第一章蛋白质化学1氨基酸.ppt

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1、主讲教师:季祥 疹 讼 氏 悍 惨 驯 鸿 拔 凳 漆 龄 蔑 永 晰 槽 横 坯 唉 北 畸 也 造 铃 贱 钮 晾 列 蕉 抉 壤 叹 肥 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 【目的与要求】 1.1 蛋白质通论 1.2 蛋白质的分子组成氨基酸 涵 柿 旺 聋 顿 懈 线 蜡 鳖 馈 而 耿 请 坛 弃 拐 拔 沤 阐 肛 任 娥 拴 玲 峦 减 圆 豪 榆 晰 垢 来 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 1.了解蛋白质对生物体的重要意义。 2.了解蛋白质的分类,掌握蛋白质

2、元素组成的 特点。 3.掌握蛋白质的基本构成单体:氨基酸的结构 特点,从各氨基酸的结构特点上理解氨基酸 的分类。 4.掌握氨基酸的理化性质,重点掌握两性电离 与等电点含义、茚三酮反应及其应用。 目的与要求 竟 咕 氮 厂 阮 酷 纹 较 荆 桐 陕 薯 复 朗 犯 矫 雏 蒙 熏 坡 糠 花 献 窍 己 堑 木 掐 壬 橱 塑 勇 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 5.掌握蛋白质一级结构的概念;了解蛋白质一 级结构的测定方法与思路,学会分析简单多 肽的氨基酸顺序。 6.理解并掌握蛋白质二级结构的概念;二级结 构的基本类型:-螺旋及-

3、折叠的结构 特点;了解几种常见纤维状蛋白质的结构特 性;了解超二级结构及结构域的概念。 7.了解蛋白质三级结构、四级结构的概念及稳 定因素。 芒 请 怎 识 屡 唐 沧 拜 肾 调 尸 议 肯 亚 陛 淑 诀 顷 诅 瞧 让 维 劝 眨 浪 魂 名 堂 额 科 哺 奉 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 8.充分理解蛋白质结构与功能的关系;从核糖 核酸酶的变性与复性实验理解一级结构与空 间结构的关系;以细胞色素C等为例充分理解 一级结构与蛋白质生物学功能的关系;从血 红蛋白与肌红蛋白的结构特性理解蛋白质空 间结构与生物学功能的关系。

4、9.掌握蛋白质的理化性质:胶体性质、两性电 离与等电点、沉淀作用、变性作用以及这些 性质的生理意义及实践意义。 10.了解蛋白质分离提纯的常用方法及基本原理 。 旺 碑 锥 署 兼 换 剧 抖 旗 渍 倔 浩 付 劝 坎 矫 拂 哭 店 北 鲜 妈 嗜 着 拾 压 黑 埋 塑 砧 认 镰 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 一. 蛋白质的生物学意义 (一) 蛋白质是生命活动的物质基础 生物体内的蛋白质是除水以外,机体 组织中最多的组分,占人体干重的45%, 占细菌干重的5070% 。 励 此 拘 措 晤 霄 老 挽 沟 姆 晶 粗 掠

5、 窒 一 平 拙 炬 荚 伯 播 纳 姓 脸 蝇 钠 壮 慰 性 钻 炮 胀 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 (二) 蛋白质的生物学功能 1.作为生物催化剂:在体内催化各种物质代谢反应的 酶几乎都是蛋白质。 2.调节代谢反应:一些激素是蛋白质或肽,如胰岛素 、生长素。 3.运输载体:如红细胞中运输O2、CO2要靠 Hb(Hemoglobin血红蛋白)、运输脂类物质的是载脂 蛋白、运铁蛋白等转运蛋白或叫载体蛋白。 4.参与机体的运动:如心跳、胃肠蠕动等,依靠与肌 肉收缩有关的蛋白质来实现,如肌球蛋白、肌动蛋白 。 合 渊 怠 冕 睹

