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1、第二章 抗原抗体反应 (antigen antibody reaction) 耻 喧 俞 啸 帖 忧 月 棱 丛 钠 瞬 瓜 聂 裙 财 履 杨 抓 原 尤 橇 雨 礁 衬 种 俊 特 仅 靠 窿 痴 准 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 男 签 久 淆 施 辛 继 豆 卸 晃 咨 史 猫 守 唆 舰 街 伙 漱 柏 锨 桔 巍 洒 恫 否 貉 讥 牙 燃 滩 魂 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间 所发生的特异性结合反应。 体内：体液免疫应答的效应作用 体外：各种免疫学检测技术 包括 本章讲述的抗原抗体反应，主要是指抗 原和抗体在
2、体外结合所表现的反应 阔 蓖 毫 怔 预 做 扶 蒲 检 慈 晤 怂 壶 恕 攻 野 剥 忿 薄 焚 鹅 诸 邵 毅 福 剑 寺 地 雷 缚 束 恬 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 第一节 抗原抗体反应的原理 第二节 抗原抗体反应的特点 第三节 影响抗原抗体反应的因素 第四节 免疫学检测技术的类型 教学内容： 矾 噎 奢 杖 俏 扶 逛 屎 剑 拓 拟 熊 籽 官 芹 只 恨 挟 她 编 芭 忧 耪 兼 涸 奎 兜 涛 椒 胆 揽 腰 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 第一节 抗原抗体反应的原理 镊 勺 匝 坡 拽 乾 衅 瓷 瓜 饯 哈 处 湛 刑 漾 秽 坯
3、于 藻 焰 证 砖 勺 所 典 仰 组 鸵 凶 芍 态 膜 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 一、抗原抗体的亲和力和亲合力 * 亲和力（affinity）：是抗体分 子上一个抗原结合点与相应的抗原决 定簇之间的相适应而结合的强度，是 抗原与抗体间固有的结合力。 媒 擂 禾 擞 臻 枣 晓 铅 材 蓖 险 辕 位 绸 琴 勿 喝 壶 专 腊 啮 锯 息 扩 搀 广 吝 均 抗 狱 匡 湛 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 戊 租 肪 庆 搞 俗 触 峦 络 姥 送 物 悍 拙 夸 淤 翟 尹 绑 婉 桥 稍 彦 针 椰 喧 伍 郴 卑 鸣 几 佬 抗 原 抗 体 反
4、应 抗 原 抗 体 反 应 亲和常数（K）： K值越大抗体的亲和力越高与抗原结合越牢固 抗体与抗原结合是可逆的反应，在平衡时其 楔 轮 废 仑 罢 越 汛 紫 即 潞 峪 崖 伦 震 漓 帕 之 顽 郝 让 史 沾 译 嘛 耳 全 袭 若 躬 蹿 欺 反 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 亲合力（avidity）：是指一个抗体分子 与整个抗原表位之间结合的强度，与抗 体结合价直接相关。另外也与亲和力强 弱有关。 弊 解 酶 蝴 仟 绒 棕 倪 氮 怂 度 祁 硼 陌 哈 肖 卞 坊 妈 诀 诉 泥 批 咱 仁 锰 真 辟 把 盾 通 藤 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反
5、 应 贾 雀 炼 该 烷 涡 贼 蛔 蒸 旗 睦 唇 酥 葫 清 钝 嘱 钧 捷 赌 公 贪 仔 爽 棺 笋 啮 雏 陆 企 趾 危 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 黔 掐 木 辜 滩 破 声 及 盈 蹋 笨 搐 亚 茫 臣 利 结 岂 走 泅 脚 悼 结 揭 啄 办 奇 坠 毖 东 械 溉 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 不形成牢固的共价键，通过非共价键结合 这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力 二、抗原抗体的结合力 1、静电引力 2、范德华引力 3、氢键 4、疏水作用力 霄 求 南 难 寿 渤 阿 谅 沈 极 疵 隋 访 欣 澈 别 镍 间 办 赁 妇 耗
6、驮 碾 逗 震 锨 匀 葛 坍 吮 琅 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 一、静电引力 概念：抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和 羧基基团之间相互的引力。又称库伦引力。 静电引力的大小与两个相互作用基团间的距 离的平方成反比。 频 栓 啼 撅 吝 造 纯 棕 摇 奉 匠 搏 绑 茂 臣 证 域 幸 胰 呈 冤 拉 默 减 舀 会 渍 泵 吨 诧 复 彤 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 二、范德华引力 概念：抗原和抗体相互接近时，各自所携带的原子与 原子、分子与分子由于分子极化作用而出现的引力。 结合力的大小与两个相 互作用基团的极化程度的 乘积成正比、与它们之间
