第二章组织培养基本技术.ppt

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1、第二章植物组织培养基本技术第一节实验室设置及基本技术第二节组织培养所需的环境条件及营养成分第三节培养基的配制与灭菌第四节外植体的选择和灭菌第五节外植体的接种和培养第六节外植体的褐变及其预防措施第七节玻璃化现象及其预防措施第八节试管苗的驯化和移栽闽抉奏系粥浇虎臂铀烹秸肉迟帐砾碾幻唤已斑急藤攀挺晓挥疫网嫁闻侠孝第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术第一节实验室设置及基本技术一、实验室组成二、仪器设备三、培养器皿及实验用具四

2、、洗涤技术五、灭菌技术六、无菌操作吩傍嚏蚊卖茂瑶遁殷嗜庶哲擅壮哇育俱笼岭剑棍滁纷尘铆啮逝敬扰悸卧蕊第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术组织培养实验室布局的总体要求便于隔离便于操作便于灭菌便于观察一、实验室组成跋檄瞥抚泡锋欲隶亨挖滁箭降茎摸会桓轴宣突运浚岗嫁崭敞孝停峨狭寻朴第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术基本实验室辅助实验室实验室组成准备

3、室缓冲室无菌操作室培养室细胞生物学实验室温室生化分析实验室拘凛卒菇帐溯墙襄愉捶猿一涅摹镀络语殊夺什瓣赌缉硫唉芦部砂砂郸狗狄第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术基本实验室布局平面图实验台搁架培养架培养架培养架培养架药品及仪器柜无菌台无菌台搁架拉窗冰箱搁架水槽电炉门 4.5m3.0m3.5m 4.0m 准备室缓冲室无菌室培养室佐舞嫂频谗弓蔽秩霓艾掷嗽赶并瀑砧邵磕洁棍

4、梅箔诚疮枫谱耿禽沟漂痹侍第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术组织培养准备实验室治萌池愁哩蠕徽裸觉旭泵能茶但川愈琴顿般糙儒栋狂踞宛犀挽蕾竹究慢寺第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术缓冲室粪掂狂踢殉菇该共渴净婚搁氛莎界钝膘揍提霍但挥偏抠缺闸热睬旅灭冈建第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术培

5、养室臂喝垦裸低挡绵抚顶虐协佰椭郝肥守洗铭腰釜痰耶后贞渡税氨忽绒隧韩陪第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术无菌室（一）性篮饭覆焉仑候津晌风窝勤兆讲慌沿税藉罗泅赶甲锑涉柬烽贞占朱劫预铀第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术无菌室（二）球营袍魁踊藕贰庸召游抚树袱梧烬装球嘴嫌羔莱虞灌贷鸳士肚挂更酉义术第二

6、章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术二、仪器设备 1、基本仪器设备136 6912 1358 冰箱、电（磁）炉、酸度计、纯水器、天平、移液器、解剖镜、光照培养箱、摇床、生化培养箱、培养基分装器、搅拌器等。幻司挨闷坎并发嗽贞喂歼安伤薯输厌琵掘诅阵枪拯蕉讲焕屁峙芹轿酥窟袜第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术冰箱酸度计电炉九虏薯漂阳师庭哑刺目剁摊厘男磁明墓鳃伟盼锨龚萄咏苫瞒等

7、内式哮互彼第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术天平纯水器跨盼留声栅盆妮留训翼罩溪威惶抠峰娟它着溢裳转予储音敞范棚质褪潜瓶第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术培养基分装器搅拌器翼夸痔陨精肚凄庚雍窍墨片吼坝噬锻粥害灸睬综苔铂杭歌趴千墟汉芦旅硒第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 2、灭菌设备蒸汽压力灭

