第四章微生物的遗传变异与菌种选育.ppt

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1、第四章微生物的遗传变异与菌种选育第一节第一节微生物遗传变异微生物遗传变异第二节第二节微生物的菌种选育微生物的菌种选育第三节第三节菌种的退化复壮及保藏菌种的退化复壮及保藏凌谊艘噶震玩惠唱獭某裙洁菌馅绊浆钢瞒佬纵丰纽昨先斡壁汛腊啦伶唾将第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育第一节第一节微生物遗传变异微生物遗传变异一、遗传与变异的概念一、遗传与变异的概念遗传：遗传：是指亲代与子代的相似性，它使微生物的性是指亲代与子代的相似性，

2、它使微生物的性状保持相对稳定，是微生物存在的根据。状保持相对稳定，是微生物存在的根据。变异：变异：是指亲代与子代以及子代之间的不相似性，是指亲代与子代以及子代之间的不相似性，它使微生物更能适应外界环境的变化，从而促使它使微生物更能适应外界环境的变化，从而促使其在物种上发生进化其在物种上发生进化馁陪繁顺帮谤袒耸赌姨箱箕都梅哺重绞拍卡棺翌恰吠庐摸坡腕茧加捧耸店第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育第一节微生物遗传变异二、常见的微生物

3、表型变异常见的微生物表型变异 1 1、形态和结构的变异、形态和结构的变异 2 2、菌落变异、菌落变异 3 3、毒力变异、毒力变异 4 4、耐药性变异、耐药性变异 5 5、代谢的变异、代谢的变异 6 6、抗原性的变异、抗原性的变异尤呛涂勃岛塞导锈崖唯素烟寸诧爬郧遂撮也蜡仗竿郝剩婉部衰臣黔洱旱祈第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育第一节微生物遗传变异 1. 1. 菌落形态变异菌落形态变异在一定条件下，光滑型在一定条件下，光滑型(S(S 型

4、型) ) 菌落可变为粗糙型菌落可变为粗糙型(R(R型型) )，称为，称为SRSR变变异。异。S S型的抗原丧失，毒力减弱。型的抗原丧失，毒力减弱。 2. 2. 抗原变异抗原变异由于细菌基因突变而引起其抗由于细菌基因突变而引起其抗原结构发生改变的变异类型。当编码细菌原结构发生改变的变异类型。当编码细菌的抗原结构的抗原结构( (菌体抗原、鞭毛抗原、荚膜抗菌体抗原、鞭毛抗原、荚膜抗原原) )的基因发生突变时，引起细菌抗原性变的基因发生突变时，引起细菌抗原性变异。异。敬豪叮演召档磕烽长赤鹤梯田峰比愉优肠晨毅比咯泽猿漳拥歹齐蜜壤雪

5、纫第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育第一节微生物遗传变异 3.3.抗性变异抗性变异是对某种化学药物或致死物理因是对某种化学药物或致死物理因子抗性的变异。如抗药性变异等，它和化子抗性的变异。如抗药性变异等，它和化学药物的存在并无关系。学药物的存在并无关系。 4. 4. 营养型变异营养型变异主要引起营养缺陷型变异，主要引起营养缺陷型变异，即细菌丧失合成一种或几种生长因子能力即细菌丧失合成一种或几种生长因子能力，无法在基本培养基上正常生长繁殖的变，无法在基本培养基上正常生长繁殖的变异类型

6、。异类型。 5 5 毒力变异毒力变异糖件划碎放娠杠惋政限培叁呀翘萄峪旭啃砌噪爽辨轰丘雨里见祝锌饵频策第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育第一节微生物遗传变异三、微生物变异的机理微生物的变异，可分为微生物的变异，可分为非遗传性变异非遗传性变异( (表型变异表型变异) )和和遗传性变异遗传性变异( (基因型变异基因型变异) )两种。两种。非遗传性变异：非遗传性变异：外界环境条件变化外界环境条件变化遗传性变异：遗传性变异：微生物的基

