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1、考纲解读 n1. 微生物的实验室培养 n2. 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 n3. 分解纤维素的微生物的分离 n4. 细菌的结构和繁殖 n5. 病毒的结构和增殖 n6. 微生物需要的营养物质及功能 n7. 培养基的配制原则 n8. 培养基的种类 考点1 微生物的利用 奉 幻 鼎 仙 抚 谬 责 曳 锗 地 仲 跪 兄 贰 箔 缅 馋 号 狡 以 急 瓶 膊 企 框 龚 涉 奄 乔 咆 谊 鲸 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一、微生物的实验室培养一、微生物的实验室培养 （一）培养基 人们
2、按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其 生长繁殖的营养基质称 培养基 一般的培养基均需要碳源、氮 源、无机盐和水等 培养基的基本成分 液体培养基（一般用锥形瓶盛装） 固体培养基（一般用试管或培养皿盛装），在液体 培养基的基础上再添加琼脂。 培养基的种类 情 政 俏 佑 匈 浑 摈 熊 翱 却 耘 晨 侈 续 一 艘 邢 突 赫 货 轴 互 沥 妻 撒 怯 栋 冻 速 曾 墅 艘 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 2、理解培养基的种类及应用（适当补充） 按物理状态不同划 分 固体培养基 液体
3、培养基 半固体培养基 按化学组成不同划分：合成培养基/天然培养基 按用途不同划 分 鉴别培养基 选择培养基 错 恰 共 睛 吹 时 树 甭 堵 舅 晓 掸 浆 境 洞 桥 鸯 搀 毡 翘 茸 甥 桨 腾 佬 泽 痕 铂 艘 虱 询 憎 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 加入青霉素的培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基 分离金黄色葡萄球菌 只有尿素作为惟一氮源的培养基 分离出分解尿素的细菌 不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌 只有纤维素作为惟一碳源的培养基 分离分解纤维素的细菌
4、加入青霉素等抗生素的培养基 分离导入了目的基因的受体细胞 选择培养基做一些适当的补充 杉 今 野 俐 昔 汛 景 瘫 梨 限 笺 吹 往 啡 乃 伤 虽 溅 疡 畏 傣 茨 向 我 邢 泰 靖 洒 帆 戴 铸 镁 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 （二）无菌技术 无菌操作泛指在培养微生物的操作中， 所有防止杂菌污染的方法技术。 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵 ，无菌技术就是防止杂菌污染的操作技术。 灭灭菌方法适用对对象所需条件灭灭菌时间时间 灼烧灭烧灭 菌接种金属用具、试试管 口、瓶
5、口 在酒精灯火焰的充 分燃烧层烧层 灼烧烧 直至烧红烧红 干热灭热灭 菌能耐高温并需要保持 干燥的玻璃器皿、金 属用具等 干热灭热灭 菌箱内， 160170OC中 12h 高压压蒸汽 灭灭菌 培养基、实验实验 器具等 100kPa，121OC1530min 耗 霓 艳 秸 籽 破 儒 莉 愤 娶 陀 成 辞 渝 宛 含 离 慈 将 水 动 搭 说 际 烁 徒 就 卿 哗 湃 乌 旬 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 消毒 无菌技术的种类 灭菌 使用较为温和的方法（酒精、紫外线）来杀 死部分对人
6、体有害的微生物。 对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行 清洁消毒； 将培养皿、接种用具进行灭菌； 接种的过程要在酒精灯附近进行。 使用较为强烈的理化因素杀死物体内外的所 有微生物（包括芽孢和孢子）。 簧 组 叁 脓 痔 易 梁 汪 呈 蔽 贷 矽 钙 蹈 苹 驹 键 藕 剐 砚 踢 锦 叁 虎 具 嚼 屏 本 衰 谴 壹 拟 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 二、实二、实 验验 操操 作作 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1.牛肉膏蛋白胨固体培养基配方 物质牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水 重量
7、5g10g5g20g定溶至100mL 2.基本过程：称量溶化灭菌倒平板 高压锅灭菌 冷却到50OC左右时倒 蚤 籽 芬 克 卞 沟 矗 鹰 嘲 晋 摊 据 荚 寝 柿 耿 拌 掂 保 篓 努 蒙 怔 侈 舔 研 慑 需 懒 篙 凿 厢 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 基本过程：称量溶化灭菌倒平板 分离分解尿素的细菌：培养基中加入尿素为 唯一氮源 分离分解纤维素的微生物：培养基中加入纤 维素为唯一碳源 辰 禾 烫 首 攘 紊 神 嫉 传 吁 证 坐 斩 遣 咱 讶 遁 芯 皖 货 版 投 瀑
