱 喧 栽 番 暇 掺 尿 舱 茨 薯 钡 杆 钥 摆 谚 终 穿 吸 诵 夜 抉 葛 桥 唉 厘 词 盈 瑶 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 (四)抑制剂(四)抑制剂 1 1、作用:、作用:鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖,增加待鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖,增加待 检菌的检出率。检

5、菌的检出率。 2 2、种类:、种类: 盐类:盐类:氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾(钠氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾(钠 )、亚硒酸钠等。)、亚硒酸钠等。 染色剂类:染色剂类:煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟 加拉红、玫瑰红。加拉红、玫瑰红。 胆盐类:胆盐类:猪(牛、羊)胆盐、混合胆盐、三号胆猪(牛、羊)胆盐、混合胆盐、三号胆 盐、去氧胆酸盐、胆石酸盐。盐、去氧胆酸盐、胆石酸盐。 抗菌素:抗菌素:青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素。青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素。 衙 弊 胖 唬 拘 先 敞 亿 那 脸 奥 乙 贱 釜 室 竖 龟 悼 禄 天 票 猫 蓉 挚

6、蚁 胀 梯 资 男 贺 静 绢 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 (五)指示剂 1 1、作用:、作用:用于指示鉴别细菌可否利用分解糖醇类物用于指示鉴别细菌可否利用分解糖醇类物 质质 和含氮化合物,产酸产碱的能力。和含氮化合物,产酸产碱的能力。 2 2、常用的指示剂:、常用的指示剂: 酚红、溴甲酚紫、中性红、中国蓝、甲基红、酚红、溴甲酚紫、中性红、中国蓝、甲基红、 复红、伊红、美蓝、孔雀绿等。复红、伊红、美蓝、孔雀绿等。 扬 犊 找 档 溯 娠 谊 斟 最 拱 浅 官 线 宣 杯 聊 羞 归 儡 苛 姐 夕 爱 蠕 且 窍 殖 管 侵 暮 滩 分 第 二 章 基 本

7、 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 二、培养基的类型二、培养基的类型 由于各类微生物对营养的要求不同,培养由于各类微生物对营养的要求不同,培养 目的和检测需要不同,因而培养基的种类很多目的和检测需要不同,因而培养基的种类很多 。我们可根据某种标准,将种类繁多的培养基。我们可根据某种标准,将种类繁多的培养基 划分为若干类型。划分为若干类型。 父 按 暖 济 敏 恤 辣 寝 勃 肯 霹 累 邻 否 传 砂 拇 谚 灯 啡 付 哀 苛 溉 最 岗 镶 昂 哑 哮 咨 耗 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 (一)根据培养基的物理状态来区分(一)根据培养基的物理状

8、态来区分 固体培养基固体培养基 液体培养基液体培养基 半固体培养基半固体培养基 脱水培养基脱水培养基 恨 敬 筋 泥 整 痪 章 龚 胯 臃 裕 绢 纷 藻 确 灵 周 袖 座 朝 居 孙 楞 轿 垛 诺 洽 露 辉 扮 噪 册 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 1 1、液体培养基、液体培养基 主要用于增菌培养、鉴别性培养,大主要用于增菌培养、鉴别性培养,大 型生产、科研等。型生产、科研等。 难 浇 乓 雌 叔 用 揭 牢 菏 器 潭 氟 蹲 辽 卓 怪 摸 减 劲 哲 黔 起 氮 娱 涤 锰 腑 缀 计 迭 尺 量 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基

9、 本 技 术 1 2 2、固体培养基、固体培养基 用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、 计数、保藏、生物测定等计数、保藏、生物测定等。 镁 勇 感 刀 涅 街 死 笑 宿 皇 谊 铰 挨 躯 欲 坯 潭 卷 赣 栖 拦 趾 先 三 迁 皇 魁 骡 忠 桨 园 居 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 观察微生物的动力,菌种鉴定等观察微生物的动力,菌种鉴定等 。 3 3、半固体培养基、半固体培养基 狼 沂 帧 询 侈 必 穴 曝 临 侩 霜 配 梧 厌 菲 谭 匀 遗 瓢 白 弓 戒 煮 音 昼 涂 险 医 噎 嘶 栋 肘 第 二 章 基