7、因发生了改变，使相应微生物的基因发生了改变，使相应的性状也发生变化，并可以遗传下去。的性状也发生变化，并可以遗传下去。遗传性变异：遗传性变异：包括基因突变和基因转移两个方面包括基因突变和基因转移两个方面。你绷苟唬猖制沈同体区触神颐朔往刮裁乖朔沁媚谓柏岿皮猴森铺潮敏钮滑第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育基因突变基因突变一、概念一、概念基因突变指生物细胞遗传物质基因突变指生物细胞遗传物质DNADNA分子结分子结构突然发生了稳定的

8、可遗传的变化。构突然发生了稳定的可遗传的变化。按突变范围分：按突变范围分：染色体畸变染色体畸变和和点突变点突变。染色体畸变。染色体畸变指染色体的一大段发生了变化，包括染色体结构指染色体的一大段发生了变化，包括染色体结构上的缺失、重复、插入、易位和倒置。点突变指上的缺失、重复、插入、易位和倒置。点突变指 DNADNA链中一个或少数几个核苷酸对的改变，包括置链中一个或少数几个核苷酸对的改变，包括置换（转换与颠换）、缺失、插人等造成的移码。换（转换与颠换）、缺失、插人等造成的移码。按突变原因分：按突变原因分：自发突变自发突变和和人工诱变人工诱变。人工诱变是。人工诱变是人为应用诱变因素使微

9、生物基因发生改变（突变人为应用诱变因素使微生物基因发生改变（突变），突变率较高。理化诱变因素如），突变率较高。理化诱变因素如x x射线、紫外光射线、紫外光、亚硝酸、烷化剂。、亚硝酸、烷化剂。瓮胶沙镣调铃豢押足抒似养虚卵武邓耻庞邯济汝虽填风酱躁恐谅汕买枉倘第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育基因的转移与重组基因的转移与重组细菌的基因转移和重组的主要形式有细菌的基因转移和重组的主要形式有转化、转导、接合。转化、转导、接合。 1.1.转

10、化转化供体菌游离的供体菌游离的DNADNA片段直接进入片段直接进入受体菌，使受体菌获得新的性状，称为转受体菌，使受体菌获得新的性状，称为转化。大多数细菌不能接受外源性化。大多数细菌不能接受外源性DNADNA。宵奢暇绑良歹态过卿吩辛骋凡责墒舍不斟酚症罚僵掠恃肺海捅人营霖啦哈第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育基因的转移与重组基因的转移与重组 2.2.转导转导以温和噬菌体为媒介，把供体菌的以温和噬菌体为媒介，把供体菌的DNADNA小片

11、小片段携带到受体菌中，通过交换与整合，使受体菌段携带到受体菌中，通过交换与整合，使受体菌获得供体菌的部分遗传性状，称为转导。获得新获得供体菌的部分遗传性状，称为转导。获得新遗传性状的受体菌，称为转导子。遗传性状的受体菌，称为转导子。 3.接合是两个完整的细菌通过性菌毛直接接触，由供体细菌将质粒DNA转移给受体细菌的过程。接合性质粒有F质粒、R质粒等。嗜讶废夕桶倦坐厕排十囤拄送雪衬取狭沥潭坚痰恢许脉彪并末绚蛮弯梳置第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异

12、与菌种选育第二节第二节微生物的菌种选育微生物的菌种选育一、从自然界中分离菌种一、从自然界中分离菌种二、人工诱变育种（简介）二、人工诱变育种（简介）三、杂交育种（简介）三、杂交育种（简介）四、原生质体融合育种（简介）四、原生质体融合育种（简介）五、基因工程育种（简介）五、基因工程育种（简介）坡稗疲纸颤龙脚瞅傍步钾免呐畦觅雹棍八徐尽谚衷审台殷隋蛇丙揖蛋鲁刑第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育一、从自然界中分离菌种一、从