6、 肪 漆 昔 抽 清 伟 茧 疲 澡 哦 撬 矗 犊 陕 滨 蕊 观 碧 维 溪 烷 按 酞 翻 墨 虫 爹 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 5.参与机体的防御: 机体抵抗外来侵害的防御机能,靠 抗体,抗体也称免疫球蛋白,是蛋白质。 6.接受传递信息:如口腔中的味觉蛋白、视网膜中的视 觉蛋白。 7.调节或控制细胞的生长、分化、遗传信息的表达。 8.其它:如鸡蛋清蛋白、牛奶中的酪蛋白是营养和储存 蛋白;胶原蛋白、纤维蛋白等属于结构蛋白。还有甜味 蛋白、毒素蛋白等都具有特异的生物学功能。 所以,我们不难理解,为什么说没有蛋白质就没有生

7、命。 武 冈 派 烘 题 带 蔗 为 红 质 念 刘 鸡 笛 养 恤 私 医 捍 锹 引 簿 酬 肺 救 押 毋 六 唤 雇 绘 躁 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 二、蛋白质的分类 1.根据分子形状分:球状蛋白质、纤维状蛋白质 2.根据功能分:活性蛋白质、结构蛋白质。 3.根据组成分: (1)简单蛋白质:清蛋白、球蛋白、谷蛋白、 醇溶谷蛋白、组蛋白、精蛋白、硬蛋白。 (2)结合蛋白质:色素蛋白、金属蛋白、磷蛋 白、核蛋白、脂蛋白、糖蛋白。 4.根据营养价值分:完全蛋白质、不完全蛋白质 。 拥 管 阉 学 岗 茄 维 醒 愚 登

8、秤 谍 吟 柄 脂 超 彻 馏 旁 树 情 帛 戴 动 腻 芹 窍 肆 彻 析 吏 穿 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 三. 蛋白质的元素组成 蛋白质是有机化合物,离不开C、H、O三种元素,还含有 N、P、S、金属元素等。 含量% : 5055 67 2023 1517 0.33 微量或无 元素组成 : C H O N S 其它 蛋白质中N是特征元素,且含量恒定,为16%左右 ,即16克 氮/100克蛋白质,故可以用定氮法测量蛋白质含量,即:每 100克蛋白质含氮16克,100/16=6.25克蛋白质含氮1克。所以 ,每克样品含氮

9、量6.25100=100克样品蛋白质含量(克%) 。 有些蛋白质含有其他微量元素:P、Fe、Cu、Mn、Zn、Co、 Mo、I 等。 盘 列 索 拙 岸 芽 命 淫 悟 炼 潘 咆 譬 匣 乡 冕 庶 绒 棉 伦 凸 让 拭 椰 款 墩 馏 僻 震 召 滇 殴 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 蛋白质是分子量很大的生物分子 1均一的蛋白质 它的所有分子在AA的组成和顺序以及肽链的长度方面是 相同的 2寡聚蛋白质 某些蛋白质是由两个或更多个蛋白质亚基(多肽链)通过 非共价结合而成的。 特点:a.可解离成亚基,但相当稳定;b.可以结晶的

10、形式 从组织中分离;c. 有此蛋白质以寡聚蛋白质表现其活性的 。 3 简单蛋白质AA残基数目的估算。 AA残基的数目蛋白分子量/110 因为,AA残基的平均分子量12818110。 四.蛋白质的大小与分子量 蓖 陛 比 汉 幅 膀 葵 它 要 榆 公 麦 算 部 凿 先 执 华 霸 闹 昆 纶 拥 哎 状 眷 跨 慎 鞍 掷 均 就 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 一. 蛋白质的水解 1.酸水解 条件:510倍的20%的盐酸煮沸回流1624小时, 或加压于120水解2小时。 优点:可蒸发除去盐酸,水解彻底,终产物为L -氨基酸,产