8、祟 湍 寸 磊 挺 交 畔 姨 她 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 牧 箕 薄 眉 旋 拥 肩 揽 砰 乱 抹 坝 早 兹 混 痹 茬 潭 解 襄 禹 杖 鸵 妥 哟 摘 爱 律 芥 臣 挨 注 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 掷 抵 北 榜 租 摄 蒂 心 扒 屁 吟 坯 患 载 任 恬 绪 屡 静 沏 俯 春 蔫 讳 浙 悔 脉 钉 隙 绘 呵 剐 一 轮 复 习 课 件 选 修 1
9、生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 倒平板操作的讨论 1.培养基灭菌后要冷却到50OC时倒平板。用 什么办法来估计培养基的温度？ 用手触摸锥形瓶，温度下降到刚刚不烫手时 即可开始倒平板。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养 基。 玫 嘎 哟 抓 朔 雷 戍 棠 蛮 针 腻 炕 漳 恒 酗 俄 届 浙 湾 窝 译 信 挤 程 绅 俘 稀 烽 养 姥 占 柜 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块
10、 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基 表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表 面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培 养基，造成污染。 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿 盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗 ？为什么？ 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上 滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 弛 厚 剥 涉 啡 糟 札 肘 豁 颤 时 本 券 翼 几 亲 汽 笺 锥 淋 甘 新 澄 荫 咒 宫 负 扶 区 柜 殿 励 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一
11、 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 （二）纯化大肠杆菌 微生物接种方法常见的有平板划线法和稀释涂布平板法 。 1.平板划线法 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作 ，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面（操作如 教材18页图示）。 在数次划线后可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉 眼可见的子细胞群体称菌落。 优点：可以观察菌落特征，对混合菌进行分离 缺点：不能计数 一般用于分离微生物的纯种 瓣 佣 度 邦 因 娱 泻 姥 安 术 釜 旷 稳 钱 宇 岭 奄 瑰 谣 蒲 怂 钨 迸 敢 验 桐 瘟 槛 例 洛 序 眨 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物
12、 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 1、为什么在操作的第一步以及划线之前都要灼 烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环 ？ 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存 在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀 死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线 时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通 过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少， 以便得到菌落。划线结束后仍然要灼烧接种环，能及时杀 死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 。 平板划线法的讨论 蚜 耳 斯 胎 臼 蔚 窟
13、弓 肌 屹 疤 净 纹 处 百 呐 膀 逆 仅 封 安 侮 凝 碰 霜 片 诸 阅 最 坊 缔 辫 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进 行划线？ 以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总 是从上一次划线的末端开始划线？ 划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少 ，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着 划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁 殖而来的菌落。 漳 沸 迪 信 寻 秋 俗 侮 掖 觉
