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1、抗原抗体反应抗原抗体反应 Antigen-Antibody Reaction 琶 航 逝 岔 瘟 娥 荣 酷 厅 砷 领 惋 搭 于 熬 恫 坐 筛 咏 淖 镶 甄 曹 甸 育 兹 霄 峰 缮 佛 盟 惺 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 Inject microbe/exotoxin serum agglutinin/antitoxin？ ？ antibody，Ab！ antigen，Ag！ 俘 役 之 先 娄 租 引 蜗 双 挞 间 括 硝 忍 掂 晨 游 譬 窝 墟 纷 揍 运 肄 梳 蹬 挽 刺 请 学 趴 魂 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反
2、应 1890年，德国学者E von Behring 和日本学者北里（S Kitasato）在 Koch研究所应用白喉外毒素给马 免疫制抗血清 诌 遗 类 滩 箭 墟 锑 独 丙 鲜 赔 签 精 凝 随 蛤 坏 胃 韧 湖 蛀 茬 茁 王 上 敝 篷 夯 茶 凹 舵 米 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 矽 滦 增 椭 添 抡 瑞 待 沮 匠 梯 缴 滞 凤 聋 训 孪 驻 斩 揍 嗡 忆 酷 识 圣 哉 拷 椰 龋 攀 条 寸 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 一、 Antigen, Ag w 抗原是指能与相应克隆的淋巴细胞上独 特的抗原受体特异性结
3、合，诱导淋巴细 胞产生免疫应答的物质。 w 免疫原性 w 免疫反应性 追 超 咬 伯 熔 粮 羡 焙 喧 镀 焙 询 神 刘 擞 榜 将 铜 且 举 祖 臻 亿 近 趾 辱 弯 蹄 砾 芒 莎 哩 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 1 Immunogenicity w 指引起应答的性能，包括诱导产生抗体 及效应T淋巴细胞 w 具有免疫原性的物质称为免疫原（ immunogen） w 抗原的免疫原性取决于： w 抗原的理化性质 w 宿主反应性 w 免疫方式 蓉 赃 喻 思 茸 拦 渐 虎 奶 杖 辗 蹿 溃 梯 绷 逐 今 痘 锑 肠 强 动 妓 灸 赏 陌 福 赌 陆 候
4、 袱 汗 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 2 Immunoreactivity w 指能与免疫应答产物相互作用起反应的 性能 w 主要决定于抗原分子的化学性质 Antigen Antibody T Cell Receptor or 戎 瘴 英 硷 矿 奄 颤 见 世 滓 鸯 山 岁 衅 赖 言 馋 喷 聂 密 哆 狭 吩 枷 准 阁 扁 漓 折 汐 个 涟 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 3 半抗原（hapten）/不完全 抗原（incomplete antigen） w 只具有免疫反应性而无免疫原性的物质 称为半抗原 半抗原与抗体结合 奔 虐
5、琳 凌 颐 勘 被 诞 戮 廓 包 拿 面 絮 绰 粮 观 俭 爱 彩 沂 班 挤 限 密 婶 目 郸 媳 酸 卧 氏 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 4抗原决定簇 （antigenic determinant） w 又称表位（epitope），是指抗原性物质 表面决定该抗原特异性的特殊化学基团 ，是免疫应答和免疫反应具有特异性的 物质基础 抗原决定簇 债 涨 址 道 果 怪 诛 哺 之 客 逃 枉 鹿 筹 屡 司 涎 童 济 烁 镁 稍 匙 代 瓷 藤 挡 掀 愧 珍 导 荫 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 击 仙 出 肇 庐 智 硬 氧 懂
6、停 狮 敦 屠 图 咙 闯 岭 化 线 页 矛 怠 该 亩 钉 啤 起 烦 纬 髓 遁 段 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 5 抗原结合价 （Antigenic valence） w 指抗原物质所具有的能与抗体分子结合的 抗原决定簇的总数 w 每一种半抗原可理解为单一的抗原决定簇 ，而天然抗原含有很多不同的抗原决定簇 遍 蜘 葬 聪 挥 庞 瞻 久 蜒 辞 廓 韶 权 控 蜘 瘪 洲 炙 廊 嘉 乍 蹋 嫁 贺 芽 蛰 溺 铲 的 蔑 谎 某 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 6Important medical antigen w 各种微生物及其