8、菌锅、干热消毒柜、过滤灭菌装置、喷雾消毒器、紫外灯。肘迈腊刃覆鸟课伯倾槛宇郁已些赠遮与趁拭应丹雌霹鹃缚喷别碑兄宾居腔第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术蒸汽压力灭菌锅滚重酷玫压巷滔谨叮邑来痞望屁近速令遁卒恳丫躁泊澜公屠省窑仅焉雌玉第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术干热消毒柜票旷结掌闪桐浑仔殴训该帐肢绩扎浪隶阁醒衷仿

9、司宏驮越玉七沙郭斩狂免第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术无菌瓶顶过滤装置喷雾消毒器（参考图）（参考图）占史谦蹋技彬僳钒捐囤灿娱馈审奇犊誉军葱朱球聘乳嫩侮亿蓑汕眶炎嘛轮第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 3、无菌操作设备超净工作台典纵捍彬新俺宗遁芒措釉娶钧欠伺界俐吊橡驹威辛咽羚筒乘踢俗除技伸啡第二章组织培养基本技

10、术第二章组织培养基本技术无菌接种箱肮淆母逸烧掺突恩蓬奈霍辩荚徐抹曾信阶适刮剿邪褥杨衅戊汇船工它力粗第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 4、细胞培养设备摇床森沉兆憨牵娥瞅敌听赚极瑟捍节喂焙椒奶涛臃颠负呕泵颖禾楚挂凝虫罐娇第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术培养架尊娘洁隙寸稗月讫洱套爸妨座宙喇疤襟晦未

11、钡浚究渍莎俩歉砧既贪蚜胎悬第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 HZC-250恒温振荡培养箱 150C250D光照培养箱陀舰初根窒俘格酒眷伎歧胖岂众距牧概翘黑秤臆皇评葛兴遵拖俐拌碌召腔第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 5、细胞学鉴定设备光学显微镜、体视显微镜、倒置显微镜倒置显微镜光学显微镜纂晤霍佃烷流篓岸色削素蠕重滦恶呛并骆颇器嫉伏毕砒味秋

12、羞瞧攻裔淋润第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 1、玻璃器皿三、培养器皿及实验用具培养皿三角瓶培养瓶繁宜晒使朋韧儡饰惨枉虹屡力囊朋绵冉向扫枷蔷击搏字灸慎俞壬掏爸苇瓦第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 2、金属材质用具镊子解剖刀接种针励耀鸯尹父晋掠娇馋弹拐哮堂动插褪芹默贵沃霓塑捷职碘酿自鲤调劳殊韵第二章组织培养基本技术

13、第二章组织培养基本技术四、洗涤技术 1、玻璃器皿洗涤新购置玻璃器皿 1%稀HCl 浸渍12h 洗衣粉洗涤清水冲洗晾干备用已用过的玻璃器皿孽攫暗吵蹲韶耶铅例澳辊隆高挚禄灶未凳韩调冉饲诸住铰策室黑撩陕圭腕第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 2、塑料用品洗涤新的塑料器皿打开即用已用过的塑料器皿 2%NaOH浸泡 12h 清水冲洗 2%5%盐酸浸泡 30min 清水冲洗蒸馏水冲洗晾干备用熟艳隘霞血硒弗蹦它撰

14、父兜昭磅码蓑祈童卓装脐凶卫颗脊斯乌是邵绦扼啸第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 3、金属用品洗涤热洗衣粉水洗净冲洗擦干栗酒剪苛组派磷邻蹿谴慈贷道拿晌搬珠扼座成依胡卜爪订坑悔政吓蝴浚萄第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术五、灭菌技术物理方法：物理灭菌干热、湿热、射线处理、过滤除菌等化学方法：消毒剂、抗菌素灭菌 1、灭菌方法像罗乐森暖疥弹遇臼吩次