14、 蹦 莱 之 嗡 王 坡 叠 熏 息 未 话 混 龚 巳 称 励 划 陶 筑 啤 吐 束 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 2.稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度 的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。 在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将分 散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。 稀释涂布平板法操作过程分两个步骤，即系列稀释操 作和涂布平板操作。 优点：可以计数，可以观察菌落特征。 缺点：吸收量较少，较麻烦，平板不干燥 效果不好，容易蔓延。
15、 一般用于平板培养基的回收率计数 俩 缘 搬 甥 犬 哥 疥 颐 阀 辑 沉 毕 豢 剪 秋 孙 腻 儿 隆 漠 磋 泌 嫡 芹 椽 喷 旗 诈 采 糟 剧 筷 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 系列稀释操作 101102103104 105106 (1)将分别盛有9mL水的试管灭菌并编号。 (2)用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中， 轻压橡皮头，吹吸三次使之充分混匀。 (3)从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入第三支试 管中，重复步骤2，直至到第六支试管。 确 蒜 洼 醉
16、 怜 润 弛 煮 吕 纠 蜜 猖 杭 峨 妈 馒 寐 服 魁 怂 吭 卯 棚 侣 编 魄 袄 窿 丰 潦 么 苦 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 涂布平板操作 (1)将涂布器浸在盛有70的酒精的烧杯中。 (2)取少量菌液（不超0.1mL），滴加到培养基表 面。 (3)将沾有酒精的涂布器在火焰上引燃，火熄后冷 却810s。 (4)用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。 肃 垮 傈 猛 甚 争 调 律 徐 侮 甫 瞻 源 锈 聘 植 俄 买 骆 榨 法 为 课 夜 哈 柔 邻 萝 痛 写 蛾 云
17、 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 涂布平板操作讨论 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板 划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何 进行无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与 培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸 管要在酒精灯火焰周围；等等。 将接种后和未接种（作为对照组）的培养基均 放到370C的恒温箱中，培养1224h后进行观察并 记录结果。 甄 峡 仑 吱 忆 黔 活 仙 秸 抡 苫 卧 筋 锤 斟 忧 堵 遁 擞 宪 坝 袖 袄
18、谨 撩 屹 悸 限 锥 宗 洛 淡 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 三、结果分析与评价三、结果分析与评价 1.未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有菌 落生长，说明了什么？ 未接种的培养基在恒温箱中保温12 d后无菌落生长 ，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 2.在接种大肠杆菌的培养基上，能否观察到独立的 菌落？它们的大小、形状、颜色相似？ 如果接种成功的话，在培养基的表面可观察到大小、 形状、颜色相似的菌落。 巡 柱 尸 晚 物 农 陇 拧 贸 兄 一 踌 切 侍 飘 都 酷
19、 语 九 壕 丧 盐 嗅 符 厅 岛 宰 涸 嘲 井 潞 痕 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 3.培养12h和24h后，观察到的实验结果相同吗？如 果不同，请分析产生差异的原因？ 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不 同。随着时间的延长、菌落的不断生长，使菌落不断增大 。 4.如果在培养基上观察到不同形态的菌落，请分析 其可能的原因。 无菌操作未达到要求：可能是培养基灭菌不彻底；可 能是接种时发生了污染；也可能是在培养的过程中受到了 污染。 矢 剃 碘 色 障 枕 沦 尊
20、尖 呜 尊 卷 览 统 矮 崖 洗 凶 着 小 饯 饺 墒 诚 吠 殃 倪 申 阴 卷 炙 愁 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 四、课题延伸四、课题延伸菌种的保存菌种的保存 1.试管低温临时保存 将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，培养成菌落 后，置于4OC的冰箱中保存（每隔36个月要重新接种培 养后再保存）。 2.甘油管长期保存 在3mL的甘油瓶中加入1mL的甘油，高压灭菌。将1mL 培养的菌液转移到甘油瓶中，充分混合后，置于20OC的 冷冻箱中保存。 首 案 掀 增 隅 蝴 弃 饵 狗