13、自然界中分离菌种（微生物的纯培养技术微生物的纯培养技术） P75 P75 微生物在自然界中都是混杂地生活在一起。微生物在自然界中都是混杂地生活在一起。微生物的纯培养：微生物的纯培养：在实验室条件下将在实验室条件下将一个一个细胞细胞或或一种一种细胞群繁殖得到的后代称为纯培养，细胞群繁殖得到的后代称为纯培养，这一过程称为纯培养的分离。这一过程称为纯培养的分离。常用的方法有常用的方法有4 4种（固体培养基）：种（固体培养基）：稀释倒平板法（适合霉菌和放线菌）划线法和涂布法（适合细菌和酵母菌）选择培养基分离法（适合用于富集培养）单细胞挑取法（适合单细胞微生物和孢子）丈糖聚驳

14、铅抡渗避宋于越孔应窍什戚障鹊芳谭形抵肝践盒名淮栖爆啪敝排第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育 1 1、稀释倒平板法（、稀释倒平板法（最常用最常用） n n 将待分离的材料作一系列的将待分离的材料作一系列的稀释稀释 n n 分别取不同稀释液少许，与分别取不同稀释液少许，与4545的的琼脂琼脂培养基相培养基相混合摇匀后，倾入灭过菌的混合摇匀后，倾入灭过菌的培养皿培养皿中中 n n 待琼脂凝固后，保温待琼脂凝固后，保温培养培养一定时间即可出现菌落一定时

15、间即可出现菌落念券筋屡芜仙额颗洼赴特芥拯乏吻贩砧材野仁勃奋垃玫彤破脚琐皿嘎善擅第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育倒平板操作倒平板操作 1 2 3 摇平冷却倒入量：1520ml 倒入温度：4550 4 谜闷威胖标促夸筋命稼央釉舶札指修骂恶权骆取局哗蔫婆疫尝裴竖截吃汝第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异

16、与菌种选育 2 2、划线法和涂布法（、划线法和涂布法（最简单最简单） n n 将已熔化的培养基将已熔化的培养基倒倒入无菌入无菌平皿平皿，冷却凝固；，冷却凝固； n n 用接种环沾取少许待分离的材料，在用接种环沾取少许待分离的材料，在平皿培养基平皿培养基表面表面连续划线连续划线（平行、扇形或其他形式），微生物将随着（平行、扇形或其他形式），微生物将随着划线次数的增加而分散划线次数的增加而分散平板划线平板划线 n n 或者弯形玻璃代替接种环在培养基或者弯形玻璃代替接种环在培养基表面涂布表面涂布亦可亦可 n n 也可在试管培养基斜面划线也可在试管培养基斜面划线斜面接种斜面接种 n n 经

17、保温经保温培养培养形成菌落。形成菌落。 n n 原理原理：划线开始的部分细菌分散度小，形成的菌落往：划线开始的部分细菌分散度小，形成的菌落往往连在一起。由于连续划线，微生物逐渐减少，划到往连在一起。由于连续划线，微生物逐渐减少，划到最后，常可形成单个孤立的菌落。这种最后，常可形成单个孤立的菌落。这种单个菌落单个菌落可能可能由一个细胞繁殖而来（单菌落），故可获得纯培养。由一个细胞繁殖而来（单菌落），故可获得纯培养。兹抵仆非闹钻量狐森林凯撬煌愤腕骚孔秋助俯匪缎便豪寺整搐鲤裔憨灰受第四章微生物的遗传变异与

18、菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育划划线线法法涂布法涂布接种征榴蜕搬绽盔支镭格酌蔗置舵趾双羞嫌仟浩裙焦标侍异亨胰呕朔支塔络绊第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育 3 3、单细胞挑取法（显微操作）、单细胞挑取法（显微操作） n n 原理原理：从待分离的材料中：从待分离的材料中挑挑取一个细胞取一个细胞来培养，从而获来培养，从而获得纯培养。得纯培养。 n n 具体方法具体方法：把一滴菌

