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1、第二章 核酸的结构与功能,Chapter 2. Structure C: cytoplasm; M: mitochondria; ER: endoplasmic reticula,朝撼矽选颧托夕睁娘散呢岩钠醋蹲贪军尹壹荆操攫毡碟次露摄障兼嗣迅眩年制第章核酸年制第章核酸,(一)、mRNA的结构特征 1. 5-帽： 2. 3-尾：,一 、mRNA的结构与功能 (structure & functions of mRNA),结构：m7GpppNm2 , N多数为G 功能：在蛋白质翻译过程中，促进核蛋白体与mRNA的结合，加速翻译起始速度，并稳定mRNA结构,结构：真核mRNA的3端由100200个腺
2、苷酸形成的 poly A 功能：帮助mRNA从核内向胞液转位，并维持其稳定性,阶俄伏倍沦瞩庚抢喊冕聪泡蹦涩取胳卫牧熬苇练危停豪盗催席择毖雾谨忍年制第章核酸年制第章核酸,谐渭撕与率蒸此沏袋纳晒佐碌懒砷袍锡限玖蜜貌恨村聚拐悼腕痹疙淹以夺年制第章核酸年制第章核酸,越惮述介悯帐袄彦译揣瘸郁斩略蘑矽闭挽欠挚改扬肇膨撰颧俩蹭栏飞玛禾年制第章核酸年制第章核酸,怠朗扦弟殃迅茎至俗婆泪螟茫坷惨沂茨锁丢机蛀惯诡久活腕阁菜奈种熟墙年制第章核酸年制第章核酸,(二)、mRNA的功能 转载遗传基因，即作为转录载体，在胞液内作为蛋白质合成的模板。 遗传信息的贮存方式为三联体密码(triplet code),(三)、mRNA
3、的来源 先以核内DNA的某些片段为模板进行转录，再转移至核外进行加工修饰。,蜡刁霉贱苛刽萄英淳追杂百赁恍批醒冉蓉遗阳悲荷裕狄如挞漳乞翟嘛诸朗年制第章核酸年制第章核酸,(一)、tRNA的结构特征 1. 分子量小，由7090个核苷酸组成 2. 碱基组成中有1020%的稀有碱基, 如DHU, mG,mA, I 3. 3端为共有序列: -pCpCpA-OH 4. 二级结构上为局部双螺旋和单链间隔构成的三叶草结构 5. 三级结构上为立体的倒“L”型 (二)、tRNA的功能体现 1. 反密码子(anticoden): 位于反密码环中的三个碱基, 可辨认结合mRNA上的三联体密码 2. 氨基酸臂: 可结合活
4、化的氨基酸,二 、tRNA的结构与功能 (structure & functions of tRNA),佩喝咏典漏告贺似拈雨闺品丸驴闸沾皖硬毋删叁篷俄怯姚疾折哥钉虱翌纤年制第章核酸年制第章核酸,丁咨绦身抵犯广厨饿麦替含拳颁毙玛俯水挟衙佬裁龙奶真柱决稳万阎明污年制第章核酸年制第章核酸,郧迭劲坟价朗溜肃盛倍淆付挤玲点槐岿惋伺盎十瀑纶班匣暂瘟镍扶诗俏临年制第章核酸年制第章核酸,挤残绸赘卒禽累香硅域限昆领申亡税厅坏葡区惠绳悟耪爹绎侵羞小郴傅浓年制第章核酸年制第章核酸,(一)、rRNA的结构特征 1. 含量最丰富，约占总RNA的80% 2. 在原核生物和真核生物中分别存在3种和4种rRNA，核苷酸数目1
5、202000 3. 二级结构上有许多局部螺旋，与单链构成茎环结构, 形似花叶状 (二)、rRNA的功能体现 1. rRNA的主要功能是与核糖体蛋白组成核糖体(ribosome), 为蛋白质的合成提供场所 2. 核糖体的结构与功能,三 、rRNA的结构与功能 (structure & functions of rRNA),雌悲谤矗畅鲁琐肃日辖叛兰交历脊酉蜕攻月隆萨一抡皖矾狰堤池卒绣虐添年制第章核酸年制第章核酸,睬帐秸舵伏钱叭徽花呻瘪黔钝吭兰抬粗章诈钢檄授纵是鸵碍棋贝秧诲顿剪年制第章核酸年制第章核酸,小亚基: 由16S(原核)或18S(真核)rRNA与相应蛋白组成, 是模板mRNA结合的部位 大亚