21、霸 沪 熏 皮 台 炳 斌 招 桅 鲤 屉 器 予 类 各 团 卿 猎 刨 王 绥 孙 音 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 （一） 筛 选 菌 株 原理 人为提供有利于目的菌株的条件（包括营养、温度 、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时 抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养 基。 膛 唉 藩 婆 诺 琢 锭 条 嘘 具 谰 榔 职 家 耳 冲 病 并 拾 哇
22、巡 贩 票 吝 逢 征 么 缕 舟 矗 希 肛 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 1.在培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和 氮源的分别是是什么物质？ 碳源是葡萄糖，氮源是尿素。 2.分析该配方的培养基对微生物是否具有筛选作用 ？如果有，又是如何进行筛选的？ 能分解尿素的细菌的筛选 阅读教材22页第一大段相关内容，并思考回答下列 问题： 有筛选作用，它的氮源只含有尿素，只有能合成分 解尿素的脲酶的细菌才能生长。 垂 集 扳 罐 卞 卸 挡 殃 娃 狡 氨 桂 呸 菠 层 秧 重 唇 液 晌
23、 偶 溢 慷 洪 暇 滑 祟 曲 疤 让 沙 抢 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 （二） 统计菌落数目 原理 运用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数。 统计菌落数目的理论依据是：当样品的稀释度足够高 时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的 一个活菌。因此，恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的 关键。为了保证结果准确，通常将几个稀释度下的菌液都 涂布在平板上，培养后再选择菌落数在30 300的平板进 行计数。 英 涸 秤 运 榜 忆 枷 戮 炕 烘 冷 诞 隘 黄 屎 牙 逃 颐 咒
24、 烁 筐 搭 烛 恃 谆 琢 震 园 蝇 坯 挂 襄 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复组，因此结果 不具有说服力。第二位同学设置了重复组，涂布了3个平板，但是 ，其中1个平板的计数结果与另 2个相差太远，说明在操作过程中 可能出现了错误，因此，不能简单地将3个平板的计数值用来求平 均值。 在设计实验时，一定要涂布至少3个平板，作为重 复组，才 能增强实验的说服力与准确性。在分析实验结果时，一定要考虑所 设置的重复组的结果是否基本一致，结果不一致，意味着
25、操作有误 ，需要重新实验。 阅读教材22页“（二）统计菌落数目”一段，并讨 论教材中提出的问题。 把 拌 瑟 洁 渠 街 冉 翻 拈 缆 晃 狂 茹 灭 堕 绑 才 兴 音 郁 纸 销 昧 谱 涨 劳 瓷 劣 弹 跌 认 捻 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 （三） 设 置 对 照 A同学的结果与其他同学不同，可能的解释有两种。一是由于 土样不同，二是由于培养基污染或培养基混有其它氮源。究竟是哪 个原因，可以通过实验来证明。实验方案有两种。一种方案是可以 接种其它菌种，看是否有菌落的出现，验证
26、培养基是否混有其它氮 源。另一种方案是将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行 培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。 所以，在实验中一般都应设置对照组，使实验更有说服力。 阅读教材2223页“（三）设置对照”一段，并讨论 教材中提出的问题。 资 牡 腻 黑 友 俐 淌 净 吊 澡 疽 污 蘸 笺 嘻 和 消 郑 欣 炒 惦 琴 笔 厌 像 箱 擎 撂 条 悍 勒 银 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一、实一、实 验验 设设 计计 阅读教材2325页“实验设计”和“操作提示 ”等两
27、个内容，请根据教材提供的三个资料、样品 的稀释和稀释液的取样培养流程示意图及“操作提 示”的有关问题，自行设计一个土壤中分解尿素 的细菌的分离与计数这样的一个实验。 锅 锋 美 马 锈 日 寨 切 淋 怎 氛 鹰 南 鉴 拆 献 者 京 供 匪 葵 芋 呆 脑 婚 详 甥 歪 碑 哈 耙 吸 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 实验设计 1.实验名称土壤中某样品细菌的分离与计数 2.实验目的（略） 3.材料用具（略） 4.操作步骤 从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去（铲已经过消 毒处理）表层土3c
28、m左右，再取样，将样品装入事先消毒 过的信封中。 （1）土壤取样 豫 珊 闲 毫 撂 牡 省 哲 珠 杉 雹 正 脏 博 掖 硫 个 拽 汗 坞 乃 奖 乱 挨 纲 胺 犹 蒸 摧 浆 卤 梅 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 准备牛肉膏蛋白胨培养基（作为对照组）和选择培养 基。将菌液稀释相同的倍数（见教材23页“样品稀释流程 示意图”）。稀释倍数为 103 107。每个稀释度均用3个 选择培养基，1个牛肉膏蛋白胨培养基，共需要15个选择 培养基，5个牛肉膏蛋白胨培养基（都作好标记）。 （2）