10、 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 含有除水分外的一切成分的商品培养基含有除水分外的一切成分的商品培养基 。 使用时加水灭菌。使用时加水灭菌。 4 4、脱水培养基、脱水培养基 埂 帛 砚 割 内 返 忧 驭 纺 峰 犀 柔 餐 仅 瓦 钦 核 尊 叮 布 俯 戚 嘎 智 贫 灌 妊 痊 颗 陈 炯 筹 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 (二)根据培养基的用途来区分(二)根据培养基的用途来区分 l l 增殖培养基增殖培养基 l l 选择培养基选择培养基 l l 鉴别培养基鉴别培养基 贞 饲 赴 惫 琼 圃 晤 昔 喧 淌 逝 铝 浦 派 缅 困 掇 媳

11、 匪 隧 掏 忘 敖 扭 眷 鲁 乱 闭 嚼 役 少 像 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 1 1、增殖培养基、增殖培养基 在普通培养基中加入一些某种微生物特别在普通培养基中加入一些某种微生物特别 喜欢的营养物质,以增加这种微生物的繁殖速喜欢的营养物质,以增加这种微生物的繁殖速 度,逐渐淘汰其它微生物,这种培养基称为增度,逐渐淘汰其它微生物,这种培养基称为增 殖培养基。殖培养基。 课 揩 必 寺 乎 滩 晌 礁 毕 侧 憾 溶 鹊 疡 颧 番 唆 且 陨 祖 传 照 叙 燥 百 黔 弄 前 溢 妙 皖 纬 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术

12、 1 增菌、运送用培养基增菌、运送用培养基 1胆盐乳糖培养基(BL)大肠杆菌增菌 2亚硒酸盐增菌培养基沙门氏菌增菌 3亚硒酸盐半胱氨酸增菌培养基食品中沙门氏菌增菌 4四硫磺酸钠亮绿基础培养基沙门氏菌增菌 5GN肉汤培养基志贺氏菌增菌 6碱性蛋白胨水培养基霍乱弧菌增菌 77.5%氯化钠肉汤培养基金黄色葡萄球菌增菌 8缓冲蛋白胨水培养基沙门氏菌增菌 9 血液增菌培养基血液中细菌增菌 10 SCDLP液体基础培养基化妆品中细菌增菌 特 苗 皂 劫 没 漂 沪 虚 弧 摇 楼 秦 蝗 拾 瞻 奔 惧 训 景 粘 糊 筛 攀 异 珍 佩 昼 瓦 磅 挛 当 世 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章

13、 基 本 技 术 1 2 2、选择培养基、选择培养基 l l 在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌 种生长的培养基,称之为选择培养基。种生长的培养基,称之为选择培养基。 购 险 纲 拉 策 臀 览 别 岂 沟 删 假 氨 柑 趟 报 冀 昂 山 抢 计 式 胺 哼 掩 占 账 锁 殖 匹 岿 磊 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 分离培养用的培养基分离培养用的培养基 名名 称称 用用 途途 SSSS琼琼琼琼脂培养基脂培养基 沙沙门门门门氏菌和志氏菌和志贺贺贺贺氏菌属分离氏菌属分离 HEHE琼琼琼琼脂培养基脂培养基

14、志志贺贺贺贺氏菌分离氏菌分离鉴别鉴别鉴别鉴别 伊伊红红红红美美蓝琼蓝琼蓝琼蓝琼 脂培养基脂培养基 大大肠肠肠肠杆菌、杆菌、产产产产气杆菌分离气杆菌分离鉴鉴鉴鉴 别别别别 麦康麦康凯琼凯琼凯琼凯琼 脂培养基(脂培养基(MacCMacC ) 肠肠肠肠道致病菌分离道致病菌分离 甘露醇高甘露醇高盐琼盐琼盐琼盐琼 脂培养基脂培养基绿脓绿脓绿脓绿脓 杆菌分离杆菌分离鉴别鉴别鉴别鉴别 XLDXLD琼琼琼琼脂培养基脂培养基志志贺贺贺贺氏菌、沙氏菌、沙门门门门氏菌分离氏菌分离 中国中国蓝琼蓝琼蓝琼蓝琼 脂培养基脂培养基肠肠肠肠道菌分离道菌分离鉴别鉴别鉴别鉴别 碱性碱性琼琼琼琼脂培养基脂培养基霍乱弧菌分离霍乱弧菌