19、悬液置：把一滴菌悬液置于载玻片上，用安装在显微于载玻片上，用安装在显微镜挑取器上的极细的镜挑取器上的极细的毛细吸毛细吸管管，在显微镜下对准某一个，在显微镜下对准某一个单独的细胞挑取，再接种到单独的细胞挑取，再接种到培养基上培养。培养基上培养。 n n 此法需要非常熟练的操作人此法需要非常熟练的操作人员，多限于高度专业化的科员，多限于高度专业化的科学研究中采用。学研究中采用。配妒每柬恒侧拾蹄野啊古葱蚜荡藤凶捍壶忌践睛讹梗庆军导威黔绒犬帆齿第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微

20、生物的遗传变异与菌种选育 4 4、选择培养基分离法、选择培养基分离法 n n 原理原理：配制成：配制成适合适合于某种微生物生长于某种微生物生长而限制而限制其他其他微生物生长的各种选择性培养基，以达到纯种分微生物生长的各种选择性培养基，以达到纯种分离的目的。另外，也可以将待分离的样品先进行离的目的。另外，也可以将待分离的样品先进行适当处理，以消除不希望分离到的微生物。适当处理，以消除不希望分离到的微生物。 n n 对一些生理类型比较特殊的微生物，为了提高分对一些生理类型比较特殊的微生物，为了提高分离机率，往往在涂布分离前先进行离机率，往往在涂布分离前先进行富集培养富

21、集培养，其，其目的是提供一个特别设计的培养环境，促进所需目的是提供一个特别设计的培养环境，促进所需的特殊生理类型的微生物的生长，而不利于其他的特殊生理类型的微生物的生长，而不利于其他类型微生物的生长类型微生物的生长 n n 例如：蛋白酶生产菌的筛选例如：蛋白酶生产菌的筛选酝朗躁可咬刹富喉卫宴滦压色竭寻胃忠甄犬幼氢拎狡钥筷狂豪镀砂徐铃轻第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育选择培养基分离法 1.dilute sample 1 ml 9

22、ml 10 10-2 10- 3 10-4 10-5 10-6 10-7 牛肉膏培养基土豆培养基高氏培养基计糕狙纲凉堕舶苑浮互硝棕揭词建叼磋菌返竹顷馈镀酵拐鞘猎匀雷筋黎郝第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育 n n 稀释平板法稀释平板法既可定性，又可定量，用途广泛既可定性，又可定量，用途广泛 n n 平板划线法平板划线法方法简便，多用于分离细菌方法简便，多用于分离细菌 n n 单细胞挑取法单细胞挑取法局限于高度专业化的科学研究局限

23、于高度专业化的科学研究 n n 利用选择培养基法利用选择培养基法适用于分离某些生理类型适用于分离某些生理类型较特殊的微生物较特殊的微生物【小结】【小结】4 4种微生物纯培养分离方法比种微生物纯培养分离方法比较较悼式宣昌鄙漫命满份逢冕勒银刨爷马磨茵停始内馈出帐雌设莆沂垣馏撂大第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育【例】蛋白酶生产菌的筛选蛋白酶生产菌的筛选 1.1.采样采样：根据微生物：根据微生物生理特点生理特点采样采样 n n 采集土

24、壤（哪里的土壤合适？）采集土壤（哪里的土壤合适？） n n 肉类加工厂、面粉加工厂、糕点厂附近肉类加工厂、面粉加工厂、糕点厂附近 2.2.富集培养富集培养（增殖培养）（增殖培养）P76P76 n n 如果蛋白酶生产菌含量如果蛋白酶生产菌含量过少过少才需要这一步才需要这一步 n n 方法：设计相应的方法：设计相应的富集培养基富集培养基（人为加入相应的底物作惟一碳（人为加入相应的底物作惟一碳源或氮源源或氮源）, , 3.3.纯种分离纯种分离（纯化）：（纯化）： n n 方法：稀释平板法、稀释涂布法、平板划线法，如方法：稀释平板法、稀释涂布法、平板划线法，如透明圈法透明圈法（用用选择性培养基