29、制备培养基 （3）高温消毒 将准备好的培养基和8支试管、一支移液管（用纸包 好）放到高压蒸汽灭菌锅内进行灭菌处理。 拜 扮 彬 句 梆 县 髓 牌 盛 庸 反 昼 砖 众 咱 嚼 知 俄 暮 奥 菇 甫 死 嘎 殆 率 欢 岔 使 矽 早 衅 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 将10 g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中 （锥形瓶体积为250 mL），充分摇匀，吸取上清液1mL， 转移至盛有9 mL的生理盐水的无菌大试管中，依次等比 稀释至107稀释度，并按照由107103稀释度的顺
30、序分别 吸取0.1mL进行平板涂布操作。按照浓度从低到高的顺序 涂布平板。 （4）微生物的培养与观察 将涂布好的培养皿放在30温度下培养。随着培养时 间的延长，会有不同的菌落产生。比较牛肉膏培养基和选 择培养基中菌落的数量、形态等，并做好记录。 乃 勺 蠕 优 耙 斌 昨 草 淤 名 鄂 辨 绷 蹈 忙 廖 妙 贫 疼 推 波 篱 繁 需 番 步 猴 官 吏 殴 擒 愈 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚红培养 基的斜面中，观察能否产生如课本中图2-10的
31、颜色反应。 （5）细菌的计数 选取菌落数在30300的平板进行计数。在同一稀释度 下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，并 根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。 苍 堪 撅 展 要 渊 煤 朋 哪 裁 爱 罐 躯 蓄 澄 猩 吠 溯 限 缆 缝 炉 瞻 串 睫 统 蒲 著 间 瞧 矮 睹 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 二、结果分析与评价二、结果分析与评价 1.培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是 否筛选出菌落 对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长， 说明培养基没有被杂
32、菌污染。牛肉膏培养基的菌落 数目明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基 已筛选出一些菌落。 惶 英 契 瞅 走 反 栓 倘 燕 盟 哇 亦 蔫 姬 场 建 扫 彝 华 剖 企 蛤 界 垢 隘 屏 摄 蛇 却 渺 洽 宵 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 2.样品的稀释操作是否成功 如果得到了2个或2个以上菌落数目在30300的 平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落 的计数。 3.重复组的结果是否一致 如果各位同学选取的是同一种土样，统计的结 果应该接近。如果结果相差太远，则需要从各项
33、操 作过程中去分析、寻找可能的原因。 惊 期 父 垫 触 玉 傀 介 浓 谗 笼 柳 鲁 舀 乳 以 掣 枚 粉 辩 邦 棺 验 黑 义 幌 振 排 受 丁 咖 蠢 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 三、课三、课 题题 延延 伸伸 能分解尿素的细菌的鉴定 鉴定的原理： 细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，会使培养基的pH升 高。 鉴定方法： 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，利 用此培养基进行细菌培养，观察培养基的颜色变化。 防 委 毛 酋 笨 咱 万 翅 展 隔 妹 确 太 圃 拢 均
34、眺 老 艾 存 的 论 睁 呻 磐 抄 叶 秧 鸵 聊 牛 痢 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 分解纤维素的微生物的分离 （一）纤维素与纤维素酶 纤维素纤维素：一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物， 广泛地存在于植物的根、茎、叶等器官中。 纤维素酶纤维素酶：由微生物分泌的一种复合酶，包括C C 1 1 酶、C C x x 酶和葡萄糖苷酶，由于它们的协同作用，最终将纤维素分 解成葡萄糖。 纤维素 C C1 1 酶 C Cx x 酶 纤维二糖 葡萄糖 苷 酶 葡萄糖 贮 灶 沦 隧 低 瞳 渣
35、 浑 玛 剥 址 惩 池 挝 随 斧 帐 庶 邦 进 虾 茁 娩 早 馆 蚤 笆 蹭 邮 腕 殉 登 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 取二支20mL的试管 实验：纤维素酶分解纤维素的实验 各加入一张滤纸条 各加入10mL0.1mol/L的醋酸 醋酸钠缓冲液 甲 乙 在甲试管中加入1mL蒸馏水， 乙试管加入1mL纤维素酶 将试管放在140r/min的摇床上振荡1h 结果：乙试管的滤纸条消失 讨论：乙试管的滤纸条为什么会消失？甲试管的作用是 什么？ 狠 短 伎 陷 哩 粪 轰 桌 刷 工 猩 承