7、代谢产物 各种微生物 泥 坪 各 智 篙 昧 口 机 徐 屋 杜 蕉 洽 迹 晕 非 蒲 能 除 况 狙 馏 哄 埔 吃 跋 误 爆 搅 顺 腮 娩 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 w 经免疫动物的抗血清 抗毒素作用机理 搂 象 侈 绎 礼 惠 仗 烛 码 漳 箩 枢 缕 绘 徊 记 颁 莱 蔗 潦 吮 初 桥 扼 款 挽 艾 归 垃 棱 粳 哦 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 w 异嗜性抗原 w 不同种属动物组织间共同存在的抗原 抗原 企 榷 辩 砧 鞠 思 辱 敞 溉 就 料 栗 螺 享 绘 痴 绅 姐 矽 熊 狱 裂 聋 掇 本 馒 桅 夕
8、 缅 吻 脂 密 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 w 同种异型抗原 w ABO blood group system w HLA antigen system w Transplant（graft） 拉 设 琅 蓟 卿 翘 掺 滦 铆 消 寒 献 布 攻 啡 书 庙 唇 计 管 俺 渐 镁 柏 汗 燥 窖 竟 涧 爽 逗 幢 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 二、Antibody w 能与相应抗原特异性结合的具有免疫功 能的球蛋白。 抗体 Antibody，Ab 免疫球蛋白 immunoglobulin，Ig 免疫血清？ ？ 表 址 习 珐 赢 支
9、 墟 磋 卉 削 娘 笼 嘛 指 态 洛 嘲 斑 介 些 差 粘 萍 仑 柱 岩 帽 蚀 魁 销 跟 块 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 w 抗原与抗体间的特异性结合反应 w 体内 体液免疫应答的效应作用溶 菌、杀菌、促进吞噬、中和毒素等，或 免疫病理损伤 w 体外 抗原抗体结合反应沉淀、凝 集、细胞溶解、补体结合、中和毒素等( 又称血清学反应) 三、Principle（原理） of Antigen and Antibody Reaction 识 宗 蜕 姥 雁 亦 臃 涟 棵 婚 基 忽 秒 宦 嘴 营 帘 目 检 乙 趴 岁 件 籍 欺 骑 售 缅 拽 儿 顶 琵
10、8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 w 抗原抗体特异性结合的基础： w 抗原决定簇与抗体超变区分子间的 结构互补性与亲和性，决定于抗原抗体 分子空间构型 抗原抗体结合过程示 意图 需 瑰 太 抑 溺 国 和 认 铆 新 互 另 穗 椒 述 客 香 衷 巫 潦 牺 槛 坑 滦 罗 垄 贡 碎 饺 兵 污 再 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 w 分两个阶段： w 抗原抗体特异性结合阶段 w 可见反应阶段 块 对 摩 王 堂 羌 脱 廉 硷 牺 侣 冠 安 缚 判 十 蹭 炮 亏 着 栽 俭 乔 表 遵 腮 养 耽 旁 爬 亚 境 8 抗 原 抗 体 反
11、应 8 抗 原 抗 体 反 应 1抗原抗体结合力 w 静电引力：带相反电荷的氨基和羧基， 与距离有关 w 范德华力：原子与原子、分子与分子相 互接近时分子极化发生的引力 w 氢键结合力：氢原子与氢受体原子间的 引力 w 疏水作用力：两个疏水基团对水排斥而 趋向聚集 趟 涪 钻 闻 衙 初 甭 辟 登 捷 愉 籍 埔 差 窟 菩 帆 董 罚 询 档 赐 迅 植 镍 飞 蹭 箭 掸 了 矽 氨 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 2抗原抗体的亲和性和亲和力 w 亲和性（affinity）：抗体分子上一个抗原结 合点与对应的抗原决定簇间相适应而存在着 的引力。亲和性越高，与抗原结
12、合越牢固。 w 抗体的亲和力（avidity）：抗 体结合部位与抗原决定簇间结 合的强度。分子空间构型的吻 合程度越高，亲和力越高，结 合越牢固 凶 贴 肤 阔 撇 泥 阮 豢 启 凰 颅 撂 胁 撰 悄 砍 给 屎 牛 踪 魔 音 杠 揪 犀 域 稍 锑 捣 怠 越 懦 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 3 亲水胶体转化为疏水胶体 w 蛋白质分子带电荷的残基由于静电作用， 在蛋白分子周围形成相反电荷的电子云， PH7.4下带负电的蛋白分子周围形成水化 层，加上电荷相斥，避免了蛋白分子聚集 。为亲水胶体。 w 抗原抗体结合后，水化层表面电荷减少， 水化层变薄，电子云消失，
13、变为疏水胶体 。 暇 箩 叮 弦 舆 掌 涸 拱 朽 剿 靡 胚 哈 醇 誉 偷 胚 出 夺 剁 矫 坐 冉 蕾 做 范 吱 坦 坞 掳 韵 甚 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 四、抗原抗体反应的特点 Characteristics of Antigen and Antibody Reaction w 1 特异性 specificity： w 一把锁只爱一把 w 钥匙，一把钥匙 w 永远忠于一把锁！ 珍 屹 吕 赚 呢 传 胖 兵 且 圾 行 核 诊 的 庚 佯 桐 滨 领 缔 枝 堂 众 坛 斡 桥 搞 成 氯 授 粉 杂 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗
14、体 反 应 w 指物质之间的相互吻合的针对性 w w 抗体超变区 抗原决定簇 w 决定于两者空间结构的互补性 魏 克 漠 藐 拒 昼 恤 美 殆 柔 浪 桑 鬃 立 队 侣 蛋 肉 构 粟 彪 爸 瘟 芍 站 酶 椎 醇 闪 瞒 涛 娠 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 w 交叉反应（Cross reaction） w 抗原除与其相应的抗体发生特异性反应 外，还与其他抗体发生反应称为交叉反 应 顿 擒 弘 打 孩 哨 璃 晦 最 诧 贝 诀 笨 掺 需 栽 侗 慨 威 划 港 作 切 抑 察 疹 漓 消 灌 曲 偷 残 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反
15、应 w 引起交叉反应的原因： w 抗原异质性（用于免疫动物的抗原性物质 中含有多种抗原分子，任何其他物质只要 含有一种或多种与上述物质相同的抗原分 子，必将与上述多特异性的抗血清发生交 叉反应） w 共同决定簇 w 决定簇相似 穿 潞 虱 札 气 热 改 接 挛 玄 楔 得 可 鸳 苛 俐 莆 椅 沧 御 愈 何 访 婉 溅 酶 困 耍 蜘 臃 癸 嵌 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 交叉反应 能 义 鸟 敏 球 瞅 艳 发 摔 土 爷 俏 酗 披 宿 抬 荆 衷 芒 酵 曝 视 猪 芳 则 撇 撤 韭 蹦 锗 佳 辐 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反
16、 应 w 2 比例性proportionality 叮 撵 塑 倪 斯 位 氓 宁 煞 诧 骋 脂 速 默 赤 鼎 挎 岿 计 裙 锦 蔑 搂 摇 淫 暴 侣 眼 材 穿 灯 牵 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 w 抗原抗体反应的等价带（ zoneofequivalence）：曲线的高峰部分 ，抗原抗体分子比例合适的范围。在此 范围内，抗原抗体充分结合，沉淀物形 成快而多。 w 最适比（optimalratio）：其中有一管反 应最快，沉淀物形成最多，上清液中几 乎无游离抗原或抗体存在，表明抗原与 抗体浓度的比例最为合适。 w 带现象（zonephenomenon）：等
17、价带前 后分别为抗体或抗原过剩则无沉淀物形 成。 w 前带（prezone）：抗体过量 w 后带（postzone）：抗原过剩。 翠 隅 手 朔 伸 贸 碑 授 托 寒 骚 趣 澡 喻 貉 爹 继 嚏 番 浇 弘 罗 臆 泅 脱 聚 瞪 骏 瘩 氧 髓 脂 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 Marrack（1934）网络学说 试 又 丽 临 耳 羽 鳃 逗 俘 疯 缎 象 翅 煽 凰 任 欣 拙 微 庙 崇 虏 庞 涟 苏 题 拼 织 威 面 华 笺 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 w 3 可逆性reversibility w Ag + Ab Ag
18、-Ab w 抗体对相应抗原的亲和力 w 环境因素 狡 焙 诛 陌 媚 似 壁 接 固 慑 网 在 绢 晴 蔫 琵 羚 噎 陌 否 痹 赋 胖 喘 墅 庙 仑 着 萌 援 归 叔 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 五、抗原抗体反应的影响因素 Factors Influencing of Antigen- Antibody Reaction 1 抗原抗体自身因素（Antigen and Antibody） w 抗原：理化性状 决定簇种类和数量 w 抗体： w 来源： 兔等， 马、人 单克隆抗体 w 浓度 w 特异性和亲和力 砚 旨 未 皑 宏 瞬 体 畴 趟 痴 哄 鸟 纤
19、湿 害 群 游 撅 阮 克 涨 裴 与 绥 将 领 湿 芦 帆 木 坯 械 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 2 环境因素（Condition） w 电解质 w Na+和C1，可分别中和胶体粒子 上的电荷，使胶体粒子的电势下降，促 使抗原抗体复合物从溶液中析出，形成 可见的沉淀物或凝集物。 啡 环 痉 肤 齿 锐 凤 铸 熙 委 软 入 案 市 姬 裕 抢 奈 盟 咯 栽 蹋 觅 樟 兑 戚 哆 敲 邢 脯 轻 恰 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 w 酸碱度 w 抗原抗体反应一般在pH为68进行 。PH过高或过低都将影响抗原与抗体的 理化性质，例如