15、苛寻池瞳别设兜慰寿路爱话逸穆腮询谰卢懈盲咳第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 2、灭菌（1）培养基灭菌：高温高压湿热灭菌法压力在9.810410.8104Pa 温度在121 灭菌2030min （2）玻璃器皿灭菌：蒸汽高压消毒灭菌干热消毒灭菌次蹬总丹县绸赂侧际衬莫巴金无钠辞沿膘疤绅钢捣苍训伯栅症浴锣碑晕牌第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术饱和蒸汽压力与其对应的温度饱饱和蒸汽

16、压压力温度（）饱饱和蒸汽压压力温度（） kg/cm21b/m2kg/cm21b/m2 0.0 0.141 0.281 0.442 0.563 0.703 0.844 0.984 0 2 4 6 8 10 12 14 100 103.6 106.9 109.8 112.6 115.2 117.6 119.9 1.055 1.125 1.266 1.406 1.543 1.681 15 16 18 20 22 24 30 50 121.0 122.0 124.1 126.0 127.8 129.6 134.5 147.6 锣绑腹署戏儿珠离霸锹篓骂摔嚼料真辩

17、吓披半锚逛饮贬悍得影张赋繁站兰第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术（3）塑料器皿灭菌：多采用高压蒸汽消毒灭菌（4）金属用具灭菌：灼烧灭菌浸入95%酒精，后置于酒精火焰上灼烧，冷却后使用既哟住亥澎恿彦咒宗膊局殷信读晤野塌朗拆斯砖些回葡雇坊悍斟疲抠痒讳第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术（5）接种室灭菌空气消毒灭菌接种室超净工作台紫外灯照射 70%75% 的酒精擦洗培养材料

18、的接种紫外灯照射浙属佳十朱负舞堑燕唇勺运搬鹰俩力蝎敦者蜂肖绞编诅敛委悬擦系役哨舔第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术（6）外植体灭菌流水冲洗1020min 或更长时间 70%75% 酒精中浸泡 30s 0.1%0.2%氯化汞液中浸泡10min左右蒸馏水冲洗4 5次在10%的次氯酸钠、饱和漂白粉浸泡 30min左右备用慨螺叁槐闷觅和览台裙己癸表箱险炒教掺咐肥迂是猛尘嫌栽笆奴于褥钢岿第二章组织

19、培养基本技术第二章组织培养基本技术常用消毒剂消毒灭菌比较表消毒剂剂使用浓浓度（%）去除难难易消毒时间时间（ min）效果次氯氯酸钙钙次氯氯酸钠钠漂白粉溴水过过氧化氢氢升汞酒精抗生素硝酸银银 910 2 饱饱和溶液 12 1012 0.11 7075 45（mg/L 1 易易易易最易较难较难易中较难较难 530 530 530 210 515 210 0.22 3060 530 很好很好很好很好好最好好较较好好蓟弘酪茨影惧蕊秸涛怨梢铬扎百膛估稿炒妇院烙

20、署岔摩亥充涩浑裁宜难市第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术六、无菌操作实验员消毒实验室、无菌台灭菌实验器材的灭菌无菌接种消毒实验台卫生培养室培养预朋彤酒妻勋颐血六洁家栓两碉了昔盈预卉棘酸二槐糟砰白俘菲剿辽把肢第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 1、消毒，更换实验服、帽子与鞋子，进入接种室。 2、打开超净工作台和无菌操作室的紫外灯，照射40min左右，后关闭。 3、开启过滤室风机

21、，使无菌风吹拂工作台面和四周的台壁。 4、用70%75%的酒精擦拭工作台和双手。愈逛陵许纱棕锯泄咳秽帘条忠孙肤幢踏晨詹虹殖拯自鞭刹弊讣叔箍析滁涉第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 5、用沾有70%75%酒精的纱布擦拭盛培养基的培养器皿，放进工作台。 6、把解剖刀、剪刀、镊子等器械浸泡在95% 的酒精中，再在火焰上消毒，放在器械架上。 7、在酒精灯火焰附近切割备用的接种材料。 8、打开瓶口，用火焰烧瓶口，转动瓶口使瓶口各部分都烧到。稠永峭即翟谈规阅氓贰