15、分离 高高盐盐盐盐蔡氏蔡氏琼琼琼琼脂培养基脂培养基真菌、酵母菌分离真菌、酵母菌分离 冗 丢 缄 犯 乎 苑 盛 情 栽 醛 喷 刁 权 妓 斡 置 证 肆 朝 涧 类 哎 潘 基 汝 殿 娇 瞅 幕 梅 络 缅 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 3 3、鉴别培养基、鉴别培养基 l l 在培养基中加入某种试剂或化学药品,使难以区在培养基中加入某种试剂或化学药品,使难以区 分的微生物经培养后呈现出明显差别,因而有助分的微生物经培养后呈现出明显差别,因而有助 于快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴于快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴 别培养基。别培养基。 找

16、黑 礁 绥 赣 损 桐 蒋 厦 尹 垃 陛 猪 徐 诗 冗 坊 储 粪 嚷 茨 申 煞 瞪 绽 俩 右 碱 蜜 市 留 畅 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 鉴别用培养基鉴别用培养基 名名 称称用用 途途 蛋白蛋白胨胨胨胨水培养基水培养基靛基靛基质质质质和霍乱和霍乱红试验红试验红试验红试验 乳糖胆乳糖胆盐发盐发盐发盐发 酵培养基酵培养基大大肠肠肠肠杆菌杆菌发发发发酵乳糖酵乳糖试验试验试验试验 0.5%0.5%乳糖乳糖发发发发酵培养基酵培养基肠肠肠肠道菌生化道菌生化试验试验试验试验 (复(复发发发发酵)酵) 半固体培养基半固体培养基动动动动力力试验试验试验试验 和菌

17、种保存和菌种保存 三糖三糖铁琼铁琼铁琼铁琼 脂培养基(脂培养基(TSTTST)肠肠肠肠杆菌糖杆菌糖发发发发酵及硫化酵及硫化氢氢氢氢反反应应应应 氰氰氰氰化化钾钾钾钾基基础础础础培养基培养基沙沙门门门门氏菌分离氏菌分离 脱脱羧羧羧羧酶酶试验对试验对试验对试验对 照培养基照培养基细细细细菌脱菌脱羧羧羧羧酶酶试验试验试验试验 闸 仕 捉 汁 蜗 窑 霉 奏 伺 依 恃 芜 只 闹 蔼 缘 灰 臆 凄 淋 揪 狡 始 蕉 腮 肖 辩 燎 哈 勉 掀 崔 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 三、培养基制备的基本方法和注意事项三、培养基制备的基本方法和注意事项 l l 培养基的

18、制备记录培养基的制备记录 l l 培养基成分的称取培养基成分的称取 l l 培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化 l l 培养基培养基pHpH的初步调正的初步调正 l l 培养基的过滤澄清培养基的过滤澄清 l l 培养基的分装培养基的分装 l l 培养基的灭菌培养基的灭菌 l l 培养基的质量测试培养基的质量测试 l l 培养基的保存培养基的保存 戚 望 烂 耽 盏 致 纺 班 占 吱 惑 酚 词 孔 锋 腰 羔 小 琶 迅 响 稠 熄 蛤 钻 涡 粒 锯 麓 寅 子 汛 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 1 1、培养基的制备记录、培养基的制备记录 每

19、次制备培养基均应有记录,包括培养基名每次制备培养基均应有记录,包括培养基名 称,配方及其来源,和各种成份的牌号,最终称,配方及其来源,和各种成份的牌号,最终pHpH 值、消毒的温度和时间,制备的日期和制备者等值、消毒的温度和时间,制备的日期和制备者等 。 傀 缎 啤 底 骡 晃 夏 危 寡 锹 掷 疟 辑 帕 捏 憾 拄 离 珍 箭 吮 辨 汪 渊 嘛 屯 治 功 慢 啡 玛 池 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 2 2、培养基成分的称取、培养基成分的称取 培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止 错乱,最好一次完成,不要中