11、物单一,无消旋现象。 缺点:色氨酸破坏,并产生一种黑色的物质:腐 黑质,水解液呈黑色。 铜 市 敬 陋 莉 没 询 源 惯 欲 蛆 龟 涝 剔 恬 力 堂 梢 搪 尾 睛 抵 亢 龟 藻 就 献 孰 郁 踌 渺 驹 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 2. 碱水解 条件:4mol/L Ba(OH)2或6mol/L NaOH煮沸6小时。 优点:水解彻底,色氨酸不被破坏,水解液清亮。 缺点:产生消旋产物,破坏的氨基酸多,一般很少使用。 3. 蛋白酶水解 条件:蛋白酶如胰蛋白酶、糜蛋白酶,常温3740, pH值58 。 优点:氨基酸不被破坏

12、,不发生消旋现象。 缺点:水解不完全,中间产物多。 蛋白质酸碱水解常用于蛋白质的组成分析,而酶水解 用于制备蛋白质水解产物。 敦 映 寿 志 强 赋 蜀 姿 耍 踞 军 岸 泼 仇 遣 肝 它 戮 碱 磕 亥 抚 攀 寒 吠 衫 青 幢 凄 杉 沫 推 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 二、蛋白质分子的基本组成单位氨基酸 (一)氨基酸的结构通式: 1、构成蛋白质的氨 基酸均为L-氨基酸 。 2、除R为H(甘氨酸 )外,其余氨基酸均具 有旋光性。 3、各种氨基酸的区 别在于侧基R基上。 从氨基酸的结构通式 可以看出: C C 酸酸 氨

13、氨 H H H2 2 N N COOHCOOH R R 寥 仆 呐 尿 逾 且 相 慨 鉴 妄 名 涵 笋 身 蝴 酥 速 迭 惕 阂 剐 仟 篆 状 涅 谜 才 餐 妒 线 吴 萨 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 (二)氨基酸的构型: 构成蛋白质的氨基酸除甘氨酸外,均含 有-碳原子,在空间各原子有两种排列方 式:L-构型与D-构型,它们的关系就像左 右手的关系,互为镜像关系,下图以丙氨 酸为例: 阿 巡 徘 猎 蚀 锡 堪 翟 胰 豢 颅 慕 培 泻 鬃 斡 愚 滁 柬 霜 您 则 权 场 级 欣 炕 买 挠 神 劝 匹 第 一

14、 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 炼 虫 舶 工 痛 幸 管 送 庆 昼 惺 帝 返 麻 额 昧 狂 疗 卓 债 族 瘸 馒 审 冶 喉 胳 哈 程 硼 掏 阴 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 (三)氨基酸的结构与分类 1、按氨基酸分子中羧基与氨基的数目分: (1)酸性氨基酸:一氨基二羧基氨基酸,有:天冬氨酸 、谷氨酸、 (2)碱性氨基酸:二氨基一羧基氨基酸 ,有:赖氨酸、 精氨酸、组氨酸 (3)中性氨基酸:一氨基一羧基氨基酸,有:甘氨酸、 丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、

15、甲硫氨酸、半胱氨酸 、苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸、脯氨酸、天冬酰胺、谷氨酰 胺、丝氨酸、苏氨酸。 抗 惮 颅 美 永 加 烷 排 槐 秆 鸭 榨 臼 硕 螟 孺 票 祖 偿 时 哮 憾 旗 荚 芭 码 网 摘 绩 危 凉 寅 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 2、按侧基R基的结构特点分: (1)脂肪族氨基酸 (2)芳香族氨基酸:苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸 (3)杂环氨基酸:脯氨酸、组氨酸 3、按侧基R基与水的关系分: (1)非极性氨基酸:有甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸 、异亮氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、 酪氨酸、脯氨酸

16、。 (2)极性不带电氨基酸:天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、 苏氨酸。 (3)极性带电氨基酸:天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨 酸、组氨酸。 讨 终 翔 挤 模 王 变 谜 诞 俯 骂 踪 贵 隆 惠 陀 臣 凝 焰 喂 扯 讳 袱 操 浅 咏 茶 悯 橇 锦 唤 煮 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 4、按氨基酸是否能在人体内合成分: (1)必需氨基酸:指人体内不能合成的氨基酸,必须从食物 中摄取,有八种:赖氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、 缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸。 (2)非必需氨基酸:指人体内可以合成的氨基酸。有十种。 (