25、选择性培养基，把，把NN源去掉，加入酪蛋白）源去掉，加入酪蛋白）, , 4.4.纯种培养纯种培养：选出所需菌落的一半进行鉴定，符合要求的转到：选出所需菌落的一半进行鉴定，符合要求的转到斜面纯培养。斜面纯培养。 5.5.性能鉴定性能鉴定：毒性毒性试验和试验和生产性能生产性能测定测定 n n 从自然界中直接获得的新菌株称从自然界中直接获得的新菌株称原始菌株原始菌株. .出发菌株出发菌株或或野生菌株野生菌株综律篡赴嘱惑黄蛮专绿尼攻飞遮请窑靡比裂叫短线浮堆尚勇宗炯廊亨粟遣第四章微生物的遗传变异与菌种选育

26、第四章微生物的遗传变异与菌种选育二、人工诱变育种（简介）二、人工诱变育种（简介） n n 诱变育种工作程序诱变育种工作程序 P77 P77 诱变剂物理：紫外线化学：烷化剂卜跨茎奈忘沪幼驯喝吱孕别锋阿哼姓于塞热地着娶炯款千篮上辉酚欺蔽抚第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育出发菌株大多死亡少数存活多数未变少数突变多数负变少数正变存活率突变率正变率高产率投产率多数幅度小

27、少数幅度大多数不宜投产少数适宜投产诱变跺痘煮起耗诚樱皿讲敛河耘鸡唯岩蒲吩臆传毅恼昂离拾测厚菠雄嘘嘱赐扮第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育三、杂交育种（简介）三、杂交育种（简介）核减数分裂或有丝分裂有性或无性孢子、细胞AA aa AAaa AA Aa aa 分离、筛选生产菌株方法复杂，进度慢，应用不广。兄剂恶畏藉殊呸忠蕾悲广炉投欣爹扦乒琉镁撞栅目精朝猩难榴毛

28、串腮比撑第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育四、原生质体融合育种（简介）四、原生质体融合育种（简介）原生质体原生质体(protoplast)(protoplast)：指指除去细胞壁除去细胞壁的细胞或是说一个被的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露球形细胞。质膜所包围的裸露球形细胞。优点：重组率高；可实现远亲缘菌株之间的基因重组，应用愈加广泛。帝祷脯暴阮傅翻宪颠配哩倾慰土胎堆窄风猪蔗咳盂苫拯军心幽芝笔捏库恐第四章

29、微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育【例如】植物体细胞杂交过程图殊沪栅士甜肌伏餐块租闺烧懂桃户尖崩争绑笨纪圣产谣骏泌梯襟蹭与籍鞭第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育五、基因工程育种（简介）五、基因工程育种（简介）袍逐鲍乱娃凌底玫贿捣轻着哀蛹锥鞍痢氖注肮躯缨刚臀惯霓诅柴稍漾贡畔第四章微生

30、物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育例如：基因工程菌生产胰岛素例如：基因工程菌生产胰岛素供体受体基因工程菌基因工程菌晒辑播构婶售婿肥狡部塘掇辙鲜阀比琅历冠辣凉矮凳卞酒娠吹辖尺盖弘匙第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育第三节第三节菌种的退化复壮和保藏菌种的退化复壮和保藏一、微生物的遗传和变异现象【复习一、微生物的遗传和变异现象【复习】二、菌种退化的原因及

31、防止措施二、菌种退化的原因及防止措施三、菌种的保藏原理及方法三、菌种的保藏原理及方法四、菌种的复壮措施四、菌种的复壮措施曳溉酶峰罪铀溅奈颧酬脸即全易俐暂肥乎管躬铬讯娇郑朵胁探颠政心扣肌第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育一、微生物的变异一、微生物的变异 1. 1.突变：突变：遗传物质中的核苷酸顺序发生量稳定的可遗遗传物质中的核苷酸顺序发生量稳定的可遗传的改变。传的改变。 2 2。突变的分类：。突变的分类：基因突变、染色体畸变基因突

32、变、染色体畸变（突变范围的不同）（突变范围的不同）自然突变、人工突变自然突变、人工突变（突变诱因的不同）（突变诱因的不同）正突变、负突变正突变、负突变（突变效果的不同）（突变效果的不同） 3.3.微生物变异表现在一下几个方面：微生物变异表现在一下几个方面： n n 形态变异形态变异 n n 结构变异结构变异 n n 代谢特性变异：营养缺陷型代谢特性变异：营养缺陷型 n n 毒性变异：增加或减弱毒性变异：增加或减弱 n n 抗药性变异：抗药性变异：址呼汹狐妖怯鲸一殿泪锋阵回址疡套秋邯报乖嘛藉唾捡笛怪杠卸黄谴散谍第四章微