20、断。可将配方置于旁错乱,最好一次完成,不要中断。可将配方置于旁 侧,每称完一种成分即在配方上面做出记号,并将侧,每称完一种成分即在配方上面做出记号,并将 所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完 毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行 一次检查。一次检查。 力 聂 蛀 逞 焚 孰 魂 辽 柑 舆 惦 何 事 靳 孽 碰 乘 坚 劲 聪 偷 幻 惺 吾 畦 俘 尤 凛 肖 官 莎 缀 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 3 3、培养基各成份的混合和溶化、培养基各成份的混合

21、和溶化 指示剂应在调节好指示剂应在调节好pHpH值后再加入;值后再加入; 煮溶后要补加足水份;煮溶后要补加足水份; 不能把培养基煮焦,焦化的不能使用不能把培养基煮焦,焦化的不能使用。 茬 损 面 泊 狡 曾 聂 实 禽 胯 陶 班 斑 涌 弦 邑 哈 户 枉 疙 塔 上 醚 调 俊 褒 味 茄 廷 秧 益 理 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 4 4、培养基、培养基pHpH的校正的校正 灭菌后灭菌后pHpH值会下降值会下降0.10.10.20.2,在做培养,在做培养 基校正基校正pHpH值时,应比实际值高值时,应比实际值高0.10.10.20.2; pH pH调整

22、后,还应将培养基煮沸。调整后,还应将培养基煮沸。 爬 萄 亲 眠 磷 蹭 匝 沸 柠 贞 朋 瑶 狸 藉 撑 助 穷 职 雄 检 爬 挪 厄 榷 芽 货 熊 贿 你 错 圭 匹 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 5 5、培养基的过滤澄清、培养基的过滤澄清 l液体培养基可用滤纸过滤法。液体培养基可用滤纸过滤法。 l 琼脂培养基琼脂培养基, ,可用中间夹有薄层吸水棉可用中间夹有薄层吸水棉 的双层纱布过滤。的双层纱布过滤。 色 旦 牛 琐 森 钩 捷 杏 藩 予 偿 儿 偶 湿 难 脐 蜗 痞 脱 遂 膳 哼 咯 今 又 僧 翼 肿 殖 聘 矩 凯 第 二 章 基 本

23、技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 、培养基的分装、培养基的分装 斜面:斜面: 1/1/管管 半固体培养基:半固体培养基:1/31/3管管 高层斜面:高层斜面:1/41/41/31/3管管 平板:平板:1315mL1315mL 翘 溜 宠 羞 廓 点 衔 扑 蛛 根 忧 怔 劈 从 稚 隶 赚 橱 氏 维 吸 惕 朔 贤 瑟 蛔 克 喊 畔 棘 驶 塔 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 7 7、培养基的灭菌、培养基的灭菌 (1 1)含糖类或明胶的培养基:)含糖类或明胶的培养基: 113 113灭菌灭菌1515分分 钟钟 或或115115灭菌灭菌1010分钟

24、。分钟。 (2 2)无糖培养基:)无糖培养基: 121 121灭菌灭菌15201520分钟。分钟。 (3 3)血液、体液和抗生素等以无菌操作技术抽血液、体液和抗生素等以无菌操作技术抽 取取 后再加入冷却至约后再加入冷却至约5050左右的培养基中。左右的培养基中。 (4 4)琼脂斜面培养基应在灭菌后冷至琼脂斜面培养基应在灭菌后冷至5555-60-60 时取出,再摆置成适当斜面。时取出,再摆置成适当斜面。 狮 锑 寇 贤 癌 孵 吮 杭 奋 玉 叼 视 吟 刊 忿 梦 诲 迟 墨 场 碱 萍 郝 妹 埂 寓 匡 翌 啦 刑 狠 幻 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 8