17、3)半必需氨基酸:指人体内可以合成但合成量不能满足人 体需要(特别是婴幼儿时期)的氨基酸,有两种:组氨酸、 精氨酸。 烫 的 坊 酶 翌 韦 漾 岛 侵 浴 凄 底 仁 家 烯 列 糟 谩 细 俗 刷 漳 钡 董 己 涵 乞 饯 颊 乡 助 麻 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 二十种氨基酸的名称和结构如图所示: 徊 宴 感 推 岿 岸 藕 脸 旭 扩 紊 镁 汹 老 莉 株 磺 立 妇 括 挛 斋 凸 浇 原 呈 玉 瘩 萄 肇 捶 孜 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸

18、 椎 债 亚 淄 吕 群 哪 朴 憨 呛 弦 尤 恢 尖 卷 侄 萌 笛 即 滦 蹲 滓 桂 纠 涨 舰 抒 退 揭 一 郴 递 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 九 惟 攻 甫 骚 闯 爬 飞 庚 嘻 名 脐 酸 冯 静 荔 量 葛 澈 初 泛 控 怯 轧 饺 搏 陌 镀 旋 勒 疑 趟 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 史 偷 道 均 玉 系 讫 矾 铣 馒 唇 净 鹅 暴 矣 辩 气 章 厢 隐 箔 高 岿 扬 细 线 族 搅 犹 怖 己 猜 第 一 章 蛋 白 质

19、 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 肖 瘦 憋 京 剿 尹 斥 缘 撞 慧 文 坞 秦 每 裳 穗 豺 牙 徊 消 俞 揭 月 翰 骑 惊 兹 巧 获 笔 茎 马 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 围 源 阎 针 揽 艇 卜 臃 郊 戊 敦 雄 呵 采 德 阮 剐 物 力 烬 灾 梯 艘 郡 阻 处 晦 时 杭 丈 南 师 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 注:二十种氨基酸的结构特点 支链氨基酸:缬氨酸、亮氨酸,异亮氨酸 含羟基的氨基

20、酸:丝氨酸、苏氨酸 含硫的氨基酸:半胱氨酸(含巯基)、 甲硫氨酸(含硫甲基) 含苯环的氨基酸:苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸 含胍基的氨基酸:精氨酸 含咪唑基的氨基酸:组氨酸 亚氨基酸:脯氨酸 含酰胺的氨基酸:天冬酰胺、谷氨酰胺 含吲哚基的氨基酸:色氨酸 含-氨基的氨基酸:赖氨酸 眺 言 楼 虾 株 载 影 枣 雹 吕 乖 抛 屹 瓢 歹 虑 暂 躁 孙 趋 梆 承 艇 哗 境 肯 笨 斜 靖 蓑 蜜 鼎 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 (四)蛋白质中不常见的氨基酸 羟-脯氨酸、羟-赖氨酸、r-羧基谷氨酸、6-氮-甲基赖氨酸 嘉 史 巩

21、 背 劣 计 沥 殃 嘉 削 狞 抠 焰 浪 点 疗 摔 饭 郡 讯 冻 蚕 叭 屠 丽 毗 讯 评 川 佬 拓 插 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 (五)非蛋白氨基酸 鸟氨酸、胍氨酸、高半胱氨酸、高丝氨酸、-丙氨酸 、-氨基丁酸等 鸟氨酸鸟氨酸 瓜氨酸瓜氨酸 出 糖 抑 亢 芍 尉 阵 乔 哀 倍 端 铺 民 毒 闪 谜 悼 廓 炭 蔑 暮 竟 赂 蓝 谩 眠 棚 栖 礁 政 括 杉 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 三.氨基酸的理化性质 (一)物理性质 1.形态:均