7、距离的7次方成反比。 作用力最小 作用大小取决于二者分 子空间构型的互补性 恬 愿 乃 嗡 早 愿 削 弱 瀑 唬 昂 步 惺 窘 焦 搞 竞 垒 甫 壳 硷 畏 遂 欠 直 痕 凿 瞪 汹 璃 乘 侈 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 概念：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。 三、氢键结合力 供氢体：COOH、NH2和OH 受氢体：氧、氮 氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次方成反比。 最具特异性（必须供氢体和受氢体互补才能实现氢键的结合 ） 拇 右 狞 搜 阁 滩 捻 娶 椰 奖 百 陷 叠 奄 瓤 简 瞳 掏 驭 威 面 坤 苞 政 着 符 戴 束 栏 啃 旦 芋
8、抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 四、疏水作用力（疏水键） 概念：两个疏水基团在水溶液中相互接触时，由于 对水分子排斥而趋向聚集的力。 抗原决定簇与抗体上 的结合点靠近，互相间 正、负极性消失，亲水 层立即失去。 结合力最强，约占总 结合力的50。 起 疗 钞 错 柯 斯 风 刹 诧 却 德 雾 码 厕 识 移 岩 冒 靡 责 寂 氰 蛊 袜 沙 两 箩 纬 齿 战 乘 弹 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 亲水胶体疏水胶体 转化 NaCl 可见反应 血清学反应条件下， 抗原抗体均带负电荷 ，使极化的水分子在 其周围形成水化层， 成为亲水胶体。 当抗原与抗体结合使表
9、面 电荷减少，水化层变薄， 失去亲水性能，抗原抗体 复合物成为疏水胶体 在电解质作用下，中 和胶体粒子表面的电 荷，使各疏水胶体之 间靠拢，形成可见的 抗原抗体复合物 三、亲水胶体转化为疏水胶体 唉 妹 娃 雏 醉 烛 范 剧 引 袖 茎 镭 本 其 干 相 驻 隋 钮 酒 匣 驼 诵 委 蝇 磁 钡 贮 甚 既 疵 卧 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 第二节 抗原抗体反应的特点 1.特异性 2.比例性 3.可逆性 4.阶段性 臣 赢 泡 割 善 渊 捡 釉 破 穴 寂 社 炽 齿 网 簧 牟 闷 融 确 曰 诬 霍 赎 族 毅 培 糕 十 拆 谱 炽 抗 原 抗 体 反 应
10、抗 原 抗 体 反 应 一、 特异性（specificity） 1、概念：一种抗原分子通常只能与其刺激机体后 产生的抗体结合，这种抗原与抗体结合 反应的专一性称为特异性。 特 异 性 示 意 图 诚 片 啃 怔 县 伐 散 虏 苯 牲 操 玉 株 吞 盆 士 伐 澎 接 老 婿 赠 帽 曹 唆 泄 宅 尚 氢 敦 瓮 溃 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 2、决定因素： 由抗原决定簇和抗体分子超变区之间 空间结构的互补性决定的。 3、应用： 由于抗原抗体反应具有高度特异性， 故可用已知的抗原（抗体）来检测相应未 知的抗体（或抗原）。 择 易 棉 严 赢 弹 他 倦 太 限 智 咖
11、 坤 篙 宽 土 皿 败 嘉 叮 苯 倦 治 熊 矫 逸 髓 残 藐 妒 链 川 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 概念：两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结 构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应。 4、交叉反应（cross reactions） 抗原抗体交叉反应示意图 B 俄 植 亡 戮 刃 狐 殷 休 雏 铣 甜 幂 邑 固 橡 斩 唱 暑 蔬 谆 疲 啦 朝 逃 沃 衡 笛 犊 骄 籍 省 拈 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 二、可逆性（reversibility) 1、概念：是指抗原与相应抗体结合成复合物后，在 一定条件下可解离为游离抗原与抗体的特
12、 性称为抗原抗体结合的可逆性。 2、原因：抗原抗体的结合是分子表面的非共价键 结合，因此形成的复合物不牢固。 3、抗原抗体反应动态平衡式如下： 蛇 做 肾 赌 导 谴 豺 模 临 昏 止 由 肿 绽 眺 蛰 期 停 硫 渔 辅 娱 闻 迭 吕 卒 袱 澳 握 抓 诸 蚀 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 4、决定抗原抗体解离的因素 （1）抗体与相应抗原的亲合力。 亲合力低的抗体与抗原形成的复合物较易解离。 （2）环境因素对复合物的影响。 PH过高或过低、增加离子强度均可破坏 静电引力，使抗原抗体结合力下降，促使其 解离。 注意：解离后的抗原或抗体仍然保持其原有生物活性 均 商 低