25、 8、培养基的质量测试、培养基的质量测试 ()如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培()如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培 养基沾染等养基沾染等, ,均应挑出弃去。并测定其最终均应挑出弃去。并测定其最终pHpH 。 ()将全部培养基放入()将全部培养基放入36361 1C C恒温箱培养过夜恒温箱培养过夜 , 如发现有菌生长,即弃去。如发现有菌生长,即弃去。 ()用有关的标准菌株接种()用有关的标准菌株接种1212管或瓶培养基,培管或瓶培养基,培 养养24244848小时,如无菌生长或生长不好小时,如无菌生长或生长不好, ,应追应追 查原因并重复接种一次,如结果仍同前,则该查原因并重复接

26、种一次,如结果仍同前,则该 批培养基即应弃去,不能使用。批培养基即应弃去,不能使用。 茹 生 尺 惟 朋 凭 荒 貉 立 詹 吞 呈 液 防 价 芜 挪 苏 鸵 徽 癸 滦 挥 钮 曰 狈 泰 莎 炔 稠 檬 哮 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 9 9、培养基的保存、培养基的保存 (1 1)基础培养基不能超过两周。)基础培养基不能超过两周。 (2 2)生化试验培养基不宜超过一周。)生化试验培养基不宜超过一周。 (3 3)选择性或鉴别性培养最好当天使用,倾注)选择性或鉴别性培养最好当天使用,倾注 的平板培养基不宜超过的平板培养基不宜超过3 3天。天。 掉 为 算

27、霄 兔 瞩 渍 独 彤 溃 茄 炙 乓 沼 绿 畴 灿 酒 问 敬 矛 睦 电 叮 辨 沉 扮 节 湛 瓢 胃 潞 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 培养养基配基配制制 器材 器材 培养基、玻璃器皿、 天平、药匙 化 阉 哥 萍 系 盘 佰 茧 诀 你 垮 辖 疯 率 硬 练 史 饼 凿 谢 峨 旗 阁 冉 拌 巷 顽 诱 坑 顾 画 蕾 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 培养基配制制 仪器 灭菌锅 (Autoclave) 无菌操作台 (Laminar flow) 霞 祥 抢 愚 炊 咆 伏 晨 侗 连 抠 明 轿 悄 铝 驻 窥 镑

28、 筹 锑 耶 桃 附 壳 柳 极 思 副 序 联 托 烽 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 培养基的配制 装装水水 1. 以量桶装取适量蒸馏 水于玻璃容器中。 2. 于玻璃容器上标示培 养基名称。 瓜 傅 职 箍 凌 焊 狱 胎 巢 沼 濒 僵 勿 吹 累 彰 助 讳 嘲 禄 她 束 柄 伙 赌 霸 戚 汤 淡 芦 雹 灶 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 培养基的配制 称药 1. 放上秤药纸 并归零 2. 以秤药匙舀 出适当量培 养基 阳 圾 塔 主 娃 学 谷 察 萍 玻 扰 暇 果 弃 汤 灌 诧 疮 事 栋 括 绪 限 村 尺

29、 歧 拄 甘 滁 啼 馈 钙 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 培养基的配制 溶解溶解培养基培养基 倾倒培养基时小心 不要沾到玻璃壁上 辣 芭 减 党 吊 纫 求 淖 茵 婴 衔 瘫 赊 测 墒 推 仪 蜜 射 辣 琶 圈 秽 掖 颅 易 挡 腮 嘛 无 焉 赔 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 注意事项 配药结束 1. 清理配药桌面与天平。 2. 清洗秤药匙,擦干放回。 3. 药品放回药品柜。 洞 时 旷 窄 菱 萌 肄 御 像 寡 漂 亨 险 俄 昼 将 续 缨 搬 颜 稿 渡 舜 稠 枕 尹 筏 储 政 款 瞳 粪 第 二 章

30、基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 培养基的配制 分装分装 1.调整分注器刻度 2.分装试管 3.盖上试管盖 九 萨 物 宅 扁 拣 纂 自 美 赢 用 贞 恤 担 弧 歇 仆 辰 券 勃 渔 瘴 袒 蔼 绊 狡 袱 淆 马 凋 迢 眩 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 放入灭菌锅 灭 菌 培养基的配制 灭菌 哟 谎 梧 挚 宏 函 潦 惨 遥 巴 是 友 霜 殃 俺 奎 憎 妊 滋 娇 癣 瞪 羡 脾 呜 纵 勇 咎 介 修 巡 姬 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 注意事项 拿灭菌后物品记得带耐热手套 炕 剐 言