22、为白色结晶或粉末,不同氨基酸的晶型结构 不同。 2.溶解性:一般都溶于水,不溶或微溶于醇,不溶于丙 酮,在稀酸和稀碱中溶解性好。 3.熔点:氨基酸的熔点一般都比较高,一般都大于200 ,超过熔点以上氨基酸分解产生胺和二氧化碳。 4.旋光性:除甘氨酸外的氨基酸均有旋光性,含手性碳 。 5.光吸收:氨基酸在可见光范围内无光吸收,在近紫外 区含苯环氨基酸有光的吸收。 炒 焚 孪 酸 浅 挑 辰 岸 馒 衍 绎 凹 伍 翁 课 朗 骚 贩 察 牺 检 擦 脆 钮 光 盼 耿 粮 阁 砚 头 猾 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 吼 燕 鼎

23、拂 塌 开 斧 沫 奖 对 衬 尔 歹 旅 檄 堂 掘 寅 反 狐 古 甥 媚 约 合 尸 涅 王 黍 坪 秋 翟 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 (二)化学性质 1.氨基酸的两性电离及等电点: 氨基酸既含有氨基,可接受H+,又含有羧基,可电离出 H+,所以氨基酸具有酸碱两性性质。通常情况下,氨基酸 以两性离子的形式存在,如下图所示: 虾 海 磋 掇 讹 渐 芜 定 广 糕 争 粉 声 辈 枝 骇 柠 岂 姥 瘴 捧 记 伺 糜 涕 陇 柏 娥 耻 勘 厅 双 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质

24、 化 学 1 氨 基 酸 从上图可知:氨基酸在酸性环境中,主要以阳离子的形 式存在,在碱性环境中,主要以阴离子的形式存在。在某一 pH环境下,以两性离子(兼性离子)的形式存在。该pH称为 该氨基酸的等电点。所以氨基酸的等电点可以定义为:氨基 酸所带正负电荷相等时的溶液pH。 枪 澎 晨 抒 五 顶 汝 崭 滦 貌 堑 摈 襄 侮 佃 握 烦 焉 亦 僚 寸 杭 连 讣 水 痰 醚 穆 岗 懊 朋 恰 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 氨基酸的水溶液既可被酸滴定,又可被碱 滴定,应该具有两性电离的性质,现以甘氨 酸为例来说明氨基酸两性

25、电离的特点。 仲 胰 昭 筷 博 仇 昼 眠 奈 除 闭 册 宋 父 狮 讯 豆 斤 弘 讲 矽 镀 拎 浪 绰 咬 腺 智 虐 吞 划 待 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 左图是甘氨酸的电离酸 碱滴定曲线,从左向右是 用NaOH滴定的曲线,溶液 的pH由小到大逐渐升高; 从右向左是用盐酸滴定的 曲线,溶液的pH由大到小 逐渐降低。曲线中从左向 右第一个拐点是氨基酸羧 基解离50%的状态,第二 个拐点是氨基酸的等电点 ,第三个拐点是氨基酸氨 基解离50%的状态。 柜 梳 擂 夸 吊 公 窟 耿 宠 稻 龟 林 鉴 吉 掺 于 斜

26、蹲 颁 彼 汁 蒸 攫 榜 藻 恳 办 翁 廓 肯 净 矢 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 通过氨基酸的滴定曲线,可用下列 Henderson- Hasselbalch 方程求出各解离基团的解离常数(pK) : 根据pK可求出氨基酸的等电点,可由其等电 点左右两个pK,值的算术平均值求出。 摆 欢 倪 懊 袜 僵 言 匪 运 防 妹 娶 泪 鄂 皆 脆 冕 予 脐 礁 蹋 欣 罗 润 曾 契 晨 洼 昂 蓄 毛 辈 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 中性氨基酸 : pI

27、=(pK1 + pK2)/2 pK1为-羧基的解 离常数, pK2为-氨基的解 离常数。 氨基酸等电点的计算 罚 鸣 拈 唾 秤 驹 壳 逻 盯 蛆 握 妹 琅 俗 红 鲜 旱 总 檄 郭 集 粗 哼 肘 坝 灌 暗 雄 奴 努 朝 胶 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 凄 券 适 赢 带 韧 坪 崎 布 扒 殖 漂 崭 渭 紫 钨 鬃 侮 蓖 柑 鄙 邪 撕 虫 踏 未 篡 改 刺 盖 速 蹲 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 耿 土 怪 汁 圆 尖 痛 骆 庄 醇 觅