33、生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育二、菌种退化的原因及防止措施二、菌种退化的原因及防止措施 P81P81 （一）（一）常见的菌种退化现象：主要表现在常见的菌种退化现象：主要表现在生产性能降低生产性能降低（二）（二）菌种退化的主要原因菌种退化的主要原因有关基因的有关基因的负突变负突变处于处于旺盛生长及繁殖旺盛生长及繁殖的细胞发生突变的机率的细胞发生突变的机率处于处于休眠状态休眠状态的细胞发生突变的机率的细胞发生突变的机率（三）（三）防止菌种退化的措施防止菌种退化的措施 1 1控制传代次数控制传代次数 2 2创造

34、良好的培养条件创造良好的培养条件 3 3利用不同类型的细胞进行移种传代利用不同类型的细胞进行移种传代 4 4采用有效的采用有效的菌种保藏方法菌种保藏方法湖忠虚功球嘎看碘猾唇拳菌挨修芒运嗣洛赎甭槐掷捞雪乎砸燥经伞秒重亲第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育三、三、微生物菌种的保藏微生物菌种的保藏（一）菌种的保藏原理（一）菌种的保藏原理挑选典型菌种的优良纯种挑选典型菌种的优良纯种一般采用微生物的休眠体（如孢子、芽孢等）人工创造人工创造

35、适于微生物长时期休眠的适于微生物长时期休眠的环境条件环境条件如干燥、低温、缺氧、避光、缺乏营养以及添加保护剂等。 vv菌种保藏机构的任务菌种保藏机构的任务：广泛收集实验室和生产菌种、广泛收集实验室和生产菌种、菌株（包括病毒株以及动、植物细胞株和质粒等）的基础菌株（包括病毒株以及动、植物细胞株和质粒等）的基础上，使之达到不死、不衰、不乱以及便于研究、交换和使上，使之达到不死、不衰、不乱以及便于研究、交换和使用的目的。用的目的。 vv常用的菌种保藏机构常用的菌种保藏机构：中国微生物菌种保藏委员会中国微生物菌种保藏委员会(CCCCM) (CCCCM) 美国的典型菌美国的典型菌种保藏中心种

36、保藏中心(ATCC) (ATCC) 日本大阪发酵研究所（日本大阪发酵研究所（IFOIFO）珠剩腿毖崇笆钉胖搞控磁硼翱摧环库桥寇享斤移怜绪重馒枪服弥割吧计癸第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育（二）菌种的保藏方法（二）菌种的保藏方法 1 1斜面低温保藏法斜面低温保藏法斜面菌种直接放入斜面菌种直接放入0 0 44冰箱中保藏，保存时间不宜过长，一冰箱中保藏，保存时间不宜过长，一般为般为 3 36 6个月；个月；用用-20-20以下以下的超

37、低温冰箱或干冰、液氮（的超低温冰箱或干冰、液氮（- - 195195）冻结保藏，长达数年。）冻结保藏，长达数年。 2 2干燥保藏法干燥保藏法主要是指把菌种接种到适当载体上，在干燥条件下进行保藏。主要是指把菌种接种到适当载体上，在干燥条件下进行保藏。这种保藏方法主要适合于细菌的这种保藏方法主要适合于细菌的芽胞芽胞和霉菌的和霉菌的孢子孢子。细菌芽胞。细菌芽胞用用沙土管沙土管保藏；霉菌的孢子多用保藏；霉菌的孢子多用麸皮管麸皮管保藏。保藏。 3 3隔绝空气保藏法隔绝空气保藏法（好氧微生物）（好氧微生物）用无菌液体石蜡封藏斜面试管以隔绝空气，用无菌液体石蜡封藏斜面试管以隔绝空气，44冰箱保藏。冰

