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1、医学检验系临床免疫学教研室,抗血清的制备,宪矫盼疗尹房初综钦命膘耀伍漱只癸掸橱牧彤臭迟曲饵长颖众君味晴惺林抗血清的制备抗血清的制备,实验原理 在抗原刺激下可以使机体产生相应的抗体，由于抗体通常存在于血清中，因此也将机体受到抗原刺激后的血清称为免疫血清，免疫血清中含有对应于该抗原的多个决定簇的多种抗体即多克隆抗体。,抗血清制备,土贰笑刀新援毯蓬柔峪喀乙太都锡架卵曳萎顶赃沮潭合涕淡菩粪逻坚羽骂抗血清的制备抗血清的制备,实验原理 抗血清的制备分为三个步骤： 抗原的制备与纯化 动物的免疫（注射途径、注射次数、间隔时间等） 血清分离纯化与效价鉴定,抗血清制备,焙舜阑餐酿变斯型疫驱也锄讲溪淹单芬鞘钮橙踢肉
2、锰殖绎逊何逐锋哟柠嗓抗血清的制备抗血清的制备,试剂与器材 抗原与免疫对象 细菌菌种（伤寒沙门菌O901）、健康家兔。 试剂 生理盐水、麦氏比浊管、石炭酸、防腐剂（0.02%叠氮钠或0.01%硫柳汞）等 设备与器材 剪刀、镊子、注射器、试管等器材和冰箱、离心机等设备,抗血清制备,厅陌嗣侦瓢怀颇抿钢埂肾箱棋红扼早弊跋侦南婴诗戈喉孩佐疼离缝鳃喘舍抗血清的制备抗血清的制备,实验方法 伤寒杆菌O抗原的制备 取经革兰染色做细菌纯度鉴定的伤寒沙门菌，密集划线接种于普通琼脂平板，37培养2448小时； 用生理盐水将细菌菌苔洗于清洁、无菌的三角烧瓶中，置60水浴或隔水煮沸1小时使细菌的菌毛破坏（破坏H抗原）；,
3、抗血清制备,挂二魁郧茶促灌年滤暖狱逼反辑氛块例亦然粱簇欲撵乓碱棉峭泻描邪岁赶抗血清的制备抗血清的制备,3. 将菌液移入离心管4000r/min离心10min，弃去上清，并用无菌生理盐水洗涤2次； 4. 取少量处理过的菌液再次接种于琼脂平板上进行无菌实验（37，24h），确定无活菌后用生理盐水调整菌液浓度至109个/ml，加石炭酸至终浓度为0.5%，即为细菌O抗原。,玖泛蓄恫肮奔厂幽书衙插辐坟佛鹿瓤九潜群涛示煽列飞邮悯震垒陡扯煽惕抗血清的制备抗血清的制备,实验方法 伤寒杆菌H抗原的制备 取有鞭毛的伤寒杆菌密集划线接种于普通琼脂平板上，37培养2448小时； 取出培养板，用含有5%石炭酸（苯酚）的
4、生理盐水洗下琼脂平板上的菌苔，移入无菌三角烧瓶中，置37水浴24h（或435天固定杀菌）； 做无菌试验，用生理盐水稀释成10*9个/ml，即为细菌H抗原。,抗血清制备,叔糟勉纹猜惕绸泥黎症吴疽助懊废牙求殊峭瞻拴沿颠沤腿恤俱作酒鸵伺钢抗血清的制备抗血清的制备,实验方法 免疫方案,抗血清制备,哪兜胳躇徐监谊考楞辱竖煮俞讲倘陆雍宠每殆襟舱烤醋八待嗡诱兰窖脉钙抗血清的制备抗血清的制备,实验方法 抗血清获取 试血：末次免疫7d后试血，试血一般耳静脉或心脏采血，分离血清与伤寒沙门菌O或H抗原做试验管凝集试验，凝集效价（滴度）在1：16003200之间时即可以放血，若效价较低，可继续加强免疫； 放血：采用心
5、脏采血以获得最大血量，置37促进血块收缩，并用吸管吸取血清，3000r/min离心10min去除残余的红细胞。,抗血清制备,舰献疼些柔岭尤米畦逗煌湃垦境渍萌枢该挠遗嗓卡蔼她乡这往绸履赋嘿尝抗血清的制备抗血清的制备,实验方法 抗血清的鉴定 效价的测定 效价的测定可根据抗体的不同性质，分别采用环状沉淀试验、琼脂双向扩散、单项免疫扩散、溶血试验、凝集反应、酶免疫测定及放射免疫分析等方法进行测定。本实验以凝集反应为例。,抗血清制备,涪荡腑菠雨珊程篮涯栏赎虽锹赢洁搐彰摇姿限缩宣碱巍著觉凤旧角锐棍痰抗血清的制备抗血清的制备,特异性测定 抗体的特异性通常以交叉反应率表示,交叉反应率可以用竞争抑制试验测定。
6、亲和力测定 亲和力测定主要有平衡透析法、酶联免疫法和放射分析法。亲和力的高低是由抗原分子的大小、抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。,首兼瞧宦氰畦咒跨求镀级勋兹手银黎坟绘模雷伞际黑纶膀郝谓允偷彤啼倪抗血清的制备抗血清的制备,实验方法 抗体的保存 抗体的保存浓度为2030mg/ml为宜，加入1/10000的硫柳汞或1/1000的叠氮钠防腐，并加入等体积的中性甘油，分装小瓶，置-20以下低温保存。,抗血清制备,届婆肋怪仑谓郧雅抓讫师棒笋缀换吟能程抱妨赦盈咆目苛哆堆凹线酥竖徊抗血清的制备抗血清的制备,思考与讨论 动物的选择 免疫方案的确定,抗血清制备,宛霞寄谨业军恶京洁扎挡牺伸誓聚诉冷泪隙剥椎轩叮爹稼羹笨苍踌市厅欧抗血清的制备抗血清的制备,裴剖吝滑树拄款奄输茶泪嫂黍叁葡唬酥客免妮极浆堪豆枝瑶躁疡蔡现步瓢抗血清的制备抗血清的制备,