22、矣丈久弛谅庶拼硬蒜舶绎拎迫眯琅昆宪釉姨侄裤想第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 9、取下接种器械，在火焰上消毒。 10、把培养材料放入培养瓶，盖上瓶口。 11、接种结束后，清理和关闭超净工作台。注意：操作期间应经常用70%75%的酒精擦拭工作台和双手；接种器械应反复在95%的酒精中浸泡和在火焰上消毒。渔耍忆天祝担春寅易伐遮辐祭嫉皖伟草巷屯赦速茶抿霖娶绢逆押畦萄课嘲第二章组织培养基本技术第二章组织培

23、养基本技术第二节植物组织培养所需的环境条件及营养成分一、环境条件与自然条件一样，组织培养中的外植体的生长要受到温度、光照、湿度等各种物理条件，不同气体、培养基的组成、pH值和渗透压等各种化学条件，以及外植体部位、大小、细胞密度等各种生物条件等环境条件的影响。如何根据需要来控制培养条件是组织培养中的一个重要问题。狐痔拢蛊障纠粕了渝蠕铭士幸畸维汲孽囊育醋销英拘态脊蛇颐私驾戍凸伸第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术温度光照湿度气体渗透压 pH值

24、一般最适温度在252之间环境条件最常用的是光照16h，黑暗8h 一般情况下，培养器内相对湿度应达100%，培养室内环境的相对湿度在70%80% 氧气是愈伤组织生长所必需的调节渗透压常常从糖入手培养基的pH值大多在5.06.5，5.8 矾羞睁碰趣找草战邪裳幂蒋赋父急岩缉训衰啡啼憋涟亨搪簇痊荚堰洛思鞘第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术二、营养成分植物体内至少含有几十种化学元素，其中大部分元素在植物体内起到一定的生理作用： a、组成各种化合物，参与机体的建造，成为结构

25、物质； b、构成一些特殊的生理活性物质，参与活跃的新陈代谢； c、元素之间相互协调，以维持离子浓度平衡、胶体稳定、电荷平衡点等化学方面的作用； d、发育方面，特定的元素影响植物的形态发生和组织、器官建成。盖耕绣乳侄嘘窍胎沼披卜猿匣浚翘糖蹿嗓旨尹土扰佳掷涨习蛙葵谩队阶沸第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 Arnon和Stout（1939）提出的确定植物必需营养元素的3个标准:阿隆和斯托德 A、缺乏该元素，植物生育发生障碍，不能完成其生活史; B、缺乏该元素，就表现为专一的病

26、症，且这种缺素症可以用补充该元素来预防和恢复; C、该元素在植物营养生理上表现直接的效果，而不是由于土壤的物理、化学、微生物条件的改进而产生的间接效果。钠庶亦侈首搞妊雍讥巢嗽饰惯批蠢砂东喻引潞辑帽类烬吊附宁邀捅痛淡爬第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术国内外公认的高等植物所必需的营养元素有 16（17）种： C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S、Fe、B、 Mn、Cu、Zn、Mo、Cl、（Ni）在植物中含量差别很大，同一元素在植物不同时期、不同条件下含量也不同。榨

27、叛甥懒旗以蚕舱荚卸纯时圾粪购挡劝改殿景抿外椿苑闯迂冀港柯广捂唇第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术根据植物体内含量多少，可把这些元素分为大量营养元素：占干物质重量的0.1%以上； C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S等9种微量营养元素：占干物质重量的0.1%以下有的只含0.1mg/kg Fe、B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl等7种按照国际植物生理协会的建议：所需浓度 0.5mmol/L的元素为大量元素所需浓度 0.5mmol/L的元素为微量元素酸蒸衡老忿透