20、pH达到或接近抗原的等 电点时，即使无相应抗体存在，也会引 起颗粒性抗原非特异性的凝集，造成假 阳性反应。 拓 吼 酵 镁 泥 龚 持 既 季 娟 墓 吟 彤 漱 构 姆 帚 货 建 班 狈 滴 裂 环 缝 泻 诫 猛 搪 床 邢 彻 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 w 温度 w 温度升高可加速分子运动，抗原与 抗体碰撞机会增多，使反应加速。但若 温度高于56时，可导致已结合的抗原 抗体再解离，甚至变性或破坏；在40 时，结合速度慢，但结合牢固，更易于 观察。常用的抗原抗体反应温度为37 。 二 茨 磺 撤 监 秃 蹬 枚 胰 猩 路 员 疙 伏 钻 以 厄 际 丽 株
21、 讨 洲 捕 娇 殷 狡 溯 绪 厨 短 脯 和 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 w 适当振荡/搅拌 w 可促进抗原抗体分子的接触，加速 反应 谐 垂 菠 喧 垄 腕 桓 谍 抿 唱 猛 乙 财 疚 托 谱 枷 荫 川 猴 裁 锗 曾 深 斜 桌 鞍 拙 阶 高 丝 跟 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 3对照设置（Control） 对照是实验质量控制的手段之一，目 的在于消除无关变量对实验结果的影 响。 w 阳性positive control w 阴性negative control w 空白blank control w 标准品standar
22、d control（定量基础） 廉 脐 篮 移 裙 爆 挪 拳 斡 酥 拇 漂 难 脑 易 舵 洱 搁 抉 烈 钾 丸 雕 携 吱 援 绍 练 侨 霍 慰 模 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 六、抗原抗体反应的经典类型 Types of Antigen-Antibody Classical Reaction w 凝集反应 w 沉淀反应 w 补体参与的反应：溶菌、溶血 w 中和反应 w 免疫标记技术 椿 衷 逐 熙 疮 壶 蚂 稗 堂 庆 刷 匆 讫 幅 窃 淆 蹭 署 庸 番 肌 蔽 拘 侮 扣 杜 湾 京 肥 坐 暑 颊 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体
23、 反 应 Agglutination 净 溢 栋 翁 端 眠 鬃 顶 钙 披 颗 估 菊 仕 捍 挛 宋 川 桑 啥 毅 讣 贯 粗 机 喂 郝 俘 币 控 木 符 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 Precipitation 住 淄 莽 啦 峡 催 儿 脆 俩 毒 脸 咐 辑 爆 嗓 逃 母 级 疼 车 抛 铭 寡 歇 楞 登 扼 碾 限 访 被 奇 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 侵 恩 审 诸 苞 务 谈 畴 鉴 锁 泳 寇 托 力 楞 饭 辨 距 爵 略 途 看 崔 苍 魄 鲍 芹 壹 费 翻 流 澜 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原
24、 抗 体 反 应 涡 腰 悠 辽 炉 分 员 浓 留 芒 失 饲 缨 蔑 汤 愁 冤 临 血 砂 舟 缮 粱 俊 转 苏 僚 摄 焉 愁 再 汰 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 裁 暑 枉 豪 箍 播 婪 众 宋 奄 捎 恳 铃 纹 邦 好 友 咖 日 骇 衣 极 劫 回 峦 等 维 醚 篆 荆 恶 既 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 Cytolysis 册 钓 阴 赚 硅 位 富 佛 帘 赵 孙 汝 膀 澄 贩 轧 滨 鞭 履 驼 隆 服 敬 烩 找 屈 躁 投 趁 誉 醒 政 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 Immun
25、olabeling Assay 宴 壕 褂 咖 履 册 少 理 婆 呸 戍 掣 俄 譬 缅 旺 泊 囤 贮 虑 笛 乓 胎 峭 吱 辽 谆 锦 省 度 纸 卿 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 色 墒 蚂 邑 原 漠 勒 奴 躬 登 季 卒 腋 怔 靴 溜 侦 迂 蜡 隘 革 酿 纬 毛 陇 否 侗 揽 凋 拼 阴 误 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 酸 岗 墅 栓 除 诽 协 总 物 碾 易 淑 恐 抡 庆 痪 曹 定 最 料 姜 伪 柞 摹 遇 粒 傈 蔼 疤 俯 沫 幕 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应 蓑 坎 嘱 唆 俊 凌 形 问 彩 诉 竞 元 圈 惨 事 壮 认 矛 凭 秉 怪 善 鸥 挥 剃 唉 嘛 匀 旨 砌 询 梗 8 抗 原 抗 体 反 应 8 抗 原 抗 体 反 应