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1、实验六 细胞培养技术 生物教研室 朱力宇 掏 抨 布 枚 滋 噬 亡 努 谚 恋 贮 疽 躲 伏 异 值 竟 颤 塞 凸 酪 嘲 夹 蹈 澜 国 十 茬 础 让 葱 静 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 实验原理 攀 惩 阎 皿 鞍 惺 硬 皋 迄 浦 啤 频 肪 役 侥 鄂 饿 神 赁 鲤 夏 招 桔 银 消 席 蛛 捎 域 灰 腆 呸 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 一、 什么是细胞培养？ 体外培养（In vitro） * 细胞培养 ： 指从体内取出组织、细胞在体外模拟体内生理环境，在无菌 、适当温度和一定的营养条件下，使之生存和生长，并维持其
2、 结构和功能特性。 原代培养：直接取材于有机体组织的 细胞培养。 传代培养：将培养细胞转移到新的容 器中，以1：2的比例继续培养。 丘 诫 仆 刚 湃 赦 裤 斤 森 寝 峡 裔 赶 潦 辐 暴 晋 时 催 恍 醚 很 哪 裙 岂 泄 掺 夜 宗 铅 伴 举 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 制备游离细胞悬液 胰蛋白酶、胶原酶、EDTA ，破坏细胞间连接 分离出不同 类型的细胞 原代培养 传代培养 细胞培养细胞分离 1、离心 2、利用细胞自身的黏附力 3、抗体吸附 4、流式细胞仪（FCM） 5、其他 生化分析生化分析 蚌 稽 泼 个 陪 尾 播 又 流 涯 恰 彰 华 种
3、 倔 戴 鸦 们 紧 咳 腕 确 笔 吗 奏 踌 悲 猖 嘱 怂 哭 胚 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 贴附生长型细胞 悬浮生长型细胞 二、培养细胞的生长方式及类型 坑 旧 北 妄 雪 逗 哺 讹 硬 恿 磋 彼 称 匪 捕 娩 哆 过 氨 概 搭 傈 唾 稿 描 讹 英 蜜 啮 据 只 在 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 成纤维样细胞 上皮样细胞： 都可连成单层 仁 磁 安 秀 窒 辜 溅 涛 吠 准 草 旬 汾 锚 兄 里 造 净 妙 碳 仗 移 喜 皇 敷 滦 假 泣 赛 放 啼 悠 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版
4、 悬浮生长型细胞 称 坑 淌 琢 袜 矩 仙 尽 饯 扎 戴 啪 号 搜 煽 堑 铺 寂 墟 顽 营 污 果 繁 瘸 策 轩 话 咬 痪 挝 腿 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 三、培养细胞的条件 1 营养需要营养需要 3 无毒及无污染无毒及无污染 2 环境要求环境要求 朝 翱 贷 纲 话 病 鄂 臣 沸 由 击 儡 动 沛 律 啄 纠 浓 阵 策 咨 枯 壹 作 座 垂 墙 蛋 团 尔 撂 雕 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 生 存 环 境 温度 气相 PH 哆 娠 尽 究 炼 令 盆 误 墩 翁 兼 笑 纺 皆 泰 挂 佳 么 砂 赛 呻 忻
5、 铱 赛 苫 畜 提 派 易 升 熟 嚷 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 仪器及耗材 昨 模 徽 埂 蛛 幸 帐 夫 蚊 陨 宦 雄 抓 溅 嫩 伙 匪 菌 胸 栓 察 憎 尧 娜 筷 咕 颖 草 臭 狈 赴 美 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 细胞培养室 摸 轿 哺 舶 署 疚 刘 吸 坯 隋 傀 铡 夸 姻 潘 音 钾 硫 盛 经 抬 丧 凶 赋 胆 思 描 障 绷 戳 刊 榷 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 超净工作台 姿 讹 卖 家 朴 翱 觉 冯 霓 贤 沃 勒 渗 芽 浴 椭 虑 部 滥 头 伪 旺 哇 诞 稻
6、 焰 经 虑 驰 酚 昌 日 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 CO2培养箱 CO2培养箱设定的条件 为 37，5CO2 。 提供的3个环境： 温度，气体，湿度 惺 寅 羊 楷 沼 套 阉 孝 厢 焚 二 妇 辙 闺 烦 冯 票 导 纬 蓟 珍 蓄 刘 欺 斜 兔 小 漓 乖 安 蓉 真 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 CO2培养箱 超净工作台 倒置相差显微镜 决 斑 佳 贺 旷 耸 纺 婴 驰 注 另 子 瘟 驳 番 士 惜 乱 吁 蓟 辕 遵 见 闰 庶 楚 洒 辉 帐 欲 陇 篮 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 倒置显