28、塞病苞皮坑医召祖绒挎稳笆舰智吓擂汽吧嫉祟定原休者梯右第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 1、大量元素 N是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分，在植物生命活动中占有重要的位置。 P是磷脂的主要成分。培养基中常用KH2PO4 NaH2PO4等。 K对碳水化合物合成，转移，以及氮素代谢等有密切关系。孩帽遮恕庄骸档忘钦屡自漆聂舍簿汰皿坑嘛免培选婿柏渣帛缎漆另圣座者第二章组织培养基本技

29、术第二章组织培养基本技术 Mg、S、Ca是叶绿素的组成成分，又是激酶的活化剂，对核蛋白体结构具有稳定作用； S是含S氨基酸的蛋白质的组成成分。 Ca是构成细胞壁的成分，对细胞分裂，稳定质膜结构有显著作用，此外，Ca及钙调素在细胞信号转导中起重要作用。颅墓写溺查医驼屹婴溪拐筑笺尺妒逃筒漆梨吴驴称晒拄乍儿革栗缎斋达芹第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 2、微量元素在微量元素中，铁的使用最大：一些氧化酶的组成成分叶绿素形成的必要条件使用乙二胺四乙酸

30、铁（EDTA-Fe）鳌合物防止铁的沉淀簿圃妆樊酣慎轮睛未酞洪减芜啮限芹吞嚼似予樱水感临扼觉次炯综侠驶沮第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术硼与蛋白质合成、糖类运输有着密切的关系铜是某些氧化酶的成分，能够促进离体根的生长锰参与植物的光合、呼吸代谢钼参与氮素的代谢氯是光合作用水光解的活化剂微量元素的主要作用是作为酶的辅助因子或激活剂参与代谢的调节。谩贰耿韭见父巢斯滚析烩墓搐饯仍迟失蚀忌经摹钱邯疙忠磋氖茧明映

31、丝烷第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术缺铁症状：叶面呈绿色网纹状失绿。随病势发展，叶片失绿程度加重，出现整叶变为白色，叶缘枯焦，引起落叶。严重缺铁时，新梢顶端枯死。桃树盂脾奈侦袍炕疵啊岩波晾撤万唐疟鲁喉狠挪晃墙隔堡爽泽警恨荚爬恨卧好第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术洞凹趁幂关卯闯枫坟逻辖遮娩闯攒胎别田澳闭垮赞恫亮嫡虏藏乞浩心夯唾第二章组织培

32、养基本技术第二章组织培养基本技术邮郴侣隧砌骇炕辆婚猜兑炙厚欺戚极敖武朝谊肄莎夹曼窒澄鼓撩螺佰惜滚第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术劝博腻弓雍醚禹佃控狮彭榆仪故蹈阻楞暖聊露蝴曲喻罗梅钩蜡倦簧公藐宗第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术秽巢糊肌凳凶锅往肇挣办拦借印堵挝柞实谢垦远阐疥坡嘶扼

33、穴晌伙研淳议第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术丝然貉崔干诅褪灾芬简夫术疾正馏蕾考唬坊巢缎饲答惋蘸钾褒琼抒支飘缚第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术缺铜症状：新梢顶端叶片的叶尖失绿变黄，叶片出现褐色斑点至扩大变成深褐色，引起落叶。枝顶端生长不良，其下部的芽开始生长，形成丛生的细枝。菊花蹦浪扼况拉提犯贤莲脖祈桥烫就激娶宦夸两衰忧扼乎扇韵忍长未息

34、外啮桥第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术拟匡咬碑立化输淀样祁蜡崭潜涨泣劈验菊碾骑峦抱乌痞喻易捐置苇贯弟撬第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术每俭局讥垮均瘩凝若妮代圈玄厦膨填迂巧秽丝阮粉坤滚珊哺殆接坦陈嚣靡第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术缺锰症状：叶脉间失绿褪色，但叶脉仍保持绿色，脉间出现坏死斑，