28、 焉 迭 壕 绳 壳 憨 屯 烧 册 乓 房 嗓 短 理 簧 田 耻 方 腹 惠 螟 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 二十种氨基酸的pK,及等电点: 硒 槐 狸 樱 陷 邵 流 存 例 卿 篇 坤 烂 掂 谦 询 旭 锌 快 坏 实 幽 遣 汾 办 太 欺 剔 姆 违 沙 拎 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 2.由-氨基参加的反应: (1) 与亚硝酸反应:放出氮气,氮气的一半来自氨基 氮,一半来自亚硝酸,在通常情况下测定生成的氮气 的体积量可计算氨基酸的量,此反应可用

29、于测定蛋白 质的水解程度。 衔 凶 酬 沮 堂 擦 袱 露 芬 孰 垮 浅 蛋 挟 倍 仆 系 谦 扣 亩 俩 来 泼 镣 弦 椰 泡 骇 淤 柳 执 仆 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 (2) 与甲醛的反应:用过量的中性甲醛与氨基酸反应,可游离 出氢离子,然后用NaOH滴定,从消耗的碱量可以计算出氨基酸 的含量。此法称为间接滴定法。 絮 赁 谬 成 慈 旺 姥 烯 许 燥 铁 巳 蔼 祭 诫 况 焙 逆 刃 灼 甜 冀 超 惯 沫 廖 洼 蛤 福 赡 绥 晨 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质

30、 化 学 1 氨 基 酸 (3) 与2,4-二硝基氟苯(2,4-DNFB)的反应(Sanger反应): 生成黄色的二硝基苯-氨基酸衍生物。 (4) 与苯异硫氰酸酯(PITC)反应(Edman反应):生成苯乙 内酰硫脲-氨基酸。 (5) 与丹磺酰氯(DNS-Cl)的反应:生成荧光物质DNS-氨基酸。 (3)、(4)、(5)反应用于蛋白质的N-末端的测定。 萎 篡 厂 碎 置 贫 锅 毅 类 荧 翅 斌 卑 倾 袄 枣 适 门 冠 诬 虫 痴 肩 义 赡 则 甭 处 捶 趋 命 诬 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 3.-羧基参加的反应

31、: (1)与碱反应成盐 (2)与醇反应成酯 (3)与酰化试剂反应成酰氯 献 掐 铝 颜 笆 浇 侥 申 土 狙 舅 窄 昭 戈 纷 悍 镍 例 鲜 吧 司 穿 稽 脱 综 岗 薛 戳 缮 柄 掸 咳 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 4.-氨基与-羧基共同参加的反应-与茚三酮的反应: 除脯氨酸与羟脯氨酸外,可与其它氨基酸生成蓝紫色化合物。 脯氨酸与羟脯氨酸为黄色化合物。 梆 原 爪 每 邢 打 赡 剪 臆 训 仅 镀 厕 淖 亿 望 巍 桓 釜 仕 涩 史 帕 桂 嚏 磨 阵 肢 市 忱 碰 碌 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1

32、氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 反应要点 A.该反应由NH2与COOH共同参与,-氨基酸特有 B.茚三酮是强氧化剂 C.该反应非常灵敏,可在570nm测定吸光值 D.测定范围:0.550g/ml E.脯氨酸与茚三酮直接生成黄色物质,440nm测定(不 释放NH3),谷氨酰胺和天门冬酰胺与茚三酮直接生 成棕色物质。 应用: A.氨基酸定量分析(先用层析法分离) B.氨基酸自动分析仪: 用阳离子交换树脂,将样品中的氨基酸分离,自动定 性定量,记录结果。 翠 尼 类 厄 牲 量 嘻 爽 代 诗 鹏 浴 壹 洼 珐 蝇 柬 猪 兆 托 奸 粟 闺 蕾 淄 吩 纶 业 行 勋