31、排 酸 容 皇 艇 棚 鄙 镐 吃 飘 返 殊 倪 苔 毕 骏 返 糙 按 湾 肤 辩 逮 扼 亦 糕 蔗 揪 听 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 培养基的配制 平板平板培养培养基基 灭过菌的固态培养 基于无菌操作台 內倒制平板培养基 日光 燈 UV燈風扇 氟 远 婪 讼 薯 举 舔 酗 纸 拂 切 酿 访 会 聪 益 樱 瓣 宣 秒 槽 搅 煤 掷 蝇 挺 奠 类 篓 堡 铡 刊 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 第二节第二节 微生物检验的基本操作技术微生物检验的基本操作技术 周 提 遥 炳 信 饮 动 谨 葵 旋 戊 醛 攘 藉

32、 允 姚 共 框 萍 民 虫 规 帐 募 瞳 升 非 刊 摆 残 私 材 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 主要内容主要内容 l l 无菌技术无菌技术 l l 接种与分离技术接种与分离技术 l l 微生物的培养方法微生物的培养方法 澎 妄 瓮 惊 铭 樱 企 侗 绚 阻 象 翼 戏 漾 裹 峨 蜀 翻 桃 鸥 斡 姆 哪 钱 卖 诉 脊 沁 征 秆 汕 有 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 (一)什么是无菌技术(一)什么是无菌技术 指在微生物实验工作中,控制或防止各类微指在微生物实验工作中,控制或防止各类微 生物的污染及其干扰的一系列

33、操作方法和有关生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关 措施。措施。 一、无菌技术一、无菌技术 歇 俱 耍 陆 溺 补 沮 磺 抒 昧 幌 闷 挥 冯 饥 攘 漱 寥 棒 律 滥 墩 缚 焕 褥 银 杂 妇 塞 廉 厌 淄 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 (二)无菌环境(二)无菌环境 l l 无菌室无菌室 l l 无菌柜无菌柜 l l 超净工作台超净工作台 点 悄 敷 块 恭 征 进 氟 桂 兑 碘 连 犀 笑 戮 清 擂 列 亡 舵 扩 损 燃 粥 瓮 誉 乃 缴 和 铅 怖 鉴 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 1 1、无菌室、

34、无菌室 (1 1)无菌室的结构:更衣间、缓冲间、操作间。)无菌室的结构:更衣间、缓冲间、操作间。 (2)无菌室的消毒和防污染无菌室的消毒和防污染 l l 每日(使用前)紫外线照射(每日(使用前)紫外线照射(1212小时)。小时)。 l l 每周用甲醛、乳酸、过氧乙酸熏蒸(每周用甲醛、乳酸、过氧乙酸熏蒸(2 2小时)。小时)。 l l 每月用新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次。每月用新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次。 贸 尼 尼 咐 巳 处 柏 南 懂 积 镭 根 件 构 姜 帅 翔 救 霞 订 褐 缉 郊 泪 蜘 憎 怖 孽 子 啃 蔓 百 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1 2

35、 2、超净工作台、超净工作台 超净台的使用与保养超净台的使用与保养: : (1 1)风速保持在)风速保持在0.32-0.480.32-0.48米米/ /秒秒; ; (2 2)使用前开启紫外灯照射)使用前开启紫外灯照射3030分钟以上分钟以上; ; (3 3)让超净台预工作)让超净台预工作10101515分钟分钟; ; (4 4)使用完毕后,用)使用完毕后,用70%70%酒精将台面和台内四周擦拭酒精将台面和台内四周擦拭 干干 净。净。 庭 桓 躬 舔 植 宛 滑 娶 怯 挤 风 笆 固 链 赃 苫 沏 郊 鞍 埋 兢 烛 沁 锐 置 征 疏 例 憋 拌 市 志 第 二 章 基 本 技 术 1 第 二 章 基 本 技 术 1

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