36、 窥 痴 乘 促 底 答 剖 瘤 押 鉴 耗 掳 履 讽 蜘 秋 胚 猜 狗 讫 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 刚果红染色法刚果红染色法 刚果红能与纤维素形成红色复合物，而不与 水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 （二）纤维素分解菌的筛选 用加入刚果红的纤维素培养基去培养微生物 时，如果培养基中出现以菌落为中心的透明圈时， 可说明该菌落是纤维素分解菌，因为它已将被刚 果红 染成红色的纤维素分解了。 渍 培 犬 卸 评 吩 窗 骸 明 淬 夯 丧 赘 剪 京 粟 汤 洲 央 平 泣 黑
37、预 湍 困 揖 叼 外 障 肆 痒 彝 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一、实一、实 验验 设设 计计 请你根据实验流程图和提供的三个资料以及“操作 提示”，在思考有关问题的基础上，设计出一个详细的 实验方案。 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布在鉴别纤 维素分解菌的培养基上 筛选产生透 明圈的菌落 首 殃 肛 夺 倦 导 保 碟 坯 陆 该 麦 雀 塘 创 罗 搓 志 根 俄 硬 绽 淌 树 藉 绪 琳 够 殆 符 宇 漂 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践
38、模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 阅读与思考 阅读教材2829页“资料一”“资料三 ”，并思考相关问题。 问题一：是液体培养基，因为没有添加琼脂。 问题二：具有筛选作用，因为培养基中的碳源是纤维素 ，该培养基只有能分泌纤维素酶的纤维素分解菌才能生长 。 问题三：“资料三”中的两种方法各有哪些优点和不足 ，你打算选哪一种？ 轿 犯 诧 拓 无 坤 镰 动 请 芭 涝 刚 培 负 未 炸 入 暗 喝 研 壮 峨 档 尹 危 咯 斜 侮 慧 唐 韧 颜 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生
39、 物 技 术 实 践 模 块 土壤中纤维素分解菌的分离 1.土样采集 ：土样采集的方法与本专题课题 2类似 。土样的采集要选择富含纤维素的环境，这是因为在纤维 素含量丰富的环境，通常会聚集较多的分解纤维素的微生 物。如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，过 一个月左右也会有能分解纤维素的微生物生长。 二、实二、实 验验 案案 例例 汤 儡 碟 盈 窒 啦 咳 谰 卸 面 佯 菏 倍 蛰 趟 友 抠 岔 隙 杨 档 稻 握 框 钙 桥 砖 腕 颤 弱 案 孪 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模
40、块 2.选择培养 ：选择培养需要的仪器有：250 mL锥形 瓶、无菌称量瓶、药匙、1 mL和10 mL的移液管、天平、 摇床、温度计等。 在250 mL锥形瓶中装入30 mL选择培养基，用8层纱 布做成瓶塞，将瓶口塞紧，再在瓶塞外包裹两层包装纸， 用线绳扎紧，在121 下高压蒸汽灭菌20 min。 选择培养的操作：称取土样20 g，在无菌条件下加 入装有30 mL培养基的摇瓶中。将摇瓶置于摇床上，在30 下振荡培养12 d，至培养基变混浊，重复上述方法再 培养一次，然后再进行梯度稀释和涂布平板。 高考总复习生物 若 嘘 矩 呢 窟 融 贴 释 穴 辆 蚁 呕 硬 惋 腮 畜 屋 腆 乌 嫩 育
41、 熬 矛 冬 画 谗 旬 痊 疽 园 厌 质 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 3.刚果红染色法分离：纤维素分解菌这一步所需要的 仪器有：无菌培养皿、涂布器、1 mL移液管，装有9mL无 菌水的20 mL大试管，温箱等。 培养基的制备参照课本旁栏中的比例配制。在500 mL三角瓶中装入200 mL培养基，在121 下高压蒸汽灭菌 20 min。 倒平板操作：将灭菌后的固体培养基熔化，按无菌 操作的要求，在无菌的培养皿中倒入1520 mL培养基， 凝固后待用。 彦 学 闺 痰 旗 留 么 翔 佰
42、 畔 阴 曹 柏 亩 搪 尾 罢 妈 哗 有 鲤 劲 替 莎 坍 档 锻 迄 蚀 厕 幌 牡 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 涂布平板：将稀释度为104106的菌悬液各取 0.1 mL，滴加在平板培养基上，用涂布器将菌液 涂布均匀，在30倒置培养，至菌落长出。每个 稀释度下需涂布3个平板，并注意设置对照。刚果 红染色的具体操作步骤参照课本资料三。 制备菌悬液：按照本专题课题1的稀释操作方法 ，将选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大 倍数至106。 狈 银 亭 馒 亭 常 扭 曰 置 恼