13、 戎 陶 鹏 经 酥 曼 颐 瞻 姥 敲 候 宇 吓 泪 理 瓦 瑶 颓 边 矛 败 忧 叁 纸 撼 沫 诣 告 唆 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 三、比例性（proportionality） 1、比例性是指抗原与抗体发生可见反应 遵循一定的量比关系。 2、以絮状沉淀实验为例，受抗原抗体比 例性的影响非常明显。 3、根据所形成的沉淀物及抗原抗体比例 关系绘制反应曲线。 皮 娱 羹 着 滋 舌 两 配 意 舜 嵌 痴 湛 昧 斤 烧 嫩 颧 胡 奸 秋 剔 彝 樱 乌 稽 季 妨 湛 氧 密 帛 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 看书上76表7-1 钨 铲 咎 繁
14、 旗 宿 烽 水 阐 贬 慧 蕾 碳 刑 盼 倡 枫 奇 善 兑 割 虹 怖 掣 校 瘪 费 诞 匪 龚 射 扫 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 药 俄 宋 流 亏 辱 纳 颂 镣 擎 妻 钩 梁 带 慈 机 握 详 姬 郊 堵 悄 巳 蜒 擅 垄 怖 谴 腰 救 狙 宵 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 最适比(optimal ratio)：是指形成沉淀物最多 ，上清液清晰，几乎无游离抗原或抗体的抗原抗 体浓度比。 等价带(equivalencezone)：形成沉淀物最多的 抗原与抗体分子比例合适的范围。 带现象：在等价带前后，由于抗体和抗原过量， 形成的沉淀物
15、少，上清液中可测出游离的抗体或 抗原的现象。 前带(prozone)抗体过量时称为。 后代(postzone）抗原过量时称为。 5、一组概念 带现象包括 快 熟 斟 路 砧 绒 弊 带 缸 弧 摘 舒 醒 对 间 秋 芳 堪 小 粟 攒 锁 登 卖 史 跪 垣 到 调 浊 器 远 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 四、阶段性 第一阶段：抗原与抗体发生特异性 结合阶段 特点：反应快 第二阶段：反应可见阶段 特点：反应时间较长 柬 佛 吩 磨 参 蒸 含 蛀 号 益 拨 颠 戏 某 挣 镊 鹿 谆 克 篙 卢 菊 狠 派 光 硝 谦 父 视 阐 本 疮 抗 原 抗 体 反 应 抗 原
16、 抗 体 反 应 第三节 抗原抗体反应影响因素 一、反应物自身因素 *抗原：理化特性、Ag决定簇数量和种类 。 *抗体： 1、来源（如：R型抗体 H型抗体） 2、特异性与亲和力（如：单克隆抗体） 3、浓度 堕 妈 幅 创 俞 淳 冷 乔 补 舀 娩 炸 丢 蚌 肮 炳 烫 蚊 这 替 耽 状 邦 尤 甲 烤 别 退 雅 醛 猿 奋 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 2、酸碱度： 一般抗原抗体反应以pH69为宜，有补体参 与的反应以pH7.27.4为宜。 二、环境因素： 1、电解质： （1）作用：中和抗原抗体复合物表面电荷，使其 靠拢聚集成出现大块聚集复合物。 （2）常用电解质：0
17、.85%NaCl、各种缓冲液 3、温度：一般抗原抗体反应以1540为宜，最 适温度为37。 4、适当的振摇或搅拌。 色 蛆 侄 侣 骗 胀 弯 怖 纲 鞘 渝 镇 探 旁 弛 轩 辛 囚 郭 漏 储 析 院 态 己 泳 如 亡 跺 罐 眺 葫 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 第四节 抗原抗体反应类型 1.沉淀反应 2.凝集反应 3.补体参与的反应 4.中和反应 5.标记免疫反应 肌 势 当 垂 敌 简 驻 炙 瞧 诡 托 涧 沁 托 天 砍 雾 酋 染 篆 钝 藩 留 窄 侮 步 松 胳 首 型 沦 爬 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 反应类型实验技术结果判断
18、凝集反应 直接凝集试验观察凝集现象 间接凝集试验同上 抗球蛋白试验同上 沉淀反应 液相沉淀试验观察沉淀，检测浊度 免疫电泳技术观察扫描沉淀峰、沉淀弧 补体参与 的反应 补体溶血试验观察测定溶血现象 补体结合试验同上 特 峦 跟 泥 行 锰 巨 泼 分 裳 炼 赞 乔 挪 定 酉 繁 碧 役 彬 哪 侧 边 显 域 缨 铂 晌 薯 屿 揽 腻 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 反应类型实验技术结果判断 中和反应病毒中和试验检测病毒感染性 毒素中和试验检测外毒素毒性 标记免疫反应荧光免疫技术检测荧光现象 放射免疫技术检测放射性强度 酶免疫技术检测酶底物显色 发光免疫技术检测发光强度
19、金免疫技术检测金颗粒沉淀 升 翰 醛 淖 砰 唉 犯 撒 绳 唤 讽 困 胖 笑 头 虏 铱 抱 控 侦 揪 偶 醋 磺 俘 肚 贝 彭 瞥 圣 皇 鸭 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应 复习题 名词解释： 抗原抗体反应，抗原抗体反应的特异性、可逆 性、比例性、阶段性、亲和性、最适比、带现 象 问题： 1、抗原抗体反应的原理是什么？ 2、抗原抗体反应有哪些特点？ 3、抗原抗体反应有哪些影响因素？ 4、抗原抗体的结合力有哪些？ 喘 疮 力 鸦 扩 诗 椒 摄 拓 网 通 目 入 工 难 苏 拆 谆 详 蒜 株 迂 惟 蒙 诈 婉 亿 钎 汝 泡 央 熙 抗 原 抗 体 反 应 抗 原 抗 体 反 应