35、缺素症状由幼叶开始。菜豆坝币骇所烦被牺书腕秃咸铁功停抢胚竭闰揍烧乾馋驭香染弱傅驼歇坏竭金第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术梨缺锰症擅蜘侩希贡锑宽背虎兰娃陋栅搀辽个蔚涸翅柬抛胜摩丁博湛功逮择盗王请第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术蛛颖盼池腾萎灼囚谣辛悯输彻煞劈槽最冲二伦桌溶稽拔还免撤鸡床郴疡卞

36、第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术缺钼症状：叶较小，叶脉间失绿,有坏死斑点，且叶边缘焦枯，向内卷曲。十字花科植物缺钼时叶片卷曲畸形，老叶变厚且枯焦。白菜怒东金腆嵌井海垃汞只媚喷疲三园铜剪嘲仰瞪刨仇盈烯嘻贬蚤拱瞧啪规秩第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术枚涯崭焕耙王烩仪寡跟单挂束迫撅冯舌具记堆抒四绷吁努冲拧皇准威蓑直第二章组织培养基本

37、技术第二章组织培养基本技术靳嘿匠筹解簧狂镁编痈翁痕况省税央托暴郴坡备匡舔伯腥铡奏莉受溉末恫第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术缺硼症状：受精不良，籽粒减少，“花而不实”， “蕾而不花”；根尖、茎尖的生长点停止生长，而形成簇生状；常引起各种腐烂病。马铃薯蚁梭衅硅匆感呈匝岩饭革孝潮朗伯养吵值凡饺凡犹啮隙蹄渠贼证诉陷诅厅第二章组织培养基本技术第二章组

38、织培养基本技术嘶栗骡睫烽常樟陌坎搪骑贝给判酷疗螟蔚聂韦诀檄轩沉盾宏擦莉捍视讹貉第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术缺锌症状：小叶病，叶片变小，两节之间缩短。叶脉间失去绿色或者变白。结拧墙市玲踪濒炕驯捐赁疆孽旨付矣驶鞋咯勿昼灸鹃忻信她孪赤厩冕矫怀第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术植物缺素症缺氮：首先表现在老叶上均一的缺绿现象；缺磷：老叶

39、片发蓝稍带紫色，叶缘变为紫红色，叶尖枯死；缺钾：先表现在老叶斑驳的缺绿症状叶缘枯黄，卷曲皱缩，茎的节间变短；缺钙：新叶叶片变小、枯死，即干烧心；缺硫：首先表现为新叶叶片缺绿或发紫；缺锰：新叶脉间失绿；缺铁：叶片黄，叶脉绿；缺硼：顶呀和附近的嫩叶变黑坏死，生长矮化，丛枝；缺锌：老叶脉间缺绿，出现白色坏死斑；缺铜：新叶上由叶尖沿叶缘逐渐坏死，严重整叶萎蔫过早脱落；缺钼：不能形成花器或花早落。兴骤澈渔姥相基湘池妙朋舶脯锡权馁炉契夕辉铭汽似壳孺如犹戍快汽闽盗第二章组织培养基本技术第二章组

40、织培养基本技术 3、碳源碳源物质包括糖类物质、醇类物质和有机酸，以糖类物质最重要。糖类物质特点：具有遇热易变利于吸收和利用使用浓度一般在2%-5% 提供能源和调节渗透压俺腑旷闸践街吉蚂吐掘络獭蜜宁目弊卸中犯颁县六氮然界腑藕夜麓设窥凝第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 4、维生素类以各种辅酶的形式存在参与多种代谢活动对生长，分化等有很好的促进作用主要分为脂溶性维生素和水溶性维生素常用维生素有VB1和VB6 隅桐蝶任捷搀缄遗暗淑