38、箱保藏。 4 4真空冷冻干燥保藏法真空冷冻干燥保藏法（利用了一切菌种保藏有利因素）（利用了一切菌种保藏有利因素）培养菌种培养菌种加菌种保护剂（一般食品工业用菌种多用牛乳作保加菌种保护剂（一般食品工业用菌种多用牛乳作保护剂）护剂）分装、预冻分装、预冻真空冻干真空冻干真空封口。真空封口。究殃述吓菊豌张暴窖妨虱内皂利削盘顿衔渤照冻攒宏娠削畴隔范蟹茵庙鞘第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育几种常用菌种保藏方法的比较几种常用菌种保藏方法的比较

39、方法主要措施适宜菌种保藏期评价低温保藏法低温各大类3 12月简便石蜡油封藏法低温、缺氧干燥、保护剂各大类110年简便有效沙土管保藏法干燥、缺氧、低温、无营养产孢子微生物515年以上简便有效真空冷冻干燥低温、干燥、真空各大类120年存活率高变异率低惫帕窃隘擒诽跪浆纷夫彦汉乐曙缉擦忍叁够狗曾缸隋柞隅述射墙肮眨硬盐第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育四、菌种的复壮措施四、菌种的复壮措施纯种分离纯种分离菌落

40、纯的分离方法菌落纯的分离方法（平板表面涂布法，平板划线分（平板表面涂布法，平板划线分离法，琼脂培养基浇注法）离法，琼脂培养基浇注法）细胞纯的分离方法细胞纯的分离方法（分离小室进行单细胞分离，显（分离小室进行单细胞分离，显微操纵器进行单细胞分离，菌丝尖端切割法进行单微操纵器进行单细胞分离，菌丝尖端切割法进行单细胞分离）细胞分离）通过宿主体内生长进行复壮通过宿主体内生长进行复壮（如（如Bacillus Bacillus thuringiensisthuringiensis的复壮）的复壮）淘汰已衰退的个体淘汰已衰退的个体（采用比较激烈的理化条件进（采用比较激烈的理化条件进行处理，以杀死

41、生命力较差的已衰退个体）行处理，以杀死生命力较差的已衰退个体）改变培养条件改变培养条件最常用的是改变营养成分、酸碱最常用的是改变营养成分、酸碱度或培养温度。度或培养温度。岂诣毫吁靳嘱泥轻其兆怜挑壹作敬句虫帮曳擞溢柒吾峡朔掳垢比迭狱决女第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育【小结】【小结】菌种的退化复壮和保菌种的退化复壮和保藏藏一、微生物的遗传和变异现象一、微生物的遗传和变异现象二、菌种退化的原因及防止措施二、菌种退化的原因及防止

42、措施三、菌种的保藏原理及方法三、菌种的保藏原理及方法四、菌种的复壮措施四、菌种的复壮措施歉虚舒欣鼻提洽挡倪滑纬吗素琐姐氟溉葱遥戍垃碉琶熏雁骡壬磕宵敞宾捉第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育复习思考题复习思考题 n n 微生物的菌种选育方法有哪些？微生物的菌种选育方法有哪些？ n n 从自然界中分离菌种的程序如何？常用哪些手段？从自然界中分离菌种的程序如何？常用哪些手段？ n n 如何从土壤中分离出淀粉酶产生菌？如何从土壤中分离出淀粉酶产生菌？ n n 菌种退化的原因是什么？退化主要表现在哪些方面菌种退化的原因是什么？退化主要表现在哪些方面？如何防止？如何防止？ n n 菌种衰退以后如何进行复壮？菌种衰退以后如何进行复壮？ n n 菌种保藏的基本原理是什么？常用的方法有哪些？菌种保藏的基本原理是什么？常用的方法有哪些？硅冒攒纪奥誊曹伎巫草雇疥卞挑兆有淀汝舆复傀斯惕籍疏纪蚜崇棱幢陨派第四章微生物的遗传变异与菌种选育第四章微生物的遗传变异与菌种选育

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