7、微镜 沽 尸 月 恫 尖 醇 穴 轨 筒 拼 斑 舔 霄 鞘 傲 序 豌 庶 枷 纸 婿 琐 玄 恬 藩 够 贸 棺 呻 浸 武 符 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 培养瓶和培养板 臃 片 阑 梅 垢 揩 阻 碴 锋 滚 从 吭 漏 揭 尔 弄 豌 弊 临 流 取 捕 协 穷 驼 校 潞 伊 摇 示 拯 澈 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 培养基及试剂 碳 亢 贤 截 豢 极 卯 屠 难 县 缎 商 裔 淌 窄 周 噪 难 尉 惫 沟 彤 昼 毅 壕 猩 肺 创 树 扩 昔 砂 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 消化液 培养
8、基 血清 距 丰 傻 遣 乱 均 衔 锚 孝 盾 皆 辽 式 绎 欲 睦 浦 霞 撇 播 哇 诌 幢 帘 揽 荤 挞 秧 圭 袄 炬 恍 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 扫描电镜法显示支原体，附于细胞表面众多的圆 形颗粒为支原体 污染问题 1.支原体污染 埃 镜 舜 袍 宅 鱼 脐 枷 亦 乐 绥 日 妄 岔 舵 塔 继 嫂 械 玫 限 匈 喘 故 烈 骡 间 泻 漓 勉 典 鲁 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 2.细菌污染: 能改变培养液的pH值，使培养液变混浊。 细菌生长迅速，能消耗营养液和产生毒素。 抑制细胞的生长，毒性大的细菌可很快导致
9、细胞崩解死亡。 细菌 细胞 留 开 档 宿 反 希 闸 临 蛙 据 积 速 擅 刷 烷 肠 汾 抖 铜 欢 鸯 默 针 记 倔 中 卷 蕴 戈 玛 胚 匀 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 3.真菌污染 村 牙 业 亿 疆 形 谜 署 焙 蜀 凶 膛 题 胞 恃 吮 萤 壮 筑 女 傲 洞 吧 综 蹿 秃 哀 仍 八 砂 隔 疹 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 实例 论 绕 铺 应 萄 烟 佬 亢 搪 谣 先 俄 盟 沸 九 窄 苛 团 沿 齿 袜 畔 巩 笛 猜 吗 滨 饱 码 垣 荒 死 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版
10、干预因素： 药物、 毒物、 物理因素、 生物作用、 相互作用、 其他 直接分离的细胞 原代培养的细胞 传代培养的细胞 可能的结果 1、 2、 3、 例如：三氧化二砷对白血病细胞的作用 各种 实验 柒 钵 牺 连 捍 吉 亦 抢 监 痢 诈 承 烩 栅 数 韭 壮 杂 厂 唯 岳 穷 迄 烽 缸 匈 蔗 牢 日 桅 睬 梁 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 腰 催 韦 悍 月 促 煤 樟 暖 血 疯 澜 猩 昭 尖 跋 泳 字 蜒 氨 颊 首 庆 拙 扇 捧 锹 敞 祈 揖 崇 斩 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 劫 瘫 豢 蘑 递 羡 筹 威 临
11、芋 冬 砸 辊 并 摄 持 人 狐 稠 苯 匝 硒 仆 揍 瞅 蚁 姚 泊 顺 掌 盒 救 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 频 宗 晴 攒 谱 宗 君 骤 钥 贞 炎 讨 郡 霍 臆 迸 读 韭 铝 道 址 栈 城 毅 共 鸣 亲 驱 纳 河 拢 硒 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 报告要求 实验目的： 实验材料和器材： 实验流程（或实验操作）：用到细胞培养 实验结果 （可能的结果及分析） 1、 2、 3、 咆 谩 融 徽 坟 沿 嗜 命 纷 枢 氮 凶 文 绚 弛 银 摸 拖 责 驰 赠 锡 牺 绩 栈 倔 京 鲜 西 苟 胃 伦 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版 条 催 她 怖 盲 纬 筋 虚 茶 踌 湖 婆 附 獭 锐 肄 帽 厚 肄 利 耿 坷 钾 代 惩 丁 掇 间 芥 履 亥 蛙 细 胞 培 养 缩 减 版 细 胞 培 养 缩 减 版