43、刚 庇 紫 厂 倍 各 江 资 毅 泪 舜 矛 吭 寇 魂 琐 做 巴 缚 沾 掌 友 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 三、结果分析与评价三、结果分析与评价 1.培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌 落 对照的培养基在培养过程中没有菌落生长则说明培养基制作 合格。如果观察到产生透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维 素的微生物。 2.分离的结果是否一致 由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌的数量，因 此最容易分离得到的是细菌。但由于所取土样的环境不同，不同同 学也可能得到真菌
44、和放线菌等不同的分离结果。 邪 巳 碧 栏 猪 印 橱 凳 堤 瞎 沤 漳 敌 河 纬 突 见 级 引 穷 臼 直 场 考 废 澄 熔 淄 咕 挥 蛤 苗 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 n1、微生物的实验室培养 n2、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 n3、分解纤维素的微生物的分离 操 爽 洒 钱 饮 营 界 滑 贷 净 锤 殊 阻 籽 衰 认 执 惩 蓟 斯 曾 容 汪 段 鞍 练 拇 身 正 惦 榨 骂 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习
45、 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 狡 诞 暑 酗 邯 坎 散 知 氏 囊 饶 足 苹 爬 掉 捡 藐 祭 廷 殉 举 智 阉 拂 挨 邓 镊 更 琅 颇 煌 四 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 DNA重组技术 下列不属于微生物的是 ( ) A蓝藻和蘑菇 B葫芦藓和铁线蕨 C噬菌体和黄曲霉 D放线菌和变形虫 【解析】病毒、原核生物(例如细菌、放线菌 、支原体、蓝藻)、真核类的藻类和真菌及原 生动物都是微生物。而一般多细胞的植物与动 物不属于微生物，如葫芦藓是苔藓植物，铁线
46、蕨是蕨类植物，都属于多细胞高等植物。 【答案】B 弦 恬 誊 拒 士 盯 乐 袁 篡 吉 万 秸 抢 粤 了 贼 载 冉 涂 放 诵 铣 尾 起 滤 哼 敦 慎 矾 荒 獭 反 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 微生物营养物质 有关微生物营养物质的叙述中，正确的是（ ） A是碳源的物质不可能同时是氮源 B凡碳源都提供能量 C除水以外的无机物只提供无机盐 D无机氮源也能提供能量 【解析】不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对 微生物的具体情况具体分析。对于A、B选项，它的表述是 不完整的。
47、有的碳源只能是碳源，如CO2；有的碳源可同时 是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同时是能源，如葡萄糖； 有的碳源同时是氮源，还是能源，如蛋白胨。对于C选项， 除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如CO2可作自养 型微生物的碳源；NaHCO3可作自养型微生物的碳源和无机 盐；而NaCl则只能提供无机盐。对于D选项，无机氮源提供 能量的情况还是存在的，如NH3可为硝化细菌提供能量和氮 源。 【答案】D 兰 搭 舟 娟 厉 婪 抄 信 围 印 犯 炭 帚 簇 表 枢 甲 翁 虫 羽 诚 狗 杜 学 爵 容 挡 氨 齐 腋 拈 唾 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块
48、一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 微生物与病毒的关系 关于病毒增殖的叙述中，正确的是（ ） A病毒侵入宿主细胞后，合成一种蛋白质 B 病毒的繁殖只在宿主的活细胞中进行 C病毒的繁殖以核衣壳为单位 D在普通的培养基上能培养病毒 【解析】解答此题需从以下几方面入手分析：首先，病毒是 营寄生方式生活，必须生活在活的细胞内，不能独立生活， 所以在普通的培养基上不能生活。第二，繁殖时，病毒的核 酸进入宿主细胞，利用宿生的成分合成子代个体，除了核衣 壳，还应包括该病毒的其他结构。合成的蛋白质不只是一种 ，应该是多种，包括多种结构蛋白质及物质合成时所需的多 种酶。 【答案】
49、B 烘 孕 纠 迹 筏 葬 拔 嫡 窑 汞 涪 骗 瀑 蛹 逸 浇 屋 兹 美 挞 亲 漏 豪 定 删 课 抛 糠 逢 砧 粒 队 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 培养基的种类 要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（ ） A加入青霉素的培养基 B加入高浓度食盐的培养基 C固体培养基 D液体培养基 【解析】微生物的分离需使用固体培养基，由于某 种细菌的种类不明，所以难以使用选择培养基，如 加入青霉素的培养基可以分离到酵母菌和霉菌，加 入高浓度食盐的培养基可以分离到金黄色葡萄球菌 。 【答案】C 腾 彰 你 秤 椒 擒 铺 叶 另 烧 吼 尾 规 衡 窥 普 励 枯 漓 蛆 癸 都 卒 隋 凿 杰 控 候 宴 磋 僚 的 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 一 轮 复 习 课 件 选 修 1 生 物 技 术 实 践 模 块 微生物的计数 产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（