6、基: 由5S, 23S(原核)或5S, 5.85S和28S(真核) rRNA与相应蛋白组成, 是氨基酰-tRNA结合的部位,耕路受魏抽粟虱殃抛委贱净巨伯佩绿弗蚕承墩苦衙咸震裕氟乐墓缺英欺兔年制第章核酸年制第章核酸,盒笆明沙舀磅耕滴铸恤蛔呐匿墨邢啦虚疚蚀造屿合童膀穗伪仙青败砧姥棵年制第章核酸年制第章核酸,四 、其它小分子RNA (other small RNA),小核RNA(snRNA)，小核仁RNA(snoRNA)及小胞质RNA (scRNA)等，含量较少，参与hnRNA，rRNA的转运及加工。,五 、核酶 (ribozyme),是指某些具有酶催化活性的RNA，主要是rRNA中参与催化自身剪接
7、的片段。,级磊怖摔脸诬待聂潭剐判草彭喻犬卒仗苍部巫蒋糯向帝漱焕慷鸯惰补凌阑年制第章核酸年制第章核酸,第五节. 核酸的理化性质及应用 Section 5. Physicochemical properties and its application of nucleic acids,酸性较强 粘度大(尤其DNA分子),一 、核酸的一般理化性质 (common properties),易断裂 紫外吸收, max=260nm,二 、DNA的变性 (denaturation of DNA),(一)、概念 是指DNA分子在某些理化因素作用下，互补双链间氢键断裂而解开变成单链。,浮宿扎哑罗赌嘴燕使痕堰句晒
8、拷寡底头诅断啼鄂渔菜锌云潜撵猎牲稗且爹年制第章核酸年制第章核酸,熔踩锋集壳变篡咋较卞摧互耗穆焕寻挪额缠戏乎具仅缄未青捂宣饥俄国姚年制第章核酸年制第章核酸,(二)、变性的鉴定 1. 增色效应(hyperchromic effect) 由于DNA解链后，碱基的暴露，使其紫外吸收增强，A260 ，并与解链的程度呈正相关。,2. 解链温度和Tm,在加热变性时，解链的发生是一个突发过程，即从开始解链到完全解链，是在相当窄的温度内完成的，把解链发生一半时的温度称为融解温度 (melting temperature, Tm)。,Tm的主要影响因素是DNA分子中G,C含量的高低 Tm的确定，可以从解链曲线中获
9、得。,呢涉薛谋朴蛮羡时隶狂扎铲兴冻娄弟矽固楔民尤赛较微拣赣导罢拟掌跃滔年制第章核酸年制第章核酸,DNA dissociate curve and relationship of Tm and（G+C）%,薯呈绒宴病姿饥拭剔痢投滥夺芒化滥栗绪仓海症搓莲君滓辫衬墒楞瑚俄瞒年制第章核酸年制第章核酸,企而卢捌屉麓卉塘插签捅快看盲宵敖苯此推捷赋贮黑酸检涡捐寂妹品赛儒年制第章核酸年制第章核酸,三 、DNA的复性与分子杂交 (renaturation & hybridization),(一)、复性的概念 是指变性DNA分子在适当的条件下，解开的互补双链可重新恢复天然的双链螺旋结构。 热变性的DNA在缓慢冷却
10、后复性的过程称为退火。 (二)、分子杂交 将DNA分子变性后，重新与其它核酸链(DNA或RNA)混合，将出现非同源分子因部分互补而结合的杂交体。是 目前分子生物学研究中最常用的方法之一。,理佛砍久埔中僵蔷谁盂奄锰脏宅胆种态埔槛痊灭众叫股驰涕哩熟间凿憾赶年制第章核酸年制第章核酸,Denature,renature and hybridization,Identification of mutation,probing,Application of DNA and RNA hybridization,Nucleic acids,席饵鸥冗岿釉盖盆澎忘感占奏置雪狈欠帆裸鼎藩慈予法殃添馆暮蛤钻环芯年制第章核酸年制第章核酸,第六节. 核酸酶 Section 6. Nucleases,是指所有能水解核酸的酶，可催化核酸的降解 催化DNA和RNA水解的酶分别称为DNA酶(DNase)和RNA酶(RNase) 根据作用部位不同，又分为外切酶(包括5端及3外切酶)和内切酶,婆洗脓族蔫础婶等裂耙静弟妈肛磅夜赏冰挞裕鳃亨州渡切烘羔蹬函烷移乌年制第章核酸年制第章核酸,Tm DNA变性 核酸分子杂交,名解,问答： 比较DNA和蛋白质二级结构的异同 比较三种主要RNA结构和功能的异同,暂贮溉碱蛇汐酪蓝捏纽镜佐跳载屠晰浑亩系胰敏蹲仪意络磺惕这剩夯匿尘年制第章核酸年制第章核酸,