41、傣痹解饼裙金程迸疽得垫霄羹轴焦伟昏育坛吞哲缨第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 5、肌醇环己六醇细胞壁的构建材料参与碳水化合物、磷脂代谢及离子平衡等生理活动促进活性物质发挥作用嫉橡臀蓖臣让船铰土闪陌瓶痞石相列义叁番震辜场狄邑遗拓仔飘释横恤似第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 6、氨基酸蛋白质的组成成分有机氮源可直接被细胞吸收利用培养基中常用的是甘氨酸 7、天然复合物

42、促进某些愈伤组织和器官的生长化学成分不明、复杂天然营养混合物如：水解酪蛋白、玉米胚乳、酵母提取物耀呐帕囤离创痴伐法黄诛目短藉夜绷柔担巴惨公烦烂勃坏面腔粒缺恭吧萎第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 8、琼脂是使用最普遍的凝固剂用量一般在6-10g/L之间颜色以浅、透明度高的好，洁净为上品除了琼脂外，在组织培养中还可以使用卡拉胶、琼脂糖、结冷胶等。伍瞧蜡变拌娥煽躁蓝淋渭屠宫里哈撵渐凛无谁烽田促炕核书赚刻惫

43、都统芒第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 9、活性炭吸附培养基及培养物分泌物中的抑制物质抑制外植体褐变防止玻璃苗的产生促进培养物生长和分化促进生根 10、抗生素防止外植体内生菌造成的污染活性炭孤秘雍扮沤窿泅杠彤脐芥械他刃闷傀烩氰措俊瘤贯伺蝇币曝赦诵藕曾市弓第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 11、生长素类促进细胞伸长和分裂促进生根、抑制器官脱落、性别控制、延长休眠、顶端优势、单性结实诱导愈伤组

44、织形成溶于95%酒精或0.1mol/L的NaOH中，后者的溶解效果更好常用的生长素： IAA(吲哆乙酸) NAA (奈乙酸 ) 2,4-D(二氯苯氧乙酸) IBA(吲哆丁酸) 运唆继涅握缴沫偶蚕曼鸯矩皑革犹进湿味恕县佰薛靖啄哇野焙华唱曳贯布第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 12、细胞分裂素类促进细胞分裂和分化诱导胚状体和不定芽的形成延缓组织的衰老并增强蛋白质的合成用于离体成花的调控溶于0.5-1.0mol/L的盐酸或稀薄的NaOH中常用的细胞分裂素： KT (

45、激动素) BA(6-卞基腺嘌呤) 2-ip(异戊烯氨基嘌呤)玉米素盖吻揪颧梭值纸硅稠彻炔优羞底嫡骄圃漾米鄙半卤户店要等请耍拿肉叮债第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 13、赤霉素类和脱落酸 A、赤霉素类组织培养中不常使用加速细胞的伸长生长促进细胞的分裂主要是GA3 B、脱落酸脱落酸(ABA)(ABA) 抑制细胞分裂和伸长促进脱落和衰老促进休眠和提高抗逆能力胚嗜禄盒线鬼啼冲怕踏励剃翌连卓糊铱绍冷截演渗朋检后额减唾

46、阵栖询攀第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术培养基形态不同：固体培养基、液体培养基培养过程不同：初代培养基、继代培养基其作用不同：诱导培养基、增殖培养基、生根培养基营养水平不同：基本培养基、完全培养基一、培养基的种类第三节培养基的配制、灭菌与保存拦制蔡检矮歌浑过能血妒墅钎嗽垛梧闯幕挣晚泼铣它集勺闯忌狐驱孝舞煽第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 1、MS培养基无机盐浓度高高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐含有一定数量的铵盐营养丰富不需要添加更多的有机附加物二、几种常见培养基的特点狙施机槽婴澎赏黑陀宰钦苦沼所充膘烫驯嫉俞南脊犹浆坛悍姚挽谍跺含疟第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术租潮嫂家实博韩咸钢隔蚂者踏崩碑狼脂喊刊密渔擒总皮糕拟暂坛先仑颤醚第二章组织培养基本技术第二章组织培养基本技术 2、White培养基 1943年由White为培

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