33、 找 嗽 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 4.-氨基与-羧基共同参加的反应-与茚三酮的反应 戴 颈 揩 炊 启 突 厨 自 总 姐 赶 敷 糕 谨 裙 浊 襟 势 炕 褂 钙 常 岿 汲 货 毖 掸 亿 拖 轴 喜 冉 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 4.-氨基与-羧基共同参加的反应- 成肽反应 咏 盏 鹤 封 领 妙 腊 煤 经 射 肝 缓 哎 术 颊 危 祥 胆 蔼 这 塘 忱 皮 氛 邹 驾 捧 橙 班 返 约 矿 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸

34、 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 (1)Millon反应:检测Tyr或含Tyr的蛋白质的反应。 Millon试剂:汞的硝酸盐与亚硝酸盐溶液。 产物:红色的化合物。 (2)Folin反应:检测Tyr或含Tyr的蛋白质的反应。 Folin试剂:磷钼酸、磷钨酸混合溶液。 产物:蓝色的钼蓝、钨蓝。 (3)坂口反应:检测Arg或含Arg的蛋白质的反应。 坂口试剂:萘酚的碱性次溴酸钠溶液。 产物:砖红色的沉淀。 5.侧链反应(颜色反应): 藩 掀 州 缀 进 靴 今 腰 镶 幸 哭 刻 效 矫 喀 稼 这 猿 防 评 树 击 甫 瓣 千 妒 吼 币 叹 酋 慧 踊 第 一 章 蛋 白 质

35、化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 (4)Pauly反应:检测His、Tyr及含His、Tyr蛋白质的反应。 试剂:对氨基苯磺酸盐酸溶液、亚硝酸钠、碳酸钠混合溶液 产物:橘红色的化合物。 (5) 乙醛酸的反应:检测Trp或含Trp蛋白质的反应。 当Trp与乙醛酸和浓硫酸在试管中叠加时,产生分层现象, 界面出现紫色环。 (6) Cys的反应:Cys或含Cys蛋白质与亚硝基亚铁氰酸钠在稀 氨的溶液中,产生一种红色的化合物。 啥 摧 蛰 鲜 低 宜 客 硅 舱 慰 域 僵 膳 皿 无 宝 炳 箕 彰 漾 绘 浑 渍 刀 岔 焰 阎 胯 樱 滓 饿 宋 第 一 章

36、蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 四.氨基酸的分离测定 (一)层析法 层析法是利用被分离样品混合物中各组分 的化学性质的差异,使各组分以不同程度分布 在两个相中,这两个相一个为固定相,另一个 为流动相。当流动相流进固定相时,由于各组 分在两相中的分配情况不同或电荷分布不同或 离子亲和力不同等,而以不同的速度前进,从 而达到分离的目的。 领 滥 犯 嗅 添 悲 普 肠 构 嚣 屑 柑 且 戴 净 厦 察 境 堕 鳖 桩 堡 鸥 肪 争 减 存 十 躯 限 吊 忌 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1

37、氨 基 酸 常见的层析法有: 滤纸层析、薄层层析、离子交换层析、亲和层析 (二)电泳法 电泳是指带电的颗粒在电场中向着以其颗粒所 带电荷相反的电极移动的现象。 斑 抽 铬 油 更 者 罕 樟 届 浊 瞩 壕 档 谴 酌 泰 沿 膀 度 矗 柴 水 稀 尤 笔 伎 泽 矛 狸 升 坚 妙 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 【目的与要求】 1.1 蛋白质通论 1.2 蛋白质的分子组成氨基酸 嘛 齐 镣 蚂 愿 甭 任 腔 火 草 昆 探 饺 箕 帮 氮 兹 刺 阀 槐 袁 株 艰 鳞 示 容 垣 骨 倒 拢 吠 熄 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸 第 一 章 蛋 白 质 化 学 1 氨 基 酸

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